朱郇悯;麦璟莹;赵晶晶;马长玲;陈晓湘;张雪雁;杨英;张惠球;李孜
目的 克隆微小RNA hsa-miR-26a并构建其慢病毒表达载体.方法 将PCR扩增得到的miR-26a前体序列和pIVTHM载体经双酶切后连接产生pIVTHM-miR-26a慢病毒表达载体,双酶切后测序鉴定,筛选阳性克隆.用pIVTHM-miR-26a、psPAχ2和pMD2.G 3质粒共转染包装细胞293FT,包装产生慢病毒.以293FT细胞绿色荧光蛋白(green fluorescent protein,GFP)的表达水平测定病毒滴度.结果 经双酶切鉴定和测序证实,成功构建了miR-26a的慢病毒表达载体pIVTHM-miR-26a.倒置荧光显微镜下观察可见包装细胞293FT呈绿色荧光,并测得病毒滴度为5×105TU/ml.成功构建hsa-miR-26a的慢病毒表达载体.为深入研究miR-26a的生物学功能奠定了基础.
作者:鲁娟;王爽;揭荣荣;姚开泰 刊期: 2008年第05期
目的 探讨紫外线减毒弓形虫免疫对小鼠旋毛虫感染肌肉期组织病理的影响.方法 ICR小鼠分为两组,实验组为紫外线减毒弓形虫免疫3周后再感染旋毛虫,对照组为旋毛虫单独感染.结果 与旋毛虫单感染相比,小鼠预先经紫外线减毒弓形虫免疫再感染旋毛虫后23 d,其肌肉期幼虫周围的炎症细胞浸润明显减轻,肌肉组织的病理损伤也明显减轻.结论 紫外线减毒弓形虫免疫对小鼠旋毛虫感染肌肉期的组织病理有一定的免疫调节作用.
作者:郑焕钦;朱佩娴;许少明;张瑞琳;黄世光;吕芳丽 刊期: 2008年第05期
目的 探讨菌群失调对全身及肠道局部免疫功能的影响.方法 用林可霉素灌胃制备小鼠肠道菌群失调模型,进行肠道菌群定量分析,同时MTT法检测脾淋巴细胞增殖活性、ELISA法检测肠粘膜sIgA、血清及肠组织IL-2的含量.结果 小鼠菌群失调后,脾淋巴细胞对丝裂原的反应性降低(P<0.05),肠粘膜sIgA、血清及肠组织IL-2含量均较正常对照组低(P<0.05).结论 抗生素致肠道菌群失调后可降低机体全身及肠道局部免疫功能.
作者:鞠宝玲;唐小云;张红军;海艳洁;陆叶 刊期: 2008年第05期
目的 了解慢性肺心病患者血浆环氧化酶2(COX-2)活性变化的临床意义.方法 采用ELISA方法动态观察了65例慢性肺心病患者及30例健康对照者血浆COX-2活性.结果 慢性肺心病患者血浆COX-2活性急性加重期(45.23±4.16)IU/L及缓解期(21.40±5.19)IU/L明显高于对照组(7.13±3.26)IU/L(P均<0.01);在急性加重期,患者心功能越差,血浆COX-2活性越高,心功能Ⅳ级者(62.98±8.15)IU/L心功能Ⅲ级者(39.00±6.73)IU/L心功能Ⅱ级者(12.84±5.20)IU/L及对照组(P均<0.01);另外,在急性加重期,患者COX-2活性与PaO2(5.08±2.65)kPa和pH值(7.29±0.31)均呈显著负相关(r分别为-0.65和-0.61,均为P<0.01),而与PaCO2(7.92±2.69)kPa呈显著正相关(r=0.71,P<0.01).结论 提示COX-2可能参与了慢性肺心病的发病过程,测定血浆COX-2活性,对评估慢性肺心病患者的病情变化及严重程度可能有一定的意义.拮抗COX-2的治疗可能有助于缓解患者的病情.
作者:马诚;高翔;张家龙;唐皓;李振宇;陈志斌;梁艳冰 刊期: 2008年第05期
目的 比较狂犬病疫苗免疫后血清抗体酶联免疫吸附试验(ELISA)与快速免疫荧光灶抑制试验(RFFIT)两种检测方法.方法 对93名研究对象采用0、3、7、14和28 d程序进行暴露后免疫,分别采用ELISA法与WHO认可的金标法RFFIT法检测免疫D0、D3、D7、D14、D45 d的血清抗体.结果 免疫D0、D3、D7、D14、D45 d ELISA法检测抗体阳性率分别为8.6%、11.8%、22.6%、49.6%、86%,RFFIT法检测抗体阳性率分别为0%、0%、22.58%、100%、100%,ELISA法与RFFIT法阳性符合率分别为0%、0%、34.8%、100%、100%;阴性符合率分别为100%、100%、81.4%、0%、0%.结论 ELISA法检测狂犬病疫苗免疫后血清抗体,免疫早期D0、D3、D7假阳性率较高,免疫D14、D45则假阴性率较高.建议采用WHO认可的方法做检测.
