龚静青;曹端荣;李晓鸣;邹桂华
目的 分析深圳市H5N6、H7N9流感病毒神经氨酸酶(NA)基因非翻译区(UTR)的分子特性,为进一步探究NA基因与流感病毒转录复制及包装之间的关系奠定理论基础.方法 使用MEGA 7.0、DNAstar7.1.0等生物信息分析软件对全球和深圳H5N6、H7N9流感病毒NA的UTR进行核苷酸序列同源性分析及基因多态性分析.结果 2014-2015年深圳市H5N6病毒与其他HXN6病毒株比较,NA?3′端核苷酸同源性为95.1%~100.0%,H5N6?NA 3′?UTR高度保守;5′端UTR核苷酸同源性为89.7%~100.0%,H5N6?NA 5′?UTR主要在第23、27、29及33位发生突变.8株2013-2014年深圳市H7N9病毒与其他HXN9流感病毒株比较,NA?5′端UTR核苷酸同源性为93.3%~100.0%,其在第4、6及23位发生突变.结论 深圳市人感染H5N6及H7N9病毒NA?UTR的保守区具有高度同源性,其可变区具有基因多态性.
作者:李茜;陈燕慈;彭博;王昕;武伟华;刘慧;郑青;房师松 刊期: 2018年第06期
人感染H7N9禽流感作为新发传染病,疫情迅速蔓延,针对性的研究很多,本文就流行形势、病毒溯源、治疗药物等方面研究进展进行综述.
作者:刘强林 刊期: 2018年第06期
目的 探讨呋塞米维持推注辅助治疗小儿重症肺炎的疗效及对细胞因子的影响.方法 选取2015年1月-2017年1月间于本院儿科重症监护病房住院治疗的重症肺炎患儿60例,随机分为观察组和对照组,对照组行常规治疗,观察组行常规治疗联合维持推注呋塞米治疗,对比两组患儿的临床疗效,血气指标以及炎性细胞因子表达水平.结果 观察组治疗有效率为96.67%,高于对照组的70.00%,差异有统计学意义(P<0.05).两组患儿治疗前动脉氧分压(PaO2)、二氧化碳分压(PCO2)、动脉血氧饱和度(SaO2)、氧合指数(PaO2/FiO2)以及白细胞介素-6(IL?6)、白细胞介素-8(IL?8)、C反应蛋白(CRP)、肿瘤坏死因子(TNF?α)、心肌肌钙蛋白I(cTnI)比较差异无统计学意义(P>0.05).经治疗后两组患儿PCO2以及IL?6、IL?8、CRP、TNF?α、cTnI水平均显著降低,且观察组降低幅度优于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05);而PaO2、SaO2、PaO2/FiO2均显著升高,且观察组升高幅度优于对照组,差异有统计学意义(P<0.05).结论 呋塞米维持推注辅助治疗小儿重症肺炎,可有效改善患儿呼吸道症状,降低血浆炎性因子表达水平,疗效显著.
作者:钟活志;贺道机;叶永芝;何海燕 刊期: 2018年第06期
目的 探讨新生儿肾上腺血肿(NAH)的临床特征、治疗方案及疾病转归.方法 回顾性分析1例以危险性高胆红素血症为主要表现的新生儿肾上腺血肿的治疗及随访经过.结果 巨大儿经阴道分娩,产道挤压及严重感染可能是导致本例肾上腺血肿的原因之一.肾上腺血肿可引起新生儿出生后早期重度高胆红素血症及胆红素脑病.结论 新生儿生后早期高胆红素血症,尤其是巨大儿且有产伤、窒息、感染等高危因素的患儿需常规腹部B超检查.
作者:陈佳;余静;管利荣;薛丹 刊期: 2018年第06期
随着全球生态变化和人口流动频繁,寄生虫病的感染情况不容乐观.目前实验室开展的寄生虫病原学和免疫学检测方法仍存在一些不足,因此以分子生物学为检测手段的寄生虫病精准诊断,将更有利于推动寄生虫病的诊断水平.本文对目前的原虫、蠕虫相关病原体的分子生物学检测作一综述.
