罗德兴;高晓枫;蓝胜文
目的 克隆微小RNA hsa-miR-26a并构建其慢病毒表达载体.方法 将PCR扩增得到的miR-26a前体序列和pIVTHM载体经双酶切后连接产生pIVTHM-miR-26a慢病毒表达载体,双酶切后测序鉴定,筛选阳性克隆.用pIVTHM-miR-26a、psPAχ2和pMD2.G 3质粒共转染包装细胞293FT,包装产生慢病毒.以293FT细胞绿色荧光蛋白(green fluorescent protein,GFP)的表达水平测定病毒滴度.结果 经双酶切鉴定和测序证实,成功构建了miR-26a的慢病毒表达载体pIVTHM-miR-26a.倒置荧光显微镜下观察可见包装细胞293FT呈绿色荧光,并测得病毒滴度为5×105TU/ml.成功构建hsa-miR-26a的慢病毒表达载体.为深入研究miR-26a的生物学功能奠定了基础.
作者:鲁娟;王爽;揭荣荣;姚开泰 刊期: 2008年第05期
目的 探讨妊娠合并甲状腺功能亢进症的母儿结局和临床处理.方法 回顾性分析2003年1月至2007年12月在我院住院分娩的55例妊娠合并甲状腺功能亢进症患者的临床资料.将其分为病情控制组(37例)和病情未控制组(18例),并进行对照研究.结果 妊娠合并甲状腺功能亢进症发生率5.4‰,病情控制组/病情未控制组妊娠糖尿病、妊娠高血压疾病、甲亢性心脏病、引产、早产、流产、小于胎龄儿、死胎发生率分别为2.7%/38.9%、0%/27.8%、0%/27.8%、0%/22.2%、2.7%/50.0%、0%/16.7%、8.1%/44.4%、0%/27.8%.病情控制组明显低于病情未控制组(P<0.01或0.05);无孕产妇死亡,无新生儿出生缺陷.病情未控制组患者的医疗费用显著高于病情控制组(P<0.001).以丙基硫氧嘧啶为主的药物治疗安全有效.结论 妊娠合并甲状腺功能亢进症孕前和孕期及早发现并规范治疗,并监测以FT3、FT4为主而非TSH的甲状腺功能,维持其正常、稳定,可以有效减少母儿并发症的发生.
作者:李斌;李映桃 刊期: 2008年第05期
目的 评价融合蛋白基因质粒(pFP)联合在体电脉冲(EP)介导的HBV DNA疫苗(pS2.S)免疫HBV转基因(Tg)小鼠的治疗效果.方法 HBV Tg小鼠随机分成3组,每组5只,分别为pS2.S+pFP、pS2.S+PcDNA3.1免疫治疗和PcDNA3.1对照组.联合免疫质粒总剂量40 μg/只,按1:1比例混合接种.初次免疫后第4、8周分别进行第一、二次增强免疫,免疫前后分别检测血清学、组织学及HBV特异性免疫应答.结果 HBVDNA血清定量检测结果,pS2.S+pFP组免疫第8周(13 317±2 539)拷贝/ml、第12周(6 462±3 359)拷贝/ml时分别较免疫前(36 159±7 769)拷贝/ml明显减低,差异具有统计学意义(P<0.01);pS2.S+pcDNA3.1组第4周(20 618±9 523)拷贝/ml及第8周(23 818±5 319)拷贝/ml时均较其免疫前水平(36 090±4 421)拷贝/ml明显降低(P<0.01),但不能持续到12周(27 691±13 071)拷贝/ml,并明显高于此时pS2.S+pFP组水平,差异有统计学意义(P<0.01);观察终点(12周)pS2.S+pFP组Tg小鼠个体血清HBV DNA及肝组织HBsAg表达水平降低的同时,伴随其血清ALT水平及HBsAg特异性IFN-γ分泌细胞数目的 升高.结论 Th1类细胞因子IL-2/IFN-γ融合蛋白基因表达质粒能够增强HBV DNA疫苗抑制Tg鼠HBV DNA复制和表达的治疗作用.
