何非；陈爱华；宋旭东；张琼
目的 构建细胞色素P450 CYP4G19基因部分片段的原核表达载体并诱导其表达,纯化表达的融合蛋白并制备CYP4G19多克隆抗体.方法 应用RT-PCR扩增CYP4G19基因部分片段,产物经T-A克隆、测序鉴定,亚克隆入原核表达载体pET-28a,在大肠杆菌BL21(DE3)中诱导表达,镍离子亲和层析法纯化重组蛋白后,免疫小鼠,获得多克隆抗体,ELISA及Western.blot检测多抗的效价及特异性.结果 从德国小蠊cDNA中克隆出一段771bp的亲水性基因片段,在大肠杆菌中诱导表达出约32000 Mr、以包涵体形式存在的P450重组蛋白.将纯化、复性的重组蛋白免疫 9,得到了滴度高于1:10<'6>的高效价多克隆抗体.Western-blot显示此多抗能与32000 Mr的重组蛋白特异结合.并能识别天然的德国小蠊微粒体P450蛋白.结论 利用原核表达的CYP4G19融合蛋白具有良好的免疫原性.制备出效价高、特异性强的抗德国小蠊CYP4G19多克隆抗体,为下一步关于德国小蠊CYP4G19蛋白表达特性及其抗药性功能的深入研究提供了重要的实验工具.
作者：赵霞；张仁利；耿艺介；黄达娜；高世同；李晓恒；胡章立 刊期： 2009年第06期
目的 探讨白三烯C4在哮喘发病中的作用.方法 采用ELISA法,分别测定56例支气管哮喘发作期.60例缓解期以及60例正常对照组血清中LTC4水平.结果 哮喘发作组和哮喘缓解组LTCA(14.63±2.85)ng/mL和(13.92±2.46)ng/mL水平显著高于正常对照组(2.42±0.36)ng/mL.而哮喘患者急性发作组和缓解组之间比较差异无统计学意义.结论 LTC4是哮喘发生发展的重要炎性因子.
作者：刘玉春；徐继庆；董惠翔；张波；林士军 刊期： 2009年第06期
目的 构建人乳头瘤病毒16型L1基因和蛋白转导肽的Tat基因的融合表达载体,导人酿酒酵母表达系统进行诱导表达,为口服基因疫苗的制备打下基础.方法 以pBR322-HPV16质粒为模板扩增L1基因,与酿酒酵母表达载体pYES2连接.重组质粒再与自行设计的蛋白转导功能片段Tat连接,经测序鉴定后转入酿酒酵母表达菌株INVSc1诱导表达Tat-HPV16L1融合蛋白.结果 融合基因Tat-HPV16L1测序结果与预期完全符合,经过半乳糖诱导表达后进行SDS-PAGE电泳和Western blotting分析.结果 表明诱导表达成功.结论 成功构建和表达了融合表达载体pYES2-Tat-HPV16L1,为制备以酿酒酵母为运送载体的口服人乳头瘤病毒疫苗打下基础.
作者：张进芳；马文丽；危敏；赵慧；朱秀兰；郑文岭 刊期： 2009年第06期
目的 评价血清标志物糖类抗原125(CA125)、15.3(CA15.3)、242(CA242)联合检测对乳腺癌诊断的价值.方法 对长海医院肿瘤科2003年9月至2005年9月期间收治的73例乳腺癌患者及60例健康人血清进行CA125、CA15.3、CA242检测.结果 乳腺癌组三种肿瘤标志物检测的阳性率显著高于对照组(χ2检验,P<0.01).乳腺癌组CA125、CA15.3、CA242及联合检测的阳性率由高到低依次为联合检测(68.49%)、CA15.3(49.32%)、CA125(34.25%)、CA242(28.77%),CA15.3阳性率与三种标志物联合检测的阳性率差异有统计学意义(χ2=5.546,P<0.05),即联合检测的阳性率高于CA15.3单独检测的阳性率.结论 CA125、CA15.3、CA242联合检测能明显提高乳腺癌的检出率.