作者:邹洋;李晶晶;贾永根;王磊;王非;郑晓燕;李小丽;黄敏君 刊期: 2018年第06期
目的 探讨miR?200c活化的肝星状细胞(HSC)对肝细胞癌(HCC)的促进作用.方法 用慢病毒转染的方法构建过表达miR?200c的HSC稳定株(LX2?200c)以及空质粒稳定株(LX2?nc);用MTT实验检测细胞增殖能力的变化,用transwell小室检测迁移和侵袭能力的影响;用裸鼠皮下种植瘤观察肝星状细胞对肝癌细胞株(HepG2和Hep3B)成瘤的影响;用Western blot方法检测HepG2和Hep3B内上皮间质转化(EMT)的标记物Zeb?1、N?cadherin和Vemintin的表达;用免疫组化方法检测皮下种植瘤组织内肝星状细胞活化标志物(α?SMA)、肿瘤组织增殖状态标志物(Ki67)的表达水平.结果 过表达miR?200c的HSC细胞株(LX2?200c)的条件培养基与对照组(LX2?nc)的条件培养基相比,可显著促进HCC体外增殖(P<0.05)、迁移及侵袭.LX2?200c可促进肝癌细胞皮下成瘤的重量和体积(P<0.05),并促进种植瘤组织中Ki67及α?SMA表达显著增加.LX2?200c条件培养基作用后的肝癌细胞株上Zeb?1、N?cadherin和Vemintin的表达增加.结论 miR?200c活化的肝星状细胞可显著促进肝癌细胞生长、侵袭.
作者:蔡秀琴;吴健;马腾飞;李巧;华赟鹏 刊期: 2018年第06期
目的 调查佛山地区春季空气中的气传花粉种属和数目.方法 在佛山市3个区定点设置曝片点进行空气花粉的取样,实验室内染色、制片、阅片,按照国内统一标准进行曝片花粉的鉴定.结果 此次调查共收集花粉7062粒,鉴定出21种属(科)6975粒花粉,占收集花粉数的98.77%.花粉鉴定结果显示,佛山地区春季主要的4种气传花粉为松属花粉,1482粒,占所有花粉数的20.99%;木麻黄属花粉1305粒,占18.48%;苏木科花粉1052粒,占14.90%;乔本科花粉680粒,占9.63%,这4种花粉之和占所有花粉总数的63.99%.结论 佛山地区春季花粉主要以松属、木麻黄属、苏木科和乔本科为主.
作者:王涛;刘林菁;黄澜;李明华 刊期: 2018年第06期
目的 研究多参数流式细胞术对急性B淋巴细胞白血病微小残留病变的应用价值.方法 选取2014年3月到2016年3月入本院行急性B淋巴细胞白血病治疗患者骨髓标本80例,均经骨髓形态学及细胞学确诊.采用两组四色荧光标记单克隆抗体组合,将选定组合抗体应用多参数流式细胞术检测患者的骨髓样本.结果 根据检测结果将样本分为三组,表达异常免疫表型组合细胞群36例(A组),不能检测到存在异常免疫表型组合细胞群36例(B组),可以检测到原始细胞但是检测不到异常免疫表型的细胞群8例(C组).对A、B组骨髓样本进行形态学检测,并进行比较.A组MRD检测结果在0.009%到0.270%之间.B组MRD呈阴性,C组共8例可观察到一定数量的原始细胞群,且未发现表达异常的免疫表型.流式细胞术检测MRD A组和B组原始淋巴细胞和幼淋巴细胞占骨髓有核细胞比值差异有统计学意义(P<0.05).术后一年复查,有8例患者白血病复发,A组6例(复发率16.67%),B组2例(复发率5.56%),采用多参数流式细胞术监测的患者比通过传统形态学监测的患者提前2个月预测到复发.结论 多参数流式细胞术检测MRD可提前预测患者复发,实验灵敏度高,方法简便,耗时短,减少了患者的医疗费用.