作者:刘华章;黄桂花;曹庆;刘远 刊期: 2008年第05期
目的 检测临床分离肠球菌的耐药和毒力因子,比较粪肠球菌和屎肠球菌的耐药性和毒力特征.方法 采用琼脂稀释法检测肠球菌对万古霉素(VAN)、四环素(TET)、环丙沙星(CIP)、红霉素(ERY)、复方新诺明(SMZ)、替考拉宁(TEC)、克林霉素(CLI)的耐药性;采用微量板测定肠球菌的生物膜形成能力;观察肠球菌的β溶血和明胶溶解结果,同时用PCR方法检测相应基因cylA和gelE.结果 粪肠球菌和屎肠球菌的耐药率分别为0%~100%和3.23%~96.77%,后者对环丙氟哌酸、红霉素的耐药程度高于前者.β溶血试验阳性率为19.23%,cylA基因阳性率为35.38%;明胶表型阳性率为21.54%,gelE阳性率为40.0%,其中有46.15%(12/26)阳性者未出现相应表型;生物膜形成检出率为36.92%;粪肠球菌3种毒力因子(表型和基因型)的阳性率均高于屎肠球菌.结论 屎肠球菌耐药率高于粪肠球菌,粪肠球菌毒力因子阳性率高于屎肠球菌.
作者:吴敏;陈清;胡族琼;江凌晓;龙军 刊期: 2008年第05期
目的 乙型肝炎合并肺结核的患者在抗结核化疗过程中,辅以护肝、抗病毒治疗的效果观察.方法 将乙型肝炎合并肺结核患者经抗结核治疗后肝功能异常的患者96例,随机分为3组:抗病毒治疗+抗结核治疗组(A组)、护肝治疗同时抗结核治疗组(B组)、单纯抗结核组(C组),观察肝脏炎症反应情况.结果 抗病毒组ALT和T-Bil高于B组,但两者差异无统计学意义(P0.05),C组ALT和T-Bil明显高于A组和B组,差异有统计学意义(P<0.05);C组停药率明显高于其它两组,差异有统计学意义(P<0.05),A组停药率略高于B组,但两者差异无统计学意义(P0.05);3组肝脏病理炎症分级:C组明显高于A组和B组,差异有统计学意义(P<0.05).结论 肝脏炎症是引起不能继续抗结核的主要因素,而乙肝病毒感染只是其中一种因素.
作者:潘越峻;范慧敏;张春兰;卢峰岳 刊期: 2008年第05期
目的 了解院前急救人员的心理健康状况.方法 应用焦虑自评量表(SAS)及抑郁自评量表(SDS)对惠州市区4所综合性医院136名院前急救人员,124名普通病房的医务人员进行了问卷调查,并进行对比分析.结果 院前急救人员SAS及SDS评分、抑郁和焦虑的发生率均比普通病房人员高(P<0.05).结论 院前急救人员的工作压力大,精神压力高,职业成就感低,是导致其心理健康状况差的原因.
作者:唐群英;乐胜;王国标;刘发妹 刊期: 2008年第05期
高血压是多基因遗传和多个环境因素相互作用的结果.对不同类型高血压动物模型的建立进行了总结,为研究高血压发病机制及研制抗高血压的新药提供有效的方法.
作者:崔慧慧;杨建一;李莉 刊期: 2008年第05期
目的 探讨慢性乙型肝炎患者抗病毒治疗与血清脂质水平的关系.方法 测定50例慢性乙型肝炎患者抗病毒治疗前后的的血清总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、血清载脂蛋白A1(apaA1)和载脂蛋白B(apoB)和HBV-DNA,并进行对比分析.结果 慢性乙型肝炎患者血清的脂质水平随着血清HBV DNA载量高低程度而变化,随着病毒载量的升高而逐渐降低,抗病毒治疗前后比较,差异有统计学意义(P<0.05).结论 测定血清脂质水平对判断较重的慢性肝炎肝组织实质细胞的损害有一定的价值.抗病毒治疗可以帮助恢复慢性乙型肝炎患者的血脂代谢.
