陈茂伟；吴健林；江建宁
目的在CHO细胞中表达小鼠TLR2(mTLR2).方法将目的基因克隆到真核表达载体pcDNA3.1中,并将其转染到CHO细胞,用G418筛选阳性克隆.采用PCR方法,检测外源基因的整合.采用Western blot、免疫组织化学对转染细胞的mTLR2表达进行鉴定.结果成功构建了pcDNA-mTLR2重组质粒.将其转染到CHO细胞,经G418筛选获得阳性细胞克隆.阳性细胞克隆经PCR检测表明TLR2基因得到稳定整合.Western blot分析显示在分子量约95 000处可见清晰的阳性反应条带.免疫组织化学检测显示转染细胞表达mTLR2.结论获得了表达mTLR2的细胞株,为进一步进行相关研究奠定了基础.
作者：赵文忠；罗招凡；刘艳君；杨翠兰；朱平；江丽芳 刊期： 2006年第05期
目的建立新型、高产量的慢病毒衍生载体的生产体系.方法构建主框架质粒pVECRNA、包装质粒pGAGPOL及包膜质粒pVSVG.通过脂质体将这三个质粒共转染至BHK21细胞,再用含有T7RNA聚合酶基因的重组痘苗病毒vTF-3感染细胞,培养4 d后,收集培养上清,0.22 μm滤膜过滤.结果将培养上清进行RT-PCR反应,结果能扩增出96 bp长度的目的条带,将培养上清感染BHK21细胞,检测到BHK21细胞中GFP的表达,测定病毒载体滴度为(1.45±0.30)×107tu/ml.结论已初步生产出慢病毒载体,为下一步生产系统建立,系统产量优化奠定良好基础.
作者：马强；李明；吴英松 刊期： 2006年第05期
目的通过观察初诊2型糖尿病患者短期胰岛素治疗前后C肽水平的变化,了解短期胰岛素治疗能否改善胰岛β细胞功能.方法对146例初诊断2型糖尿病患者(空腹血糖≥12 mmol/L,未接受过其他治疗的患者)进行1～3月的短期胰岛素治疗,使血糖在短期内得到较好的控制,比较治疗前后标准馒头餐C肽释放试验的C肽水平变化.结果经过短期胰岛素治疗,所有病例血糖得到了良好控制,3个月后复查C肽释放试验,空腹及餐后30 min、60min、120 min和180 min的C肽水平较治疗前均明显升高(P＜0.001),恢复到了2型糖尿病自然病程中较为早期的水平.结论初诊2型糖尿病短期胰岛素治疗,可以使血糖在短期内达到良好控制,C肽水平明显提高,胰岛β细胞分泌功能明显得到改善.
作者：梁干雄；陈少颖；朱柏乐 刊期： 2006年第05期
目的了解肺结核患者MTB-L型的感染情况,并探讨其培养的临床意义.方法选取2004年1月～2004年12月确诊为肺结核患者的痰标本372例进行MTB-L型培养.结果MTB-L型总培养阳性率为16.7%.菌阳肺结核组MTB-L型培养阳性率为21.8%,菌阴组为9.6%;活动性肺结核组MTB-L型培养阳性率为18.6%,非活动性组为2.5%,两者差异极显著(P＜0.01);服药时间＞6个月组MTB-L型培养阳性率为33.8%,服药时间＜1个月组MTB-L型培养阳性率为10.9%,两者有极显著差异(P＜0.01).初治肺结核组MTB-L型培养阳性率为13.9%,复治组MTB-L型培养阳性率为35.4%,两者差异极显著(P＜0.01).结论肺结核患者MTB-L型感染占一定比例,服药时间＞6个月和复治的患者MTB-L型感染率较高,若在痰结核分枝杆菌培养的同时进行MTB-L型培养,不仅可使肺结核患者细菌学的诊断率提高一定比例,而且对肺结核患者的治疗以及判断预后也具有重要意义.
作者：黄燊德 刊期： 2006年第05期
在肺结核病例中,痰涂片阴性肺结核病占很大比例,其诊断比较复杂,目前仍无统一标准.本文对近年来涂阴肺结核病诊断研究进行了综述,分别对涂阴肺结核、涂阴肺结核的诊断、涂阴肺结核的鉴别诊断及改进诊断进行了阐述.
作者：宋烨；杨本付 刊期： 2006年第05期
目的观察感染旋毛虫的小鼠不同时期IL-2的水平及旋毛虫在小鼠体内的发育.方法小鼠感染旋毛虫后,采用ELISA检测小鼠不同时期外周血中IL-2含量.取不同部位肌肉观察旋毛虫在鼠体内的发育.结果小鼠感染旋毛虫后1～5周IL-2的含量较正常组明显增加.小鼠感染旋毛虫后21 d即可检出旋毛虫,以膈肌中检出数为高,其次为咬肌,舌肌少.结论IL-2对感染旋毛虫小鼠早期具有一定的免疫抑制作用,感染后35～42 d幼虫密度高.
