根据基层反映的情况，近期部分疫苗出现供应短缺和销售量大幅下滑的问题，引发公众对疫苗供应不足的担心。为及时有效地解决相关问题，国家食药监管总局将有关要求通知各省、自治区、直辖市食品药品监督管理局。
作者： 刊期： 2016年第04期
结核病（ tuberculosis ， TB ）是由结核分枝杆菌（mycobacterium tuberculosis，MTB）引起的一种在全球范围内流行的慢性致死传染性疾病。MTB 主要通过侵袭肺部形成肺结核，也可能侵入人体其他器官（如骨骼、关节、淋巴结和肠道等）形成肺外结核。结核病主要通过呼吸道传播，故肺结核占临床 TB的80%以上。据 WHO新统计数据显示，2014年，全球新增结核病例600万，其中150万人死亡；耐多药结核（multidrug-resistant tuberculosis， MDR-TB）病例高达48万，其中包括艾滋病阳性患者39万人，结核/艾滋病（MTB/HIV）双重感染将严重威胁人类的健康[1]。在中国，结核病被列为重大传染病之一，2012年中国疾病预防控制中心的调查报告显示，未来数年内中国将可能出现以耐药菌为主的结核病流行态势，耐药结核病的危害日益凸显。
作者：任金凤；赵跃；王菊仙 刊期： 2016年第04期
重组单克隆抗体是新一代生物工程技术产品，其通过特定的靶点发挥药效[1]。随着大规模哺乳动物细胞培养技术的发展，工业化细胞培养液体积可达1万升以上，抗体表达量可达5 g/L以上，极大地加重了重组单抗下游纯化的压力[2-3]，下游纯化成为限制重组单抗工业化扩大的主要因素[4-6]。重组单抗杂质控制浓度指标见表1，这些指标必须通过离心、过滤和色谱层析纯化后控制在一定浓度以下[7-10]。重组抗体的纯化一般可以分为细胞培养液澄清、抗体捕获、抗体精制纯化、病毒灭活和纯化工艺的放大等流程。
作者：邹有土 刊期： 2016年第04期
随着人群健康意识的逐年提高，越来越多的妇女选择定期健康体检，液基薄层细胞学检测（thinprep cytologic test， TCT）工作量越来越多，可以预见的是随着医学数据的急剧增加，智能化是诊疗数字化发展的方向和目标。图像分析的出现，使病理诊断由定性向定量发展，对样品照片进行数字图像分析，把目标区域染色的深浅及分布面积量化，则能实现病理图像的量化比较。TCT 细胞薄层均匀分布，清晰易读，避免因自然重力沉淀涂片而造成立体堆积和镜下焦距深浅不一，使其成为智能诊断的理想载体。宫颈癌细胞学筛查技术新柏氏（Integrated Imager，I2）的基本原理如下：对 TCT玻片进行图像扫描→转换成数字信息→统计分析→智能诊断，也就是计算机对每张 TCT玻片上各个视野中所有细胞核的 DNA平均含量进行测量排序，筛选出22个目标视野作为可疑病变（包括2个腺上皮细胞视野），在医生阅片时，自动化显微镜根据坐标值自动定位每个可疑视野并呈现给医生进行诊断，如果22个目标视野均正常，则可判定为阴性结果。国内使用 I2的单位较少，相关资料非常有限，究竟 I2能起到怎样的作用，其在国内运用的前景如何，诸多数据尚待实际应用来得以完善。
作者：彭辉；赵敏；阳宇 刊期： 2016年第04期
