何伟；廖映旭；晏维
目的 采用羧基荧光素二醋酸盐琥珀酰亚胺酯(carboxyfluorescin diacetate succinimidyl ester, CFSE)与溴化脱氧尿嘧啶核苷(5-bromo-2-deoxyuridine,Brdu)两种细胞标记物观测肝移植术后受体骨髓间充质干细胞(MSCs)肝内分布情况.并对两种方法进行比较.方法 在已构建的DA-Lewis大鼠原位肝移植模型及提取培养Lewis大鼠MSCs的基础上分别用CFSE和Brdu对Lewis来源的MSCs进行标记,术中经门静脉输注,通过荧光显微镜和免疫组织化学法观测术后2mo内各时间点受体肝组织内MSCs的分布情况.结果 CFSE细胞标记率约为(94.1±1.4)%.受体肝组织第1、7、14天内有CFSE标记的MSCs聚集.对照组第5天肝组织内发布的CFSE标记MSCs消失.BrdU细胞标记率约为(90.3±3.5)%.受体肝组织第14天、1个月、2个月可见Brdu阳性的MSCs分布,对照组相应时间点肝组织内未发现Brdu阳性的MSCs.结论 CFSE和Brdu均为MSCs的良好标记物.CFSE标记细胞后荧光迅速减弱,适用于短期示踪.Brdu标记细胞后可维持较长时间,适用于长期示踪.两种标记方法均是MSCs较为简单有效的方法,实验显示受体MSCs大部分分布于移植肝脏.
作者：谭浩翔；汪谦；张会迎；高毅 刊期： 2009年第06期
目的 了解中山市游泳池水质的卫生状况,严防感染性疾病的暴发.方法 2008年对管辖范围的住宅小区内泳池、学校等公共场所泳池、宾馆/度假村泳池进行细菌总数、大肠菌群、pH值、浑浊度、尿素、游离余氯六个项目检测.结果 中山市游泳池水质检测总合格率为65.14%,其中浑浊度合格率高(99.51%),尿素合格率低(82.42%),各项目之间差异有统计学意义(χ2=562.52,P<0.05).住宅小区内泳池、学校等公共场所泳池、宾馆/度假村泳池水合格率依次为63.67%、65.41%、70.09%,不同类型游泳池之间没有统计学意义(χ2=3.25,P>0.05).结论 2008年中山市游泳池水质检测合格率偏低,应加强游泳场所的监测监督管理,提高卫生质量,避免疾病的感染或流行.
作者：袁展红；马秀英；余昆英；刘绮明；丁丽燕；欧阳珮珮 刊期： 2009年第06期
目的 探讨血小板源性生长因子(PDGF)和纤维连接蛋白(FN)诱导人胚胎肺成纤维细胞(HFL1)增殖的磷酸酰基醇-3-激酶(P13K)信号转导通路.方法 采用不同浓度的PDGF和FN分别刺激HFL1并观察P13K抑制剂wortmannin(WMN)对PDGF、FN诱导HFL1增殖作用的影响.用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测各组细胞增殖情况.结果 PDGF和FN对HFL1的诱导增殖作用明显,并呈剂量依赖性升高趋势,二者均在50 ng/mL时作用显著;P13K抑制剂wortmannin可抑制PDGF和FN诱导的HFL1细胞增殖.结论 PDGF和FN诱导HFL1的细胞增殖可以通过P13K信号转导途径实现.