作者:陈嘉骥;苏泳恩;邹茂权 刊期: 2018年第06期
目的 评价美罗培南(MPN)、亚胺培南(IPN)和厄他培南(ETP)3种不同药敏纸片作为底物应用于碳青霉烯酶表型检测法(CIM)检测产碳青霉烯酶的鲍曼不动杆菌的可行性.方法 选择邢台市第三医院2015年1-12月和河北医科大学第二医院2015年5-6月从临床标本分离所得的非重复鲍曼不动杆菌88株,经LB培养基复苏,在血培养基35℃,5%CO2过夜培养后,准备A、B、C三组EP管,用10μL接种环挑取满环细菌分别加入A、B、C 3管中,混匀后再分别加入10μg美洛培南、亚胺培南、厄他培南药敏片,检测鲍曼不动杆菌的碳青霉烯酶,并以经典PCR方法检测耐药基因OXA?23为金标准,比较3种药敏片作为底物的CIM法检测产OXA?23型碳青霉烯酶的鲍曼不动杆菌的效果.结果 88株鲍曼不动杆菌有57株显示OXA?23基因阳性,IMP、VIM、KPC、OXA?48基因均为阴性.57株OXA?23基因阳性的菌株中美罗培南、亚胺培南、厄他培南的检出率分别为93.0%(53/57)、77.2%(44/57)、73.7%(42/57),亚胺培南和厄他培南阴性菌株经过加入3倍菌量再次实验,检出率分别为89.5%(51/57)和87.7%(50/57).31株OXA?23基因阴性的菌株中,美罗培南CIM试验2株阳性,亚胺培南和厄他培南检测均有1株阳性.3种药敏片的CIM试验和金标准OXA?23基因比较,差异无统计学意义(P>0.05).结论 应用美罗培南、亚胺培南和厄他培南为底物的CIM法检测产OXA?23型碳青霉烯酶的鲍曼不动杆菌都是很好的检测方法,但是亚胺培南和厄他培南需要加大3倍菌量.
作者:牛翠;李致文;杨华;张凯;时东彦 刊期: 2018年第06期
目的 回顾性分析2631例可疑呼吸道感染患者血清中肺炎支原体(MP)与病毒独立检出情况及合并感染情况,为呼吸道感染患者临床合理治疗和预防提供依据.方法 应用间接免疫荧光法(IIFA),对2631例呼吸道感染患者的血清同时进行9项常见呼吸道感染病原体检测,统计分析检测结果.结果 2631例患者中MP检出率21.28%,病毒检出率10.22%.MP阳性合并病毒感染百分率20.71%,病毒感染合并MP百分率39.03%(P<0.05).MP合并病毒感染以MP合并FluB感染常见,占2.43%.不同年龄组中,儿童组(<18岁)MP检出率高,占27.52%.不同年龄组MP合并病毒感染,也以儿童组占高,占25.07%(P<0.05).不同性别组中,男性MP检出率18.74%,女性MP检出率25.19%(P<0.05);男性MP合并病毒感染率8.75%,女性MP合并病毒感染率11.96%(P<0.05).不同季节组,春季、夏季MP检出率分别为24.15%、24.46%,较秋季、冬季高(P<0.05);春、夏季MP合并病毒感染率分别占5.89%、7.85%,也较秋冬季高(P<0.05).结论 MP为本地区呼吸道感染主要致病原,且MP合并病毒感染机率高,随年龄不同、流行季节不同而有一定的流行规律,对于呼吸道感染的诊断具有重要意义.