目的：构建以分泌型荧光素酶为报告基因的单轮感染流感病毒用于药物作用机制的快速鉴别。方法通过使用分泌型荧光素酶（Gluc）序列替代流感病毒 HA基因，并利用表达质粒反式提供 HA蛋白，借助甲型流感病毒 WSN反向遗传学产毒系统，构建带有报告系统的单轮感染流感病毒。结果首轮接种单轮感染流感病毒的细胞上清中可以检测到 Gluc信号，但检测不到病毒滴度，而在第二轮感染的细胞上清中检测不到 Gluc信号，表明该单轮感染病毒在感染过程中能够分泌 Gluc蛋白并且不能产生具有感染性的子代病毒颗粒。通过对复制动力学和时相的观察，明确了单轮感染病毒的生活周期，同时结合4种已知作用机制的抗流感药物的阻断实验结果，证明该系统可以用来快速、有效地鉴别药物的作用机制。结论成功构建了以分泌型荧光素酶为报告基因的单轮感染流感病毒，该系统可以用于抗病毒药物作用机制的快速鉴别。
作者：张永欣；赵斐；王臻；张瑞欣；周金明；岑山 刊期： 2016年第04期
6月16日，李少丽副理事长作为药品安全合作联盟（以下简称“联盟”）秘书长召集联盟相关成员单位，与阿里健康有关负责人就开展药品安全合作举行会议。
作者： 刊期： 2016年第04期
川崎病（Kawasaki disease，KD）又名皮肤黏膜淋巴结综合征，是一种急性、自限性血管炎，其主要临床特征为发热、不同程度口腔黏膜改变、眼结膜充血、皮疹、手足指端改变等，全身多系统均可受累，尤以冠状动脉受损为严重。目前，KD 发病机制尚未完全清楚，但是已有研究表明，免疫系统的功能异常参与了川崎病的发生发展[1-3]，其中 CD4+CD25+Treg细胞的数量及功能异常在 KD的研究逐步深入。现就其生物学特性、作用机制及与 KD的关系作一综述。
作者：吴慧；张春伟；王永清；李燕林 刊期： 2016年第04期
目的：获取实验性自身免疫性脑脊髓炎（EAE）模型小鼠小胶质细胞，并检测其特性。方法取8周龄，雌性 C57BL/6小鼠行 EAE造模，待至发病高峰期（第15天）时以 PBS灌注后取小鼠后脑和脊髓，切碎后加胰酶消化，消化完成后通过100μm滤网滤过，而后采用 Percoll密度梯度离心法分离获取单个核细胞，进一步利用 CD11b与 CD45抗体染色，通过流式细胞仪分选 CD11b+CD45high和 CD11b+CD45low细胞，即分别得到相对活化和静息的小胶质细胞，后对流式分选获取的小胶质细胞行 qPCR检测。结果通过形态比较，获得了高纯度的小胶质细胞。FIZZ-1基因行qPCR检测，结果显示在 EAE急性期 M2型小胶质细胞明显增多，符合文献报道。结论该方法能从 EAE小鼠体内分离获取高纯度的小胶质细胞，可用于相关目的基因后续检测。
作者：浦颖艳；孙定亚；黄爱军；曹莉 刊期： 2016年第04期
6月27日下午，小牛血类产品原料生产质量管理自律规范定稿会在京召开，吴朝晖秘书长主持会议，8家生产企业派代表参加会议。会议听取了自律规范起草组专家对征求意见过程中反馈意见和建议的解答，就自律规范中关键环节、小牛血类产品原料标准和如何开展行业自律进行了研讨。
作者： 刊期： 2016年第04期