作者：马跃文；柏广涛；张美侠 刊期： 2009年第06期
目的 观察绝经期前后骨质疏松(osteoporosis,OP)患者血清胰岛素样生长因子(IGF-1)、转化生长因子(TGFβ1)与OPG-RANKL系统的关系以及骨灵汤对IGF-1和TGFβ1表达的影响.方法 将80例OP患者分为绝经前组和绝经后组.每组各40例,均给予抗OP中药骨灵汤(骨碎补、鹿角胶、菟丝子等)治疗.采用ELISA方法检测血清TGFβ1、OPG和RANKL.采用包被放免法(IRMA)检测血清IGF-1.结果 绝经后组血清IGF和RANKL的水平显著低于绝经前组(P<0.01),绝经后组血清OPG水平显著高于绝经前组(P<0.01);血清IGF-1、TGFβ1浓度与血清OPG浓度呈负相关.相关系数为r=0.003、P=-0.622和r=0.000、P=-0.713;血清IGF-1、TGFβ1浓度与血清RANKL浓度呈正相关.相关系数为r=0.012、P=0.549和r=0.001、P=0.667:绝经前妇女骨灵汤治疗后,血清IGF和TGFβ水平升高(P<0.05),OPG水平明显升高(P<0.01).RANKL浓度下降(P<0.05);绝经后妇女骨灵汤治疗后IGF、TGFβ和OPG水平升高(P<0.05),RANKL浓度下降(P<0.05).结论 骨灵汤可以通过上调IGF-1和TGFβ1的表达,影响OPG-RANKL系统,从而调节骨代谢,达到防治OP的目的 .
作者：钱杨佩娟；庞捷；李娟 刊期： 2009年第06期
目的 了解男性泌尿生殖道感染的病原学分布,为男性泌尿生殖道感染的预防和治疗提供可靠依据.方法 对2123例男性泌尿生殖道标本的微生物学检验进行回顾性分析.结果 2123例男性泌尿生殖道标本中共检出病原菌1082株,检出率为50.96%,其中解脲支原体检出率高,为24.30%;所有送检标本中,尿道拭子标本的病原菌检出率高,为60.09%,混合感染率为12.74%;精液标本中无乳链球菌检出率明显高于前列腺液(P<0.05).结论 解脲支原体是男性泌尿生殖道感染的主要病原菌;男性泌尿道标本的病原学检查以尿道拭子为宜;男性不孕是否与无乳链球菌的感染有关还有待进一步研究.
作者：汤学夫；张水兰；何琴；蔡毅华 刊期： 2009年第06期
目的 全面、准确地掌握奉节县居民食用合格碘盐的情况,确保碘缺乏病防治措施的有效实施,为持续消除碘缺乏病工作提供科学依据.方法 按照<重庆市碘盐监测方案>规定的抽样方法及盐碘测定方法对居民户食用盐进行监测.结果 2004-2008年监测居民户家庭食用盐每年360份,共1800份,碘含量均数为30.75 mg/kg.变异系数为21.06,年份间碘含量差异有统计学意义(F=13.755,P<0.05),呈明显线性下降趋势(R=0.12,P<0.05);碘盐覆盖率为99.39%,碘盐合格率为94.69%,合格碘盐食用率为94.11%,非碘盐率为0.61%,年份间差异均无统计学意义(P>0.05).结论 奉节县实现基本消除碘缺乏病阶段目标后,居民合格碘盐食用率保持在90%以上,成果巩固.各级政府应持续重视.完善监督监测机制,确保碘盐质量,以实现消除碘缺乏病的目标.
作者：雷兵；刘学刚；廖和平 刊期： 2009年第06期
目的 探讨ALT筛查在无偿献血血液安全中的作用.方法 采用回顾性调查方法,追踪广州地区2007-2008年ALT单项检测首次不合格的献血者再次献血时的血液筛查结果,并进行比较分析.结果 2007-2008年广州地区9122位ALT单项检测首次不合格的献血者中,1005人(11%)再次来献血,其中,五项传染病指标全部标合格者747人(74.3%),258人(25.7%)不合格,其中ALT单项仍为阳性者240人,为不合格总人数的93%,有18人(7%)献血者传染病指标转为不合格,其中ALT阴性而其他四项指标不合格者15人,ALT合并其他传染病指标不合格者3人.结论 ALT筛杳在一定程度上能够减少肝炎病毒窗口期或隐匿性感染的漏检,在其他更敏感和特异的检测方法引入我国血液筛查之前,ALT筛查对降低输血传染病残留风险仍具有不可忽视的作用.