作者:杨富强;陈光明;饶桂荣;徐宇虹;赵勇刚;何晓嫱;孙希海;侯金林 刊期: 2008年第05期
目的 探讨紫外线减毒弓形虫免疫对小鼠旋毛虫感染肌肉期组织病理的影响.方法 ICR小鼠分为两组,实验组为紫外线减毒弓形虫免疫3周后再感染旋毛虫,对照组为旋毛虫单独感染.结果 与旋毛虫单感染相比,小鼠预先经紫外线减毒弓形虫免疫再感染旋毛虫后23 d,其肌肉期幼虫周围的炎症细胞浸润明显减轻,肌肉组织的病理损伤也明显减轻.结论 紫外线减毒弓形虫免疫对小鼠旋毛虫感染肌肉期的组织病理有一定的免疫调节作用.
作者:郑焕钦;朱佩娴;许少明;张瑞琳;黄世光;吕芳丽 刊期: 2008年第05期
目的 研究江门地区成人腹泻者星状病毒感染情况及型别特点.方法 收集江门地区病毒性腹泻流行期散发成人腹泻患者粪便标本,经胶体金法、RT-PCR法分别检测轮状病毒和诺如病毒后,运用实时荧光PCR进行星状病毒检测,并对阳性标本进行RT-nested PCR测序,鉴定型别.结果 56份成人病毒性腹泻粪便标本中,荧光PCR法测出3份星状病毒株(5.4%),经RT-PCR测序1份,序列分析鉴定为HAtsV-4型.结论 江门成人散发病毒性腹泻者存在星状病毒感染,型别为HAstV-4,未发现多致泻病毒混合感染.
作者:徐巧华;唐亚丽;聂军;蔡练功;李建栋;戴迎春;陈清;俞守义 刊期: 2008年第05期
目的 比较狂犬病疫苗免疫后血清抗体酶联免疫吸附试验(ELISA)与快速免疫荧光灶抑制试验(RFFIT)两种检测方法.方法 对93名研究对象采用0、3、7、14和28 d程序进行暴露后免疫,分别采用ELISA法与WHO认可的金标法RFFIT法检测免疫D0、D3、D7、D14、D45 d的血清抗体.结果 免疫D0、D3、D7、D14、D45 d ELISA法检测抗体阳性率分别为8.6%、11.8%、22.6%、49.6%、86%,RFFIT法检测抗体阳性率分别为0%、0%、22.58%、100%、100%,ELISA法与RFFIT法阳性符合率分别为0%、0%、34.8%、100%、100%;阴性符合率分别为100%、100%、81.4%、0%、0%.结论 ELISA法检测狂犬病疫苗免疫后血清抗体,免疫早期D0、D3、D7假阳性率较高,免疫D14、D45则假阴性率较高.建议采用WHO认可的方法做检测.
作者:刘华章;黄桂花;曹庆;刘远 刊期: 2008年第05期
目的 探讨慢性乙型肝炎患者抗病毒治疗与血清脂质水平的关系.方法 测定50例慢性乙型肝炎患者抗病毒治疗前后的的血清总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、血清载脂蛋白A1(apaA1)和载脂蛋白B(apoB)和HBV-DNA,并进行对比分析.结果 慢性乙型肝炎患者血清的脂质水平随着血清HBV DNA载量高低程度而变化,随着病毒载量的升高而逐渐降低,抗病毒治疗前后比较,差异有统计学意义(P<0.05).结论 测定血清脂质水平对判断较重的慢性肝炎肝组织实质细胞的损害有一定的价值.抗病毒治疗可以帮助恢复慢性乙型肝炎患者的血脂代谢.
