周燕蓉;吴忠道
目的 探讨miR-125b-1增强紫杉醇对乳腺癌SKBR-3细胞化疗敏感性的影响,及其对靶基因Her2蛋白表达的影响.方法 合成miR-125b-1并通过LipofectamineTM 2000转染SKBR-3细胞,将实验分为空白对照组(脂质体转染SKBR-3细胞株)、阴性对照组(siRNA转染SKBR-3细胞株)、miR-125b-1组(miR-125-1转染SKBR-3细胞株)3组.分别用RT-PCR和蛋白质印迹法检测Her2 mRNA和蛋白质表达水平的变化;流式细胞仪检测细胞周期;MTT法检测miR125b-1对紫杉醇作用于SKBR-3细胞化疗敏感性的影响.结果 miR-125b-1转染后的SKBR-3细胞中Her2 mRNA和蛋白质水平显著下降;流式细胞仪检测结果显示,转染miRNA-125b-1的SKBR-3细胞G2M期细胞比例显著高于其他组(P=0.000),而空白对照组与阴性对照组比较差异无统计学意义(P=0.094).三组之间比较,G0-G1期、S期比例差异无统计学意义;用miR-125b-1处理组细胞的IC50与未处理组相比下降2.69倍,差异有统计学意义(P<0.05).结论 miR-125b-1可增强乳腺癌SKBR-3细胞对紫杉醇的化疗敏感性,下调Her2可能是其作用机制之一.
作者:胡斌;吴爱国;李学孝;纪术峰;王梦川;吴凯;邵国利 刊期: 2012年第07期
目的 比较INNO-LiPA HBV DR v2和直接测序法检测HBV耐药突变的准确性和灵敏性.方法 选取41例接受阿德福韦或聚乙二醇干扰素α-2a救援治疗并在治疗过程中(治疗48周和72周时)进行INNO-LiPA HBV DR v2耐药检测的拉米夫定耐药患者,共收集到101份足量的血清,采用直接测序法进行拉米夫定和阿德福韦耐药检测.分析HBV聚合酶第80、173、180、181、204和236位点的耐药突变情况,并与INNO-LiPA耐药检测的结果进行对比.结果 INNO-LiPA HBV DR v2和直接测序法检测204位点耐药结果对比,完全符合率为73.8%(62/84),部分符合率为23.8%(20/84),总体符合率达到97.6%(82/84).其他位点总体符合率也多在95%以上.另外INNO-LiPA比直接测序法有更高的灵敏度,对混合感染的检出率(46.4%)明显高于直接测序法(23.8%),其总体耐药检出率也高于直接测序法.结论 INNO-LiPA方法在灵敏度和准确性上均优于直接测序法,而且操作简便、快捷,能够提供更多的信息量,在科研和临床上都有很好的应用前景.
作者:郑慧珂;周彬;何海棠;吕国涛;刘美三;孙剑;侯金林 刊期: 2012年第07期
目的 观察1.8%阿维菌素(AVM)乳油对小鼠肝微粒体细胞色素P450 (CYP450)酶系与谷胱甘肽S-转移酶(GST)的影响,初步探讨1.8%AVM在肝脏的可能的代谢过程和毒性机理.方法 40只清洁级昆明种小鼠(雌雄各半)灌胃给予1.8%AVM乳油(70、35、17.5 mg/kg),连续7d,以0.9%氯化钠溶液作对照.末次给药后处死小鼠,采用差速离心法制备大鼠肝微粒体,Brandford法测定微粒体蛋白浓度,CO还原差示光谱法检测肝微粒体CYP450含量,差示光谱法则定肝微粒体b5 (Cyt-b5)含量,紫外分光光度法则定肝微粒红霉素N-脱甲基酶活性(ERD)和氨基比林-N-脱甲基酶(ADM)和GST的活性.结果 各1.8%AVM乳油染毒剂量组ERD、ADM活性均低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);各剂量组小鼠肝脏指数、CYP450与b5的含量及GST的活性与对照组比较差异均无统计学意义(P>0.05),且不同剂量组间差异亦无统计学意义(P>0.05).结论 1.8%AVM乳油可抑制小鼠肝微粒体ERD(主要反映CYP3A活性)和ADM(主要反映CYP2E1)的活力,而对CYP450和b5含量及GST活性影响小,未观察到1.8%AVM乳油对小鼠肝微粒体重要的Ⅰ相酶CYP450和Ⅱ相酶GST的诱导或抑制作用.