作者：戎霞；付涌水；汪传喜；郑优荣；唐钱；滕青 刊期： 2009年第06期
目的 探讨卵巢癌基因HE4对卵巢癌细胞增殖及侵袭能力的影响.方法 构建针对HE4基因的PcDNA3.1/HFA载体,脂质体法介导PcDNA3.1/HE4载体转染人浆液性卵巢癌细胞系HO8910,WESTERN-BLOT检测转染前后细胞内HE4蛋白的表达效果.用四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法、平板克隆形成实验观察HE4基因对细胞增殖能力的影响,经细胞粘附实验、体外侵袭力实验比较转染前后细胞侵袭能力的变化.结果 Western-blot结果显示PcDNA3.1/HFA载体成功转染HO8910细胞并显著提高该细胞HE4基因的表达,细胞增殖能力较前无明显变化,侵袭能力明显下降.结论 通过增强HEA基因表达,可降低其侵袭能力,有望成为卵巢癌基因治疗的新的候选基因.
作者：陈瑶；牟霞；王穗海；杜红延；吴英松；李明 刊期： 2009年第06期
目的 创建一种新的结核、血吸虫抗体快速联合检测方法,并评价其在疾病预防中的潜在应用价值.方法 以血吸虫虫卵可溶性抗原(SEA)和结核分枝杆菌脂阿拉伯甘露糖(LAM)作为检测用抗原,分别点样在硝酸纤维素膜上,以胶体金-蛋白A结合物为检测标记物,采用自行设计的垂直流检测装置为抗原抗体反应体系,建立结核抗体、血吸虫抗体快速联合检测的金标免疫渗滤法(TB/Sj-DIGFA);用TS/Sj-DIGFA检测肺结核病人、血吸虫病人、健康人及流动人口血清样本,以敏感性、特异性等指标考核其诊断价值及应用价值.结果 TB/Sj-DIGFA检测36份肺结核病人血清和40份血吸虫病人血清的敏感性分别为94.4%(34/36)和100%(40/40);检测50人份健康人血清,对结核病和血吸虫病的特异性分别为80.0%(40/50)和100%(50/50).应用新创建的TB/Sj-DIGFA方法调查3120流动人口,查出结核抗体阳性675份,阳性率为21.6%(675/3120),血吸虫抗体阳性38人份,阳性率为1.22%(38/3120).结论 TB/Sj-DIGFA检测结核和血吸虫抗体具有较高的敏感性和特异性.该方法一次操作可同时完成结核和血吸虫2项特异性抗体测定,检测效率高,可节省大量人力和物力.
作者：顾炜峰；王有芳；王越；罗学辉；汤益；干小仙 刊期： 2009年第06期
目的 探讨单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)及其受体趋化因子受体2(CCR-2)经动脉粥样硬化相关因素刺激后表达量的变化情况.方法 密度梯度离心法从健康成人外周血中分离获得单个核细胞,体外培养48 h.给予氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)、C反应蛋白(CRP)及高密度脂蛋白(HDL)进行干预.干预后用实时荧光定量RT-PCR技术检测单核细胞MCP-1 mRNA和CCR2 mRNA的含量,ELISA法检测MCP-1蛋白含量.结果 ox-LDL+CRP组、ox-LDL、CRP处理组MCP-1和CCR2 mRNA表达水平和MCP-1蛋白含量明显高于对照组(P<0.05).而经HDL处理的单核细胞表达MCP-1和CCR2 mRNA水平下调,MCP-1蛋白含量低于对照组(P<0.05).结论 在体外培养的条件下.CRP和ox-LDL可以促进MCP-1和CCR2 mRNA表达,继而导致MCP-1含量增加,增强炎症反应的范围和强度.HDL可以有效的抑制MCP-1的表达.