作者：张光玉；王云甫；黄朝芬；钟萍；王绍基；杨树国 刊期： 2006年第05期
目的探讨自体CD133+细胞肝门静脉移植对猕猴肝损伤的治疗意义,为人类肝损伤治疗提供新技术.方法猕猴每日皮下注射40%CCL4 0.5 ml/kg复制肝损伤模型后连续饲喂高脂饲料,经肝功能生化指标检测及肝穿组织病理学观察确认肝损伤后,免疫磁珠法分离自体骨髓CD133+细胞,按3×105细胞/kg将细胞植入肝门静脉,植入后60 d进行肝功能相关指标检测及组织病理学观察.结果连续注射CCL4 4 d后,血清谷草转氨酶(AST)、谷丙转氨酶(ALT)、球蛋白(GLOB)均显著升高,而总蛋白(TP)和白蛋白含量无变化(P＞0.05),肝组织结构紊乱,部分肝细胞水肿、变性和坏死,汇管区及周围有大量炎性细胞浸润.第二次肝门静脉细胞移植后30 d,血清AST、ALT活性和GLOB、BIL含量显著低于对照组(P＜0.05),而TP、ALB、LDL含量高于对照组(P＜0.05),治疗组肝组织结构清楚,而对照组有部分纤维增生和肝细胞有脂肪变性.结论自体CD133+细胞肝门静脉移植能有效促进肝损伤修复和阻止猕猴肝损伤的发展,改善猕猴肝组织结构和功能.
作者：侯宝华；潘兴华；庞荣清；和占龙；张步振；简志祥；孙建；区金锐 刊期： 2006年第05期
目的建立微柱凝胶技术在新生儿溶血病(HDN)血清学检查的方法.方法采用微柱凝胶抗人球蛋白方法和传统抗人球蛋白试验检测HDN标本,通过比较,进行两种方法学评价.结果2004年送检标本中共检出430例HDN,其中ABO-HDN416例,RH-HDN13例,MN-HDN1例,两种方法HDN实验阳性率无显著性差异.在直抗试验中微柱凝胶法阳性率65.38%,抗人球法阳性率58.17%,结果有差异(x2=4.518,0.025＜P＜0.05).结论微柱凝胶技术敏感度高,操作简单,结果客观,值得推广.
作者：黎世杰；罗广平；赵阳 刊期： 2006年第05期
目的寻找新的支持HCV亚基因复制子复制的支持细胞,为研究HCV复制机制、HCV与宿主间的关系,及建立HCV缺陷病毒培养体系提供材料储备.方法质粒pNNeo3-5B含HCV-N亚基因复制子cDNA,该复制子RNA能在Huh7细胞中有效复制.缺失其中的BsaB Ⅰ-Hpa Ⅰ片段(含NS5B的GDD基序),生成缺陷型复制子质粒pNNeo3-5B(△).将以上两个质粒线性化后体外转录出复制子RNA:rNNeo3-5B和rNNeo3-5B(△).将rNNeo3-5B电转染Huh7、SMMC7721、HepG2、BEL7402、Lo2、CBRH7919、BHIK21、Vero E6、293和293T等细胞,以G418筛选3周,观察克隆形成情况,并检测克隆中HCV特异性RNA和蛋白.结果在CBRH7919和BHK21获得G418抗性克隆,转染rNNeo3-5B(△)的细胞和未转染复制子的细胞则全部死亡.RT-PCR检测证实各克隆都含有HCV 5'NTR和新霉素磷酸转移酶基因,间接免疫荧光和Western blot检测证实有大量表达的HCV NS3和NS5A蛋白,未转染复制子的细胞全为阴性.结论本研究证实CBRH7919和BHK21能支持HCV复制子的自主复制,可作为建立HCV病毒培养体系的备选材料.
作者：邬刚；吴英松；董文其；陈白虹；李明 刊期： 2006年第05期
目的检测ABCA1基因第7号外显子中R219K SNP的发生率,并探讨不同基因型与炎性因子IL-1 β、ICAM-1水平的关系.方法冠心病患者112例及正常人108例,分别进行PCR反应及限制性酶切,确定不同的基因型,并检测每例血浆中炎性因子IL-1β、ICAM-1的水平.结果RR、RK、KK基因型之间进行多重比较.冠心病组IL-1β水平差异显著(P＜0.01),对照组中IL-1β水平无明显差异(P＞0.05);冠心病组及对照组ICAM-1水平差异显著(P＜0.01).以RR型高,KK型低.结论ABCA1基因第7号外显子中R219K位点K等位基因能显著降低ICAM-1的水平,能显著降低冠心病人的IL-1β水平,但对正常人IL-1β无明显影响.