作者:喻馨兰;张华;韦艳 刊期: 2012年第07期
目的 探讨应变率成像(SRI)对急性前壁ST段抬高心肌梗死(STEMI)患者心肌存活的早期预测价值.方法 行急诊经皮冠状动脉介入术(PCI)的前壁STEMI患者在术后测量室间隔心尖段的SRI指标,当收缩末期应变(SES)≥-7%时则纳入研究,并于6个月后复查,评价急性期SRI指标对心肌存活的预测价值.结果 46例前壁STEMI患者纳入研究,其中25例在6个月时SES<-7%,我们定义为存活心肌;21例随访时SES≥-7%,我们定义为失活心肌.存活心肌组SES、收缩后应变(SPS)、收缩期应变率(SRS)及舒张早期应变率(SRE)等指标明显优于失活心肌组(P<0.01),而收缩后应变率、舒张晚期应变率两组间无明显差异(P>0.05).SRS、SRE、SPS、SES均能预测心肌的存活,其中SRS曲线下面积大(0.803,P<0.01),当临界值取-0.31 s-1时,其预测存活心肌的敏感性、特异性、阳性预测值、阴性预测值分别为83%、68%、76%、71%.结论 在行急诊PCI的前壁STEMI患者中,SRI技术能早期预测受累心肌的存活性.
作者:钟新波;赵有生;王小庆;王涓;陈文斌;李涯 刊期: 2012年第07期
目的 探讨孕晚期疤痕子宫孕妇经阴道分娩的影响因素并分析其可行性.方法 回顾性分析80例孕晚期疤痕子宫孕妇经阴道分娩的临床资料,将其分为疤痕子宫自然临产组(n=38)、疤痕子宫计划分娩组(n=42),并设定对照组(n=50).比较3组间的分娩结局如产后出血量、胎盘胎膜滞留率、是否存在子宫破裂、急产率及钳产率等情况.结果 自然临产组有9例(23.68%)孕妇以钳产术缩短第二产程终止妊娠,而计划分娩组则有8例(19.05%),均高于对照组3例(6.00%),两两比较差异有统计学意义(P<0.01).自然临产组孕妇钳产率又稍高于计划分娩组,但两组比较差异无统计学意义(P>0.05).自然临产组总产程<3 h者有9人(23.68%),急产率高于计划分娩组(2.38%)及对照组(10.00%),差异有统计学意义(P<0.01).3组孕妇产后出血量、胎盘胎膜滞留率以及非计生引产胎儿评分比较,差异均无统计学意义(P>0.05).3组均无子宫破裂及新生儿重度窒息等不良事件发生.结论 疤痕子宫并非阴道试产的绝对禁忌,产前超声检查子宫下段疤痕区域的良好连续性及低位钳产术是其阴道试产的有利因素.
作者:郭芳;何平 刊期: 2012年第07期
目的 探讨在不同出血量及肝功能状态下,食管曲张静脉套扎术(EVL)治疗食管曲张静脉破裂(EVB)出血的临床治疗效果.方法 选择湘岳医院2005年1月至2010年12月收治的晚期血吸虫病并发EVB患者107例,在内科综合治疗基础上给予EVL.结果 本组患者107例,肝功能Child分级与食管曲张静脉程度有等级相关关系,相关系数为0.728(P<0.01),与出血量呈正相关关系,相关系数为0.848(t=16.426,P<0.01).内科治疗+套扎术治疗的有效率为97.87%,单纯内科治疗的有效率仅为12.15%,二者比较差异有统计学意义(P<0.01).结论 肝功能损害越严重食管胃底静脉曲张程度就越大、出血量也越多.内科治疗+套扎术治疗EVB的有效率明显优于单纯内科治疗.
