学术投稿

原代神经元及PC12细胞用于药物体外急性毒性评价的实验研究

巫玮;周捷;潘雪刁;潘琴;石磊;臧林泉

关键词:细胞毒性, 免疫, 神经元, PC12细胞
摘要:[目的]研究原代神经元及PC12细胞用以评价药物或化合物的急性毒性,以判断是否可以替代动物实验,为建立稳定的体外高通量筛选化合物和药物的急性毒性评价体系奠定基础.[方法]原代分离培养大鼠皮质神经元,传代培养大鼠类神经元细胞--PC12细胞,取17种药物和化合物,分别稀释不同浓度,与上述两种细胞分别孵育24 h,与空白对照组比较,以MTT法检测药物/化合物对细胞的抑制率,据此量效曲线计算出IC50,与大鼠口服LD50进行相关性分析.[结果]体外神经元的IC50与体内LD50相关性为:R2=0.7253,PC12细胞毒性检测结果的IC50与动物体内急性毒性LD50相关性为:R2=0.6441,二者均有明显相关性.[结论]利用体外分离培养的原代神经元以及PC12细胞,在短时间(24h)内可以评价药物或化合物的急性毒性,并可以预测化合物对人及动物的毒性,基本可以替代或减少动物实验.
医学临床研究杂志相关文献
  • TVCDS在输卵管妊娠保守治疗中的应用

    [目的]探讨经阴道彩色多普勒血流显像在化学药物保守治疗早期输卵管妊娠(TP)的价值.[方法]回顾分析59例化学药物保守治疗TP治疗前后的TVCDS影像.[结果]59例保守治疗成功率89.83%(53/59),治疗前TP包块内显示半环状血流有10例,治疗成功率为为40%(4/10),而非半状血流分布的TP成功率100%.[结论]TP包块内半环状血流是TVCDS评价保守治疗TP疗效的一个重要影像指标.

    作者:薛勤;张炽敏;邹大中;许玉芳;谭洁 刊期: 2009年第03期

  • 原代神经元及PC12细胞用于药物体外急性毒性评价的实验研究

    [目的]研究原代神经元及PC12细胞用以评价药物或化合物的急性毒性,以判断是否可以替代动物实验,为建立稳定的体外高通量筛选化合物和药物的急性毒性评价体系奠定基础.[方法]原代分离培养大鼠皮质神经元,传代培养大鼠类神经元细胞--PC12细胞,取17种药物和化合物,分别稀释不同浓度,与上述两种细胞分别孵育24 h,与空白对照组比较,以MTT法检测药物/化合物对细胞的抑制率,据此量效曲线计算出IC50,与大鼠口服LD50进行相关性分析.[结果]体外神经元的IC50与体内LD50相关性为:R2=0.7253,PC12细胞毒性检测结果的IC50与动物体内急性毒性LD50相关性为:R2=0.6441,二者均有明显相关性.[结论]利用体外分离培养的原代神经元以及PC12细胞,在短时间(24h)内可以评价药物或化合物的急性毒性,并可以预测化合物对人及动物的毒性,基本可以替代或减少动物实验.

    作者:巫玮;周捷;潘雪刁;潘琴;石磊;臧林泉 刊期: 2009年第03期

  • 颈部淋巴结病变的CT灌注成像研究

    [目的]探讨CT灌注成像在颈部淋巴结病变中的诊断价值.[方法]对58例颈部淋巴结病变患者进行CT灌注成像检查,其中恶性22例,良性36例,分析比较不同病理类型淋巴结病变的时间-密度曲线(TDC)和CT灌注参数差异.[结果]淋巴结恶性病变TDC多为A型(66.7%),淋巴结良性病变TDC多为C型(54.6%),B型曲线在良性和恶性淋巴结病变中均可见到;淋巴结恶性病变的灌注血流量(BF)值及血容量(BV)值均高于良性病变(P<0.05),腺癌淋巴结转移灶BF值及BV值高于鳞癌淋巴结转移灶及淋巴瘤,鳞癌淋巴结转移灶的BF值高于淋巴瘤,淋巴瘤的平均通过时间(MTT)值长于鳞癌及腺癌淋巴结转移灶(P<0.05).[结论]不同病理类型的颈部淋巴结病变的灌注特点不同,CT灌注成像有助于颈部淋巴结病变的鉴别诊断.