作者：何非；陈爱华；宋旭东；张琼 刊期： 2009年第06期
目的 研究酵母来源的CO1在不同的环境下对蚊虫的引诱效果.方法 采用现场试验的方法,实验组为酵母粉与蔗糖溶液组成的混合溶液添加于诱蚊诱卵器中.对照组为去氯自来水添加于诱蚊诱卵器中,分别布放于地下车库、办公室内与绿化地带.布放后每隔24 h观察记录一次诱蚊数目及品种.结果 在地下车库实验组总诱捕622只蚊虫,其中白纹伊蚊228只,致倦库蚊394只,无蚊卵,诱蚊诱卵指数为100;对照组共诱捕81只蚊虫,其中白纹伊蚊53只,致倦库蚊28只,蚊卵268个,诱蚊诱卵指数为73.3.在办公室内实验组共诱蚊23只,均为致倦库蚊;对照组共诱蚊6只,其中白纹伊蚊1只,余为致倦库蚊,蚊卵30个,诱蚊诱卵指数为3.3.在绿化地带实验组仅引诱一只致倦库蚊,对照组共诱蚊32只.1只致倦库蚊,余均为白纹伊蚊,诱卵1322个,诱蚊诱卵指数为60.3种环境下的CO1组诱蚊总数量比较差别均有统计学意义(χ2=17.676,P=0.000).结论 酵母来源的CO1在3种不同环境下的诱蚊诱卵效果有显著差别,在地下车库等较封闭的空间具有较好的诱蚊效果,诱蚊数量显著高于去氯水组:但在空气流通良好的绿化地带却呈现与地下车库相反的结果.诱蚊效果显著低于去氯水组;办公室内两组诱蚊效果无差别.
作者：任旭琦；刘彬；向文龙；陈志勇；宋灿磊；俞守义；陈清 刊期： 2009年第06期
目的 观察创伤弧菌ATCC27562对常用消毒剂的抵抗力,为创伤弧菌消毒提供实验依据.方法 采用DGHM试验测定戊二醛、过氧乙酸及乙醇对创伤弧菌的小抑菌浓度(MIC)及小杀菌浓度(MBC),定性悬浮试验检测其对创伤弧菌的快有效杀菌时间.结果 戊二醛的MIC为0.31 g/L、MBC为10.00 g/L,过氧乙酸的MIC为0.04 g/L、MBC为0.31 g/L,乙醇的MIC为4.69%、MBC为37.50%;20 g/L戊二醛作用10 S杀灭创伤弧菌,5 g/L过氧乙酸作用10 s创伤弧菌被杀灭,75%(V/V)乙醇作用于创伤弧菌60 S将其有效杀灭.结论 创伤弧菌ATCC27562对常用消毒剂抗性较弱,常用浓度能将其迅速有效杀灭.
作者：王贵明；陈清；申洪 刊期： 2009年第06期
目的 构建人乳头瘤病毒16型L1基因和蛋白转导肽的Tat基因的融合表达载体,导人酿酒酵母表达系统进行诱导表达,为口服基因疫苗的制备打下基础.方法 以pBR322-HPV16质粒为模板扩增L1基因,与酿酒酵母表达载体pYES2连接.重组质粒再与自行设计的蛋白转导功能片段Tat连接,经测序鉴定后转入酿酒酵母表达菌株INVSc1诱导表达Tat-HPV16L1融合蛋白.结果 融合基因Tat-HPV16L1测序结果与预期完全符合,经过半乳糖诱导表达后进行SDS-PAGE电泳和Western blotting分析.结果 表明诱导表达成功.结论 成功构建和表达了融合表达载体pYES2-Tat-HPV16L1,为制备以酿酒酵母为运送载体的口服人乳头瘤病毒疫苗打下基础.
作者：张进芳；马文丽；危敏；赵慧；朱秀兰；郑文岭 刊期： 2009年第06期
目的 分泌表达重组登革病毒2型NS1蛋白,并制备兔抗NS1多克隆抗体.方法 应用毕赤酵母表达系统表达全长登革病毒2型NS1蛋白,制备抗原,免疫家兔;采集免疫血清,制备兔抗NS1蛋白多克隆抗体;应用Western-blot、ELISA法鉴定和检测抗体效价;经辛酸-硫酸铵法、亲和层析法纯化抗体,SDS-PAGE电泳检测抗体的纯度;用Western-blot、ELISA法检测纯化后IsG性质及效价.结果 重组NS1蛋白获得分泌表达,其免疫血清经Western-blot、ELISA法证实获得特异性兔抗NS1多克隆抗体,抗体效价为1:6000.结论 重组登革病毒2型NS1蛋白在毕赤酵母真核表达系统中高效表达,纯化产物有较强的免疫原性,成功获得特异性兔抗NS1多克隆抗体,为进一步研究登革病毒NS1蛋白及其抗体在登革病毒致病与免疫机制中的作用奠定了基础.
