学术投稿

PDGF、FN诱导FHL1细胞增殖的P13K信号转导通路研究

马跃文;柏广涛;张美侠

关键词:人胚胎肺成纤维细胞, 血小板源性生长因子, 纤维连接蛋白, 磷酸酰基醇-3-激酶
摘要:目的 探讨血小板源性生长因子(PDGF)和纤维连接蛋白(FN)诱导人胚胎肺成纤维细胞(HFL1)增殖的磷酸酰基醇-3-激酶(P13K)信号转导通路.方法 采用不同浓度的PDGF和FN分别刺激HFL1并观察P13K抑制剂wortmannin(WMN)对PDGF、FN诱导HFL1增殖作用的影响.用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测各组细胞增殖情况.结果 PDGF和FN对HFL1的诱导增殖作用明显,并呈剂量依赖性升高趋势,二者均在50 ng/mL时作用显著;P13K抑制剂wortmannin可抑制PDGF和FN诱导的HFL1细胞增殖.结论 PDGF和FN诱导HFL1的细胞增殖可以通过P13K信号转导途径实现.
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  • 德国小蠊细胞色素P450 CYP4G19基因的原核表达及多克隆抗体制备

    目的 构建细胞色素P450 CYP4G19基因部分片段的原核表达载体并诱导其表达,纯化表达的融合蛋白并制备CYP4G19多克隆抗体.方法 应用RT-PCR扩增CYP4G19基因部分片段,产物经T-A克隆、测序鉴定,亚克隆入原核表达载体pET-28a,在大肠杆菌BL21(DE3)中诱导表达,镍离子亲和层析法纯化重组蛋白后,免疫小鼠,获得多克隆抗体,ELISA及Western.blot检测多抗的效价及特异性.结果 从德国小蠊cDNA中克隆出一段771bp的亲水性基因片段,在大肠杆菌中诱导表达出约32000 Mr、以包涵体形式存在的P450重组蛋白.将纯化、复性的重组蛋白免疫 9,得到了滴度高于1:10<'6>的高效价多克隆抗体.Western-blot显示此多抗能与32000 Mr的重组蛋白特异结合.并能识别天然的德国小蠊微粒体P450蛋白.结论 利用原核表达的CYP4G19融合蛋白具有良好的免疫原性.制备出效价高、特异性强的抗德国小蠊CYP4G19多克隆抗体,为下一步关于德国小蠊CYP4G19蛋白表达特性及其抗药性功能的深入研究提供了重要的实验工具.

    作者:赵霞;张仁利;耿艺介;黄达娜;高世同;李晓恒;胡章立 刊期: 2009年第06期

  • 瑞舒伐他汀对大鼠颈动脉球囊损伤后细胞凋亡的影响

    目的 观察瑞舒伐他汀对大鼠颈动脉球囊损伤后细胞凋亡的影响.方法 36只雄性SD大鼠随机分为对照组、损伤组和治疗组,每组12只.损伤组和治疗组分别建立大鼠左侧颈动脉球囊损伤模型,右侧颈动脉未予球囊损伤.治疗组于损伤前3 d始连续每天给予瑞舒伐他汀5 mg/(kg·d)灌胃,对照组和损伤组予9g/L氯化钠溶液灌胃.术后14 d取左侧颈总动脉.进行HE染色和末端脱氧核苷酸转移酶介导的生物素-dUTP缺口标记技术(Terminal deoxynucleotidyl transferase biotin-dUTP nick end labeling,TUNEL)的凋亡检测.结果 共30只大鼠成功完成本次实验.①血管损伤14 d,可见明显的新生内膜:损伤组和治疗组的内膜面积、内膜/中膜面积的比值较对照组增大(P<0.05);与损伤组比较,治疗组内膜/中膜面积的比值减少,管腔面积增加26%(P<0.05).②对照组血管偶可见单个散在的凋亡细胞;损伤组凋亡细胞阳性率为(12.3±1.8)%,与对照组比较,差异有统计学意义(P<0.05);治疗组凋亡细胞数目增多,凋亡细胞阳性率达(26.8±3.2)%,与损伤组比较,差异有统计学意义(P<0.05).凋亡细胞主要位于新生内膜.结论 瑞舒伐他汀可抑制大鼠颈动脉球囊损伤后的内膜增生,可促进大鼠颈动脉球囊损伤后的细胞凋亡.瑞舒伐他汀促进细胞凋亡的作用可能与其抑制内膜增生有关.