    作者:于海容;王振常;闫钟钰;王永哲;赵波;李琰 刊期: 2009年第03期

  • 胸腺肽α1对老年胃大部切除手术后T细胞亚群的影响

    [目的]观察老年胃大部切除手术前后使用胸腺肽α1对病人的T细胞亚群的影响.[方法]35例老年手术病人随机分为对照组(肠内营养组n=20)和研究组(胸腺肽加肠内营养组n=15).研究组术前1 d至术后d6每天给予胸腺肽α1,于术前1 d,术后d1、d10分别检测T细胞亚群CD3+、CD4+、CD4+/CD8+和术前d0,术后d3、d7分别检测血清白介素6(IL6)、肿瘤坏死因子(TNF-α)等急性炎性反应指标.[结果]两组病人术后CD3+、CD4+、CD4+/CD8+均有下降及急性炎性反应的发生,但研究组较对照组术后d10的T细胞亚群指标有明显提升(P<0.05),且研究组病人术后的IL6、TNF-α水平有显著下降.[结论]老年胃大部切除手术病人围手术期应用胸腺肽α1既可提高T细胞亚群水平又能缓解急性相炎性反应.

    作者:王华;蔡骏;郭立杰;张静喆 刊期: 2009年第03期

  • 5F共用型导管在经桡动脉冠状动脉造影中的应用

    [目的]探讨运用5F(左右侧)共用型导管行经桡动脉冠状动脉造影的可行性、安全性和成功率.[方法]回顾本院486例运用5F共用型导管行经桡动脉冠状动脉造影的临床资料,了解其成功率及并发症发生率,总结5F共用型导管操作技巧.[结果]486例患者桡动脉穿刺成功467例,成功率96.09%(467/486);467例桡动脉穿刺成功患者457经桡动脉造影获得成功,成功率97.88%(457/467);其中完全使用5F共用型造影管446例,占97.59%(446/457); 5F共用造影管配合使用6F JudkinsR3.5造影管11例,占2.41%(11/457);并发症发生率5.76%(28/486);无死亡病例.[结论]运用5F共用型导管行经桡动脉冠状动脉造影成功率高、并发症少,配合使用6F JudkinsR3.5造影管可提高成功率,并在临床上有良好的可行性和安全性.

    作者:唐烨晖;邬文敏;申强;孙秀才 刊期: 2009年第03期

  • 后腹腔镜与开放手术行肾蒂淋巴管结扎治疗乳糜尿疗效比较

    [目的]评价后腹腔镜技术行肾蒂淋巴管结扎术治疗乳糜尿的临床效果.[方法]乳糜尿患者21例,年龄43~72岁.经腹膜后腹腔镜手术(A组)12例,病变位于左侧7例,右侧3例,双侧2例;传统开放手术(B组)9例,病变位于左侧2例,右侧5例,双侧2例,行肾蒂淋巴管结扎术.比较两组的术中并发症、手术时间、术中出血量、术后肠道功能恢复时间、术后住院时间以及术后复发情况.[结果]21例患者术后近期乳糜尿消失.A、B两组手术时间分别为(78.4±32.3)min和(104.6±23.6)min(P<0.01);术中出血量分别为(56.3±34.8)mL和(131.5±75.3) mL(P<0.01);肠道功能恢复时间分别为(32.4±12.6) h和(47.9±18.3) h(P<0.01);引流管留置时间分别为(1.8±0.8) d和(2.7±1.8) d(P<0.01);术后住院时间分别为(5.7±2.5) d和(8.7±1.5) d(P<0.01).随访时间3~60个月,A、B组各有1例复发.B组中2例伤口延迟愈合.[结论]腹膜后腹腔镜技术行肾蒂淋巴管结扎术治疗乳糜尿具有创伤小、恢复快的优点,疗效与开放手术一致.

    作者:傅广波;汤鹏;庄海军;孟俊嵩;候佩金;徐宗源;王勇 刊期: 2009年第03期

  • 3岁以内婴幼儿食用含三聚氰胺奶粉致泌尿系结石4500例B超筛查结果报告

    [目的]总结3岁以内婴幼儿食用含三聚氰胺奶粉致泌尿系结石B超筛查情况.[方法]对本地区4 500名3岁以内有含三聚氰胺奶粉喂养史的婴幼儿进行B超检查,对不同喂养方式及喂养时间的婴幼儿结石发病率进行比较.[结果]4500名3岁以内食用问题奶粉的婴幼儿中检出泌尿系结石64例(1.42%),纯奶粉喂养者中检出结石29例(2.38%),奶粉作为辅食喂养者中检出结石35例(1.06%);喂养时间≥3个月者检出结石57例(1.67%),喂养时间<3个月者检出结石7例(0.6%).[结论]食用含三聚氰胺奶粉的婴幼儿泌尿系结石发病率显著高于普通人群,结石的发生与摄入体内三聚氰胺的量和摄入时间有关.B超检查是明确诊断的首选方法.

