崔慧慧;杨建一;李莉
<微生物学及检验>是一门理论与实践紧密结合的课程,为使高专医学检验专业学生更好地掌握其理论知识和实验操作技能,并培养他们的创新能力和科学素养,我们进行了大胆的探索与尝试.教学质量明显提高.
作者:赵晋英;王秀虎;黄泽智;钟方为;李艳伟 刊期: 2008年第05期
目的 乙型肝炎合并肺结核的患者在抗结核化疗过程中,辅以护肝、抗病毒治疗的效果观察.方法 将乙型肝炎合并肺结核患者经抗结核治疗后肝功能异常的患者96例,随机分为3组:抗病毒治疗+抗结核治疗组(A组)、护肝治疗同时抗结核治疗组(B组)、单纯抗结核组(C组),观察肝脏炎症反应情况.结果 抗病毒组ALT和T-Bil高于B组,但两者差异无统计学意义(P0.05),C组ALT和T-Bil明显高于A组和B组,差异有统计学意义(P<0.05);C组停药率明显高于其它两组,差异有统计学意义(P<0.05),A组停药率略高于B组,但两者差异无统计学意义(P0.05);3组肝脏病理炎症分级:C组明显高于A组和B组,差异有统计学意义(P<0.05).结论 肝脏炎症是引起不能继续抗结核的主要因素,而乙肝病毒感染只是其中一种因素.
作者:潘越峻;范慧敏;张春兰;卢峰岳 刊期: 2008年第05期
目的 探讨紫外线减毒弓形虫免疫对小鼠旋毛虫感染肌肉期组织病理的影响.方法 ICR小鼠分为两组,实验组为紫外线减毒弓形虫免疫3周后再感染旋毛虫,对照组为旋毛虫单独感染.结果 与旋毛虫单感染相比,小鼠预先经紫外线减毒弓形虫免疫再感染旋毛虫后23 d,其肌肉期幼虫周围的炎症细胞浸润明显减轻,肌肉组织的病理损伤也明显减轻.结论 紫外线减毒弓形虫免疫对小鼠旋毛虫感染肌肉期的组织病理有一定的免疫调节作用.
作者:郑焕钦;朱佩娴;许少明;张瑞琳;黄世光;吕芳丽 刊期: 2008年第05期
目的 构建弓形虫可遗传及可诱导的RNAi载体系统,为弓形虫基因功能研究提供工具.方法 通过PCR和酶切连接,首先构建弓形虫主要表面抗原1(SAG1)基因启动子驱动的绿色荧光蛋白基因载体pBSK-SAG1/5UTR-eGFP-SAG1/3UTR(pBSK-SAG1/GFP),然后构建以弓形虫热休克蛋白HSP70基因启动子驱动的反向重复序列RNAi载体pBSK-HSP70/5UTR-IntronC-HSP70/3UTR,将载体pBSK-SAG1/GFP中的SAG1/5UTR-eGFP-SAG1/3UTR片段克隆到载体pBSK-HSP70/5UTR-IntronC-HSP70/3UTR中形成载体pBSK-GFP-Hairpin,再将该载体中的GFP-Hairpin片段克隆到载体pHANA-0.5中形成弓形虫可遗传及可诱导的RNAi载体系统pHANA-hairpin.通过PCR分别扩增SAG1和缓殖子蛋白1(BAG1)基因的正向和反向序列,通过酶切连接.将正向和反向序列克隆到载体pHANA-hairpin中.分别构建靶向SAG1和BAG1基因的RNAi载体pHANA-hairpin/SAG1和pHANA-hairpin/BAG1.结果 酶切鉴定和测序结果表明成功构建载体pHANA-hairpin、pHANA-hairpin/SAG1和pHANA-hairpin/BAG1.结论 弓形虫可遗传及可诱导的RNAi载体系统成功构建,为下一步基因功能研究奠定基础.