    作者:曾春苗;董少红;刘华东;李鹏 刊期: 2009年第06期

  • 骨灵汤对绝经期前后骨质疏松患者血清IGF-1、TGFβ1与OPG/RANKL水平的影响

    目的 观察绝经期前后骨质疏松(osteoporosis,OP)患者血清胰岛素样生长因子(IGF-1)、转化生长因子(TGFβ1)与OPG-RANKL系统的关系以及骨灵汤对IGF-1和TGFβ1表达的影响.方法 将80例OP患者分为绝经前组和绝经后组.每组各40例,均给予抗OP中药骨灵汤(骨碎补、鹿角胶、菟丝子等)治疗.采用ELISA方法检测血清TGFβ1、OPG和RANKL.采用包被放免法(IRMA)检测血清IGF-1.结果 绝经后组血清IGF和RANKL的水平显著低于绝经前组(P<0.01),绝经后组血清OPG水平显著高于绝经前组(P<0.01);血清IGF-1、TGFβ1浓度与血清OPG浓度呈负相关.相关系数为r=0.003、P=-0.622和r=0.000、P=-0.713;血清IGF-1、TGFβ1浓度与血清RANKL浓度呈正相关.相关系数为r=0.012、P=0.549和r=0.001、P=0.667:绝经前妇女骨灵汤治疗后,血清IGF和TGFβ水平升高(P<0.05),OPG水平明显升高(P<0.01).RANKL浓度下降(P<0.05);绝经后妇女骨灵汤治疗后IGF、TGFβ和OPG水平升高(P<0.05),RANKL浓度下降(P<0.05).结论 骨灵汤可以通过上调IGF-1和TGFβ1的表达,影响OPG-RANKL系统,从而调节骨代谢,达到防治OP的目的 .

    作者:钱杨佩娟;庞捷;李娟 刊期: 2009年第06期

  • 血清CA125、CA15.3、CA242联合检测对乳腺癌诊断的价值

    目的 评价血清标志物糖类抗原125(CA125)、15.3(CA15.3)、242(CA242)联合检测对乳腺癌诊断的价值.方法 对长海医院肿瘤科2003年9月至2005年9月期间收治的73例乳腺癌患者及60例健康人血清进行CA125、CA15.3、CA242检测.结果 乳腺癌组三种肿瘤标志物检测的阳性率显著高于对照组(χ2检验,P<0.01).乳腺癌组CA125、CA15.3、CA242及联合检测的阳性率由高到低依次为联合检测(68.49%)、CA15.3(49.32%)、CA125(34.25%)、CA242(28.77%),CA15.3阳性率与三种标志物联合检测的阳性率差异有统计学意义(χ2=5.546,P<0.05),即联合检测的阳性率高于CA15.3单独检测的阳性率.结论 CA125、CA15.3、CA242联合检测能明显提高乳腺癌的检出率.

    作者:宋红伟;王雅杰 刊期: 2009年第06期

  • 广州市超市自制食品卫生状况调查与分析

    目的 了解目前广州市不同规模超市自制食品的卫生状况.方法 采用分层抽样的方法,抽取大型超市18间、中型超市4间、小型超市14间作为调查对象.采用现场监督检查、询问和填写调查表的方法进行调查.结果 对不同规模超市生熟交叉污染、预进间的设置、空气消毒设备和空调设置等方面进行了比较,大型、中型超市成品区域的设施方面都比小型超市成品区域设施规范,差异均有统计学意义(P<0.05).超市中自制食品存在安全隐患,尤以小型超市为甚.结论 应重点加强对小型超市自制食品卫生状况的监管.