    作者:余毅;许四清 刊期: 2009年第03期

  • 血液灌注加血液透析联合治疗对β2-MG及PTH的清除作用

    [目的]探讨血液灌注+血液透析与其它血液净化方式对血清β2-微球蛋白(β2-MG)和甲状旁腺激素(PTH)的清除效果.[方法]将72例维持性血液透析患者随机分为三组:血液灌流+血液透析(HDP)组、血液透析(HD)组和血液透析滤过(HDF)组,比较三组单次治疗对血清β2-MG和PTH的清除率.[结果]①HD组、HDF组和HDP组均能有效清除血清尿素氮(BUN)、肌酐(Scr)和血磷(P<0.01).②HDP组与HDF组治疗前后血清β2-MG和PTH均显著下降(P<0.01),HD组治疗前后血清β2-MG和PTH均无显著下降(P>0.05);③HDP组与HDF组对β2-MG和PTH的清除率比较差异无显著性(P>0.05),此两组的清除率与HD组比较差异均有显著性(P<0.01).[结论]HDP与HDF可有效清除β2-MG及PTH;HD不能有效清除β2-MG及PTH.

    作者:臧翠平;周巧玲;许辉;龙敏琦;刘湘华 刊期: 2009年第03期

  • 松果体区肿瘤的手术切除及技巧

    [目的]对松果体区肿瘤采取熟悉的手术入路,认真了解肿瘤周围的解剖结构,结合其熟练的手术技巧,以期达到良好效果.[方法]本组自2006年8月至2008年10月,对22例松果体区肿瘤采取显微手术,2例采用Poppen入路,其余20例采用Krause入路,全部病例均采用侧俯卧位.[结果]22例松果体区肿瘤,全切除20例,次全切除2例,症状好转及痊愈19例,病情加重3例,其中1例术中肿瘤卒中术后昏迷、1例术后巨大硬膜外血肿继发昏迷、1例术后急性脑积水致脑危相昏迷.无死亡病例.[结论]熟悉的手术入路、熟练的手术技巧及显微手术技术,对松果体区肿瘤的手术切除能取得良好效果、同时重视术后可能出现的并发症.

    作者:刘景平;刘运生;沈沉浮;李学军;兰松 刊期: 2009年第03期

  • 31例肝局灶性结节状增生的影像学检查结果对比分析

    [目的]分析肝局灶性结节状增生超声、CT、核磁共振影像学结果,明确各种检查的诊断价值,提高肝局灶性结节状增生诊断的准确率,避免不必要的手术治疗.[方法]回顾性分析31例(33个病灶)经病理证实的肝局灶性结节状增生患者的超声、CT、核磁共振影像检查的结果.[结果]31例患者(33个病灶)中,二维灰阶超声诊断为良性病变18个病灶,彩色多普勒超声诊断为良性病变26个病灶,22个病灶CT诊断为良性病变,共有26个病灶MRI诊断为肝局灶性结节状增生;其中行超声造影者9例,8例均诊断为肝局灶性结节状增生.[结论]彩色多普勒超声与MRI对肝局灶性结节状增生的良恶性诊断大体一致,但是MRI对肝局灶性结节状增生的定性诊断明显高于彩超;而超声造影是所有影像定性诊断中准确的方法.

    作者:王莉萍;夏晓辉;敖琨;龙湘党;赵康 刊期: 2009年第03期

  • 移位髋臼骨折治疗方法探讨及疗效分析(附33例报告)

    [目的]探讨移位髋臼骨折的手术方法与疗效.[方法]回顾性分析2000年10月至2006年6月切开复位内固定治疗移位髋臼骨折33例,按Letournel-Judet分型简单骨折23例,复杂骨折10例.Kocher-Langenbeck入路25例、髂腹股沟入路5例、前后联合入路3例.首先处理关节腔内游离骨块,将负重区关节软骨下压缩骨折或翻转骨折复位,然后纠正骨折端旋转分离移位,复位后采用重建钢板内固定.[结果]30例患者随访13~80个月(平均51个月),根据Matta解剖学评分,解剖复位28例,复位欠佳3例,复位不满意2例;根据D′Aubigne-Postel 功能评定标准:优20例,良6例,可4例,差3例.[结论]移位髋臼骨折应尽早手术,骨折类型、股骨头软骨面损伤程度、手术时间以及骨折复位质量是影响预后的主要因素.