作者:卢罗生 刊期: 2008年第05期
目的 从基因水平探索肌萎缩侧索硬化(ALS)其发病机制并发现治疗ALS的新靶点.方法 通过GeneSifter软件对野生型(WT)和重度联合免疫缺陷型(SCID)小鼠肺组织钩虫感染的微阵列表达谱进行分析,使用two-way ANOVA的统计学方法对数据聚类,并结合Gene Ontology和KEGG(Kyoto Encyclopedia of Genesand Genomes)生物学通路,深入分析具有种系效应的517个差异基因(P<0.001).结果 显示ALS的信号转导通路在两组小鼠间差异具有统计学意义(Z2),与Th2反应相关的多个基因对ALS的代谢异常具有保护作用.结论 筛选出的3个特异基因,可作为治疗肌萎缩侧索硬化的新候选基因.
作者:刘华;马文丽;丁大鹏;柯杰兵;郑文岭 刊期: 2008年第05期
目的 构建弓形虫可遗传及可诱导的RNAi载体系统,为弓形虫基因功能研究提供工具.方法 通过PCR和酶切连接,首先构建弓形虫主要表面抗原1(SAG1)基因启动子驱动的绿色荧光蛋白基因载体pBSK-SAG1/5UTR-eGFP-SAG1/3UTR(pBSK-SAG1/GFP),然后构建以弓形虫热休克蛋白HSP70基因启动子驱动的反向重复序列RNAi载体pBSK-HSP70/5UTR-IntronC-HSP70/3UTR,将载体pBSK-SAG1/GFP中的SAG1/5UTR-eGFP-SAG1/3UTR片段克隆到载体pBSK-HSP70/5UTR-IntronC-HSP70/3UTR中形成载体pBSK-GFP-Hairpin,再将该载体中的GFP-Hairpin片段克隆到载体pHANA-0.5中形成弓形虫可遗传及可诱导的RNAi载体系统pHANA-hairpin.通过PCR分别扩增SAG1和缓殖子蛋白1(BAG1)基因的正向和反向序列,通过酶切连接.将正向和反向序列克隆到载体pHANA-hairpin中.分别构建靶向SAG1和BAG1基因的RNAi载体pHANA-hairpin/SAG1和pHANA-hairpin/BAG1.结果 酶切鉴定和测序结果表明成功构建载体pHANA-hairpin、pHANA-hairpin/SAG1和pHANA-hairpin/BAG1.结论 弓形虫可遗传及可诱导的RNAi载体系统成功构建,为下一步基因功能研究奠定基础.
作者:吴煙;程璐;王琼;郝丽;陈晓光 刊期: 2008年第05期
目的 评价融合蛋白基因质粒(pFP)联合在体电脉冲(EP)介导的HBV DNA疫苗(pS2.S)免疫HBV转基因(Tg)小鼠的治疗效果.方法 HBV Tg小鼠随机分成3组,每组5只,分别为pS2.S+pFP、pS2.S+PcDNA3.1免疫治疗和PcDNA3.1对照组.联合免疫质粒总剂量40 μg/只,按1:1比例混合接种.初次免疫后第4、8周分别进行第一、二次增强免疫,免疫前后分别检测血清学、组织学及HBV特异性免疫应答.结果 HBVDNA血清定量检测结果,pS2.S+pFP组免疫第8周(13 317±2 539)拷贝/ml、第12周(6 462±3 359)拷贝/ml时分别较免疫前(36 159±7 769)拷贝/ml明显减低,差异具有统计学意义(P<0.01);pS2.S+pcDNA3.1组第4周(20 618±9 523)拷贝/ml及第8周(23 818±5 319)拷贝/ml时均较其免疫前水平(36 090±4 421)拷贝/ml明显降低(P<0.01),但不能持续到12周(27 691±13 071)拷贝/ml,并明显高于此时pS2.S+pFP组水平,差异有统计学意义(P<0.01);观察终点(12周)pS2.S+pFP组Tg小鼠个体血清HBV DNA及肝组织HBsAg表达水平降低的同时,伴随其血清ALT水平及HBsAg特异性IFN-γ分泌细胞数目的 升高.结论 Th1类细胞因子IL-2/IFN-γ融合蛋白基因表达质粒能够增强HBV DNA疫苗抑制Tg鼠HBV DNA复制和表达的治疗作用.