作者:卢建强;黄纪 刊期: 2018年第06期
目的 分析轮状病毒肠炎患儿血清和大便白细胞介素-6(IL?6)、白细胞介素-8(IL?8)、超敏C反应蛋白(hs?CRP)的动态水平变化,探讨其对轮状病毒肠炎患儿检测和治疗的意义.方法 选取100例轮状病毒肠炎患儿作为观察组,根据病情的轻重分为重症组50例和轻症组50例,同时选取50例同期健康儿童作为对照组.动态观察观察组患儿血清和大便中IL?6、IL?8、hs?CRP的水平变化,并与对照组健康儿童的动态水平变化进行对比.结果 治疗前,重症组和轻症组患儿血清和大便中的IL?6、IL?8、hs?CRP数值均高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05).治疗后,重症组与轻症组患儿血清和大便中的IL?6、IL?8、hs?CRP数值均显著下降,与对照组比较差异无统计学意义(P>0.05).结论 轮状病毒肠炎患儿的血清样本和大便样本中IL?6、IL?8、hs?CRP指标的动态变化与轮状病毒肠炎感染的病情严重程度密切相关.
作者:黄燕妮;罗茂华;袁艺华 刊期: 2018年第06期
目的 探究不同剂量紫草酸对高糖诱导人视网膜血管内皮细胞(RVECs)凋亡及Notch1、多聚二磷酸腺苷核糖聚合酶-1(PARP?1)表达的影响.方法 体外培养人RVECs,将对数生长期细胞分为五组,即正常糖浓度组、高糖组、高糖+紫草酸低剂量组、高糖+紫草酸中剂量组和高糖+紫草酸高剂量组.培养处理12及24 h时,分别观察各组人RVECs细胞凋亡、增殖及细胞周期变化情况,并检测各组人RVECs中Notch1、PARP?1的mRNA及蛋白表达水平.结果 培养处理12及24 h时,高糖组细胞凋亡比例、细胞周期S期、细胞增殖率及PARP?1 mRNA、蛋白相对表达水平均高于正常糖浓度组,而细胞周期G0/G1期、Notch1 mRNA、蛋白相对表达水平均低于正常糖浓度组,差异均有统计学意义(P<0.05);高糖+紫草酸组细胞凋亡比例、细胞周期S期、细胞增殖率及PARP?1 mRNA、蛋白相对表达水平均低于高糖组,而细胞周期G0/G1期、Notch1 mRNA、蛋白相对表达水平均高于高糖组,差异有统计学意义(P<0.05);高糖+紫草酸组内3个不同剂量间相比,浓度越高其细胞凋亡比例、细胞周期及细胞增殖与Notch1、PARP?1的mRNA及蛋白相对表达水平变化幅度越大,差异均有统计学意义(P<0.05).结论 紫草酸作用于高糖诱导人视网膜血管内皮细胞,能够有效抑制细胞调亡,促进Notch1表达,降低PARP?1表达,其作用效果具有剂量依赖性.
作者:靖鹏举;朱冬梅 刊期: 2018年第06期
目的 探讨血小板计数检测对支原体肺炎(MPP)婴幼儿病情评估中的价值.方法 选择389例1~3岁支原体肺炎患者作为研究对象,按照血小板计数分为继发性血小板增多组(A组,76例,血小板计数>400×109/L)和血小板计数正常组[B组,313例,血小板计数(100~400)×109/L],比较两组发热时间、高体温、咳嗽时间、肺部啰音时间、住院时间、喘息发生率、肺外并发症发生率和难治性支原体肺炎发生率,并比较两组降钙素原(PCT)、C反应蛋白(CRP)和血沉(ESR),分析血小板计数与上述指标的相关性.结果 B组患儿发热时间、住院时间、高体温、肺外并发症和难治性支原体肺炎发生率、CRP、PCT、ESR、多重病原体感染率和节段性或大叶性肺炎率均显著低于A组,差异均有统计学意义(P<0.05);本组389例支原体肺炎患儿血小板计数与发热时间(r=0.158)、高体温(r=0.171)、住院时间(r=0.284)、CRP(r=0.642)、ESR(r=0.533)呈显著正相关(P<0.05).结论 血小板计数检测对于支原体肺炎婴幼儿病情评估和重症预测有一定临床价值.