    作者:黄亮宇;许晓晖;许斌 刊期: 2009年第06期

  • 老年人戊肝临床特点分析

    目的 探讨老年人戊型病毒性肝炎(戊肝)的临床特点.方法 对老年人戊肝60例及非老年人戊肝64例作对照分析,比较两组之间的临床特点.结果 老年戊肝患者组急性黄疸型比率和重型肝炎发病率,重叠感染率,合并基础疾病率,病死率,病程,胆红素水平,并发症(感染,腹水及感性脑病)的发生率均明显高于非老年组;而ALT,胆固醇,白蛋白及凝血酶原活动度要低于非老年组.两组在性别及临床表现上无明显差异.结论 老年人戊肝不少见,病程长,病情重,预后不佳.

    作者:李德昌;彭琳 刊期: 2009年第06期

  • 揭阳市2004-2008年乙型肝炎流行特征

    目的 了解揭阳市乙型肝炎(简称乙肝)的发病情况,为制订有效的防制措施提供科学依据.方法 从<中国疾病预防控制信息系统>中导出数据库,用SPSS13.0的χ2检验进行数据处理,采用描述性流行病学方法对揭阳市2004-2008年乙肝疫情和流行特征进行分析.结果 揭阳市2004-2008年共报告乙肝病例3680例,年均发病率为12.54/10万,发病无明显季节性,病例主要集中于20~59岁的青壮年,占总报告数的76.74%,男性发病率明显高于女性(χ2=657.92,P=0.0047),各县区发病率无明显差别(χ2=0.86845,P=0.9290),职业以农民、家务及待业为主,两者占总数的56.79%.结论 揭阳市乙肝发病率低于全省的平均水平,但近年有上升趋势,应继续采取以免疫接种提高易感人群免疫力为主的综合防制措施,在做好儿童常规乙肝疫苗接种的同时,提高其他易感人群的乙肝疫苗接种率.

    作者:林伟波;李惠莲;邱志远 刊期: 2009年第06期

  • 血浆对臭氧在水介质中杀菌效果影响的研究

    目的 探索血浆对臭氧在水介质中杀菌作用的干扰效应,为医用臭氧对腹水等体液中细菌杀灭作用研究摸索臭氧作用的浓度及时间参数.方法 在含不同浓度血浆的生理盐水中加人大肠埃希菌(ATCC25922)和金黄色葡萄球菌(ATCC25923),悬液定量法计算高浓度臭氧(90 μg/mL)对其杀菌率;臭氧作用于含10.0%血浆的生理盐水,摸索臭氧有效杀菌的浓度和作用时间参数.结果 臭氧杀菌效果随生理盐水中血浆浓度的提高而降低,血浆含量大于10.0%后杀菌效果显著降低(P<0.05),90μg/mL臭氧作用20 min(流速12 ml/min)对含10.0%血浆的生理盐水中大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌杀菌率可分别达到100%、99.05%.不同浓度组(40 μg/mL、60 μg/mL、90μg/mL)的臭氧杀菌效果有显著性差异(P<0.05),臭氧作用不同时间(5 min、10min、20 min)杀菌效果亦有显著性差异(P<0.05),以浓度为90 μg/mL臭氧作用20 min杀菌效果好.结论 血浆可干扰臭氧在生理盐水中的杀菌作用,血浆含量在10.0%以下时影响作用较小,提高臭氧浓度、延长作用时间可提高杀菌率.

    作者:孙婧;骆训武;张亚莉;万铁林;张明霞;郭亚兵 刊期: 2009年第06期

  • 三峡大坝建成前影响长寿区疟疾流行的相关因素分析与监测结果

    目的 为了掌握疟疾疫情和按蚊密度动态以及影响疟疾流行的相关因素,为今后库区疟疾防治提供基础数据和依据.方法 收集、整理三峡库区与疟疾流行的相关资料、建国后疟疾流行概况、媒介种群及分布等资料.1999年建立三峡库区疟疾监测点.监测疟疾疫情和按蚊种群、密度变化动态.结果 收集、整理了三峡库区的基线资料.三峡库区历史上曾有间日疟和恶性疟流行,20世纪60年代后无恶性疟发生,建国初期疟疾大流行,70年末控制流行.传疟媒介主要为中华按蚊.监测结果显示,疟疾疫情稳定,年发病控制在1/万以下;发热病人血检和儿童IFAT检测结果均为阴性;传疟媒介5~10月叮人率在1~9.6只/人·夜之间,牛房密度在6~360只/人工小时之间.结论 目前,疟疾年发病率控制在1/万以下,但是,传染源存在,媒介广泛分布,水库建成蓄水后,流速减缓、水面增宽、消落带积水均为按蚊孳生提供了有利条件,开展监测是必要的.