目的：探讨体外大量培养扩增原发性肝癌肿瘤浸润淋巴细胞（TILs）的新方法，并初步研究其分子表型和功能特征。方法20例手术切除的原发性肝癌组织经混合消化酶消化为单个细胞后，应用密度梯度离心法分离其中的淋巴细胞，然后应用两步培养法大量扩增 TILs，并检测它们的生长扩增速度。应用流式细胞仪检测扩增淋巴细胞的分子表型， ELISA法检测其 IFN-γ的分泌水平，并分析高表达 PD-1和低表达 PD-1分子 TILs分泌 IFN-γ的能力。结果18例标本中的 TILs在体外经两步法培养后可以扩增达到1010数量级。扩增的 TILs中 CD3+细胞的比例为（91.7±7.4）%，CD3+CD56+细胞的比例为（28.5±11.7）%， CD3+CD4+细胞的比例为（32.5±19.6）%，CD3+CD8+细胞的比例为（62.5±29.1）%。PD-1分子在 CD3+CD8+细胞的比例为（23.5±16.1）%。扩增的 TILs分泌 INF-γ的水平为（827.8±307.7）pg/ml，其中9例 PD-1分子低表达的 CD3+CD8+细胞的分泌 INF-γ的水平为（1087.5±249.6）pg/ml，6例 PD-1分子高表达的 CD3+CD8+细胞的分泌 INF-γ的水平为（478.6±69.3）pg/ml，两者相比有明显差异（P <0.05）。结论应用两步培养法从原发性肝癌中大量扩增 TILs简便易行，扩增的TILs主要为 CD3+CD8+T淋巴细胞，且 TILs中 PD-1的表达与其分泌 IFN-γ的能力呈负相关。
作者：秦鹏；柴晓菲；王昭月；买玲；高全立 刊期： 2016年第04期
目的：将布氏减毒活疫苗通过滴鼻和皮下注射两种方式免疫小鼠，比较两种方式的免疫效果。方法采用两种方法免疫动物，免疫4周后分离血清、脾脏淋巴细胞及制备肺泡灌洗液。ELISA 法检测免疫动物血清中总 IgG抗体；ELISA法检测免疫动物肺泡灌洗液中总 IgG、IgA抗体；ELISPOT法检测分泌 IFN-γ、IL-4的脾脏淋巴细胞数目，以及用 ELISA方法检测体外再刺激后小鼠脾细胞分泌细胞因子水平；流式细胞术对 T细胞亚群进行分类；用羊布氏菌弱毒株 M5通过滴鼻和皮下注射两种方式攻击免疫动物，通过脾脏布氏菌计数评价并比较两种免疫方法的保护效果。结果 ELISA、ELISPOT和 T淋巴细胞亚群分类结果显示，两种免疫途径均能诱导体液免疫、细胞免疫应答，两者间无显著差异。BALB/c 小鼠滴鼻攻击试验结果显示滴鼻免疫组和皮下免疫组脾脏中布氏菌数量的对数值均为0，阴性组脾脏中布氏菌数量的对数值为6.24±0.07；皮下攻击试验显示滴鼻免疫组脾脏中布氏菌数量的对数值为1.69±0.07，皮下免疫组为3.03±0.03，阴性组为5.29±0.06。结论两种免疫途径均能诱导体液免疫、细胞免疫应答，滴鼻免疫组的免疫保护作用显著优于皮下注射组，提示滴鼻免疫是一种高效的免疫途径。
作者：张凌男；陈成；李恪梅；王国治；魏东；董巧香 刊期： 2016年第04期
链霉素发酵工业已经有了比较长的历史，发展至今研究投入较大，生产水平也逐年增长，它的菌体生长和产物形成过程牵涉到一系列的生物化学反应过程[1]，包含着复杂的质量和能量传递，所以对其发酵过程难以进行人为控制，使得在具体生产实践过程中主要以经验作为依据，而理论知识方面较为匮乏。由于后来耳毒性的发现，各个国家对链霉素的产量和使用量开始出现明显下降[2]，但是近年来由于化学农药污染较为严重，各个国家开始研究易分解、杀菌谱广和药效强的生物农药，正是由于链霉素的这些优点，它逐渐开始广泛地应用于农牧行业，并且取得了非常好的效果。