学术投稿

C反应蛋白与酶修饰低密度脂蛋白对树突状细胞成熟的影响

何威;陈爱华;宋旭东

关键词:C反应蛋白, 酶修饰低密度脂蛋白, 树突状细胞
摘要:目的 探讨在动脉粥样斑块硬化进程中C反应蛋白(CRP)和酶修饰低密度脂蛋白(E-LDL)对外周血中树突状细胞(DC)分化成熟的影响.方法 梯度离心法分离人外周血单核细胞,用含rhGM-CSF和rhIL-4的Cellgro培养液培养5 d,使其分化为DC.分别用CRP、E-LDL及CRP加E-LDL刺激DC 48 h后,采用流式细胞术检测DC表型(CD1a、CD80、CD86、HLA-DR)的表达,ELISA法检测DC上清液中IL-12、TNFα、IL-2和IL-10的含量,并进行比较.结果 CRP抑制DC的CD1a、CD80表达及IL-12、TNFα分泌,E-LDL促进DC的CD1a、CD80、CD86和HLA-DR表达及IL-12、TNFα分泌,CPR加E-LDL结果与E-LDL类似.结论 CRP抑制DC的活化,E-LDL可促进DC的分化成熟,E-LDL激活DC的作用强于CRP的抑制作用.
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  • 融合基因Tat-HPV16L1的克隆及其在酿酒酵母中的表达

    目的 构建人乳头瘤病毒16型L1基因和蛋白转导肽的Tat基因的融合表达载体,导人酿酒酵母表达系统进行诱导表达,为口服基因疫苗的制备打下基础.方法 以pBR322-HPV16质粒为模板扩增L1基因,与酿酒酵母表达载体pYES2连接.重组质粒再与自行设计的蛋白转导功能片段Tat连接,经测序鉴定后转入酿酒酵母表达菌株INVSc1诱导表达Tat-HPV16L1融合蛋白.结果 融合基因Tat-HPV16L1测序结果与预期完全符合,经过半乳糖诱导表达后进行SDS-PAGE电泳和Western blotting分析.结果 表明诱导表达成功.结论 成功构建和表达了融合表达载体pYES2-Tat-HPV16L1,为制备以酿酒酵母为运送载体的口服人乳头瘤病毒疫苗打下基础.

    作者:张进芳;马文丽;危敏;赵慧;朱秀兰;郑文岭 刊期: 2009年第06期

  • PDGF、FN诱导FHL1细胞增殖的P13K信号转导通路研究

    目的 探讨血小板源性生长因子(PDGF)和纤维连接蛋白(FN)诱导人胚胎肺成纤维细胞(HFL1)增殖的磷酸酰基醇-3-激酶(P13K)信号转导通路.方法 采用不同浓度的PDGF和FN分别刺激HFL1并观察P13K抑制剂wortmannin(WMN)对PDGF、FN诱导HFL1增殖作用的影响.用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测各组细胞增殖情况.结果 PDGF和FN对HFL1的诱导增殖作用明显,并呈剂量依赖性升高趋势,二者均在50 ng/mL时作用显著;P13K抑制剂wortmannin可抑制PDGF和FN诱导的HFL1细胞增殖.结论 PDGF和FN诱导HFL1的细胞增殖可以通过P13K信号转导途径实现.

    作者:马跃文;柏广涛;张美侠 刊期: 2009年第06期

  • HE4基因表达载体的构建及对卵巢癌细胞HO8910生长侵袭的影响

    目的 探讨卵巢癌基因HE4对卵巢癌细胞增殖及侵袭能力的影响.方法 构建针对HE4基因的PcDNA3.1/HFA载体,脂质体法介导PcDNA3.1/HE4载体转染人浆液性卵巢癌细胞系HO8910,WESTERN-BLOT检测转染前后细胞内HE4蛋白的表达效果.用四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法、平板克隆形成实验观察HE4基因对细胞增殖能力的影响,经细胞粘附实验、体外侵袭力实验比较转染前后细胞侵袭能力的变化.结果 Western-blot结果显示PcDNA3.1/HFA载体成功转染HO8910细胞并显著提高该细胞HE4基因的表达,细胞增殖能力较前无明显变化,侵袭能力明显下降.结论 通过增强HEA基因表达,可降低其侵袭能力,有望成为卵巢癌基因治疗的新的候选基因.