    作者:王奎;勾能;雷群建;周万江;蒋和宏 刊期: 2009年第06期

  • 2008年揭阳市艾滋病筛查实验室质量评价

    目的 通过室间质量考评,规范揭阳市艾滋病检测筛查实验室的建设和管理,确保检测质量.方法 分析2008年揭阳市医疗卫生机构的13个艾滋病检测筛查实验室的质量考评情况.结果 考评综合成绩,13个艾滋病检测筛查实验室全部合格,取得良好以上成绩的实验室占69.23%.医疗、妇幼机构考评成绩较差,主要问题在于弱阳性样品的检测出现错检、漏检情况.总体分析,本次考评出现问题的主要环节是室内质控、定量仪器的校准及检定、生物安全防护.结论 全市艾滋病检测筛查实验室总体上检测质量较好,基本符合艾滋病筛查实验室的要求,弱阳性样品检测能力、质量控制和生物安全是薄弱环节.

    作者:洪艳苹 刊期: 2009年第06期

  • 深圳市龙岗区患者痰培养细菌菌谱和耐药性研究

    目的 研究深圳市龙岗区患者痰培养细菌菌谱和耐药性,为临床合理应用抗菌药物提供依据.方法 对来自深圳市龙岗区4间医院2007年1月至2008年6月患者合格痰标本中培养的细菌药敏试验进行回顾性分析.结果 727株细菌中,革兰阴性杆菌595株,占81.8%,以鲍曼不动杆菌、铜绿假单胞菌为主;革兰阳性球菌132株,占18.2%.以凝固酶阴性葡萄球菌、金黄色葡萄球菌为主,而且凝固酶阴性葡萄球菌株数超过金黄色葡萄球菌.药敏结果提示革兰阴性杆菌及革兰阳性球菌对相当多数的抗生素耐药率较高.结论 深圳市龙岗区患者痰培养细菌耐药情况较严重,条件致病菌菌株数比例较高.应加强药物尤其是抗菌药物的使用管理,规范应用抗生素.

    作者:岑慧;杨兵;张旭;聂郁林;郭文哲 刊期: 2009年第06期

  • 保留肾单位手术治疗肾血管平滑肌脂肪瘤的疗效观察

    目的 探讨保留肾单位手术(NSS)治疗肾血管平滑肌脂肪瘤(RAML)的安全性及有效性.方法 对56例采用NSS治疗的RAML患者的临床资料回顾性分析,其中肿瘤剜除术35例,肾部分切除21例,4例患者术前行选择性肾动脉栓塞术.结果 术中切除肿瘤平均直径(5.6±2.7)cm,术中平均失血量(140±75)ml,术后无大出血、尿瘘.51例患者获得随访,平均随访36月(6~120月),术后肾功能相对稳定,未见肿瘤复发.结论 保留肾单位手术是治疗RAML的较好方法,有效地控制出血和保护肾脏功能是手术成功的关键.

    作者:余新立;廖勇彬;庞健;陈立新;黄晓生;吴荣海;程洲平;黄黎明;林绮平;孙明 刊期: 2009年第06期

  • 用重组SAG1抗原检测弓形虫抗体

    目的 探讨重组SAG1抗原对弓形虫IgG和IgM抗体的检测效果.方法 用rSAG1作抗原建立免疫印迹方法(rSAG1-WB),与玻片虫体过氧化物酶免疫染色试验(TSHE)平行检测不同来源血清.结果 15例病原学检查阳性小鼠血清和5例免疫兔血清的IsG抗体均为阳性,30例正常小鼠血清和10例正常兔血清均未出现阳性反应.rSAG1-WB检测可疑弓形虫病患者血清阳性率为60.3%(38/63),献血员血清阳性率为6%(3/50),与TSHE检测结果(65.1%和4%)均无统计学差异(P>0.05).1例IgM强阳性血清和13例IgM弱阳性血清在Western-blot检测中分别出现相应的强阳性与弱阳性反应,50例献血员血清均未出现IgM阳性反应,结果与TSHE一致.结论 rSAG1-WB检测弓形虫IgG和IgM抗体均具有高度的敏感性和特异性,与TSHE的符合率高.