    作者:何辉;曹知贫 刊期: 2009年第03期

  • 舒芬太尼配合喉罩在小儿全麻中的应用

    小儿全麻是临床麻醉的难点和重点,基于小儿对麻醉药物敏感,缺氧耐受性差的原因,故容易造成机械性损伤和肺部感染,这给临床麻醉医生提出了更高的要求.作者观察了舒芬太尼配合喉罩在小儿全麻中的可行性,其结果分析报道如下.

    作者:张国光;夏冰 刊期: 2009年第03期

  • 早产鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞的分离纯化、原代培养及鉴定

    [目的]建立一套可靠的早产鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞(AECⅡ)分离、纯化和培养技术,用于体外研究早产儿肺部疾病.[方法]采用胰酶和胶原酶消化胎龄20d早产鼠肺组织块,经差速离心和反复贴壁法,分离、纯化早产鼠AECⅡ,并进行原代培养.用细胞角化蛋白(cytokeratin)进行二氨基联苯胺(DAB)及荧光免疫细胞化学显色,和透射电镜对所分离的细胞进行鉴定.[结果]AECⅡ体外培养24~48 h,增殖代谢旺盛,进入对数生长期,生长状态佳.cytokeratin在DAB免疫细胞化学及荧光免疫细胞化学中均有表达.透射电镜观察可见细胞内板层小体.[结论]该方法所得细胞产量大、纯度高,是一种可靠的早产鼠AECⅡ的分离纯化培养技术,对体外研究早产儿肺部疾病如高氧肺损伤等有重要意义.

    作者:丁小芳;钟礼立;张兵;李嘉 刊期: 2009年第03期

  • TCT,HR-HPV检测在宫颈病变筛查中的应用

    [目的]评价新柏士液基薄层细胞学检查(TCT),人乳头状瘤病毒(HPV)高危型检测(HR-HPV)对宫颈病的筛查价值.[方法]对门诊858例TCT异常(TBS系统诊断≥ASC-US)的患者,同时行HPV高危型检测,配合阴道镜检查并取活检,以病理学为标准对结果进行分析.[结果]858例液基细胞细胞学异常中与病理组织学检查的符合率为:LSIL76.2%(112/147),HSIL90.1%(136/151),宫颈癌100%(9/9).细胞学异常858中,HPV阳性率分别为ASC34.7%(191/551),LSIL78.2%(115/147),HSIL 91.4%(149/163),宫颈浸润癌88.9%(8/9).858例患者阴道镜组织活检病理学诊断结果的HR-HPV阳性率分别为:慢性宫颈炎17.2%(67/390)、CINⅠ HPV77.3%(225/291)、CINⅡ CINⅢ 92.7%(140/151)宫颈癌92.9%(13/14).[结论]TCT检查,HPV检测是宫颈病变筛查的有效方法,二者结合提高宫颈病变及宫颈癌的检出率.

    作者:厉碧荣;李劼;陈婷 刊期: 2009年第03期

  • 226例肺癌手术患者预后多因素分析

    [目的]分析影响肺癌预后各种因素,为肺癌的防治提供科学依据.[方法]对湖南省肿瘤医院胸外科2003年1月至2004年1月期间具有明确病理学类型和临床分期的226例肺癌手术病例,经查阅病历并随访,回顾性分析、比较影响肺癌患者生存预后的因素.[结果]共随访226患者,失访18人,有效病例208例;随访率92%.采用Cox单因素及多因素分析,对12个协变量进行统计学处理表明:肿瘤家族史、临床分期、原发肿瘤大小、淋巴结转移、辅助化或(和)放疗影响肺癌手术患者预后.[结论]肿瘤家族史、临床分期、原发肿瘤大小、淋巴结转移、辅助化或(和)放疗是独立的影响肺癌手术患者预后的因素.