    作者:陈瑶;牟霞;王穗海;杜红延;吴英松;李明 刊期: 2009年第06期

  • 在机能学实验教学中培养学生的创新能力

    为培养和提高学生的创新能力,对医学机能学实验采取了增加综合性实验比重、开设设计性实验、建立虚拟实验室及开展学生科研等改革措施.多年的实践表明,学生的创新能力和科研素质得到提高,为大学生素质教育提供了新思路.

    作者:谢红艳;王桂房 刊期: 2009年第06期

  • 揭阳市2004-2008年乙型肝炎流行特征

    目的 了解揭阳市乙型肝炎(简称乙肝)的发病情况,为制订有效的防制措施提供科学依据.方法 从<中国疾病预防控制信息系统>中导出数据库,用SPSS13.0的χ2检验进行数据处理,采用描述性流行病学方法对揭阳市2004-2008年乙肝疫情和流行特征进行分析.结果 揭阳市2004-2008年共报告乙肝病例3680例,年均发病率为12.54/10万,发病无明显季节性,病例主要集中于20~59岁的青壮年,占总报告数的76.74%,男性发病率明显高于女性(χ2=657.92,P=0.0047),各县区发病率无明显差别(χ2=0.86845,P=0.9290),职业以农民、家务及待业为主,两者占总数的56.79%.结论 揭阳市乙肝发病率低于全省的平均水平,但近年有上升趋势,应继续采取以免疫接种提高易感人群免疫力为主的综合防制措施,在做好儿童常规乙肝疫苗接种的同时,提高其他易感人群的乙肝疫苗接种率.

    作者:林伟波;李惠莲;邱志远 刊期: 2009年第06期

  • 瑞舒伐他汀对大鼠颈动脉球囊损伤后细胞凋亡的影响

    目的 观察瑞舒伐他汀对大鼠颈动脉球囊损伤后细胞凋亡的影响.方法 36只雄性SD大鼠随机分为对照组、损伤组和治疗组,每组12只.损伤组和治疗组分别建立大鼠左侧颈动脉球囊损伤模型,右侧颈动脉未予球囊损伤.治疗组于损伤前3 d始连续每天给予瑞舒伐他汀5 mg/(kg·d)灌胃,对照组和损伤组予9g/L氯化钠溶液灌胃.术后14 d取左侧颈总动脉.进行HE染色和末端脱氧核苷酸转移酶介导的生物素-dUTP缺口标记技术(Terminal deoxynucleotidyl transferase biotin-dUTP nick end labeling,TUNEL)的凋亡检测.结果 共30只大鼠成功完成本次实验.①血管损伤14 d,可见明显的新生内膜:损伤组和治疗组的内膜面积、内膜/中膜面积的比值较对照组增大(P<0.05);与损伤组比较,治疗组内膜/中膜面积的比值减少,管腔面积增加26%(P<0.05).②对照组血管偶可见单个散在的凋亡细胞;损伤组凋亡细胞阳性率为(12.3±1.8)%,与对照组比较,差异有统计学意义(P<0.05);治疗组凋亡细胞数目增多,凋亡细胞阳性率达(26.8±3.2)%,与损伤组比较,差异有统计学意义(P<0.05).凋亡细胞主要位于新生内膜.结论 瑞舒伐他汀可抑制大鼠颈动脉球囊损伤后的内膜增生,可促进大鼠颈动脉球囊损伤后的细胞凋亡.瑞舒伐他汀促进细胞凋亡的作用可能与其抑制内膜增生有关.