作者:郑娜;荆群山;杨米佳;陈哲;王洪波 刊期: 2012年第07期
目的 分析吸毒人群HIV感染者中HIV-1的基因序列特征,初步确定其感染的基因亚型和各亚型的流行趋势.方法 在Genbank中查找HIV gag基因的序列,设计巢式PCR引物.从全血中提取样本的基因组DNA,进行巢式PCR,对PCR产物进行琼脂糖凝胶电泳和测序,所获序列与国际参考株序列进行比对,确定基因型或亚型.结果 对36例HIV-1感染者样本进行扩增,PCR共检测出29例阳性样本,27例测序成功,其中16例为CRF 08-BC重组亚型、7例为CRF 07-BC重组亚型、4例为CRF 01-AE重组亚型,15例阴性对照均无目的条带.结论 在广州吸毒强戒人员HIV-1型中以CRF BC亚型为主,其次为CRF 01-AE亚型.应加强对HIV-1毒株亚型的监测,以制定更好的防治策略.
作者:石泽林;韩慧;吴炳义 刊期: 2012年第07期
目的 分析社区获得性肺炎(CAP)患者CURB-65评分与其临床指标、IL-1β、IL-4之间的相关性.方法 研究中共收入80例研究对象,其中21例健康志愿者作为对照组;CAP病例共59例,其中轻症CAP 25例,重症CAP 34例.所有患者人院后采用CURB-65进行评分,常规行动脉血气分析,计算氧合指数,同时采用ELISA检测降钙素原(PCT)、IL-1β、IL-4.结果 轻症肺炎组与健康对照组比较,其PaO2[(99.5±13.4)mmHg vs( 105.1 ±9.4)mmHg]及PCT水平[( 1.62±1.65)pg/ml vs (0.04±0.01)pg/ml]差异均无统计学意义(P>0.05);轻症肺炎组患者CURB-65评分(0.9±0.8 vs 0)、FiO2[(26.6±7.8)% vs 21%、IL-1β[(118.79±32.29)pg/ml vs (9.33±2.51)pg/ml]、IL-4[(41.24±6.52)pg/ml vs (18.46±4.05)pg/ml]高于健康对照组,氧合指数(406.59±126.03 vs 500.45±44.82)则低于健康对照组(P<0.05);重症肺炎组CURB-65评分(3.5±0.7 vs 0.9±0.8&0)、FiO2[(41.9±12.0)%vs(26.6±7.8)% & 21%)、PCT[( 11.96±7.59)pg/ml vs (1.62±1.65)pg/ml&(0.04±0.01)pg/ml]、IL-1β[(200.13 ±48.27)pg/ml vs( 118.79±32.29)pg/ml&(9.33 ±2.51 )pg/ml]、IL-4 [(55.41±13.71)pg/ml vs (41.24±6.52)pg/ml&(18.46±4.05)pg/ml]明显高于轻症肺炎组及健康对照组,而PaO2[(74.4±13.1)mmHg vs (99.5±13.4)mmHg&(105.1±9.4)mmHg]及氧合指数(204.14±110.10 vs 406.59±126.03&500.45±44.82)则明显低于轻症肺炎组及健康对照组,差异均有统计学意义(P<0.05).CURB-65评分与氧合指数呈负相关(r=-0.833,P<0.05),而与PCT(r=0.900)、IL-1β (r=0.893)、IL-4(r=0.838)均呈正相关(P均<0.05).结论 CAP患者的CURB-65评分与患者氧合指数、炎症反应指标呈明显相关性,可以作为评估重症肺炎的一种简易手段.
作者:高旗 刊期: 2012年第07期
目的 分析224例流行性乙型脑炎(简称乙脑)的流行特征,为进一步做好乙脑的预防控制措施提供科学依据.方法 采用快速IgM抗体捕捉ELISA进行患者血清或脑脊液的乙脑抗体检测,结合临床表现予以诊断.对确诊病例利用Excel软件进行描述流行病学分析.结果 2001-2010年共收集疑似乙脑患者血清/脑脊液标本626份,阳性224例,检出率为35.78%,脑脊液的阳性检出率略高于血清.男女比例为1.24∶1,好发年龄为10岁以下及50岁以上,发病者多数在农村.发病时间7-10月,发病高峰集中在8月.结论 开展乙脑病例监测,在高发地区及农村进行重点控制,加强宣传教育和增强灭蚊、防蚊意识,加强中老年人的乙脑疫苗免疫接种,是降低乙脑发病率的必要措施.