作者:李涛;郑淮武;黄艳 刊期: 2018年第06期
目的 通过阻断小鼠体内T细胞免疫球蛋白黏蛋白分子-3(Tim3)/Galectin9通路,研究Tim3/Galectin9通路在结核菌感染中的调控作用.方法 利用Tim3和Galectin9功能性单抗阻断Tim3/Galectin9通路,1.0×106CFU H37Rv经腹腔注射感染C57BL/6雌性小鼠,感染4周后观察肺部大体情况和肺组织病理改变;流式细胞术检测小鼠外周血中Th1细胞干扰素-γ(IFN?γ)等细胞因子的表达情况;采用平板计数法计算脾脏和肺脏组织荷菌数CFUs.结果 小鼠感染后,经Tim3、Galectin9功能性单抗阻断Tim3/Galectin9通路的小鼠肺部肉芽肿病变明显减轻,脾脏和肺脏的荷菌量均较IgG control对照组低,流式细胞术结果显示CD4+T细胞的IFN?γ表达量相比IgG control感染对照组增多,差异有统计学意义(P<0.05).结论 结核分枝杆菌感染中,通过功能性单抗阻断Tim3/Galectin9通路可缓解结核病理状态,有效提高机体免疫水平,抑制结核的发生发展.
作者:杨宜;杨芳;陈玲铭;张志祎;曾谷城 刊期: 2018年第06期
目的 探讨miR?204在原发性肝细胞癌(HCC)中的表达及其临床意义.方法 采用对照研究,收集2010年5月-2014年5月深圳市宝安区人民医院HCC患者的HCC肝组织36例,切除癌组织后离切缘3~5 cm位置处肝组织作为癌旁组织36例,正常肝组织15例.采用免疫组化法检测miR?204、B淋巴细胞瘤?2蛋白(Bcl?2)、甲胎蛋白(AFP)、高尔基蛋白73(GP73)、E盒结合锌指蛋白2(ZEB2)、血管内皮生长因子-D(VEGF?D)的表达情况,收集患者临床资料并进行3年随访,分析miR?204表达情况与患者病理特征、3年生存率的关系,对比检测结果,并使用ROC曲线对检测结果进行评价.结果 36例HCC患者肝癌组织中miR?204阳性表达12例,阳性表达率33.33%,癌旁组织中miR?204阳性表达30例,阳性表达率83.33%,正常肝脏组织中miR?204阳性表达14例,阳性表达率93.33%,肝癌组织miR?204阳性表达率明显低于癌旁组织及正常组织(P<0.05);肝癌组织的Bcl?2、AFP、GP73、ZEB2、VEGF?D表达阳性率明显高于癌旁组织及正常组织(P<0.05).HCC患者中的miR?204表达与Bcl?2、AFP、GP73、ZEB2、VEGF?D呈负相关(r分别为-0.853、-0.769、-0.824、-0.617、-0.732,P=0.000),与HCC病理分期呈负相关(r=-0.794,P=0.000),与HCC患者3年生存率呈正相关(r=0.608,P=0.000).miR?204检测的ROC曲线下面积分别为0.945,大于0.6(P<0.05).结论 HCC患者miR?204表达降低,对其进行监测,能为其诊断及病情评估提供参考.