    作者:曾春苗;董少红;刘华东;李鹏 刊期: 2009年第06期

  • 深圳市龙岗区患者痰培养细菌菌谱和耐药性研究

    目的 研究深圳市龙岗区患者痰培养细菌菌谱和耐药性,为临床合理应用抗菌药物提供依据.方法 对来自深圳市龙岗区4间医院2007年1月至2008年6月患者合格痰标本中培养的细菌药敏试验进行回顾性分析.结果 727株细菌中,革兰阴性杆菌595株,占81.8%,以鲍曼不动杆菌、铜绿假单胞菌为主;革兰阳性球菌132株,占18.2%.以凝固酶阴性葡萄球菌、金黄色葡萄球菌为主,而且凝固酶阴性葡萄球菌株数超过金黄色葡萄球菌.药敏结果提示革兰阴性杆菌及革兰阳性球菌对相当多数的抗生素耐药率较高.结论 深圳市龙岗区患者痰培养细菌耐药情况较严重,条件致病菌菌株数比例较高.应加强药物尤其是抗菌药物的使用管理,规范应用抗生素.

    作者:岑慧;杨兵;张旭;聂郁林;郭文哲 刊期: 2009年第06期

  • 广州地区ALT不合格献血者再次献血血液筛查结果分析

    目的 探讨ALT筛查在无偿献血血液安全中的作用.方法 采用回顾性调查方法,追踪广州地区2007-2008年ALT单项检测首次不合格的献血者再次献血时的血液筛查结果,并进行比较分析.结果 2007-2008年广州地区9122位ALT单项检测首次不合格的献血者中,1005人(11%)再次来献血,其中,五项传染病指标全部标合格者747人(74.3%),258人(25.7%)不合格,其中ALT单项仍为阳性者240人,为不合格总人数的93%,有18人(7%)献血者传染病指标转为不合格,其中ALT阴性而其他四项指标不合格者15人,ALT合并其他传染病指标不合格者3人.结论 ALT筛杳在一定程度上能够减少肝炎病毒窗口期或隐匿性感染的漏检,在其他更敏感和特异的检测方法引入我国血液筛查之前,ALT筛查对降低输血传染病残留风险仍具有不可忽视的作用.

    作者:戎霞;付涌水;汪传喜;郑优荣;唐钱;滕青 刊期: 2009年第06期

  • 建立快速检测淋巴细胞内磷酸化信号传导及转录激活子的方法

    目的 建立淋巴细胞内磷酸化信号传导及转录激活子(STAT)的快速检测方法.方法 人单个核细胞或外周静脉血淋巴细胞用IL-6、IL-4和IFN-α1体外刺激15 min,运用流式细胞术检测胞内STAT3(pY705)、STAT6(pY641)和STAT1(pY701)磷酸化水平,并比较不同破膜剂对它的影响.结果 与0.2%皂素、90%甲醇比较,Purm buffer Ⅲ破膜剂破膜后,能够显著地提高淋巴细胞内STAT3的磷酸化水平(P<0.01).结论 经Perm buffer Ⅲ破膜后,运用流式细胞术可快速检测磷酸化STAT3、STAT6和STAT1.

    作者:莫建福;罗宇维;孙尔维 刊期: 2009年第06期

  • 骨灵汤对绝经期前后骨质疏松患者血清IGF-1、TGFβ1与OPG/RANKL水平的影响

    目的 观察绝经期前后骨质疏松(osteoporosis,OP)患者血清胰岛素样生长因子(IGF-1)、转化生长因子(TGFβ1)与OPG-RANKL系统的关系以及骨灵汤对IGF-1和TGFβ1表达的影响.方法 将80例OP患者分为绝经前组和绝经后组.每组各40例,均给予抗OP中药骨灵汤(骨碎补、鹿角胶、菟丝子等)治疗.采用ELISA方法检测血清TGFβ1、OPG和RANKL.采用包被放免法(IRMA)检测血清IGF-1.结果 绝经后组血清IGF和RANKL的水平显著低于绝经前组(P<0.01),绝经后组血清OPG水平显著高于绝经前组(P<0.01);血清IGF-1、TGFβ1浓度与血清OPG浓度呈负相关.相关系数为r=0.003、P=-0.622和r=0.000、P=-0.713;血清IGF-1、TGFβ1浓度与血清RANKL浓度呈正相关.相关系数为r=0.012、P=0.549和r=0.001、P=0.667:绝经前妇女骨灵汤治疗后,血清IGF和TGFβ水平升高(P<0.05),OPG水平明显升高(P<0.01).RANKL浓度下降(P<0.05);绝经后妇女骨灵汤治疗后IGF、TGFβ和OPG水平升高(P<0.05),RANKL浓度下降(P<0.05).结论 骨灵汤可以通过上调IGF-1和TGFβ1的表达,影响OPG-RANKL系统,从而调节骨代谢,达到防治OP的目的 .