作者:卢罗生 刊期: 2008年第05期
目的 了解番禺区狂犬病门诊暴露人群的流行病学特征,为制定狂犬病预防策略提供科学依据.方法 对2006-2007年在狂犬病预防门诊接受诊治的狂犬病门诊暴露人群进行描述性流行病学分析.结果 2006-2007年番禺区共报告狂犬病暴露者19 532人,两年均无因本地动物伤害而引起的狂犬病病例报告.动物伤人一年四季均可发生,其中以7~10月相对较多,第三季度共发生5 574例.暴露者中男性占56.43%,女性占43.57%.所有暴露者中15~44岁占51.22%.中心城区的暴露水平较周边地区高.伤人动物以犬为主,占87.82%,受伤部位以下肢为主共10 190例,占52.17%,暴露人员中以Ⅱ度暴露多共18 193例,占93.14%.结论 当前控制狂犬病流行需加强养犬管理,有效地降低人群狂犬病暴露水平:加强狂犬病防治等相关知识的宣传教育,提高人群的自我保护意识等综合措施,以控制狂犬病的发生.
作者:陈光艳;许晓茵;李伟强 刊期: 2008年第05期
目的 探讨菌群失调对全身及肠道局部免疫功能的影响.方法 用林可霉素灌胃制备小鼠肠道菌群失调模型,进行肠道菌群定量分析,同时MTT法检测脾淋巴细胞增殖活性、ELISA法检测肠粘膜sIgA、血清及肠组织IL-2的含量.结果 小鼠菌群失调后,脾淋巴细胞对丝裂原的反应性降低(P<0.05),肠粘膜sIgA、血清及肠组织IL-2含量均较正常对照组低(P<0.05).结论 抗生素致肠道菌群失调后可降低机体全身及肠道局部免疫功能.
作者:鞠宝玲;唐小云;张红军;海艳洁;陆叶 刊期: 2008年第05期
目的 探索金黄色葡萄球菌肠毒素B(SEB)对实验性支气管哮喘小鼠肺组织Th0细胞分化的在体调节和对气道炎症的作用.方法 32只15~17 d BALB/c小鼠,随机分为4组:对照组、模型组、金黄色葡萄球菌组、金黄色葡萄球菌肠毒素B(SEB)组.用卵蛋白(OVA)致敏和激发建立小鼠慢性哮喘模型,在致敏前14 d对幼年鼠做金黄色葡萄球菌或SEB预防性腹腔注射.观察记录小鼠的耗氧量、肺组织切片、支气管肺泡灌洗液(BALF)中炎性细胞及相关细胞因子等的改变.结果 金黄色葡萄球菌组与模型组相比.肺组织病理切片结构紊乱减轻、炎症细胞明显减少,小鼠耗氧量降低(5.24±0.12 vs 5.59±0.18),BALF中IL-4水平明显下降(44.94±4.51 vs 29.37±4.17),IFN-γ水平明显增加(19.61±3.83 vs 29.33±4.04),SEB组也有上述作用(耗氧量:5.09±0.20;细胞介素4:36.68±5.10;γ干扰素:24.27±3.46).结论 金黄色葡萄球菌能明显减轻实验性哮喘的气道炎症,纠正哮喘小鼠肺组织中Th1/Th2细胞因子的失衡,其作用可能是通过其分泌的SEB.
作者:孔令恩;陆丽;叶英俊;林明佳 刊期: 2008年第05期
高血压是多基因遗传和多个环境因素相互作用的结果.对不同类型高血压动物模型的建立进行了总结,为研究高血压发病机制及研制抗高血压的新药提供有效的方法.
作者:崔慧慧;杨建一;李莉 刊期: 2008年第05期
目的 了解院前急救人员的心理健康状况.方法 应用焦虑自评量表(SAS)及抑郁自评量表(SDS)对惠州市区4所综合性医院136名院前急救人员,124名普通病房的医务人员进行了问卷调查,并进行对比分析.结果 院前急救人员SAS及SDS评分、抑郁和焦虑的发生率均比普通病房人员高(P<0.05).结论 院前急救人员的工作压力大,精神压力高,职业成就感低,是导致其心理健康状况差的原因.
作者:唐群英;乐胜;王国标;刘发妹 刊期: 2008年第05期
树突状细胞(dendritic cells,DCs)作为机体免疫的启动者和调控者,成为目前医学研究的热点.小鼠髓源性树突状细胞(bone marrow derived dendritic cell,BMDC)作为研究人DC的良好体外模型,其体外诱导技术一直受到重视和关注,近年来该技术发展迅速并得到广泛的应用.本文对常用的体外诱导小鼠髓源性树突状细胞的方法和影响因素的研究作一综述.