作者：查政；吴芬芳；王琦光；郭志刚 刊期： 2006年第05期
目的为了解佛山市水痘疫苗免疫效力(即疫苗保护效果),进而探讨水痘爆发的原因.方法选择2004年以来4起有代表性的水痘爆发,进行1:2配比的病例对照研究,共调查370例,并计算配比和不配比的水痘疫苗效力.结果病例组的水痘疫苗接种率显著低于对照组.配比后得出的水痘疫苗效力为84.4%.结论水痘疫苗效力＜90%,仍偏低.水痘疫苗效力不够高和免疫接种率偏低是水痘爆发的主要原因.
作者：梁飞琼；何炳欣；杨国；郭志强 刊期： 2006年第05期
目的探讨小鼠肝癌微波消融(microwave ablation,MA)对宿主Th2/Th1免疫应答的影响.方法建立C57BL/6J小鼠Hepa1-6细胞移植肝癌模型,对肿瘤微波消融或手术切除,取正常、荷瘤、手术后及MA后四组小鼠,每组6只,用ELISA法检测各组周围血血浆Th1(IL-12、IFN-γ)和Th2(IL-4、IL-10)细胞因子水平(pg/ml).结果荷瘤组比正常组,细胞因子IL-10增加,IL-4、IL-12和IFN-γ下降(均P＞0.05).MA组较荷瘤组,IL-12、IFN-γ显著上升(均P＜0.01),IL-4明显降低(P＜0.05),IL-10有所下降(P＞0.05).手术组比荷瘤组,IL-12、IFN-γ上升,IL-4、IL-10下降(均P＞0.05).MA组比手术组,IL-12明显上升(P＜0.05),IFN-γ升高,IL-4和IL-10下降(均P＞0.05).结论MA原位灭活小鼠肝癌可促进宿主免疫应答的Th2/Th1偏移,并且MA较手术切除具有较强的免疫刺激效应.
作者：刘大全；冯炼强；吕明德；谭进富；王竹；周忠信 刊期： 2006年第05期
目的探讨急性心肌梗死患者出现完全性右束支传导阻滞的临床特点及对预后的影响.方法对近8年来收治的急性心肌梗死患者的资料进行回顾性分析,将临床资料分为两组,观察组(25例)为有新出现持续性完全性右束支传导阻滞的急性心肌梗死患者;对照组(160例)为同期收治的无束支传导阻滞的急性心肌梗死患者.进行一般情况及并发症比较,临床经过及住院病死率比较.结果两组一般情况及并发症比较无明显差异(P＞0.05),两组临床经过及住院病死率比较,观察组中的休克、恶性心律失常、前壁心肌梗死的发生率,心功能不全、房室传导阻滞的发生率及病死率均较对照组显著增高(P＜0.05).结论急性心肌梗死出现持续性完全性右束支传导阻滞提示病情重、并发症发生多,预后差.
作者：王树源；崔翠萍 刊期： 2006年第05期
目的建立一种比现有方法敏感、特异性高、重复性好的实时荧光定量PCR检测的新方法检测人类mdr1基因.方法以含有目的基因mdr1cDNA的质粒pHaMDR1/A为阳性模板,用Primer express 2.0引物设计软件设计引物和Taq Man-MGB探针,建立荧光定量PCR检测方法.结果当待扩增DNA浓度在3.601×103cps/ml～3.601×109cps/ml范围时,模板浓度与循环阈值(Ct)之间的相关性良好,相关系数r2大于0.98.结论应用Taq Man-MGB探针的实时荧光定量PCR方法检测人类mdr1基因,具有灵敏度高、特异性高和精确度高等优点,可作为进一步研究人类mdr1基因的方法.
作者：邹亚伟；胡斌；何蕴韶；陈福雄；封志纯 刊期： 2006年第05期
目的探讨胞嘧啶脱氨酶(CD)和胸苷激酶(TK)融合双自杀基因系统对膀胱癌细胞的杀伤作用.方法利用含有CD-TK双自杀融合基因及绿色荧光蛋白(GFP)基因的复制缺陷腺病毒感染膀胱癌细胞株Mb49细胞,RT-PCR检测CD及TK表达,MTT法测定感染病毒Mb49细胞对GCV和/或5-FC敏感性及旁观者效应.结果RT-PCR可检测到腺病毒感染的Mb49细胞中CD及TK表达,腺病毒感染的Mb49细胞对GCV和/或5-FC敏感性增强,且细胞存活率随前药浓度增加而明显降低,联合应用杀伤效果更强.在混合培养细胞中转染细胞为10%时,GCV组、5-FC组、GCV+5-FC组细胞存活率分别为(79.55±0.88)%、(77.17±3.38)%、(49.21±1.78)%,有较强的旁观者效应.结论腺病毒载体能有效转导CD-TK融合双自杀基因在膀胱癌细胞中表达,CD-TK融合双基因系统对膀胱癌细胞有更强杀伤效果和更明显的旁观者效应,优于单基因系统,值得进一步研究.
