廖旺军;孙季萍;谢剑明;申鹏;罗荣城
目的 预测及比较分析猪带绦虫乳酸脱氢酶A(Taenia solium lactate dehydrogenase A,TsLDH-A)和乳酸脱氢酶B(Taenia solium lactate dehydrogenase B,TsLDH-B),用于指导其生物学功能的研究.方法 利用生物信息网站如美国国家生物技术信息中心(NCBI,http://www.ncbi.nlm.nih.gov/)和瑞士生物信息学研究所的蛋白分析专家系统(ExPASY,http://ca.expasy.org/)中有关基因和蛋白的序列和结构信息分析的各种工具,结合其它生物信息学分析软件包,从猪带绦虫成虫全长cDNA质粒文库中识别LDH-A和LDH-B的全长编码基因并对其结构与功能进行生物信息学预测分析.结果 两序列都是包含完整开放阅读框的全长基因,推导出的氨基酸序列与其它物种LDH-A或LDH-B同源基因的氨基酸序列的一致性均大于50%.两者编码的蛋白在编码的氨基酸数目(331)、蛋白的理化性质、L-乳酸脱氢酶结构域、构成LDH酶催化中心的关键氨基酸、包含LDH活性位点的线性表位、无亚细胞定位等方面是一致的,但两者在翻译后的修饰位点、3个跨膜区和其他线性表位方面既相似也有区别.结论 应用生物信息方法从猪带绦虫成虫cDNA文库中筛选出了TsLDH-A和TsLDH-B的cDNA全长序列,并预测和比较了两者结构与功能方面的信息,为进一步研究所编码蛋白的功能奠定了基础.
作者:杜武英;戴佳琳;黄艳;胡旭初;余新炳;徐劲;廖兴江;黄江 刊期: 2010年第03期
目的 探索改进阴道毛滴虫封存标本的制作方法 .方法 取附属医院妇科门诊阴道毛滴虫患者的阴道分泌物,在无菌条件下接种于改良的肝浸汤培养基中,加入2 ml无菌健康马血清及5×104 U/ml青霉素,置37℃培养箱内培养,选取转种3代培养36 h的阴道毛滴虫,采用载玻片的包装隔离纸带拖片,经改进的染液染色制片.结果 封片标本中虫体分布均匀,伸展好.细胞浆呈淡蓝色,波动膜、轴柱、鞭毛呈蓝色,核红色,核仁紫红色.结论 采用本方法制作的阴道毛滴虫封片标本虫体结构清晰,形态特征明显.
作者:陈熙;杨立军;雷霖;周本江 刊期: 2010年第03期
目的 应用藏药二十五味铜灰散的成分之一--自然铜和天竺黄治疗小鼠继发性棘球蚴病,探讨药物治疗感染棘球蚴的小鼠后其体内细胞因子的变化趋势.方法 感染棘球蚴小鼠给予藏药、自然铜及其它药物治疗90 d后,剖杀小鼠眼球获取小鼠血清.检测小鼠血清中的细胞因子IL-2、IL-6、IL-10和IgE的含量.结果 治疗90 d后,小鼠血清IL-2、IL-6和IgE的含量与对照组比较差异有统计学意义(P<0.05),IL-10的含量与对照组比较差异无统计学意义.结论 小鼠血清中的细胞因子IL-2、IL-6、IL-10和IgE的含量可作为判断治疗棘球蚴病的疗效指标.
作者:曹得萍;白海燕;赵海龙 刊期: 2010年第03期
目的 评估针对男男性行为人群(MSM)的干预效果,为调整干预策略提供建议.方法 比较分析2006、2007和2008年3次横断面调查的MSM人群知识、行为、HIV和梅毒感染率变化趋势.结果 2006、2007和2008年分别调查了1 000、1 044和743名MSM,研究结果显示干预后MSM人群艾滋病防治知识知晓率无明显变化,过去1年接受过咨询检测服务的比例明显上升,近一次与男性发生肛交时安全套使用率也由2006年的56.4%上升至2008年的64.4%(χ2=9.25,P=0.002),HIV感染率呈逐年上升的趋势,由2006年的10.4%上升至2008年的17.0%(χ2=15.95,P<0.001),梅毒感染率2007年较2006年有所下降,但差异无统计学意义(χ2=0.38,P=0.54).结论 干预后MSM人群艾滋病防治知识认知水平较高,安全套使用率有所提高,但仍处于较低水平,与HIV感染率快速上升的趋势相比,防治形势严峻,开展针对MSM人群的持续有效的综合干预至关重要.