作者:吴煙;程璐;王琼;郝丽;陈晓光 刊期: 2008年第05期
目的 研究江门地区成人腹泻者星状病毒感染情况及型别特点.方法 收集江门地区病毒性腹泻流行期散发成人腹泻患者粪便标本,经胶体金法、RT-PCR法分别检测轮状病毒和诺如病毒后,运用实时荧光PCR进行星状病毒检测,并对阳性标本进行RT-nested PCR测序,鉴定型别.结果 56份成人病毒性腹泻粪便标本中,荧光PCR法测出3份星状病毒株(5.4%),经RT-PCR测序1份,序列分析鉴定为HAtsV-4型.结论 江门成人散发病毒性腹泻者存在星状病毒感染,型别为HAstV-4,未发现多致泻病毒混合感染.
作者:徐巧华;唐亚丽;聂军;蔡练功;李建栋;戴迎春;陈清;俞守义 刊期: 2008年第05期
目的 观察侵袭性真菌感染应用氟康唑、伊曲康唑和两性霉素B治疗的临床疗效及安全性.方法 选择南方医科大学附属南方医院2002年2月至2007年2月收治的侵袭性真菌感染患者237例,单用常规剂量氟康唑107例、伊曲康唑84例、两性霉素B 46例;氟康唑治疗无效者改用伊曲康唑39例和两性霉素B26例,伊曲康唑治疗无效改用两性霉素B和脂质体两性霉素B 39例.结果 237例侵袭性真菌感染总的治愈率和有效率分别为54.85%和72.57%.单用氟康唑治疗组的有效率显著低于伊曲康唑和两性霉素B治疗组,分别为39.25%、53.57%和56.52%(P<0.05);用氟康唑治疗无效改用伊曲康唑或两性霉素B治疗的有效率分别为76.93%和84.61%.结论 伊曲康唑和两性霉素B抗真菌谱广且疗效相似,优于氟康唑;氟康唑和伊曲康唑安全性良好.而两性霉素B的不良反应发生率高.
作者:谭筱江;孟凡义;谢晋国;李文源;俞守义 刊期: 2008年第05期
目的 本研究旨在探讨难治性视神经脊髓炎(NMO)的治疗方法,以及与结核分支杆菌的相关性.方法 本研究对13例激素治疗无效的视神经脊髓炎的病人进行了前瞻性的研究.治疗前均进行磁共振和腰穿检查,脑脊液进行常规检查和应用巢式PCR监测分支杆菌MPB-64基因,治疗前应用EDSS对病人的伤残程度进行评分.进行抗结核诊断性治疗.并进行长期随访和观察.结果 所有的病人在治疗前脊髓MR均有超过3个脊髓阶段的异常信号.EDSS评分在4.5~9;视敏度均有明显下降.巢式PCR扩增结核杆菌基因有3个病人呈阳性结果.病人对抗结核治疗反应良好,治疗后EDSS评分逐步下降,脊髓内的异常信号在治疗后逐渐消退,视力改善.结论 本研究显示结核分支杆菌感染在NMO的发生、发展过程中可能起着重要作用.鉴于该病预后差,以及抗结核治疗在本研究中令人鼓舞的效果,作者认为在激素治疗无效时,应为病人进行诊断性抗结核治疗.
作者:丰岩清;国宁;陈曦;周畅;孙巧松 刊期: 2008年第05期
目的 克隆微小RNA hsa-miR-26a并构建其慢病毒表达载体.方法 将PCR扩增得到的miR-26a前体序列和pIVTHM载体经双酶切后连接产生pIVTHM-miR-26a慢病毒表达载体,双酶切后测序鉴定,筛选阳性克隆.用pIVTHM-miR-26a、psPAχ2和pMD2.G 3质粒共转染包装细胞293FT,包装产生慢病毒.以293FT细胞绿色荧光蛋白(green fluorescent protein,GFP)的表达水平测定病毒滴度.结果 经双酶切鉴定和测序证实,成功构建了miR-26a的慢病毒表达载体pIVTHM-miR-26a.倒置荧光显微镜下观察可见包装细胞293FT呈绿色荧光,并测得病毒滴度为5×105TU/ml.成功构建hsa-miR-26a的慢病毒表达载体.为深入研究miR-26a的生物学功能奠定了基础.