    作者:钱杨佩娟;庞捷;李娟 刊期: 2009年第06期

  • 血清CA125、CA15.3、CA242联合检测对乳腺癌诊断的价值

    目的 评价血清标志物糖类抗原125(CA125)、15.3(CA15.3)、242(CA242)联合检测对乳腺癌诊断的价值.方法 对长海医院肿瘤科2003年9月至2005年9月期间收治的73例乳腺癌患者及60例健康人血清进行CA125、CA15.3、CA242检测.结果 乳腺癌组三种肿瘤标志物检测的阳性率显著高于对照组(χ2检验,P<0.01).乳腺癌组CA125、CA15.3、CA242及联合检测的阳性率由高到低依次为联合检测(68.49%)、CA15.3(49.32%)、CA125(34.25%)、CA242(28.77%),CA15.3阳性率与三种标志物联合检测的阳性率差异有统计学意义(χ2=5.546,P<0.05),即联合检测的阳性率高于CA15.3单独检测的阳性率.结论 CA125、CA15.3、CA242联合检测能明显提高乳腺癌的检出率.

    作者:宋红伟;王雅杰 刊期: 2009年第06期

  • 重组登革病毒2型NS1蛋白的分泌表达及其抗体制备

    目的 分泌表达重组登革病毒2型NS1蛋白,并制备兔抗NS1多克隆抗体.方法 应用毕赤酵母表达系统表达全长登革病毒2型NS1蛋白,制备抗原,免疫家兔;采集免疫血清,制备兔抗NS1蛋白多克隆抗体;应用Western-blot、ELISA法鉴定和检测抗体效价;经辛酸-硫酸铵法、亲和层析法纯化抗体,SDS-PAGE电泳检测抗体的纯度;用Western-blot、ELISA法检测纯化后IsG性质及效价.结果 重组NS1蛋白获得分泌表达,其免疫血清经Western-blot、ELISA法证实获得特异性兔抗NS1多克隆抗体,抗体效价为1:6000.结论 重组登革病毒2型NS1蛋白在毕赤酵母真核表达系统中高效表达,纯化产物有较强的免疫原性,成功获得特异性兔抗NS1多克隆抗体,为进一步研究登革病毒NS1蛋白及其抗体在登革病毒致病与免疫机制中的作用奠定了基础.

    作者:江澜;汤云霞;尹悦;方丹云;周俊梅;江丽芳 刊期: 2009年第06期

  • 景洪市肺吸虫病流行区20年后的变化

    目的 了解景洪市肺吸虫病流行区20年后疫区疫情变化和溪蟹的自然感染情况.方法 从原流行区采集溪蟹,鉴定种类,用研磨水洗沉淀法、生物体视显微镜检查囊蚴或脱囊蚴并计数.将本次检查结果与周本江等1989年报告的结果进行比较,获得该流行区的纵向变化结果,分析引起变化的主要原因.结果 从原流行区共采集溪蟹474只,经鉴定全为景洪溪蟹:从溪蟹体内共检获95个囊蚴.经分类鉴定全部为小睾并殖吸虫囊蚴,并通过感染实验动物家猫获得成虫加以证实.溪蟹的自然感染率为10.8%,感染度平均为1.86.结论 景洪市同一流行区20年后发生了明显的变化,无论是溪蟹的种类、肺吸虫的虫种、溪蟹的自然感染率、感染度均出现了明显的下降.引起这些变化的主要原因是居民的健康意识增强和环境因素的改变所致.