作者:丁贤彬;冯连贵;萧燕;晋灿瑞;徐世明;郭晓嘉;卢戎戎;徐静;张敏;郑建琼;杨明芳 刊期: 2010年第03期
目的 探讨携带micro-dystrophin基因的自体骨髓间充质干细胞移植mdx鼠后在移植鼠体内分化为肌细胞的可能机制.方法 采用逆转录病毒介导micro-dystrophin基因转染mdx小鼠MSCs(mMSCs),通过尾静脉注射移植治疗mdx鼠.在移植后免疫荧光检测micro-dystrophin的表达并在不同时间点检测MyoD的表达.结果 移植后成功检测到micro-dystrophin,其表达随着移植时间的延长而增加;随移植时间延长MyoD阳性肌纤维比例增加,分别达到9%(4周时)、15%(8周时)、28%(12周时).RT-PCR和Western blot也发现,随着移植时间的延长,MyoD表达增加.结论 自体mMSCs可携带外源性micro-dystrophin基因在受体鼠体内分化为micro-dystrophin阳性肌细胞,移植入的干细胞向肌细胞的分化是一个持久的、连续的过程,成肌调节因子在调节其分化过程中发挥了重大作用.
作者:于美娟;张雅妮;冯善伟;王淑辉;熊符;张成 刊期: 2010年第03期
目的 研究冠心病心绞痛血瘀证(气滞血瘀证、心血瘀阻证、气虚血瘀证)患者的血浆代谢组学变化.方法 对18例健康人、18例冠心病心绞痛血瘀证患者(6例气滞血瘀证、6例心血瘀阻证、6例气虚血瘀证)的血浆样本进行氢核磁共振(1H NMR)检测.通过偏小二乘判别分析(PLS-DA)方法研究各组之间的血浆代谢产物谱差异.结果 各组血浆1H NMR谱的PLS-DA结果显示,与健康人相比,心绞痛血瘀证患者血浆柠檬酸、琥珀酸、葡萄糖、乙酰糖蛋白、低密度脂蛋白、极低密度脂蛋白、3-羟基丁酸、谷氨酸、脯氨酸、亮氨酸含量较高,高密度脂蛋白、不饱和脂肪酸、苏氨酸、组氨酸含量较低.气虚血瘀证组与其他两个血瘀证组差别较大,而气滞血瘀证与心血瘀阻证差别不明显.与其他血瘀证相比,气虚血瘀证组血浆柠檬酸、3-羟基丁酸、丙酮、氧化三甲胺含量较高,葡萄糖、N-乙酰糖蛋白、酪氨酸、苯丙氨酸、脯氨酸、亮氨酸含量较低.结论 血浆1H NMR代谢谱差异能明显区分健康人与心绞痛血瘀证患者:不能区分心绞痛气滞血瘀证与心血瘀阻证:能在一定程度上区分气虚血瘀证与其他血瘀证.代谢组学方法对于研究冠心病心绞痛中医证候具有重要价值.
作者:华何与;贾钰华;张红栓;曹世平;崔凯;关山越;万中原 刊期: 2010年第03期
目的 构建人肺腺癌转移相关转录本1(MALAT1)功能性序列重组真核荧光表达载体,并在人大肠癌SW620细胞株中表达.方法 采用RT-touchdown PCR方法 ,从人正常大肠黏膜组织中提取总RNA,扩增MALAT1功能性序列,将扩增产物克隆至pTA2载体,测序证实后,克隆至pEGFP-C1质粒中,构建重组真核荧光表达载体;阳离子脂质体介导下转染人大肠癌SW620细胞,荧光显微镜检测细胞中增强型绿色荧光蛋白(EGFP)的表达.通过Real-time PCR检测质粒转染前后MALAT1/fgf mRNA表达水平的变化.结果 经pTA2载体和pEGFP-C1载体克隆、酶切鉴定及序列分析后,证实人MALAT1功能性序列重组真核荧光表达载体构建成功.在荧光显微下观察到带绿色荧光的SW620细胞.pEGFP-C1-MALAT1/fgf转染前后SW620细胞MALATI/fgf mRNA表达水平倍比关系为2.376±0.573,差异具有统计学意义(P<0.05).结论 成功构建了人MALAT1功能性序列真核荧光表达载体pEGFP-C1-MALAT1/fgf,转染SW620细胞后可引起MALAT1/fgf mRNA表达上调,为进一步研究MALAT1的结构、功能及其与人大肠癌的关联奠定了基础.