作者：江澜；汤云霞；尹悦；方丹云；周俊梅；江丽芳 刊期： 2009年第06期
目的 探讨保留肾单位手术(NSS)治疗肾血管平滑肌脂肪瘤(RAML)的安全性及有效性.方法 对56例采用NSS治疗的RAML患者的临床资料回顾性分析,其中肿瘤剜除术35例,肾部分切除21例,4例患者术前行选择性肾动脉栓塞术.结果 术中切除肿瘤平均直径(5.6±2.7)cm,术中平均失血量(140±75)ml,术后无大出血、尿瘘.51例患者获得随访,平均随访36月(6～120月),术后肾功能相对稳定,未见肿瘤复发.结论 保留肾单位手术是治疗RAML的较好方法,有效地控制出血和保护肾脏功能是手术成功的关键.
作者：余新立；廖勇彬；庞健；陈立新；黄晓生；吴荣海；程洲平；黄黎明；林绮平；孙明 刊期： 2009年第06期
目的 探索血浆对臭氧在水介质中杀菌作用的干扰效应,为医用臭氧对腹水等体液中细菌杀灭作用研究摸索臭氧作用的浓度及时间参数.方法 在含不同浓度血浆的生理盐水中加人大肠埃希菌(ATCC25922)和金黄色葡萄球菌(ATCC25923),悬液定量法计算高浓度臭氧(90 μg/mL)对其杀菌率;臭氧作用于含10.0%血浆的生理盐水,摸索臭氧有效杀菌的浓度和作用时间参数.结果 臭氧杀菌效果随生理盐水中血浆浓度的提高而降低,血浆含量大于10.0%后杀菌效果显著降低(P<0.05),90μg/mL臭氧作用20 min(流速12 ml/min)对含10.0%血浆的生理盐水中大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌杀菌率可分别达到100%、99.05%.不同浓度组(40 μg/mL、60 μg/mL、90μg/mL)的臭氧杀菌效果有显著性差异(P<0.05),臭氧作用不同时间(5 min、10min、20 min)杀菌效果亦有显著性差异(P<0.05),以浓度为90 μg/mL臭氧作用20 min杀菌效果好.结论 血浆可干扰臭氧在生理盐水中的杀菌作用,血浆含量在10.0%以下时影响作用较小,提高臭氧浓度、延长作用时间可提高杀菌率.
作者：孙婧；骆训武；张亚莉；万铁林；张明霞；郭亚兵 刊期： 2009年第06期
目的 建立淋巴细胞内磷酸化信号传导及转录激活子(STAT)的快速检测方法.方法 人单个核细胞或外周静脉血淋巴细胞用IL-6、IL-4和IFN-α1体外刺激15 min,运用流式细胞术检测胞内STAT3(pY705)、STAT6(pY641)和STAT1(pY701)磷酸化水平,并比较不同破膜剂对它的影响.结果 与0.2%皂素、90%甲醇比较,Purm buffer Ⅲ破膜剂破膜后,能够显著地提高淋巴细胞内STAT3的磷酸化水平(P<0.01).结论 经Perm buffer Ⅲ破膜后,运用流式细胞术可快速检测磷酸化STAT3、STAT6和STAT1.