作者:时莹;王媛;刘梓谕;丁天兵 刊期: 2012年第07期
目的 探讨线粒体脑肌病(MELAS综合征型)的临床、影像及病理特点.方法 回顾性分析2例MELAS综合征患者的临床资料及复习相关文献.结果 2例患者均以视力障碍为首发症状伴头痛、呕吐,发育延迟,血乳酸增高,影像以枕叶皮层受累为主,基底节钙化.肌肉病理发现破碎样红纤维,电镜可见肌膜下异常线粒体增多.结论 以视力障碍为首发症状的青少年患者应考虑到MELAS综合征的可能,以免误诊.
作者:成秋生;李蒙燕;杨勇;郭爱华;潘小平 刊期: 2012年第07期
目的 观察肾损伤分子1(KIM-1)在药物相关性急性肾损伤(AKI)患者尿液中的变化,探讨KIM-1在药物相关性AKI早期诊断中的意义.方法 将108例药物相关性AKI患者分为轻度AKI组(28例)、中度AKI组(51例)、重度AKI组(29例),终末期肾脏病(ESRD)患者30例和健康对照组30例作为观察对照.采用ELISA方法检测尿液中KIM-1的水平,比色法检测尿N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶(NAG)的水平,颗粒免疫比浊法检测血液胱抑素C(CysC)的浓度.并对尿KIM-1与NAG、血清肌酐及血清Cys C进行相关性分析.结果 轻度、中度和重度AKI患者尿液KIM-1显著升高,与健康对照组和ESRD组比较差异均有统计学意义(P<0.05),而ESRD组与健康对照组比较差异无统计学意义(P>0.05).尿KIM-1升高程度与NAG、血清肌酐和Cys C均呈正相关(P<0.05).结论 检测尿液中KIM-1水平,有助于药物相关性AKI的早期临床诊断.
作者:廖纯兴;潘巧玲;杨建泉;杨碧君;黄贵阳;何楠;张军 刊期: 2012年第07期
目的 了解福田区人群土源性线虫感染情况及流行病学特征,为制定预防与控制策略提供科学依据.方法 随机选取两个监测点,采用改良加藤厚涂片法检查土源性线虫虫卵,同时对检测者进行知识、行为问卷调查,幼儿园儿童采用透明胶纸肛拭法查蛲虫卵.结果 本次共粪检743人,蛲虫感染率为0.13%,未检出蛔虫、钩虫和鞭虫.儿童透明胶纸肛拭法检测514人,蛲虫感染率为3.11%.人群防治知识知晓率为69.90%,健康行为形成率为77.67%.结论 福田区土源性线虫感染以蛲虫为主,应采取有效的措施进行儿童蛲虫病的防制.
作者:范苏云;石向辉;顾青;刘莹;舒彬 刊期: 2012年第07期
目的 克隆十二指肠钩虫谷胱甘肽转移酶(GST) AduGST-1基因,并在大肠埃希菌中表达获得重组AduGST-1.方法 设计特异引物,以十二肠钩虫成虫cDNA为模板,通过PCR扩增AduGST-1基因.将获得的AduGST-1编码序列克隆至原核表达载体pETHF,构建重组表达质粒pETHF/AduGST-1.重组质粒转化至大肠埃希菌BL21 (DE3),用IPTG诱导表达、Ni亲和层析分离纯化重组AduGST-1,SDS-PAGE分析重组蛋白表达及纯化情况.结果 成功扩增到AduGST-1全长编码序列,并登记到GenBank (accession no.JQ812812).AduGST-1编码序列长度为624 bp,编码307个氨基酸残基.成功构建了重组表达质粒pETHF/AduGST-1,在BL21(DE3)中表达并纯化了重组AduGST-1.结论 首次报道从十二指肠钩虫中分离到GST基因,该基因可在大肠埃希菌中高效表达,并分离纯化了重组GST蛋白,为进一步研究AduGST-1功能与应用奠定了基础.