作者:杨敏慧;王双双;王晓燕;徐川;李祖国 刊期: 2010年第03期
目的 了解阳山县医务人员对艾滋病职业暴露知识的知晓程度和医护过程中锐器刺伤暴露情况.方法 采用整群抽样方法选择阳山县3问县级医院及5间乡镇卫生院,于2008年9月对其572名医务人员进行问卷调查.结果 572名医务人员艾滋病职业暴露相关知识总体知晓率为59.03%,其中对艾滋病的传播途径知晓率高为98.78%;不同医院级别、职业、职称和科室之间医务人员以及是否曾参加过相关培训者掌握艾滋病职业暴露相关知识的程度有不同(P<0.05);37.24%的调查对象承认在医疗护理过程中曾经被针具利器刺破皮肤经历,不同职业、职称和科室之间医务人员职业暴露发生率不同(P<0.05).结论 阳山县医务人员对艾滋病职业暴露相关知识掌握较差,发生锐器刺伤等的职业暴露率较高,有必要加强培训,提高医务人员艾滋病职业暴露相关知识和自我防护能力.
作者:梁时力;黄新华;黄安 刊期: 2010年第03期
目的 分析急性百草枯中毒患者早期心、肝、肾功能变化,探讨其对预后的影响.方法 用酶法分别检测68例急性百草枯中毒患者(中毒时间<24 h)入院时心肌酶、血清谷丙转氨酶(ALT)、总胆红素(TBil)、血清尿素氮(Bun)、肌酐(Cr)以及检查胸片;统计患者中毒剂量和中毒时间,并进行APACHE Ⅱ评分.依据临床结局分为猝死组(生存时间≤24 h组)和非猝死组(生存时间>24 h组).结果 中毒患者猝死组与非猝死组的中毒时间、中毒剂量比较差异有统计学意义(P<0.05,P<0.01),两组患者年龄、性别比、APACHEⅡ评分比较差异无统计学差异意义(P>0.05);猝死组心肌酶、血清ALT、TBil、Cr均显著升高,与非猝死组比较差异有统计学意义(P<0.01).结论 百草枯中毒猝死患者早期出现严重的中毒性心、肝、肾损害,救治过程中应强调重要器官保护并及早干预;中毒后血清心肌酶活性的显著升高可能是发生猝死的一个预警指标.
作者:高渝峰;史晶;刘青;廖晓星 刊期: 2010年第03期
肠道是人体重要的消化器官,也是一个由定植于肠道的大量固有菌群、肠道上皮细胞及肠道局部粘膜免疫系统组成的肠道微生态系统,它在人体的代谢、免疫系统的发育、成熟等过程中均起着非常重要的作用.肝脏与肠道的关系极为密切,肝病病人由于胆汁分泌异常等等原因导致肠道微生态的失衡.肠道菌群的数量(和)或组成结构发生变化、肠道定植抗力(B/E比值)的降低,甚至发生菌群易位,由此对机体的代谢和免疫产生一定的影响,在疾病的发生、发展中的作用不可忽视.
作者:顾玉荣;高志良 刊期: 2010年第03期
目的 探讨永川农村地区土源性线虫病流行现状与态势,评估防治效果.为制定防治计划提供依据.方法 随机选择农村地区1个村1 003人开展土源性线虫调查,在10户农户的庭院、客厅、厕所、菜园等地区采集土壤进行蛔虫虫卵检测.结果 人群土源性线虫总感染率为22.43%(225/1003),12岁以下儿童蛲虫感染率为6.67%(3/45).中老年农民是感染土源性线虫的高危人群(χ2=40.28,P<0.01),无明显家庭聚集性(χ2=3.54,P>0.05).土壤中蛔虫卵阳性率为20%(8/40),土壤阳性户家庭成员感染率高于阴性户家庭成员感染率(χ2=8.11,P<0.01).结论 与永川区2000年土源性线虫分布调查相比,人群土源性线虫病总感染率虽有所下降,但感染率依然较高,仍是永川区的主要寄生虫病.