    作者:吴冠宇;肖高明;王文祥;汤轶;周石林 刊期: 2009年第03期

  • 氯氮平合并拉莫三嗪治疗躁狂症的疗效观察

    [目的]探讨氯氮平合并拉莫三嗪治疗有精神病性症状的躁狂症的疗效及安全.[方法]符合CCMD-3诊断标准的有精神病性症状的躁狂症患者 60例,随机分为两组,各30例,研究氯氮平合并拉莫三嗪治疗,治疗对照组单用氯氮平治疗.在治疗前及治疗后1~8周运用Beeh-Rafaelsen躁狂量表(BRMS)及不良反应量表(TESS)评定疗效和副作用.[结果]治疗组在治疗后有效率为83.33%,对照组为80.00%,两组差异无显著性(P<0.05),但研究组起效快于对照组,(P<0.05),副反应未增加(P>0.05).[结论]氯氮平合并拉莫三嗪治疗有精神病性症状的躁狂症起效快、安全性高.

    作者:谢新年;舒人九 刊期: 2009年第03期

  • 尤瑞克林治疗40例急性脑梗死的疗效观察

    [目的]观察尤瑞克林治疗急性脑梗死的有效性和安全性.[方法]80例急性脑梗死患者随机分成尤瑞克林治疗组(40例)及对照组(40例).对照组用常规治疗方法,治疗组在常规治疗的基础上加用尤瑞克林治疗14 d.采用NIHSS评分量表对治疗前、治疗后d7、d14的神经功能缺损进行评分和临床疗效评定,并记录不良反应.[结果]两组治疗后d7和d14 NHISS评分均有改善(全部P<0.05),治疗组优于对照组(全部P<0.05);治疗组总有效率达到90%显著高于对照组的70%(P<0.05).两组均未发现明显不良反应.[结论]尤瑞克林能显著改善急性脑梗死的神经功能缺损,提高疗效,安全性高.

    作者:张以善;张雄伟;林浩;王超凡;王磊 刊期: 2009年第03期

  • 短期吡格列酮干预对急性冠脉综合征合并2型糖尿病患者血浆SAA和CRP及IL-1β水平的影响

    [目的]探讨吡格列酮对急性冠脉综合征(ACS)合并2型糖尿病患者血浆淀粉样蛋白A(SAA)、C反应蛋白(CRP)及白介素1-β(IL-1β)水平的影响及其非降糖作用.[方法]69例合并2型糖尿病的急性冠脉综合征患者随机分为两组,实验组在不停用已有降糖药的基础上加用吡格列酮30 mg/d,分两次服.对照组在已有降糖药的基础上加用安慰剂.用酶联免疫吸附实验(ELISA)的方法分析两组患者在干预前后的血浆SAA和IL-1β水平;颗粒增强的免疫透射比浊法测定血浆CRP水平.[结果]实验组患者在干预1周后血浆SAA和IL-1β水平下降差异有显著性(P<0.05),而CRP有下降趋势但无统计学意义(P>0.05).对照组在干预前后血浆SAA、CRP和IL-1β水平均无明显变化(P>0.05).两组干预前后血糖和胰岛素水平差异均无显著性(P>0.05).[结论]吡格列酮能降低急性冠脉综合征合并2型糖尿病患者的血SAA和 IL-1β水平,其抑制SAA和IL-1β水平的作用不依赖其代谢调节作用.

    作者:曾高峰;祁述善;周胜华;孙翔 刊期: 2009年第03期

  • 微创经皮肾穿刺治疗上尿路结石围手术期的护理

    微创经皮肾取石术(MPCNL)由于安全、无切口、疗效好、住院时间短而逐渐普及[1].本院自2007年12月至2008年6月行经皮肾穿刺,输尿管镜直视下,腔内气压弹道碎石术治疗上尿路结石80例,取得了满意的效果.现将围手术期的护理介绍如下.

    作者:杨红;易琳 刊期: 2009年第03期

  • HPLC法测定复方炎消颗粒中盐酸小檗碱的含量

    [目的]建立测定复方炎消颗粒中盐酸小檗碱含量的高效液相色谱法.[方法]采用Diamonsil C18柱,以乙腈-水(含0.05%磷酸和0.1%三乙胺)(42:58)为流动相,检测波长266 nm.[结果]该色谱条件下盐酸小檗碱在4.08~81.6 mg/L浓度范围内呈良好的线性关系.平均回收率为98.5%,相对标准偏差(RSD)为1.16%.[结论]本法简便可行、重复性好,可用于该制剂中盐酸小檗碱的含量测定.

    作者:罗佳 刊期: 2009年第03期

医学临床研究杂志

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主管:湖南省卫生厅

主办:中华医学会湖南分会