作者:鲁娟;王爽;揭荣荣;姚开泰 刊期: 2008年第05期
1 案例资料1.1 简要案情2007年3月7日,在一烂尾楼西侧楼梯一楼至地下室的楼梯上发现一具尸体.
作者:余礼聪;吕国丽;王江峰 刊期: 2008年第05期
目的 对比气管内全麻合并颈丛阻滞和单纯气管内全麻应用于甲状腺手术的麻醉效果.方法 40例行双侧甲状腺次全切除手术的全麻患者,随机分为A、B两组,A组采用气管内全麻合并颈丛阻滞,B组采用单纯气管内全麻,常规麻醉诱导插管,麻醉维持A组用瑞芬太尼0.05~0.15μg/(kg·min),B组用瑞芬太尼0.1~0.2μg/(kg·min),两组均持续静脉输注异丙酚,记录气管插管、切皮、麻醉维持和气管拔管时血压和心率的变化,术后睁眼和气管拔管时间,以及术后是否需要镇痛.结果 A组气管插管、切皮、麻醉维持时浅麻醉发生率明显低于B组(P<0.05),B组术后需要镇痛的人数明显多于A组(P<0.01).结论 气管内全麻合并颈丛阻滞在甲状腺手术时维持血流动力学稳定方面明显优于单纯气管内全麻,并可减轻术后疼痛.
作者:罗德兴;高晓枫;蓝胜文 刊期: 2008年第05期
树突状细胞(dendritic cells,DCs)作为机体免疫的启动者和调控者,成为目前医学研究的热点.小鼠髓源性树突状细胞(bone marrow derived dendritic cell,BMDC)作为研究人DC的良好体外模型,其体外诱导技术一直受到重视和关注,近年来该技术发展迅速并得到广泛的应用.本文对常用的体外诱导小鼠髓源性树突状细胞的方法和影响因素的研究作一综述.
作者:周何军;吴忠道 刊期: 2008年第05期
目的 评估缬沙坦治疗高血压病的降压效果、安全性与逆转高血压心肌肥厚和改善心功能的疗效.方法 以氨氯地平为对照药物,在老年性轻、中度高血压患者中进行随机、平行对照的临床研究.结果 缬沙坦组患者治疗4周总有效率为60.8%(45/74),降压幅度15.6/10.9 mmHg;治疗24周后总有效率为78.4%(54/74),降压幅度21.1/17.9 mmHg.缬沙坦组治疗24周后在逆转高血压心肌肥厚中取得满意的疗效,能显著逆转左室肥厚(LVH),左室后壁厚度(PWT),室间隔厚度(IVST),降低左室重量指数(LVMI),且缬沙坦组能有效地改善心功能,经治疗后患者的心脏每分输出量(CO)、左室射血分数(LVEF)、舒张早期与舒张晚期峰值流速的比值(E/A)、E峰减速度(Ede)均不同程度得到改善;缬沙坦组患者血尿酸、C-反应蛋白较治疗前明显下降,不良反应率为8.1%,主要是面红、头昏及心悸.心率、血生化、肝肾功能无明显变化.结论 缬沙坦降压疗效好,且能逆转左心室肥厚,改善心功能,不良反应少,可作为治疗老年性轻、中度高血压伴左心室肥厚的一线药物.
作者:李挺;廖(钅监)能;张建华;邵丽香 刊期: 2008年第05期
高血压是多基因遗传和多个环境因素相互作用的结果.对不同类型高血压动物模型的建立进行了总结,为研究高血压发病机制及研制抗高血压的新药提供有效的方法.