作者:蒋雪飞;熊鸿雁;肖邦忠;李琴;廖永贞;罗兴建 刊期: 2010年第03期
目的 探讨细粒棘球绦虫(Eg)转Eg95-EgA31融合基因苜蓿疫苗免疫BALB/c小鼠后对Eg原头节攻击感染的保护性作用.方法 热絮凝法提取转基因苜蓿的叶蛋白,配成浓度为20μg/μl.分别用100μl(约含1μg融合抗原)口服灌胃和10μl(约含0.1 μg融合抗原)滴鼻接种免疫BALB/c小鼠,每3 d免疫1次,连续免疫2月,同时设转空质粒(pBI121)苜蓿叶蛋白及正常苜蓿叶蛋白对照组.末次免疫后8周,用Eg原头节进行攻击感染(腹腔注射50个Eg原头节/每只小鼠),感染后24周剖杀各组小鼠,检获包囊质量,计算囊重减少率;采眼球血,常规酶联免疫吸附试验法(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)检测血清中IgG及其亚类和IgE水平.结果 疫苗口服灌胃接种组小鼠检获包囊质量明显降低,囊重减少率为64.1%,与正常蛋白对照组相比,差异有统计学意义(P<0.05),血清中IgG、IgG2b和IgE水平显著高于正常苜蓿叶蛋白对照组,其值分别为0.175±0.013、0.096±0.028和0.096±0.028.细论细粒棘球绦虫转Eg95-EgA31融合基因苜蓿疫苗口服接种能使免疫鼠获得保护力以抵抗Eg原头节攻击感染,IgG、IgG2b和IgE在疫苗诱导的保护力中起重要作用.
作者:叶艳菊;李文桂 刊期: 2010年第03期
目的 探讨自2004年1月至2008年12月我院新生儿重症监护病房获得性真菌血症病原学及临床特征,为真菌血症防治提供依据.方法 回顾分析5年中新生儿重症监护室发生的33例真菌血症的病原学和临床资料.结果 33例真菌血症均为医院获得感染的假丝酵母菌,其中白色假丝酵母菌17株、热带假丝酵母菌10株、近平滑假丝酵母菌5株、光滑假丝酵母菌1株.结论 假丝酵母菌属是新生儿重症监护病房真菌血症的主要致病菌,以白色假丝酵母菌常见.但非白色假丝酵母菌也占较大比例;真菌血症与早产、极低体重儿、机械通气、静脉导管、全胃肠外营养等因素有关.5-氟脲嘧啶、伊曲康唑、两性霉素B和氟康唑对假丝酵母菌耐药性较低,氟康唑是治疗假丝酵母菌属的有效药物.
作者:段纯;张小兰;李素丽;朱岩;龙峰 刊期: 2010年第03期
目的 探讨妊娠期高血压疾病患者血浆蛋白质Z(PZ)水平检测的临床意义.方法 用ELISA法测定30例妊娠期高血压、33例子痈前期(19例轻度、14例重度)和60例正常妊娠妇女血浆PZ水平,以正常妊娠妇女血浆PZ水平的第5百分位数值作为PZ缺乏的标准(≤1.21 mg/L).采用秩和检验和单因素方差分析比较PZ在各组之间中位数水平和缺乏率的差异.结果 妊娠期高血压组和正常妊娠组之间血浆PZ的中位数水平差异无统计学意义(2.04 mg/L vs 1.80 mg/L,P>0.05),子痫前期组血浆Pz的中位数水平(1.57 mg/L)显著低于妊娠期高血压组和正常妊娠组(P<0.001);正常妊娠组PZ水平的第5百分位数值为1.21 mg/L;血浆PZ缺乏率妊娠期高血压组(23.3%)和子痫前期组(45.5%)显著高于正常妊娠组(3.3%)[让步比(OR)8.83,95%CI1.71-45.7,P=0.006;OR 24.2,95%CI 5.0-115.8,P=0.000],妊娠期高血压组和子痫前期组PZ缺乏率差异无统计学意义(OR 2.7,95%CI 0.9-8.1,P=0.057).结论 子痫前期患者血浆PZ中位数水平明显减低,而且妊娠期高血压疾病患者血浆PZ缺乏率显著高于正常妊娠患者.提示PZ缺乏可能是妊娠期高血压疾病存在的一个危险因素.