作者：宋红伟；王雅杰 刊期： 2009年第06期
目的 分泌表达重组登革病毒2型NS1蛋白,并制备兔抗NS1多克隆抗体.方法 应用毕赤酵母表达系统表达全长登革病毒2型NS1蛋白,制备抗原,免疫家兔;采集免疫血清,制备兔抗NS1蛋白多克隆抗体;应用Western-blot、ELISA法鉴定和检测抗体效价;经辛酸-硫酸铵法、亲和层析法纯化抗体,SDS-PAGE电泳检测抗体的纯度;用Western-blot、ELISA法检测纯化后IsG性质及效价.结果 重组NS1蛋白获得分泌表达,其免疫血清经Western-blot、ELISA法证实获得特异性兔抗NS1多克隆抗体,抗体效价为1:6000.结论 重组登革病毒2型NS1蛋白在毕赤酵母真核表达系统中高效表达,纯化产物有较强的免疫原性,成功获得特异性兔抗NS1多克隆抗体,为进一步研究登革病毒NS1蛋白及其抗体在登革病毒致病与免疫机制中的作用奠定了基础.
作者：江澜；汤云霞；尹悦；方丹云；周俊梅；江丽芳 刊期： 2009年第06期
目的 探讨血小板源性生长因子(PDGF)和纤维连接蛋白(FN)诱导人胚胎肺成纤维细胞(HFL1)增殖的磷酸酰基醇-3-激酶(P13K)信号转导通路.方法 采用不同浓度的PDGF和FN分别刺激HFL1并观察P13K抑制剂wortmannin(WMN)对PDGF、FN诱导HFL1增殖作用的影响.用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测各组细胞增殖情况.结果 PDGF和FN对HFL1的诱导增殖作用明显,并呈剂量依赖性升高趋势,二者均在50 ng/mL时作用显著;P13K抑制剂wortmannin可抑制PDGF和FN诱导的HFL1细胞增殖.结论 PDGF和FN诱导HFL1的细胞增殖可以通过P13K信号转导途径实现.
作者：马跃文；柏广涛；张美侠 刊期： 2009年第06期
目的 探讨产后出血急症子宫切除术治疗的时机、指征及高危因素,以期降低产后出血急症子宫切除的发生率及患者死亡率.方法 对本院2000年6月至2008年6月因产后出血行急症子宫切除术的30例病例进行回顾性分析.结果 围产期急症子宫切除率为0.18%(30/16546),其中剖宫产组急症子宫切除率为0.24%(24/9900),阴道分娩组急症子宫切除率为0.09%(6/6616),两者对比差异有统计学意义(P<0.05).30例中有2例死亡(其中1例为羊水栓塞,另1例为多脏器功能障碍综合征),急症子宫切除术治疗后抢救成功率为93.33%.30例产后出血行急症子宫切除术患者原发病因:胎盘因素16例.软产道裂伤4例,宫缩乏力4例,羊水栓塞3例,子宫破裂2例,凝血功能障碍伴多脏器功能受损1例.结论 本文胎盘因素是产后出血围产期急症子宫切除术主要的手术指征.加强前置胎盘、胎盘植入的产前诊断,重视孕产妇管理有望降低围产期急症子宫切除率及孕产妇死亡率.
作者：刘付春；陈敦金 刊期： 2009年第06期
目的 采用羧基荧光素二醋酸盐琥珀酰亚胺酯(carboxyfluorescin diacetate succinimidyl ester, CFSE)与溴化脱氧尿嘧啶核苷(5-bromo-2-deoxyuridine,Brdu)两种细胞标记物观测肝移植术后受体骨髓间充质干细胞(MSCs)肝内分布情况.并对两种方法进行比较.方法 在已构建的DA-Lewis大鼠原位肝移植模型及提取培养Lewis大鼠MSCs的基础上分别用CFSE和Brdu对Lewis来源的MSCs进行标记,术中经门静脉输注,通过荧光显微镜和免疫组织化学法观测术后2mo内各时间点受体肝组织内MSCs的分布情况.结果 CFSE细胞标记率约为(94.1±1.4)%.受体肝组织第1、7、14天内有CFSE标记的MSCs聚集.对照组第5天肝组织内发布的CFSE标记MSCs消失.BrdU细胞标记率约为(90.3±3.5)%.受体肝组织第14天、1个月、2个月可见Brdu阳性的MSCs分布,对照组相应时间点肝组织内未发现Brdu阳性的MSCs.结论 CFSE和Brdu均为MSCs的良好标记物.CFSE标记细胞后荧光迅速减弱,适用于短期示踪.Brdu标记细胞后可维持较长时间,适用于长期示踪.两种标记方法均是MSCs较为简单有效的方法,实验显示受体MSCs大部分分布于移植肝脏.