链霉素的获得主要是通过对灰色链霉菌的发酵培养，灰色链霉菌从培养基获得足够的营养组分和能量来合成链霉素，所以适宜的培养基成分和比例对于链霉素生产水平的提高至关重要。混料设计是一种研究配料中各组分的佳比例的科学试验设计方法，因子是配料中的组分或分量[3]，可以深入研究成分对响应目标值的影响，以及各个成分之间的交互作用。应用传统的设计方法，比如单因素试验、正交试验等，费时费力，而且效率不高，无法精确地求取优值，但是应用科学先进的实验设计方法就非常方便和高效。近几年来风靡全球企业的六西格玛科学管理方法，其中很重要的一部分就是试验设计理论，尤其是在研发领域[4]的应用效果更是得到了高度的评价。六西格玛工具中有一专门设计模块，可以完成混料试验设计的整个过程，并对实验数据进行回归分析，依据分析结果建立变量曲线方程，后利用响应优化器求得优值，能在短的时间内利用科学的理论方法得到所需要的目标值[5]，此种试验设计可广泛应用于化工、食品、医药和材料等各个涉及配方配比的领域。
作者：金伟；郑长春；郭强；高春慧；祈维蓉；柏莉娟；周东东；郭雷；卢春玲；郭晓梅；王静；柏莉欣；王刚 刊期： 2016年第04期
自2004年发现石墨烯至今[1]，石墨烯的相关性质开始被人们慢慢挖掘。石墨烯是由 sp2杂化连接形成的单原子层蜂窝状二维原子晶体，是世界上薄的新型二维纳米材料，其厚度仅为0.35 nm[2]，并拥有非常高的机械性能、表面积及电传导速率，这成为石墨烯在力学、电学及光学的应用基础[3]。石墨烯应用于生物医学的主要形式是功能化石墨烯，功能化石墨烯表面含有大量的活性基团，比如羰基、羧基、羟基及环氧基等，这些基团使石墨烯具有良好的水溶性及生物相容性[4]。
作者：俞淼；武洋；苏昊然；程路峰 刊期： 2016年第04期
目的：建立对破伤风类毒素原液进行质量分析的分子排阻色谱方法和聚丙烯酰胺凝胶电泳方法。方法分别建立分子排阻色谱方法和聚丙烯酰胺凝胶电泳方法对破伤风类毒素原液单体和聚体含量进行分析，并对两种方法的关键影响因素及两种方法检测结果进行评价分析。结果以含1%异丙醇的 pH 7.0，0.2 mol/L磷酸盐缓冲液为流动相，选取 TSK-GEL G3000SWxl色谱柱，可以对破伤风类毒素单体、二聚体和多聚体分离，经配套软件分析得到其三个组分的相对含量；选用实验室自配的10%浓度的分离胶对破伤风类毒素原液进行电泳后经 Image Lab软件分析可以对破伤风类毒素原液的单体和聚体进行纯度分析，两种方法检测结果具有可比性。结论建立的两种检测破伤风类毒素原液单体和聚体含量的方法能够对所含单体、二聚体和多聚体进行分离和定量，两种方法相辅相成，可以对生产的破伤风类毒素原液批间一致性进行监控和用于不同目的的破伤风类毒素质量情况进行监督。
作者：夏德菊；谭亚军；田霖；王珣；马霄；肖詹蓉 刊期： 2016年第04期
目的：合成创新霉素前药衍生物，测定其体外抗菌活性。方法以创新霉素为起始原料，经酯化或酰胺化反应得到目标化合物1a ~ f和2a ~ f。结果共合成12个创新霉素前药衍生物，其结构均经核磁共振氢谱和质谱确证；化合物1a ~ e体现了较强的体外抗甲氧西林敏感金葡菌（MSSA）、耐甲氧西林金葡菌（MRSA）、甲氧西林敏感表葡菌（MSSE）、耐甲氧西林表葡菌（MRSE）和肺炎链球菌（ATCC49619）活性，其中化合物1a、1e体外抗 MSSA、MRSA、MSSE、MRSE、ATCC49619活性是创新霉素的4~128倍，相当或略优于阳性对照药替甲环素。结论在创新霉素的 C-2羧酸上形成取代苯甲酰氧甲酯或环己基甲酰氧甲酯前药有利于提高体外抗革兰阳性菌活性，化合物1a、1e的体内抗菌活性值得进一步研究。