作者：莫建福；罗宇维；孙尔维 刊期： 2009年第06期
目的 观察瑞舒伐他汀对大鼠颈动脉球囊损伤后细胞凋亡的影响.方法 36只雄性SD大鼠随机分为对照组、损伤组和治疗组,每组12只.损伤组和治疗组分别建立大鼠左侧颈动脉球囊损伤模型,右侧颈动脉未予球囊损伤.治疗组于损伤前3 d始连续每天给予瑞舒伐他汀5 mg/(kg·d)灌胃,对照组和损伤组予9g/L氯化钠溶液灌胃.术后14 d取左侧颈总动脉.进行HE染色和末端脱氧核苷酸转移酶介导的生物素-dUTP缺口标记技术(Terminal deoxynucleotidyl transferase biotin-dUTP nick end labeling,TUNEL)的凋亡检测.结果 共30只大鼠成功完成本次实验.①血管损伤14 d,可见明显的新生内膜:损伤组和治疗组的内膜面积、内膜/中膜面积的比值较对照组增大(P<0.05);与损伤组比较,治疗组内膜/中膜面积的比值减少,管腔面积增加26%(P<0.05).②对照组血管偶可见单个散在的凋亡细胞;损伤组凋亡细胞阳性率为(12.3±1.8)%,与对照组比较,差异有统计学意义(P<0.05);治疗组凋亡细胞数目增多,凋亡细胞阳性率达(26.8±3.2)%,与损伤组比较,差异有统计学意义(P<0.05).凋亡细胞主要位于新生内膜.结论 瑞舒伐他汀可抑制大鼠颈动脉球囊损伤后的内膜增生,可促进大鼠颈动脉球囊损伤后的细胞凋亡.瑞舒伐他汀促进细胞凋亡的作用可能与其抑制内膜增生有关.
作者：曾春苗；董少红；刘华东；李鹏 刊期： 2009年第06期
目的 了解景洪市肺吸虫病流行区20年后疫区疫情变化和溪蟹的自然感染情况.方法 从原流行区采集溪蟹,鉴定种类,用研磨水洗沉淀法、生物体视显微镜检查囊蚴或脱囊蚴并计数.将本次检查结果与周本江等1989年报告的结果进行比较,获得该流行区的纵向变化结果,分析引起变化的主要原因.结果 从原流行区共采集溪蟹474只,经鉴定全为景洪溪蟹:从溪蟹体内共检获95个囊蚴.经分类鉴定全部为小睾并殖吸虫囊蚴,并通过感染实验动物家猫获得成虫加以证实.溪蟹的自然感染率为10.8%,感染度平均为1.86.结论 景洪市同一流行区20年后发生了明显的变化,无论是溪蟹的种类、肺吸虫的虫种、溪蟹的自然感染率、感染度均出现了明显的下降.引起这些变化的主要原因是居民的健康意识增强和环境因素的改变所致.
作者：高忠萱；郑汝成；李林峰；周本江 刊期： 2009年第06期
目的 构建细胞色素P450 CYP4G19基因部分片段的原核表达载体并诱导其表达,纯化表达的融合蛋白并制备CYP4G19多克隆抗体.方法 应用RT-PCR扩增CYP4G19基因部分片段,产物经T-A克隆、测序鉴定,亚克隆入原核表达载体pET-28a,在大肠杆菌BL21(DE3)中诱导表达,镍离子亲和层析法纯化重组蛋白后,免疫小鼠,获得多克隆抗体,ELISA及Western.blot检测多抗的效价及特异性.结果 从德国小蠊cDNA中克隆出一段771bp的亲水性基因片段,在大肠杆菌中诱导表达出约32000 Mr、以包涵体形式存在的P450重组蛋白.将纯化、复性的重组蛋白免疫 9,得到了滴度高于1:10<'6>的高效价多克隆抗体.Western-blot显示此多抗能与32000 Mr的重组蛋白特异结合.并能识别天然的德国小蠊微粒体P450蛋白.结论 利用原核表达的CYP4G19融合蛋白具有良好的免疫原性.制备出效价高、特异性强的抗德国小蠊CYP4G19多克隆抗体,为下一步关于德国小蠊CYP4G19蛋白表达特性及其抗药性功能的深入研究提供了重要的实验工具.
作者：赵霞；张仁利；耿艺介；黄达娜；高世同；李晓恒；胡章立 刊期： 2009年第06期
热带医学杂志
主管:广东省科学技术协会
主办：广东省寄生虫学会 中华预防医学会