作者:程明刚;郝艳华;刘香萍;秦惠琳;姚吉龙 刊期: 2010年第03期
目的 构建携带人Oct4和EGFP基因的慢病毒表达载体pFUOGW.方法 Sac Ⅱ线性化pLentiEF1a-Oct4-IRES-EGFP,回收片段并补平Sac Ⅱ切口,接着BamH Ⅰ酶切该片段,回收2.565 kb片段而获连接用Oct4-IRES-EGFP;EcoR Ⅰ线性化pFUGW,回收并补平EcoR Ⅰ切口,然后BamH Ⅰ酶切该片段,回收9.174 kb片段获连接用载体片段,后使用DNA连接试剂盒(TaKaRa)中的Solution Ⅰ将其与连接用Oct4-IRES-EGFP连接,连接产物转化,次日挑选单菌落,提取质粒并行酶切鉴定.所构建载体命名为pFUOGW.获pFUOGW后,按Invitrogen公司推荐的标准程序进行慢病毒包装和确认慢病毒是否成功生产;携带Oct4和EGFP基因的慢病毒感染293FF细胞和鼻咽癌细胞株C666-1、CNEI和6-10B以建立相应病毒感染体系.结果 酶切鉴定证实成功构建了pFUOGW,按标准程序生产的携带Oct4和EGFP基因的慢病毒上清高效率感染鼻咽癌细胞株C666-1、CNE1和6-10B.结论 成功构建携带人Oct4和EGFP基因的慢病毒表达载体pFUOGW,为相关后续的研究打下良好的基础.
作者:肖高芳;姚志芳;贾俊双;李艳青;鄢文;肖东;姚开泰 刊期: 2010年第03期
目的 了解2009年广州市2例输入性登革热病例的流行病学、病原学检查特点.方法 对患者及密切接触者流行病学及临床资料进行回顾性分析,采用免疫层析法、ELISA法对患者血清样本进行登革热IgM、IgG抗体检测,并采用PCR对病毒进行分型.结果 两名患者均来自登革热疫区,出现乏力、发热、头痛等症状.患者的DEV-IgM均呈阳性,DEV-IgG呈阴性,病毒型别均为登革Ⅰ型.结论 两名患者为实验室确诊病例,由于发现及时,患者救治方案正确,各项防控措施落实到位,2例患者均痊愈出院,未发生二代病例,疫情得到有效控制.
作者:宋韶芳;王大虎;董志强;王玉林 刊期: 2010年第03期
目的 探讨应用氨基末端B型利钠肽前体(NT-proBNP)对有呼吸困难症状的孕产妇评估心功能的作用.方法 回顾性分析本院2009年1月1日至2009年12月30日有呼吸困难症状的孕产妇共42例,其中子痫前期18例,心脏病7例,甲亢4例,双胎妊娠先兆早产用宫缩抑制剂安胎5例,三胎妊娠2例,卵巢过度刺激综合征5例,产后出血1例.每例病人均测定血清NT-proBNP值并按标准诊断程序检测,并规范治疗.结果 本组42例中12例(双胎妊娠先兆早产用宫缩抑制剂安胎5例,三胎妊娠1例,卵巢过度刺激综合征5例,妊娠合并甲亢1例)NT-proBNP<500 pg/ml,临床排除心衰;余下30例(子痫前期18例,妊娠合并心脏病7例,妊娠合并甲亢3例,三胎妊娠1例,产后出血1例)均NT-proBNP>500 pg/ml,行胸片示双肺肺水肿,经临床证实为妊娠合并急性心衰.NT-proBNP>3 000 pg/ml者7例,临床治疗困难,心衰反复发作,1例孕产妇死亡.NT-proBNP 1 000~3 000 pg/ml者21例,经积极治疗病情好转.NT-proBNP 500~1 000 pg/ml者2例,症状轻,治疗康复快.此外,其中2例患者治疗过程复查NT-proBNP下降,临床体现病情好转;1例NT-proBNP值增高,病情加重.结论 对有呼吸困难症状的孕产妇NT-proBNP值>500 pg/ml可早期诊断心力衰竭并评估预后,NT-proBNP的改变较临床症状出现早,其值越高,心衰临床表现越明显,预后越差.