    作者:邹梦晨;言慧;吴煙;陈晓光;李华 刊期: 2009年第06期

  • 非糖刺激试验评价胰岛β细胞功能的临床应用

    目的 探讨精氨酸刺激试验(AST)和胰高血糖素刺激试验(GST)在糖尿病病人的年龄、病程和体重指数(BMI)等不同的情况下评价胰岛β细胞功能的价值,以指导临床合理评价胰岛β细胞功能.方法 60例2型糖尿病(T2DM)患者分成A、B两组及不同亚组,采用自身对照及交叉试验方法,分别测定血糖、精氨酸(Arg)刺激后3 min、胰高血糖素(Glg)刺激后6 min的C肽释放水平并作比较.结果 A、B两组注射Arg、Glg后血压、血糖均无明显升高(P>0.05).各组比较精氨酸刺激后3 min C肽与胰高血糖素刺激后6 min C肽差异均无统计学意义(P>0.05),且存在正相关(P均<0.05).结论 AST、GST相对于口服糖耐量试验对DM患者是有利的;胰岛β细胞对Arg和Glg这两种非葡萄糖刺激物的反应程度相似,而且两试验结果的相关性良好,对临床合理选用评价胰岛β细胞功能的方法有一定的参考价值.

    作者:黄莉文;冯烈;刘华龙;张云 刊期: 2009年第06期

  • 巫溪县燃煤型氟中毒防治现状

    目的 了解巫溪县燃煤型氟中毒病情和防治措施落实进度及发展趋势,为制定防治燃煤型氟中毒措施提供依据.方法 运用Dean's法检查该县所有病区村8~12岁儿童氟斑牙(GB16396-1996)和检查16岁以上成人氟骨症(WS192-1999),计算氟斑牙检出率和成人氟骨症检出率.调查2005-2008年中央转移支付地方公共卫生地氟病防治项目改炉改灶现状,计算炉灶改造率、改炉改灶合格率、改炉改灶正确使用率.2005-2008年在改炉改灶前后分别检测儿童尿氟,计算几何均数.结果 儿童氟斑牙检出率为46.21%,成人氟骨症检出率为0,炉灶改造率为59.52%,合格率为97.16%,正确使用率为97.76%,尿氟几何均数改炉改灶前后均呈下降趋势.结论 巫溪县燃煤型氟中毒病区呈轻微流行,2005-2008年结合中央转移支付地方公共卫生地氟病防治项目进行了大规模的改炉改灶工作,要达到国家75%的目标还需改炉改灶3600余户.

    作者:何伟;廖映旭;晏维 刊期: 2009年第06期

  • 景洪市肺吸虫病流行区20年后的变化

    目的 了解景洪市肺吸虫病流行区20年后疫区疫情变化和溪蟹的自然感染情况.方法 从原流行区采集溪蟹,鉴定种类,用研磨水洗沉淀法、生物体视显微镜检查囊蚴或脱囊蚴并计数.将本次检查结果与周本江等1989年报告的结果进行比较,获得该流行区的纵向变化结果,分析引起变化的主要原因.结果 从原流行区共采集溪蟹474只,经鉴定全为景洪溪蟹:从溪蟹体内共检获95个囊蚴.经分类鉴定全部为小睾并殖吸虫囊蚴,并通过感染实验动物家猫获得成虫加以证实.溪蟹的自然感染率为10.8%,感染度平均为1.86.结论 景洪市同一流行区20年后发生了明显的变化,无论是溪蟹的种类、肺吸虫的虫种、溪蟹的自然感染率、感染度均出现了明显的下降.引起这些变化的主要原因是居民的健康意识增强和环境因素的改变所致.