    作者:高忠萱;郑汝成;李林峰;周本江 刊期: 2009年第06期

  • 2008年揭阳市艾滋病筛查实验室质量评价

    目的 通过室间质量考评,规范揭阳市艾滋病检测筛查实验室的建设和管理,确保检测质量.方法 分析2008年揭阳市医疗卫生机构的13个艾滋病检测筛查实验室的质量考评情况.结果 考评综合成绩,13个艾滋病检测筛查实验室全部合格,取得良好以上成绩的实验室占69.23%.医疗、妇幼机构考评成绩较差,主要问题在于弱阳性样品的检测出现错检、漏检情况.总体分析,本次考评出现问题的主要环节是室内质控、定量仪器的校准及检定、生物安全防护.结论 全市艾滋病检测筛查实验室总体上检测质量较好,基本符合艾滋病筛查实验室的要求,弱阳性样品检测能力、质量控制和生物安全是薄弱环节.

    作者:洪艳苹 刊期: 2009年第06期

  • 抗弓形虫药物研究新进展

    弓形虫是重要的机会性感染病原体,可导致人兽共患弓形虫病,目前尚未找到理想的治疗药物.本文综述了抗生素类药物、其它类化学药物、生物制剂及中药抗弓形虫作用的新研究进展,对抗弓形虫药进行了总结.其中复方中药在治疗急性弓形虫病有很大的应用价值,西药联合用药,可适当减少药量、降低不良反应和耐药性的产生,治疗效果明显优于单独用药.

    作者:朱穗京;田春林;杨雯 刊期: 2009年第06期

  • 脐尿管癌的CT影像学分析

    目的 探讨脐尿管癌的CT表现特点及鉴别诊断要点.方法 回顾性分析经病理证实的9例脐尿管癌及4例其他脐尿管病变患者的临床资料和CT表现.结果 9例脐尿管癌患者的病变部位均在腹中线Retzius间隙脐尿管走行区,其中6例位于脐尿管膀胱交界区的膀胱顶壁或前壁,3例位于脐尿管上端.9例脐尿管癌中6例呈囊实性,3例为实性,4例可见病灶中心或周边斑点状钙化.增强扫描后均有不同程度强化.随诊复查腹膜转移者1例,肝转移者1例.结论 脐尿管癌的CT表现具有特征性,CT扫描能提供较为准确的定位和定性,同时也是脐尿管癌术前明确诊断和鉴别诊断的重要措施之一.

    作者:王毅明 刊期: 2009年第06期

  • 血浆对臭氧在水介质中杀菌效果影响的研究

    目的 探索血浆对臭氧在水介质中杀菌作用的干扰效应,为医用臭氧对腹水等体液中细菌杀灭作用研究摸索臭氧作用的浓度及时间参数.方法 在含不同浓度血浆的生理盐水中加人大肠埃希菌(ATCC25922)和金黄色葡萄球菌(ATCC25923),悬液定量法计算高浓度臭氧(90 μg/mL)对其杀菌率;臭氧作用于含10.0%血浆的生理盐水,摸索臭氧有效杀菌的浓度和作用时间参数.结果 臭氧杀菌效果随生理盐水中血浆浓度的提高而降低,血浆含量大于10.0%后杀菌效果显著降低(P<0.05),90μg/mL臭氧作用20 min(流速12 ml/min)对含10.0%血浆的生理盐水中大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌杀菌率可分别达到100%、99.05%.不同浓度组(40 μg/mL、60 μg/mL、90μg/mL)的臭氧杀菌效果有显著性差异(P<0.05),臭氧作用不同时间(5 min、10min、20 min)杀菌效果亦有显著性差异(P<0.05),以浓度为90 μg/mL臭氧作用20 min杀菌效果好.结论 血浆可干扰臭氧在生理盐水中的杀菌作用,血浆含量在10.0%以下时影响作用较小,提高臭氧浓度、延长作用时间可提高杀菌率.