作者:崔慧慧;杨建一;李莉 刊期: 2008年第05期
目的 探讨菌群失调对全身及肠道局部免疫功能的影响.方法 用林可霉素灌胃制备小鼠肠道菌群失调模型,进行肠道菌群定量分析,同时MTT法检测脾淋巴细胞增殖活性、ELISA法检测肠粘膜sIgA、血清及肠组织IL-2的含量.结果 小鼠菌群失调后,脾淋巴细胞对丝裂原的反应性降低(P<0.05),肠粘膜sIgA、血清及肠组织IL-2含量均较正常对照组低(P<0.05).结论 抗生素致肠道菌群失调后可降低机体全身及肠道局部免疫功能.
作者:鞠宝玲;唐小云;张红军;海艳洁;陆叶 刊期: 2008年第05期
目的 了解院前急救人员的心理健康状况.方法 应用焦虑自评量表(SAS)及抑郁自评量表(SDS)对惠州市区4所综合性医院136名院前急救人员,124名普通病房的医务人员进行了问卷调查,并进行对比分析.结果 院前急救人员SAS及SDS评分、抑郁和焦虑的发生率均比普通病房人员高(P<0.05).结论 院前急救人员的工作压力大,精神压力高,职业成就感低,是导致其心理健康状况差的原因.
作者:唐群英;乐胜;王国标;刘发妹 刊期: 2008年第05期
目的 为了解我院医院感染的发病情况及影响因素.方法 对2004-2006年6、12月份出院患者医院感染情况进行回顾性调查分析.结果 医院感染发病率呈逐年下降趋势,其中下呼吸道感染、上呼吸道感染占主要构成,下呼吸道感染构成比为39.7%,上呼吸道感染构成比为31.9%,医院感染发病率与季节及平均住院日有直接关系,平均住院日越长,医院感染发病率越高.结论 减少平均住院日,加强消毒隔离,有效通风,改善环境,控制呼吸道感染,根据药敏试验合理使用抗菌药物可以有效降低医院感染发病率.
作者:张秀萍;刘秀玲;赵楠 刊期: 2008年第05期
目的 通过基因重组的方法表达IgE高亲和力受体FeεR Ⅰα亚基,并用重组蛋白制备单克隆抗体.方法 用RT-PCR的方法从过敏性疾病病人外周血嗜碱性粒细胞调取FcεR Ⅰα蛋白基因,经T-A克隆、亚克隆至pET28a(+)原核表达载体,将重组质粒转化到大肠杆菌BL-21-STAR(DE3),IPTG诱导表达FeεR Ⅰα亚基蛋白,通过Ni-NTA亲和层析纯化融合蛋白;并用其免疫BALB/c小鼠,运用杂交瘤技术制备抗FcεR Ⅰα亚基单克隆抗体,用细胞免疫荧光法对单克隆抗体的特异性进行鉴定.结果 成功调取了人IgE高亲和力受体FcεRⅠα亚基的基因,且测序正确;构建原核表达质粒FcεR Ⅰα-pET28a(+);成功建立4株稳定分泌抗FcεR Ⅰα亚基的单克隆抗体杂交瘤细胞株,分别命名为G101、C22、G113、G42.通过细胞免疫荧光实验证实,4株单克隆抗体均能特异性结合人嗜碱性粒细胞表面的FcεR Ⅰα亚基.结论 成功利用基因重组技术制备了FcεR Ⅰα亚基蛋白,制备了4株效价高、特异性好的抗FcεR Ⅰα亚基单克隆抗体,为FeεR Ⅰα亚基及其抗体在过敏性疾病中的生物学功能研究奠定了基础.