    作者:高忠萱;郑汝成;李林峰;周本江 刊期: 2009年第06期

  • PDGF、FN诱导FHL1细胞增殖的P13K信号转导通路研究

    目的 探讨血小板源性生长因子(PDGF)和纤维连接蛋白(FN)诱导人胚胎肺成纤维细胞(HFL1)增殖的磷酸酰基醇-3-激酶(P13K)信号转导通路.方法 采用不同浓度的PDGF和FN分别刺激HFL1并观察P13K抑制剂wortmannin(WMN)对PDGF、FN诱导HFL1增殖作用的影响.用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测各组细胞增殖情况.结果 PDGF和FN对HFL1的诱导增殖作用明显,并呈剂量依赖性升高趋势,二者均在50 ng/mL时作用显著;P13K抑制剂wortmannin可抑制PDGF和FN诱导的HFL1细胞增殖.结论 PDGF和FN诱导HFL1的细胞增殖可以通过P13K信号转导途径实现.

    作者:马跃文;柏广涛;张美侠 刊期: 2009年第06期

  • 日本血吸虫紫外线致弱尾蚴免疫小鼠攻击感染后的组织细胞反应

    目的 观察日本血吸虫紫外线致弱尾蚴疫苗(UVC)免疫动物攻击感染后的局部组织免疫病理变化.方法 将70只C57BL/6小鼠随机分为疫苗免疫组和感染对照组.疫苗组小鼠接种紫外线致弱日本血吸虫尾蚴后5周,再经腹部皮肤攻击感染正常日本血吸虫尾蚴(800±50)条;感染对照组经皮肤感染同量尾蚴.于攻击感染后6~120 h的不同时间点各剖杀小鼠5只,取攻击部位皮肤及/或肺组织,进行病理学观察.结果 UVC疫苗免疫小鼠攻击感染日本血吸虫尾蚴后,皮肤炎症反应较感染对照出现早、反应强烈、持续时间长,EOS百分比高,但肺部出血斑点出现时间(72 h)迟于感染对照组(48 h).72~120 h,疫苗组小鼠肺部局灶性炎症明显,肉芽肿样结节形成,肺泡壁多正常.而感染对照组小鼠肺组织炎症轻,但肺泡壁水肿明显,且有较多红细胞渗出.结论 紫外线致弱尾蚴疫苗免疫增强了小鼠皮肤及肺组织的细胞反应及其杀虫作用.

    作者:陈家旭;刘述先;曹建平;徐裕信;宋光承;郭俭 刊期: 2009年第06期

  • 白三烯C4在哮喘发病中的作用

    目的 探讨白三烯C4在哮喘发病中的作用.方法 采用ELISA法,分别测定56例支气管哮喘发作期.60例缓解期以及60例正常对照组血清中LTC4水平.结果 哮喘发作组和哮喘缓解组LTCA(14.63±2.85)ng/mL和(13.92±2.46)ng/mL水平显著高于正常对照组(2.42±0.36)ng/mL.而哮喘患者急性发作组和缓解组之间比较差异无统计学意义.结论 LTC4是哮喘发生发展的重要炎性因子.

    作者:刘玉春;徐继庆;董惠翔;张波;林士军 刊期: 2009年第06期

  • C反应蛋白与酶修饰低密度脂蛋白对树突状细胞成熟的影响

    目的 探讨在动脉粥样斑块硬化进程中C反应蛋白(CRP)和酶修饰低密度脂蛋白(E-LDL)对外周血中树突状细胞(DC)分化成熟的影响.方法 梯度离心法分离人外周血单核细胞,用含rhGM-CSF和rhIL-4的Cellgro培养液培养5 d,使其分化为DC.分别用CRP、E-LDL及CRP加E-LDL刺激DC 48 h后,采用流式细胞术检测DC表型(CD1a、CD80、CD86、HLA-DR)的表达,ELISA法检测DC上清液中IL-12、TNFα、IL-2和IL-10的含量,并进行比较.结果 CRP抑制DC的CD1a、CD80表达及IL-12、TNFα分泌,E-LDL促进DC的CD1a、CD80、CD86和HLA-DR表达及IL-12、TNFα分泌,CPR加E-LDL结果与E-LDL类似.结论 CRP抑制DC的活化,E-LDL可促进DC的分化成熟,E-LDL激活DC的作用强于CRP的抑制作用.

    作者:何威;陈爱华;宋旭东 刊期: 2009年第06期

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主管:广东省科学技术协会

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