    作者:孙婧;骆训武;张亚莉;万铁林;张明霞;郭亚兵 刊期: 2009年第06期

  • 大鼠肝移植术后受体骨髓间充质干细胞输注肝内示踪与标记方法比较

    目的 采用羧基荧光素二醋酸盐琥珀酰亚胺酯(carboxyfluorescin diacetate succinimidyl ester, CFSE)与溴化脱氧尿嘧啶核苷(5-bromo-2-deoxyuridine,Brdu)两种细胞标记物观测肝移植术后受体骨髓间充质干细胞(MSCs)肝内分布情况.并对两种方法进行比较.方法 在已构建的DA-Lewis大鼠原位肝移植模型及提取培养Lewis大鼠MSCs的基础上分别用CFSE和Brdu对Lewis来源的MSCs进行标记,术中经门静脉输注,通过荧光显微镜和免疫组织化学法观测术后2mo内各时间点受体肝组织内MSCs的分布情况.结果 CFSE细胞标记率约为(94.1±1.4)%.受体肝组织第1、7、14天内有CFSE标记的MSCs聚集.对照组第5天肝组织内发布的CFSE标记MSCs消失.BrdU细胞标记率约为(90.3±3.5)%.受体肝组织第14天、1个月、2个月可见Brdu阳性的MSCs分布,对照组相应时间点肝组织内未发现Brdu阳性的MSCs.结论 CFSE和Brdu均为MSCs的良好标记物.CFSE标记细胞后荧光迅速减弱,适用于短期示踪.Brdu标记细胞后可维持较长时间,适用于长期示踪.两种标记方法均是MSCs较为简单有效的方法,实验显示受体MSCs大部分分布于移植肝脏.

    作者:谭浩翔;汪谦;张会迎;高毅 刊期: 2009年第06期

  • 广州市超市自制食品卫生状况调查与分析

    目的 了解目前广州市不同规模超市自制食品的卫生状况.方法 采用分层抽样的方法,抽取大型超市18间、中型超市4间、小型超市14间作为调查对象.采用现场监督检查、询问和填写调查表的方法进行调查.结果 对不同规模超市生熟交叉污染、预进间的设置、空气消毒设备和空调设置等方面进行了比较,大型、中型超市成品区域的设施方面都比小型超市成品区域设施规范,差异均有统计学意义(P<0.05).超市中自制食品存在安全隐患,尤以小型超市为甚.结论 应重点加强对小型超市自制食品卫生状况的监管.

    作者:黄亮宇;许晓晖;许斌 刊期: 2009年第06期

  • 日本血吸虫紫外线致弱尾蚴免疫小鼠攻击感染后的组织细胞反应

    目的 观察日本血吸虫紫外线致弱尾蚴疫苗(UVC)免疫动物攻击感染后的局部组织免疫病理变化.方法 将70只C57BL/6小鼠随机分为疫苗免疫组和感染对照组.疫苗组小鼠接种紫外线致弱日本血吸虫尾蚴后5周,再经腹部皮肤攻击感染正常日本血吸虫尾蚴(800±50)条;感染对照组经皮肤感染同量尾蚴.于攻击感染后6~120 h的不同时间点各剖杀小鼠5只,取攻击部位皮肤及/或肺组织,进行病理学观察.结果 UVC疫苗免疫小鼠攻击感染日本血吸虫尾蚴后,皮肤炎症反应较感染对照出现早、反应强烈、持续时间长,EOS百分比高,但肺部出血斑点出现时间(72 h)迟于感染对照组(48 h).72~120 h,疫苗组小鼠肺部局灶性炎症明显,肉芽肿样结节形成,肺泡壁多正常.而感染对照组小鼠肺组织炎症轻,但肺泡壁水肿明显,且有较多红细胞渗出.结论 紫外线致弱尾蚴疫苗免疫增强了小鼠皮肤及肺组织的细胞反应及其杀虫作用.

    作者:陈家旭;刘述先;曹建平;徐裕信;宋光承;郭俭 刊期: 2009年第06期

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