作者：谭浩翔；汪谦；张会迎；高毅 刊期： 2009年第06期
目的 探讨卵巢癌基因HE4对卵巢癌细胞增殖及侵袭能力的影响.方法 构建针对HE4基因的PcDNA3.1/HFA载体,脂质体法介导PcDNA3.1/HE4载体转染人浆液性卵巢癌细胞系HO8910,WESTERN-BLOT检测转染前后细胞内HE4蛋白的表达效果.用四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法、平板克隆形成实验观察HE4基因对细胞增殖能力的影响,经细胞粘附实验、体外侵袭力实验比较转染前后细胞侵袭能力的变化.结果 Western-blot结果显示PcDNA3.1/HFA载体成功转染HO8910细胞并显著提高该细胞HE4基因的表达,细胞增殖能力较前无明显变化,侵袭能力明显下降.结论 通过增强HEA基因表达,可降低其侵袭能力,有望成为卵巢癌基因治疗的新的候选基因.
作者：陈瑶；牟霞；王穗海；杜红延；吴英松；李明 刊期： 2009年第06期
目的 观察日本血吸虫紫外线致弱尾蚴疫苗(UVC)免疫动物攻击感染后的局部组织免疫病理变化.方法 将70只C57BL/6小鼠随机分为疫苗免疫组和感染对照组.疫苗组小鼠接种紫外线致弱日本血吸虫尾蚴后5周,再经腹部皮肤攻击感染正常日本血吸虫尾蚴(800±50)条;感染对照组经皮肤感染同量尾蚴.于攻击感染后6～120 h的不同时间点各剖杀小鼠5只,取攻击部位皮肤及/或肺组织,进行病理学观察.结果 UVC疫苗免疫小鼠攻击感染日本血吸虫尾蚴后,皮肤炎症反应较感染对照出现早、反应强烈、持续时间长,EOS百分比高,但肺部出血斑点出现时间(72 h)迟于感染对照组(48 h).72～120 h,疫苗组小鼠肺部局灶性炎症明显,肉芽肿样结节形成,肺泡壁多正常.而感染对照组小鼠肺组织炎症轻,但肺泡壁水肿明显,且有较多红细胞渗出.结论 紫外线致弱尾蚴疫苗免疫增强了小鼠皮肤及肺组织的细胞反应及其杀虫作用.
作者：陈家旭；刘述先；曹建平；徐裕信；宋光承；郭俭 刊期： 2009年第06期
脑寄生虫病临床表现复杂多样,病原学诊断困难,影像学检查对诊断可提供重要的辅助作用.本文通过对目前常见的几种脑部寄生虫病的影像学表现要点作一总结,为脑寄生虫病的鉴别与正确诊断提供有效的资料.
作者：顾福祥；顾金保；陈晓光 刊期： 2009年第06期
目的 探讨重组SAG1抗原对弓形虫IgG和IgM抗体的检测效果.方法 用rSAG1作抗原建立免疫印迹方法(rSAG1-WB),与玻片虫体过氧化物酶免疫染色试验(TSHE)平行检测不同来源血清.结果 15例病原学检查阳性小鼠血清和5例免疫兔血清的IsG抗体均为阳性,30例正常小鼠血清和10例正常兔血清均未出现阳性反应.rSAG1-WB检测可疑弓形虫病患者血清阳性率为60.3%(38/63),献血员血清阳性率为6%(3/50),与TSHE检测结果(65.1%和4%)均无统计学差异(P>0.05).1例IgM强阳性血清和13例IgM弱阳性血清在Western-blot检测中分别出现相应的强阳性与弱阳性反应,50例献血员血清均未出现IgM阳性反应,结果与TSHE一致.结论 rSAG1-WB检测弓形虫IgG和IgM抗体均具有高度的敏感性和特异性,与TSHE的符合率高.