作者:邵正;何庆丰;邓莉;彭礼飞 刊期: 2012年第07期
目的 掌握深圳市龙岗区2001-2010年女工职业病发病情况,分析女工职业病发病规律和特征,为制定防治对策及措施提供科学依据.方法 对深圳市龙岗区2001-2010年诊断的女工职业病例和职业卫生调查资料进行回顾性分析,分析女工职业病种类、患者年龄和行业分布等特征.结果 龙岗区2001-2010年共发生116例女工职业病,引起职业中毒的化学及物理因素以有机溶剂为主,共发生57例(49.14%),慢性职业性铅中毒55例(47.41%).职业中毒的行业系统分布主要以金属制品业(30.95%)、电子及通信设备制造业(19.05%)、家具制造业(16.67%)和塑料制品业(11.90%)为主.结论 深圳市龙岗区女工职业病的发生在高危行业和重点毒物有明显的集中趋势,加强对重点行业、重点毒物的卫生监管,是预防控制女工职业病的重要环节.
作者:何丽英;于碧鲲;陈浩 刊期: 2012年第07期
目的 了解广州地区献血人群隐匿性乙型肝炎病毒感染(0BI)的流行病学和血清学情况.方法 对广州地区199 631例无偿献血者标本同时用ELISA法检测HBsAg、紫外-乳酸脱氢酶法检测ALT、核酸扩增技术(NAT)联合检测HBV/HCV/HIV及HBV单项鉴别试验,对HBsAg阴性HBV DNA阳性者进行随访,用荧光定量PCR检测病毒载量,用ELISA法检测乙肝两对半.结果 199 631例标本中共检出 104例HBsAg阴性HBV DNA阳性者,经随访有54例为OBI,OBI检出率为0.027%,年龄以46~55岁组检出率高(P<0.01),外地身份证的献血者检出率高于广州市身份证者(P<0.01),OBI检出率与性别和献血次数无关(P>0.05).104例HBsAg阴性HBV DNA阳性的标本ALT均正常,病毒载量均<1 000 IU/ml,平均值为162 IU/ml.随访标本中,除6例ALT异常外其余均正常,54例OBI标本病毒载量均<1 000 IU/ml,平均值为122 IU/ml,乙肝两对半中抗-HBc阳性率明显高于其他项目(P<0.01).结论 HBsAg阴性献血者中存在OBI,有必要在献血者中开展核酸检测.
作者:李玉笑;周才;杜耀民;汪传喜;黄伯泉;杜荣松;田也;刘旭映;邓燕清 刊期: 2012年第07期
目的 观察糖皮质激素对结核性胸膜炎胸液吸收及防止胸膜肥厚的影响.方法 将148例结核性胸膜炎合并胸腔积液患者,随机分为糖皮质激素观察组和对照组,每组74例.两组在给予规律抗结核治疗基础上,观察组每日加用糖皮质激素药物醋酸氢化可的松片,口服每次1片(含药20 mg),1~2次/d,对照组不加用任何药物.结果 观察组胸腔抽液总量为(2 759.4±492.7)ml,对照组胸腔抽液总量为(3412.4±512.7)ml,两组比较差异有统计学意义(P<0.01);观察组胸膜厚度为( 1.04±0.18)mm,对照组胸膜厚度为(1.37±0.28)mm,两组比较差异有统计学意义(P<0.05).两组患者均无明显不良反应.结论 糖皮质激素对结核性胸膜炎合并胸腔积液患者积液的渗出起到抑制作用,并能促进积液的吸收,抑制或降低胸膜粘连厚度.