作者:周何军;吴忠道 刊期: 2008年第05期
目的 探讨吸烟与听力损失的关系以及吸烟和职业性噪声对听力损失的交互作用.方法 利用回顾性队列研究,选择广州市某大型空调生产企业连续性噪声作业人员254名吸烟者为吸烟组,在相同的噪声暴露环境中选择154名不吸烟者为非吸烟组,两组间除吸烟外,其它均均衡可比.按照<作业场所噪声测量规范>(WS/T 69-1996)要求对噪声暴露作业场所进行测点选择和噪声强度测量[dB(A)],并计算累积噪声暴露量(CNE).按GB7583-87要求,对工人进行左、右耳500~6000 Hz内6个频率的纯音气导听阈测试.自行设计问卷对研究对象进行调查,问卷内容包括一般情况、个人生活史、职业史、噪声暴露史、家族性耳聋史以及耳毒性药物使用史等.结果 同一噪声暴露环境下,吸烟组左、右耳高频(3 000~6 000Hz)听阈位移均显著高于非吸烟组(P<0.01).吸烟是听力损失独立的危险因素,二者间存在剂量反应关系(χ2=18.464,P<0.001),吸烟每天20支以上听力损失的相对危险度是不吸烟的3.464倍(95%CI:1.739~6.901).累积噪声量达80 dB(A)以上时,吸烟和职业噪声听力损失的RR值分别为3.443(95%CI:1.182~10.024)和4.667(95%CI:1.199~18.169),吸烟与职业噪声联合作用RR值为10.000(95%CI:3.526~28.360),大于两个变量独立作用之和.结论 吸烟是听力损失独立的危险因素,在高强度噪声暴露情况下.吸烟和职业噪声暴露对听力损失可能存在协同作用.
作者:李旭东;李永胜;郭晓;刘移民;肖吕武;肖启华;何国权;吴琳 刊期: 2008年第05期
目的 检测临床分离肠球菌的耐药和毒力因子,比较粪肠球菌和屎肠球菌的耐药性和毒力特征.方法 采用琼脂稀释法检测肠球菌对万古霉素(VAN)、四环素(TET)、环丙沙星(CIP)、红霉素(ERY)、复方新诺明(SMZ)、替考拉宁(TEC)、克林霉素(CLI)的耐药性;采用微量板测定肠球菌的生物膜形成能力;观察肠球菌的β溶血和明胶溶解结果,同时用PCR方法检测相应基因cylA和gelE.结果 粪肠球菌和屎肠球菌的耐药率分别为0%~100%和3.23%~96.77%,后者对环丙氟哌酸、红霉素的耐药程度高于前者.β溶血试验阳性率为19.23%,cylA基因阳性率为35.38%;明胶表型阳性率为21.54%,gelE阳性率为40.0%,其中有46.15%(12/26)阳性者未出现相应表型;生物膜形成检出率为36.92%;粪肠球菌3种毒力因子(表型和基因型)的阳性率均高于屎肠球菌.结论 屎肠球菌耐药率高于粪肠球菌,粪肠球菌毒力因子阳性率高于屎肠球菌.
作者:吴敏;陈清;胡族琼;江凌晓;龙军 刊期: 2008年第05期
1 案例资料1.1 简要案情2007年3月7日,在一烂尾楼西侧楼梯一楼至地下室的楼梯上发现一具尸体.
作者:余礼聪;吕国丽;王江峰 刊期: 2008年第05期
<微生物学及检验>是一门理论与实践紧密结合的课程,为使高专医学检验专业学生更好地掌握其理论知识和实验操作技能,并培养他们的创新能力和科学素养,我们进行了大胆的探索与尝试.教学质量明显提高.