作者：邹梦晨；言慧；吴煙；陈晓光；李华 刊期： 2009年第06期
目的 全面、准确地掌握奉节县居民食用合格碘盐的情况,确保碘缺乏病防治措施的有效实施,为持续消除碘缺乏病工作提供科学依据.方法 按照<重庆市碘盐监测方案>规定的抽样方法及盐碘测定方法对居民户食用盐进行监测.结果 2004-2008年监测居民户家庭食用盐每年360份,共1800份,碘含量均数为30.75 mg/kg.变异系数为21.06,年份间碘含量差异有统计学意义(F=13.755,P<0.05),呈明显线性下降趋势(R=0.12,P<0.05);碘盐覆盖率为99.39%,碘盐合格率为94.69%,合格碘盐食用率为94.11%,非碘盐率为0.61%,年份间差异均无统计学意义(P>0.05).结论 奉节县实现基本消除碘缺乏病阶段目标后,居民合格碘盐食用率保持在90%以上,成果巩固.各级政府应持续重视.完善监督监测机制,确保碘盐质量,以实现消除碘缺乏病的目标.
作者：雷兵；刘学刚；廖和平 刊期： 2009年第06期
弓形虫是重要的机会性感染病原体,可导致人兽共患弓形虫病,目前尚未找到理想的治疗药物.本文综述了抗生素类药物、其它类化学药物、生物制剂及中药抗弓形虫作用的新研究进展,对抗弓形虫药进行了总结.其中复方中药在治疗急性弓形虫病有很大的应用价值,西药联合用药,可适当减少药量、降低不良反应和耐药性的产生,治疗效果明显优于单独用药.
作者：朱穗京；田春林；杨雯 刊期： 2009年第06期
目的 通过室间质量考评,规范揭阳市艾滋病检测筛查实验室的建设和管理,确保检测质量.方法 分析2008年揭阳市医疗卫生机构的13个艾滋病检测筛查实验室的质量考评情况.结果 考评综合成绩,13个艾滋病检测筛查实验室全部合格,取得良好以上成绩的实验室占69.23%.医疗、妇幼机构考评成绩较差,主要问题在于弱阳性样品的检测出现错检、漏检情况.总体分析,本次考评出现问题的主要环节是室内质控、定量仪器的校准及检定、生物安全防护.结论 全市艾滋病检测筛查实验室总体上检测质量较好,基本符合艾滋病筛查实验室的要求,弱阳性样品检测能力、质量控制和生物安全是薄弱环节.
作者：洪艳苹 刊期： 2009年第06期
为培养和提高学生的创新能力,对医学机能学实验采取了增加综合性实验比重、开设设计性实验、建立虚拟实验室及开展学生科研等改革措施.多年的实践表明,学生的创新能力和科研素质得到提高,为大学生素质教育提供了新思路.
作者：谢红艳；王桂房 刊期： 2009年第06期
目的 了解目前广州市不同规模超市自制食品的卫生状况.方法 采用分层抽样的方法,抽取大型超市18间、中型超市4间、小型超市14间作为调查对象.采用现场监督检查、询问和填写调查表的方法进行调查.结果 对不同规模超市生熟交叉污染、预进间的设置、空气消毒设备和空调设置等方面进行了比较,大型、中型超市成品区域的设施方面都比小型超市成品区域设施规范,差异均有统计学意义(P<0.05).超市中自制食品存在安全隐患,尤以小型超市为甚.结论 应重点加强对小型超市自制食品卫生状况的监管.