作者：谭万龙；谢毅；郑少斌；吴元东；朱文辉 刊期： 2006年第05期
目的探讨血清中游离的血红蛋白(不同程度溶血)对检测血清磷酸肌酸激酶(CK)活力的影响.方法用自制血红蛋白(Hb)液,制成不同浓度Hb含量的血清标本,用自动血细胞计数仪检测其Hb浓度,用自动生化仪配对检测原血清以及含不同浓度Hb血清的CK活力(U/L).结果含不同浓度Hb血清比原血清CK活力均有不同程度的升高,且CK活力升高的程度与血清中Hb的浓度成正相关.结论在检测血清CK活力时,不宜采用溶血的血清标本,以免造成CK活力的假性增高.
作者：陈勇；吴建曾；黎玉坚 刊期： 2006年第05期
目的探讨神经内镜技术和手术显微镜结合单鼻孔经蝶微侵袭垂体瘤切除的效果.方法从2003年7月～2005年8月在神经内镜和手术显微镜下单鼻孔经鼻蝶入路切除23例垂体瘤.结果在神经内镜和手术显微镜下全切肿瘤19例,近全切4例,术后21例内分泌化验恢复正常,10例视力好转,4例病人出现暂时性尿崩,2例病人出现脑脊液漏,均于1～2周后恢复.23例病人随访3～16个月,未见复发,无传统唇下入路常见的唇部麻木、鼻中隔穿孔等并发症.结论神经内镜辅助下经鼻蝶入路切除垂体瘤能达到微创的目的,能更好显示鞍上和鞍旁的肿瘤,神经内镜能清晰显示手术显微镜不能看清的部位,而手术显微镜能提供三维视野,在经鼻入路过程及切除鞍区肿瘤的主体等方面具有其优势,二者结合能更安全更完全切除肿瘤.
作者：杨炳湖；罗洪海；荆国杰；黄月红 刊期： 2006年第05期
目的了解2型糖尿病并发急性心肌梗死的临床特点及预后.方法对255例糖尿病并急性心肌梗死和200例非糖尿病急性心肌梗死做临床对比研究.结果发现2型糖尿病发生无痛性急性心肌梗死的构成比(36.47%)较非糖尿病者发生的构成比(10.5%)高(P＜0.005);发生大面积梗死的构成比(32.94%)比对照组的发生构成比(15.5%)明显升高(P＜0.005);严重心律失常的发生构成比(60.39%)及死亡构成比(22.35%)均明显高于非糖尿病者(39%、9%)(P＜0.025和0.005),主要死因均为泵衰竭和心跳骤停;入院第一周内的死亡构成比(13.73%)较非糖尿病者(4%)明显升高(P＜0.005).结论2型糖尿病并发急性心肌梗死患者较无糖尿病的急性心肌梗死患者病情重、预后差、第一周内及住院期的死亡率高.
作者：夏碧文；马中富；何建桂；马虹；何玉辉 刊期： 2006年第05期
目的观察抗小鼠TLR2胞外段单表位抗体(TSP-2)对C48/80诱导的肥大细胞瘤P815细胞脱颗粒的影响.方法用RT-PCR、免疫组化检测了小鼠肥大细胞瘤P815细胞在mRNA水平的表达及膜表面TLR2与抗体TSP-2的结合;利用激光共聚焦显微镜观察小鼠TLR2胞外段单表位抗体TSP-2对C48/80诱导的肥大细胞瘤P815细胞脱颗粒的影响.结果P815细胞在mRNA水平以及膜表面均有TLR2表达,抗体TSP-2能有效抑制C48/80诱导的肥大细胞瘤P815细胞脱颗粒反应所致的形态学改变与钙流出.结论抗小鼠TLR2胞外段单表位抗体TSP-2可与P815细胞膜表面TLR2结合,并能抑制C48/80诱导的P815肥大瘤细胞脱颗粒.
作者：杨翠兰；郑健；罗冰；刘艳君；富宁 刊期： 2006年第05期
针对当前医学专业中实施双语教学的现状,从教师的外语水平、教师对教材的理解和掌握及教学方法三个方面探讨了在医学专业中从事双语教学的教师的素质问题.
作者：陈新宇 刊期： 2006年第05期
热带医学杂志
主管:广东省科学技术协会
主办：广东省寄生虫学会 中华预防医学会