作者:李映桃;蔡玉宇;卢雄;陈希明;王天红;陈敦金 刊期: 2010年第03期
目的 了解江门市某区淡水鱼养殖场的淡水鱼肝吸虫感染和环境卫生情况,为制定防控策略提供参考.方法 在江门市某区选取5个镇的6个行政村开展调查,制定统一的调查表,主要调查内容包括养殖场基本情况、人和动物粪便污染情况等;采取部分养殖场的淡水鱼进行肝吸虫囊蚴检验.使用EpiData3.0建立数据库.用Epiinfo3.5.1进行统计分析.结果 共调查了67间淡水鱼养殖场,16间塘基建有厕所,占被调查养殖场总数的23.88%(16/67);48间塘基建有家禽或家畜栏,占被调查总数的71.64%(48/67).抽样检测了10间养殖场的淡水鱼,共有6间养殖场淡水鱼中检出肝吸虫囊蚴,占受检总数的60%(6/10),各村均有受肝吸虫感染的养殖场.共采集了156条淡水鱼,囊蚴总阳性率为15.38%(24/156).鲩鱼的感染率高(5/10),其次为鳙鱼(11/47).结论 江门市某区人和动物粪便污染淡水鱼养殖场水质的情况较为普遍,淡水鱼感染肝吸虫囊蚴的情况仍然严重,应当采取有效措施改善环境卫生,降低淡水鱼肝吸虫感染率,以制止肝吸虫病的流行.
作者:晁斌;张贤昌;林荣幸;杨杏芬;裴福全;卢文成;王金龙;岑咏珍;林卫光;张启明 刊期: 2010年第03期
目的 探讨抗环瓜氨酸肽抗体(抗CCP抗体)检测对类风湿关节炎(RA)诊断的意义.方法 采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测115份人血清的抗CCP抗体,同时采用免疫透射比浊法定量检测类风湿因子(RF),包括40例RA患者,45例其它风湿病患者,30名正常人;并分析抗CCP抗体与RF实验结果之间的相关性.结果 在40例RA病人中,抗CCP抗体的阻性率为80.0%,在其它风湿病人中的阳性率为7.0%,抗CCP抗体对RA的敏感性和特异性分别为80.0%、96.0%,其敏感性高于RF,但差异无统计学意义(P>0.05),特异性明显高于RF(P<0.05).联合应用抗CCP抗体与RF进行诊断,二者均阳性时敏感性为65.0%,特异性为97.3%.抗CCP抗体与RF实验结果之间无相关性.结论 抗CCP抗体对RA具有较好的敏感性和很高的特异性,可与RF相互补充,联合检测可提高对RA早期诊断的准确性.
作者:范婷婷;廖伟娇;欧阳立杰;韩秀晶;万舒婷 刊期: 2010年第03期
目的 评价血清胱抑素C在诊断糖尿病肾病中的价值.方法 检索多个数据库,对相关文献进行系统评价,用随机效应模型计算纳入研究的总灵敏度、特异度及其它指标,绘制受试者工作特征曲线以探讨本试验的总体诊断特性.结果 按照选择标准终有9项独立研究纳入本次meta分析,合并灵敏度与特异度分别为85%和86%,合并阳性拟然比与阴性拟然比分别为6.23和0.17,合并诊断优势比为54.59,SROC曲线下面积0.9435,SE为0.0273.结论 血清胱抑素C水平的检测有助于评估肾小球滤过功能,对糖尿病肾病患者早期肾损害有一定的诊断价值.
作者:王慧;罗炜 刊期: 2010年第03期