作者:杨富强;陈光明;饶桂荣;徐宇虹;赵勇刚;何晓嫱;孙希海;侯金林 刊期: 2008年第05期
目的 获得日本血吸虫(Schistosoma japonicum,Sj)转化生长因子β1(TGF-β1)成熟肽基因的DNA,进行原核克隆和表达.并比较它与Sj26kd的谷胱甘肽转移酶(Sj26GST)在成虫和虫卵期的转录水平.方法 根据美国国立生物信息学中心(NCBI)上登录的小鼠TGF-β1基因的全长序列,设计两条位于保守区的寡核苷酸作为引物.利用RT-PCR从日本血吸虫成虫的mRNA中扩增SjTGF-β1基因的部分序列,并利用生物信息学进行分析和鉴定.克隆SjTGF-β1成熟肽基因的cDNA到原核表达载体pGEX-6p-3,将重组载体转化大肠杆菌BL21株并诱导表达.利用RT-PCR半定量分析SjTGF-β1基因与Sj26GST基因在成虫和虫卵期的转录水平.结果 成功获得并构建了SjTGF-β1成熟肽基因的原核表达载体.融合表达后的重组融合蛋白经SDS-PAGE分析,显示其相对分子质量约为3 5000.与目的 基因编码蛋白的预测分子量相符.SjTGF-β1在成虫与虫卵期的转录水平都低于Sj26GST基因,但虫卵期的转录水平比成虫高.结论 SjTGF-β1成熟肽基因的获得为其编码序列全长的获得奠定了基础;重组融合蛋白的成功表达为进一步的功能研究提供保障;虫卵期该基因的转录水平高提示该基因在血吸虫虫卵与宿主的相互作用中可能具有一定的作用.
作者:朱郇悯;麦璟莹;赵晶晶;马长玲;陈晓湘;张雪雁;杨英;张惠球;李孜 刊期: 2008年第05期
目的 研究江门地区成人腹泻者星状病毒感染情况及型别特点.方法 收集江门地区病毒性腹泻流行期散发成人腹泻患者粪便标本,经胶体金法、RT-PCR法分别检测轮状病毒和诺如病毒后,运用实时荧光PCR进行星状病毒检测,并对阳性标本进行RT-nested PCR测序,鉴定型别.结果 56份成人病毒性腹泻粪便标本中,荧光PCR法测出3份星状病毒株(5.4%),经RT-PCR测序1份,序列分析鉴定为HAtsV-4型.结论 江门成人散发病毒性腹泻者存在星状病毒感染,型别为HAstV-4,未发现多致泻病毒混合感染.
作者:徐巧华;唐亚丽;聂军;蔡练功;李建栋;戴迎春;陈清;俞守义 刊期: 2008年第05期
目的 了解深圳口岸出入境人员传染病的感染现状,为进一步有针对性的开展疾病监测工作,制订有效的防治措施提供依据.方法 对2002-2006年经深圳口岸出入境的289 339名出入境人员的疾病监测结果进行统计分析.结果 2002-2006年在所监测的出入境人员中.各年度传染病总检出率呈下降趋势.5年的梅毒和HBsAg阳性率分别是0.26%和8.89%,各年度间差异均有统计学意义(χ2=38.216,P<0.05;χ2=239.37,P<0.05),总体均呈下降趋势;5年的HIV阳性率为0.14‰,各年度间差异无统计学意义(χ2=6.208,P0.05).HIV感染者以男性中青年的技术人员和交通员工为主.交通员工在出入境人员中所占5年的合计比例为55.17%,其中交通员工的梅毒和HBsAg感染率从2004年开始呈下降趋势;艾滋病感染率总体呈上升趋势.结论 应重点加强男性中青年交通员工的传染病监测工作,有针对性地开展多途径、多种形式宣传教育和行为干预措施,防止传染病传播,保护人们身体健康.
作者:刘春芳;甄胜西;庄宏杰;李莹林;林勤丰;陆家海 刊期: 2008年第05期
目的 评估缬沙坦治疗高血压病的降压效果、安全性与逆转高血压心肌肥厚和改善心功能的疗效.方法 以氨氯地平为对照药物,在老年性轻、中度高血压患者中进行随机、平行对照的临床研究.结果 缬沙坦组患者治疗4周总有效率为60.8%(45/74),降压幅度15.6/10.9 mmHg;治疗24周后总有效率为78.4%(54/74),降压幅度21.1/17.9 mmHg.缬沙坦组治疗24周后在逆转高血压心肌肥厚中取得满意的疗效,能显著逆转左室肥厚(LVH),左室后壁厚度(PWT),室间隔厚度(IVST),降低左室重量指数(LVMI),且缬沙坦组能有效地改善心功能,经治疗后患者的心脏每分输出量(CO)、左室射血分数(LVEF)、舒张早期与舒张晚期峰值流速的比值(E/A)、E峰减速度(Ede)均不同程度得到改善;缬沙坦组患者血尿酸、C-反应蛋白较治疗前明显下降,不良反应率为8.1%,主要是面红、头昏及心悸.心率、血生化、肝肾功能无明显变化.结论 缬沙坦降压疗效好,且能逆转左心室肥厚,改善心功能,不良反应少,可作为治疗老年性轻、中度高血压伴左心室肥厚的一线药物.