作者:龚静青;曹端荣;李晓鸣;邹桂华 刊期: 2018年第06期
目的 探讨益智乙酸乙酯提取物对大鼠肝纤维化防治作用及其作用机制.方法 采用高脂饲料喂养12周诱导SD大鼠非酒精性脂肪性肝炎模型,实验分为对照组、模型组、益智乙酸乙酯提取物组(实验组).实验组给予高脂饲料喂养+四氯化碳(CCL4)腹腔内注射,每天给予益智提取物500 mg/kg灌胃;模型组给予高脂饲料喂养+CCL4腹腔内注射,每天给予相同体积的白开水灌胃;对照组,正常饲料喂养,每天给予相同体积的白开水灌胃,持续4周.外周血检测甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)、谷草转氨酶(AST)、谷丙转氨酶(ALT);ELISA检测肝组织透明质酸(HA)、层粘连蛋白(LN)含量.肝组织检测丙二醛(MDA)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH)、超氧物歧化酶(SOD)活性.RT?PCR检测转化生长因子-β1(TGF?β1)m?RNA、Smad2、Smad3、Smad7表达.Masson染色观察肝纤维化情况.结果 与对照组比较,模型组的TG、TC、AST、ALT、HA、LN、MDA、Smad2、Smad3、TGF?β1 m?RNA水平明显升高,差异有统计学意义(P<0.05);GSH、SOD、Smad7明显下降,差异有统计学意义(P<0.05).与模型组比较,实验组的TG、TC、AST、ALT、HA、LN、MDA、Smad2、Smad3、TGF?β1 m?RNA水平明显下降,差异有统计学意义(P<0.05),GSH、SOD、Smad7明显上升,差异有统计学意义(P<0.05).Masson染色下,与对照组比较,模型组及实验组肝脏组织均出现纤维化.与模型组比较,实验组肝组织脂肪变性情况改善,但肝纤维化情况改善不明显.结论 益智乙酸乙酯提取物能抗氧化应激、下调TGF?β1/Smad信号通路,有缓解肝纤维化的作用.
作者:陈益耀;陈轶;何周桃;巫华志 刊期: 2018年第06期
目的 分析自制红霉素眼膏纱条在非洲黑人慢性骨髓炎的临床应用疗效.方法 回顾性研究2016年6月至2017年11月,马拉博医院收治慢性骨髓炎,并行开槽清创、自制红霉素眼膏纱条填塞手术的患者共21例,男12例,女9例.胫骨8例,肱骨6例,股骨5例,尺骨1例,桡骨1例.结果 无红霉素过敏病例,平均住院时间(6.7±1.6)d;伤口平均愈合时间(17.2±2.4)d,无伤口感染发生;平均随访时间为(4.5±3.3)个月;无骨髓炎复发病例.结论 自制红霉素眼膏纱条结合规范的开槽清创术在非洲黑人慢性骨髓炎患者中取得良好的疗效,在医疗资源极度缺乏的国家不失为一种切实可行的选择.
作者:黄岭志;张日雄;LesterDiazMorin;BarillReginaldo 刊期: 2018年第06期
目的 揭示人感染H7N9宿主血清HA抗体的产生及与其他HA亚型的交叉反应特性.方法 生物公司合成各亚型HA蛋白胞外域核苷酸序列,并克隆到改造过的pCDNA3.1载体上构建表达质粒.采用哺乳动物细胞表达体系表达C端带标签的H1、H3、H5和H7重组HA蛋白.用抗标签的抗体捕获293T细胞转染上清中的HA蛋白.用建立的ELISA法检测22例H7N9感染者血清抗体与蛋白H1、H3、H5、H7(2013)和H7(2017)的结合反应,同时设H1N1感染组及健康对照组.结果 成功构建H1、H3、H5和H7重组HA蛋白表达质粒,表达蛋白大小约72000~100000 Mr.在检测的22例34份H7N9感染血清,对2013年及2017年分离的H7N9病毒株的HA蛋白均有显著结合[OD值=(1.85±0.27)、(1.54±0.27)],与健康对照组及H1N1组比较,差异均有统计学意义(P<0.05).同时H7N9血清组与组1的H1、H5有交叉反应,OD值分别为(1.53±0.49)和(0.92±0.53),与健康对照组比较差异有统计学意义(P<0.05),与组2的H3有交叉反应[OD值=(2.09±0.22)],与健康对照组比较差异有统计学意义(P<0.05).而健康对照组与H1、H3有一定的结合反应,与H5、H7几乎不结合.结论 人感染H7N9病毒诱导的宿主血清HA抗体不仅与H7N9结合且与其他亚型HA蛋白有高度交叉反应,为广谱中和抗体的筛选及疫苗的研发提供了依据.