作者：黄亮宇；许晓晖；许斌 刊期： 2009年第06期
目的 观察瑞舒伐他汀对大鼠颈动脉球囊损伤后细胞凋亡的影响.方法 36只雄性SD大鼠随机分为对照组、损伤组和治疗组,每组12只.损伤组和治疗组分别建立大鼠左侧颈动脉球囊损伤模型,右侧颈动脉未予球囊损伤.治疗组于损伤前3 d始连续每天给予瑞舒伐他汀5 mg/(kg·d)灌胃,对照组和损伤组予9g/L氯化钠溶液灌胃.术后14 d取左侧颈总动脉.进行HE染色和末端脱氧核苷酸转移酶介导的生物素-dUTP缺口标记技术(Terminal deoxynucleotidyl transferase biotin-dUTP nick end labeling,TUNEL)的凋亡检测.结果 共30只大鼠成功完成本次实验.①血管损伤14 d,可见明显的新生内膜:损伤组和治疗组的内膜面积、内膜/中膜面积的比值较对照组增大(P<0.05);与损伤组比较,治疗组内膜/中膜面积的比值减少,管腔面积增加26%(P<0.05).②对照组血管偶可见单个散在的凋亡细胞;损伤组凋亡细胞阳性率为(12.3±1.8)%,与对照组比较,差异有统计学意义(P<0.05);治疗组凋亡细胞数目增多,凋亡细胞阳性率达(26.8±3.2)%,与损伤组比较,差异有统计学意义(P<0.05).凋亡细胞主要位于新生内膜.结论 瑞舒伐他汀可抑制大鼠颈动脉球囊损伤后的内膜增生,可促进大鼠颈动脉球囊损伤后的细胞凋亡.瑞舒伐他汀促进细胞凋亡的作用可能与其抑制内膜增生有关.
作者：曾春苗；董少红；刘华东；李鹏 刊期： 2009年第06期
目的 研究安神方颗粒对失眠造模大鼠中枢神经递质的影响.方法 60只Wistar大鼠随机方法分为中药高、中、低剂量组和生理盐水组4组;采用限制运动方法制备大鼠焦虑抑郁失眠模型,同时给予药物干预.15 d后,处死并冰台上分离大鼠海马及下丘脑,冷冻离心后分离上清液,高效液相色谱法测定谷氨酸(GLU),γ-氨基丁酸(GABA)含量.结果 海马及下丘脑GLU含量下降(P<0.05,P<0.01),GABA含量升高(P<0.05,P<0.01);且海马部神经递质含量变化与药物浓度成正相关性.结论 中药安神方颗粒可以通过调节中枢神经递质,如谷氨酸(GLU)和γ-氨基丁酸(GABA),从而达到治疗失眠症目的 .
作者：吴海波；熊嘉玮；陈宝田 刊期： 2009年第06期
目的 为了掌握疟疾疫情和按蚊密度动态以及影响疟疾流行的相关因素,为今后库区疟疾防治提供基础数据和依据.方法 收集、整理三峡库区与疟疾流行的相关资料、建国后疟疾流行概况、媒介种群及分布等资料.1999年建立三峡库区疟疾监测点.监测疟疾疫情和按蚊种群、密度变化动态.结果 收集、整理了三峡库区的基线资料.三峡库区历史上曾有间日疟和恶性疟流行,20世纪60年代后无恶性疟发生,建国初期疟疾大流行,70年末控制流行.传疟媒介主要为中华按蚊.监测结果显示,疟疾疫情稳定,年发病控制在1/万以下;发热病人血检和儿童IFAT检测结果均为阴性;传疟媒介5～10月叮人率在1～9.6只/人·夜之间,牛房密度在6～360只/人工小时之间.结论 目前,疟疾年发病率控制在1/万以下,但是,传染源存在,媒介广泛分布,水库建成蓄水后,流速减缓、水面增宽、消落带积水均为按蚊孳生提供了有利条件,开展监测是必要的.
作者：王奎；勾能；雷群建；周万江；蒋和宏 刊期： 2009年第06期
热带医学杂志
主管:广东省科学技术协会
主办：广东省寄生虫学会 中华预防医学会