作者:李挺;廖(钅监)能;张建华;邵丽香 刊期: 2008年第05期
目的 为了解我院医院感染的发病情况及影响因素.方法 对2004-2006年6、12月份出院患者医院感染情况进行回顾性调查分析.结果 医院感染发病率呈逐年下降趋势,其中下呼吸道感染、上呼吸道感染占主要构成,下呼吸道感染构成比为39.7%,上呼吸道感染构成比为31.9%,医院感染发病率与季节及平均住院日有直接关系,平均住院日越长,医院感染发病率越高.结论 减少平均住院日,加强消毒隔离,有效通风,改善环境,控制呼吸道感染,根据药敏试验合理使用抗菌药物可以有效降低医院感染发病率.
作者:张秀萍;刘秀玲;赵楠 刊期: 2008年第05期
目的 了解番禺区狂犬病门诊暴露人群的流行病学特征,为制定狂犬病预防策略提供科学依据.方法 对2006-2007年在狂犬病预防门诊接受诊治的狂犬病门诊暴露人群进行描述性流行病学分析.结果 2006-2007年番禺区共报告狂犬病暴露者19 532人,两年均无因本地动物伤害而引起的狂犬病病例报告.动物伤人一年四季均可发生,其中以7~10月相对较多,第三季度共发生5 574例.暴露者中男性占56.43%,女性占43.57%.所有暴露者中15~44岁占51.22%.中心城区的暴露水平较周边地区高.伤人动物以犬为主,占87.82%,受伤部位以下肢为主共10 190例,占52.17%,暴露人员中以Ⅱ度暴露多共18 193例,占93.14%.结论 当前控制狂犬病流行需加强养犬管理,有效地降低人群狂犬病暴露水平:加强狂犬病防治等相关知识的宣传教育,提高人群的自我保护意识等综合措施,以控制狂犬病的发生.
作者:陈光艳;许晓茵;李伟强 刊期: 2008年第05期
目的 通过观察补肾中药骨灵片对骨质疏松大鼠腰椎松质骨二维平面和三维结构的改变以及对骨强度的影响,进一步探讨骨灵片抗骨质疏松的作用机制.方法 选取3月龄SD雌性大鼠18只,随机分为假手术组,去卵巢组,骨灵片低、中、高3个剂量组(根据人鼠剂量换算标准),以雌激素为对照组.通过硬组织切片观测二维形态计量学.在其基础上利用连续切片摄像及图像数码处理技术重建腰椎骨小梁的空间结构.结合计算机3D-Doctor软件测量相关三维参数.结果 去势后的模型组较之假手术组,骨小梁分离度明显升高,其余参数均显著下降(P<0.01);经骨灵片干预后的各组与去卵巢组比较可见,骨灵片各剂量组的骨小梁厚度显著增加,低剂量组对于骨小梁的面积百分数无明显增高,中、高剂量组在骨小梁数量、面积百分数、分离度上的改善较低剂量组显著.三维重建后的结果显示,高剂量组的骨小梁体积百分数和各剂量组的体元总数明显升高(P<0.01);骨灵片组与雌激素对照组相比,中剂量组在骨小梁厚度、体积百分数上的增加有显著差异(P<0.05),高剂量组的体元总数显著升高(P<0.01);相关分析显示三维体元总数及骨小梁体积百分比与二维骨小梁面积百分数、骨小梁厚度、骨小梁数量呈显著正相关,与骨小梁分离度呈明显负相关.各组骨小梁体积百分数在三维重建前后无显著差异(P0.05).结论 构建的三维模型结合相关参数测量的结果反映出模型组在骨小梁结构上存在典型的骨质疏松改变;经骨灵片干预后的大鼠,骨小梁的结构较之模型组有明显改善,尤其是中、高剂量组在骨结构的厚度、紧密性以及体积百分数上有显著升高.结合骨灵片对骨密度以及骨力学的改善,提示该药可以通过增强骨小梁实际结构的方式,起到增加骨强度,改善骨负荷,有效抗骨质疏松的作用.
作者:张娟;黄少慧;吴湘慧;李娟 刊期: 2008年第05期