作者:李春林;邓西龙;向梦蓉;温莺芬;王茜茜;张复春;庾蕾 刊期: 2018年第06期
目的 比较依那普利叶酸片与依那普利治疗H型高血压伴慢性心力衰竭(CHF)的疗效.方法 选取2013年1月-2015年6月就诊的90例符合标准的H型高血压伴左心室收缩功能不全患者,随机分为依那普利组和依那普利叶酸片组(依叶组),每组各45例.根据统一心衰指南,给予强心、利尿及改善心肌重塑治疗,依那普利组给予依那普利片,依叶组给予依那普利叶酸片,治疗1年观察两组患者血压、心功能、脑钠肽(BNP)及血浆同型半胱氨酸(Hcy)水平的变化.结果 两组患者治疗后收缩压、舒张压均较治疗前显著降低,治疗前后差异有统计学意义(P<0.05),且治疗后依叶组显著低于依那普利组(P<0.05).治疗后,两组患者血浆Hcy水平均较治疗前降低(P<0.05),且治疗后依叶组血浆Hcy水平显著低于依那普利组,差异有统计学意义(P<0.05).治疗后,两组患者BNP水平与治疗前相比均降低(P<0.05),且治疗后依叶组显著低于依那普利组,差异有统计学意义(P<0.05).患者治疗前血清Hcy与BNP呈现明显的正相关,随着血清Hcy水平的升高,血清BNP明显升高(rpearson=0.69,P<0.05).结论 依那普利叶酸片能更好地降低H型高血压伴心力衰竭患者血压及血浆Hcy水平,更好改善此类患者心功能.
作者:段凌菱;孙向阳;冯达应 刊期: 2018年第06期
目的 探讨热休克蛋白70(Hsp70)在寨卡病毒(ZIKV)感染中的作用.方法 建立ZIKV感染的A549细胞模型,Realtime?PCR方法检测感染后不同时间点Hsp70表达水平;在A549细胞中过表达Hsp70?flag或沉默Hsp70,感染ZIKV后,Realtime?PCR方法检测ZIKV RNA表达水平和肿瘤坏死因子(TNF?α)、干扰素-β(IFN?β)表达水平,Western blot方法检测细胞中病毒蛋白的表达水平;用Hsp70的抑制剂VER155008处理A549细胞,Realtime?PCR方法检测ZIKV RNA表达水平和TNF?α、IFN?β表达水平,Western blot方法检测病毒蛋白表达水平,并用Focus Forming Assay检测病毒粒子释放水平.结果 A549细胞感染ZIKV后,Hsp70表达上调,感染组是未感染组的2倍(P<0.05);在A549细胞中过表达Hsp70?flag后,ZIKV复制水平和TNF?α、IFN?β水平均增高(P<0.05);在A549细胞中沉默Hsp70后感染ZIKV,病毒胞内复制减弱,TNF?α、IFN?β的表达水平降低(P<0.05);抑制Hsp70的功能后,ZIKV胞内复制水平降低,TNF?α、IFN?β表达水平降低(P<0.05).结论 Hsp70可促进ZIKV在A549细胞中的增殖及促炎性因子TNF?α、IFN?β的释放,并且这种作用依赖于Hsp70与ATP结合的功能域.
作者:刘巧巧;赖宏智;刘婷;蒲洁莹;黄曦 刊期: 2018年第06期