作者：刘宗英；朱俊泰；金洁；李卓荣 刊期： 2016年第04期
2016年6月18日，我会转化医学分会一届二次委员会议在天津武警后勤学院招待所礼堂召开，来自天津武警后勤学院的领导、我会转化医学分会（以下简称“分会”）第一届委员、2016中国转化医学大会筹备组成员等近50人出席本次会议。
作者： 刊期： 2016年第04期
由国家肿瘤临床医学研究中心、中国抗癌协会、中国医药生物技术协会、中国工程院医药卫生学部、美国西奈山医学院肿瘤中心、美国国家癌症基金会共同主办，国家肿瘤临床医学研究中心、中国医药生物技术协会临床应用专业委员会、天津太山肿瘤医院承办，天津医科大学肿瘤医院、美国加州大学临床芯片中心协办的第一届中美肿瘤精准医疗高峰论坛将于2016年9月22–24日在天津帝旺凯悦酒店举办。
作者： 刊期： 2016年第04期
目的：研究红花细胞培养物的化学成分。方法采用固体 MS培养基，对红花细胞进行放大培养，通过硅胶柱色谱、Sephadex LH-20凝胶柱色谱、半制备 HPLC等方法对红花细胞培养物的化学成分进行分离纯化，质谱和核磁共振等波谱方法进行化学成分的结构鉴定。结果从红花细胞培养物中分离并鉴定了12个化合物，分别是豆甾-5-烯-3β,7β-二醇、豆甾-5-烯-3β,7α-二醇、豆甾-5,22-二烯-3β,7β-二醇、豆甾-5,22-二烯-3β,7α-二醇、十六烷酸甘油酯、丁香酸甲酯、3,5-二甲氧基-对羟基苯甲醛、对羟基苯甲醛、对羟基苯甲酸、N-阿魏酸酰-对羟基苯乙胺、芥子酸乙酯、丁香脂素。结论化合物豆甾-5-烯-3β,7β-二醇、豆甾-5-烯-3β,7α-二醇、豆甾-5,22-二烯-3β,7β-二醇、豆甾-5,22-二烯-3β,7α-二醇、丁香酸甲酯、3,5-二甲氧基-对羟基苯甲醛、N-阿魏酸酰-对羟基苯乙胺、芥子酸乙酯均为首次从红花植物中分离得到。
作者：谭圳；陈日道；解可波；杨林；戴均贵 刊期： 2016年第04期
经李克强总理签批，国务院办公厅日前印发《关于促进和规范健康医疗大数据应用发展的指导意见》（以下简称《意见》），部署通过“互联网+健康医疗”探索服务新模式、培育发展新业态，努力建设人民满意的医疗卫生事业，为打造健康中国提供有力支撑。
作者： 刊期： 2016年第04期
目的：构建基于人 CD105分子的酵母表面展示系统。方法以人 CD105 cDNA为模板，扩增 CD105基因片段，转化到酵母表面展示载体 pYDs，构建 pYDs-CD105重组质粒；将重组质粒转化酵母细胞，测序鉴定，并通过流式细胞仪分析 CD105的表达。结果测序表明 CD105基因片段转入 pYDs质粒，流式细胞仪检测到酵母细胞表面有 CD105分子的表达。结论成功构建了基于人 CD105分子的酵母表面展示系统，为本实验室获得 CD105单克隆抗体杂交瘤细胞株提供了新的筛选平台。
作者：高海霞；刘红芹；石琳；屈浩 刊期： 2016年第04期
中国医药生物技术杂志
主管:中华人民共和国卫生部
主办：中国医药生物技术协会