作者:陈永浩;陈志成;徐建辉;林庆裕 刊期: 2012年第07期
目的 构建肠道病毒71型(EV71)的感染性克隆,为EV71致病机理的研究和药物的开发建立技术平台.方法 选取临床手足口重症儿童粪便样品,经荧光定量PCR检测为阳性,RT-PCR方法扩增出EV71全基因组,通过TA克隆的方法连接到TOPO-XL-PCR载体中,应用T7聚合酶系统将线性化的EV71 DNA序列体外转录成RNA,转染人横纹肌肉瘤细胞系RD-A细胞,病毒传代并观察病变,通过间接免疫荧光实验进一步鉴定,获得的感染性克隆进行全基因组测序和序列比对分析.结果 RT-PCR可以获得EV71全长约7.5 kb的DNA片段,体外转录并转染后3~5 d可观察到典型的肠道病毒致细胞病变,免疫荧光可看到特异标记,序列比对为C4a亚型的EV71病毒.结论 构建出具有感染性的EV71全长cDNA克隆,在分子生物学水平上有利于深入研究EV71的致病机制和毒力基因、患者抗体的中和特性、疫苗和药物的效力评估与开发等.
作者:罗敏;陈惠玲;杨洪;张海龙;冼慧霞;张仁利 刊期: 2012年第07期
目的 构建SARSS抗原的B细胞表位核酸疫苗并观察其免疫效果.方法 将已经鉴定的SARS S抗原的B细胞表位S603-620的编码DNA序列插入真核表达载体PCI中,构建核酸疫苗(PCI-S603-620).使用EcoR Ⅰ和Xba Ⅰ酶切,电泳及DNA测序鉴定.使用脂质体将PCI-S603-620转入293A细胞,使用ELISA检测其在真核细胞中的表达.使用PCI-S60-620免疫小鼠,ELISA检测其诱导的抗体情况.结果 对PCI-S603-620进行酶切鉴定,电泳结果表明目的基因片段分子量为100 bp左右.PCI-S603-620的DNA测序结果表明其序列与设计序列吻合.PCI-S603-620能在转染的293A细胞中表达.PCI-S603-620免疫小鼠可以诱导特异性抗体产生,效价为1∶400.该抗体可以特异性识别SARS S抗原.结论 成功构建SARS S抗原的B细胞表位核酸疫苗(PCI-S603-620).
作者:朱郇悯;谢红艳;陈殿慧;罗雪平;黄俊 刊期: 2012年第07期
目的 探讨TRPC离子通道通过p53通路参与一氧化氮供体硝普钠(SNP)诱导的原代培养海马神经元凋亡.方法 原代培养的海马神经元,经RT-PCR检测TRPC1-6的表达;给予SNP处理后,通过Real-time RT-PCR检测p53下游靶基因Bax、Apaf-1、PUMA和Survivin的表达;给予TRPC通道阻断剂和激活剂,检测其是否影响SNP诱导的p53下游靶基因表达.结果 TRPC在原代培养海马神经元上广泛表达.SNP处理神经元4、8、24 h后,p53下游靶基因Bax、Apaf-1和Survivin表达无明显变化(P>0.05).而PUMA则在3个时间点分别增加至1.94、1.86和1.90倍,与对照组比较差异有统计学意义(P<0.01).TRPC通道阻断剂2-APB,可降低SNP诱导的PUMA上调(1.91 vs 1.12) (P<0.01).结论 TRPC通道可以通过调节PUMA的表达参与SNP诱导的原代培养海马神经元凋亡.
作者:郭进强;覃旻 刊期: 2012年第07期
目的 了解肇庆市4家监测医院出生缺陷儿的发生率及其变化情况,研究出生缺陷发生的相关因素,为制定出生缺陷干预措施提供依据.方法 按照《广东省出生缺陷医院监测方案》的要求,以市内4家医院作为监测医院,对肇庆市2001-2010年的出生缺陷监测资料进行回顾性分析.结果 2001-2010年共监测围产儿63476名,其中出生缺陷儿1 034名,发生率为162.90/万,总体呈上升趋势,2010年的发生率比2001年高,差异有统计学意义(x2=21.635,P<0.001).前3位出生缺陷类型依次为先天性心脏病、胎儿水肿综合征、多指(趾)畸形.出生缺陷发生率与围产儿性别、孕母年龄、胎数有关.结论 出生缺陷严重影响出生人口的素质,应继续加强三级预防措施,有效地降低出生缺陷的发生.
作者:陈志玮;刘楚芹;梁云 刊期: 2012年第07期