作者:宋晓妮;王穗海;曲焕;王萍;魏伟;王文敬;董文其 刊期: 2008年第05期
目的 获得日本血吸虫(Schistosoma japonicum,Sj)转化生长因子β1(TGF-β1)成熟肽基因的DNA,进行原核克隆和表达.并比较它与Sj26kd的谷胱甘肽转移酶(Sj26GST)在成虫和虫卵期的转录水平.方法 根据美国国立生物信息学中心(NCBI)上登录的小鼠TGF-β1基因的全长序列,设计两条位于保守区的寡核苷酸作为引物.利用RT-PCR从日本血吸虫成虫的mRNA中扩增SjTGF-β1基因的部分序列,并利用生物信息学进行分析和鉴定.克隆SjTGF-β1成熟肽基因的cDNA到原核表达载体pGEX-6p-3,将重组载体转化大肠杆菌BL21株并诱导表达.利用RT-PCR半定量分析SjTGF-β1基因与Sj26GST基因在成虫和虫卵期的转录水平.结果 成功获得并构建了SjTGF-β1成熟肽基因的原核表达载体.融合表达后的重组融合蛋白经SDS-PAGE分析,显示其相对分子质量约为3 5000.与目的 基因编码蛋白的预测分子量相符.SjTGF-β1在成虫与虫卵期的转录水平都低于Sj26GST基因,但虫卵期的转录水平比成虫高.结论 SjTGF-β1成熟肽基因的获得为其编码序列全长的获得奠定了基础;重组融合蛋白的成功表达为进一步的功能研究提供保障;虫卵期该基因的转录水平高提示该基因在血吸虫虫卵与宿主的相互作用中可能具有一定的作用.
作者:朱郇悯;麦璟莹;赵晶晶;马长玲;陈晓湘;张雪雁;杨英;张惠球;李孜 刊期: 2008年第05期
目的 比较狂犬病疫苗免疫后血清抗体酶联免疫吸附试验(ELISA)与快速免疫荧光灶抑制试验(RFFIT)两种检测方法.方法 对93名研究对象采用0、3、7、14和28 d程序进行暴露后免疫,分别采用ELISA法与WHO认可的金标法RFFIT法检测免疫D0、D3、D7、D14、D45 d的血清抗体.结果 免疫D0、D3、D7、D14、D45 d ELISA法检测抗体阳性率分别为8.6%、11.8%、22.6%、49.6%、86%,RFFIT法检测抗体阳性率分别为0%、0%、22.58%、100%、100%,ELISA法与RFFIT法阳性符合率分别为0%、0%、34.8%、100%、100%;阴性符合率分别为100%、100%、81.4%、0%、0%.结论 ELISA法检测狂犬病疫苗免疫后血清抗体,免疫早期D0、D3、D7假阳性率较高,免疫D14、D45则假阴性率较高.建议采用WHO认可的方法做检测.
作者:刘华章;黄桂花;曹庆;刘远 刊期: 2008年第05期
目的 探索金黄色葡萄球菌肠毒素B(SEB)对实验性支气管哮喘小鼠肺组织Th0细胞分化的在体调节和对气道炎症的作用.方法 32只15~17 d BALB/c小鼠,随机分为4组:对照组、模型组、金黄色葡萄球菌组、金黄色葡萄球菌肠毒素B(SEB)组.用卵蛋白(OVA)致敏和激发建立小鼠慢性哮喘模型,在致敏前14 d对幼年鼠做金黄色葡萄球菌或SEB预防性腹腔注射.观察记录小鼠的耗氧量、肺组织切片、支气管肺泡灌洗液(BALF)中炎性细胞及相关细胞因子等的改变.结果 金黄色葡萄球菌组与模型组相比.肺组织病理切片结构紊乱减轻、炎症细胞明显减少,小鼠耗氧量降低(5.24±0.12 vs 5.59±0.18),BALF中IL-4水平明显下降(44.94±4.51 vs 29.37±4.17),IFN-γ水平明显增加(19.61±3.83 vs 29.33±4.04),SEB组也有上述作用(耗氧量:5.09±0.20;细胞介素4:36.68±5.10;γ干扰素:24.27±3.46).结论 金黄色葡萄球菌能明显减轻实验性哮喘的气道炎症,纠正哮喘小鼠肺组织中Th1/Th2细胞因子的失衡,其作用可能是通过其分泌的SEB.
作者:孔令恩;陆丽;叶英俊;林明佳 刊期: 2008年第05期