作者:赵晋英;王秀虎;黄泽智;钟方为;李艳伟 刊期: 2008年第05期
目的 探讨HBsAg(-)/HBeAg(+)/HBcAb(+)/preS1Ag(+)少见血清学模式形成的原因.方法 采用聚合酶链反应(PCR)、单链构象多态性分析(SSCP)、异源双链分析(HA)和基因测序的方法,对该少见模式乙肝病毒携带者HBV S基因进行分析,并与其母亲及参考序列HBV S基因进行比较,分析其变异情况.结果 该少见模式乙肝病毒携带者与其母亲HBV S基因PCR扩增结果均为阳性,经SSCP、HA和核苷酸序列比对分析.两者HBV S基因多态性不明显,同源性为99.82%.与其母亲或参考序列(AF411409)比对,该少见模式乙肝病毒携带者HBV S基因在第353位由野生型的C变为A,从而使HBsAg 118位氨基酸由苏氨酸变为赖氨酸(aa118T→K).结论 该少见模式乙肝病毒携带者所感染的HBV在HBsAg第118位氨基酸上错义突变(T→K),改变了HBsAg的空间结构和抗原性,影响了HBsAg与抗-HBs的结合能力.
作者:祝玲玲;朱平安;梁汉章;赖秀花;张松;谭萍;汪世平 刊期: 2008年第05期
目的 构建弓形虫可遗传及可诱导的RNAi载体系统,为弓形虫基因功能研究提供工具.方法 通过PCR和酶切连接,首先构建弓形虫主要表面抗原1(SAG1)基因启动子驱动的绿色荧光蛋白基因载体pBSK-SAG1/5UTR-eGFP-SAG1/3UTR(pBSK-SAG1/GFP),然后构建以弓形虫热休克蛋白HSP70基因启动子驱动的反向重复序列RNAi载体pBSK-HSP70/5UTR-IntronC-HSP70/3UTR,将载体pBSK-SAG1/GFP中的SAG1/5UTR-eGFP-SAG1/3UTR片段克隆到载体pBSK-HSP70/5UTR-IntronC-HSP70/3UTR中形成载体pBSK-GFP-Hairpin,再将该载体中的GFP-Hairpin片段克隆到载体pHANA-0.5中形成弓形虫可遗传及可诱导的RNAi载体系统pHANA-hairpin.通过PCR分别扩增SAG1和缓殖子蛋白1(BAG1)基因的正向和反向序列,通过酶切连接.将正向和反向序列克隆到载体pHANA-hairpin中.分别构建靶向SAG1和BAG1基因的RNAi载体pHANA-hairpin/SAG1和pHANA-hairpin/BAG1.结果 酶切鉴定和测序结果表明成功构建载体pHANA-hairpin、pHANA-hairpin/SAG1和pHANA-hairpin/BAG1.结论 弓形虫可遗传及可诱导的RNAi载体系统成功构建,为下一步基因功能研究奠定基础.
作者:吴煙;程璐;王琼;郝丽;陈晓光 刊期: 2008年第05期
目的 观察侵袭性真菌感染应用氟康唑、伊曲康唑和两性霉素B治疗的临床疗效及安全性.方法 选择南方医科大学附属南方医院2002年2月至2007年2月收治的侵袭性真菌感染患者237例,单用常规剂量氟康唑107例、伊曲康唑84例、两性霉素B 46例;氟康唑治疗无效者改用伊曲康唑39例和两性霉素B26例,伊曲康唑治疗无效改用两性霉素B和脂质体两性霉素B 39例.结果 237例侵袭性真菌感染总的治愈率和有效率分别为54.85%和72.57%.单用氟康唑治疗组的有效率显著低于伊曲康唑和两性霉素B治疗组,分别为39.25%、53.57%和56.52%(P<0.05);用氟康唑治疗无效改用伊曲康唑或两性霉素B治疗的有效率分别为76.93%和84.61%.结论 伊曲康唑和两性霉素B抗真菌谱广且疗效相似,优于氟康唑;氟康唑和伊曲康唑安全性良好.而两性霉素B的不良反应发生率高.
作者:谭筱江;孟凡义;谢晋国;李文源;俞守义 刊期: 2008年第05期