陈新宇
目的构建HE4基因及蛋白表达系统,用于卵巢癌的早期诊断.方法提取卵巢癌细胞H08910的总RNA,利用RT-PCR技术扩增HE4基因,然后将该片段进行T-A克隆并测序鉴定,纯化回收后亚克隆于原核表达载体PGEX-4T-1中,然后提取质粒,酶切鉴定,后经IPTG诱导,原核表达重组子在TOP10宿主菌进行表达,并进行SDS-PAGE、Western Blot分析与鉴定.结果应用RT-PCR技术,从卵巢癌HO8910的总RNA中扩增到一条大小约为400 bp的片段,经T-A克隆与测序鉴定,证实此片段为HE4基因,将PGEX-4T-1重组子转化入宿主菌,用IPTG诱导菌体表达HE4重组蛋白,经SDS-PAGE电泳和Western Blot鉴定证实,在相对分子量约39 000处可见明显的特异性的高表达条带.结论已成功克隆HE4基因,并经IPTG诱导在TOP10宿主菌中表达了相应的蛋白,为进一步制备卵巢癌的早期诊断试剂奠定基础.
作者：陈洁晶；吴英松；宁云山；董文其；李明 刊期： 2006年第05期
目的探讨HBsAg(-)/HBeAg(+)/HBcAb(+)/preS1Ag(+)少见血清学模式形成的原因,了解该少见模式乙肝病毒携带者体内血清学标志物及其HBV DNA变化情况.方法采用ELISA、电化学发光免疫分析法(ECLIA)、巢式PCR和实时荧光定量PCR,对该少见模式乙肝病毒携带者HBV血清学标志物和HBV DNA进行检测,每隔3个月复查一次,持续15个月.结果在研究的时间内,国产ELISA试剂盒检测结果均为HBsAg(-)/HBeAg(+)/HBcAb(+)/preS1Ag(+);电化学发光免疫分析法检测HBsAg均为阳性,并随时间延续HBsAg水平逐渐下降;巢式PCR与实时荧光定量PCR检测HBV DNA为阳性,病毒载量上下波动.结论该乙肝病毒携带者血清学少见模式HBsAg为假阴性,动态观察HBsAg与HBV DNA水平,了解HBV复制情况,可为临床诊治提供可靠的依据.
作者：朱平安；祝玲玲；申群喜；谭德明；朱红秋；谭萍；陈素文 刊期： 2006年第05期
目的了解肺结核患者MTB-L型的感染情况,并探讨其培养的临床意义.方法选取2004年1月～2004年12月确诊为肺结核患者的痰标本372例进行MTB-L型培养.结果MTB-L型总培养阳性率为16.7%.菌阳肺结核组MTB-L型培养阳性率为21.8%,菌阴组为9.6%;活动性肺结核组MTB-L型培养阳性率为18.6%,非活动性组为2.5%,两者差异极显著(P＜0.01);服药时间＞6个月组MTB-L型培养阳性率为33.8%,服药时间＜1个月组MTB-L型培养阳性率为10.9%,两者有极显著差异(P＜0.01).初治肺结核组MTB-L型培养阳性率为13.9%,复治组MTB-L型培养阳性率为35.4%,两者差异极显著(P＜0.01).结论肺结核患者MTB-L型感染占一定比例,服药时间＞6个月和复治的患者MTB-L型感染率较高,若在痰结核分枝杆菌培养的同时进行MTB-L型培养,不仅可使肺结核患者细菌学的诊断率提高一定比例,而且对肺结核患者的治疗以及判断预后也具有重要意义.
作者：黄燊德 刊期： 2006年第05期
目的探讨急性危重症患儿死亡的危险因素及临床对策.方法对2002年1月～2005年6月儿童监护病房(PICU)收治的282例患儿在入院第1、3、7天作小儿危重病例评分(PCIS)和全身炎症综合征(SIRS)、多器官功能障碍(MODS)指标的检查,并记录患儿的临床资料.结果SIRS组病死率明显高于非SIRS组(P＜0.05);死亡组SIRS病例明显多于存活组,且其PCIS明显降低;PCIS 70分以下者病死率高于71～90分者(P＜0.01),PCIS越低,病情越重,SIRS病例越多.PCIS与SIRS呈负相关.发生3个或3个以上器官功能障碍时病死率明显高于2个(x2=20.2,P＜0.01),随着功能障碍器官数目的增加,死亡率亦增加.结论降低急危重症患儿的病死率关键是积极控制炎症反应,加强护理及临床监护,阻止SIRS向MODS的发展,保护重要器官的功能.
作者：张坤尧；卢远达；余蓉 刊期： 2006年第05期
目的为了解佛山市水痘疫苗免疫效力(即疫苗保护效果),进而探讨水痘爆发的原因.方法选择2004年以来4起有代表性的水痘爆发,进行1:2配比的病例对照研究,共调查370例,并计算配比和不配比的水痘疫苗效力.结果病例组的水痘疫苗接种率显著低于对照组.配比后得出的水痘疫苗效力为84.4%.结论水痘疫苗效力＜90%,仍偏低.水痘疫苗效力不够高和免疫接种率偏低是水痘爆发的主要原因.
作者：梁飞琼；何炳欣；杨国；郭志强 刊期： 2006年第05期
目的观察感染旋毛虫的小鼠不同时期IL-2的水平及旋毛虫在小鼠体内的发育.方法小鼠感染旋毛虫后,采用ELISA检测小鼠不同时期外周血中IL-2含量.取不同部位肌肉观察旋毛虫在鼠体内的发育.结果小鼠感染旋毛虫后1～5周IL-2的含量较正常组明显增加.小鼠感染旋毛虫后21 d即可检出旋毛虫,以膈肌中检出数为高,其次为咬肌,舌肌少.结论IL-2对感染旋毛虫小鼠早期具有一定的免疫抑制作用,感染后35～42 d幼虫密度高.
作者：张光玉；王云甫；黄朝芬；钟萍；王绍基；杨树国 刊期： 2006年第05期
目的探讨日本血吸虫Sj26GSTDNA疫苗辅以佐剂FQ2共同作用对小鼠的免疫保护作用.方法采用FQ2 12 μg/只分别与Sj26 GST DNA疫苗混合经股四头肌接种BALB/c小鼠,共接种3次,同时设Sj26 GSTDNA疫苗组与生理盐水对照组,接种后4周以日本血吸虫尾蚴攻击感染,感染后6周剖杀小鼠,计数减虫率和减卵率.结果FQ2+疫苗组的减虫率与减卵率分别为34.24%与41.12%,而疫苗组的减虫率与减卵率各为28.76%与29.03%,结果显示FQ2+疫苗组的减虫率与减卵率均高于疫苗组,减卵率差异显著(P＜0.05).结论FQ2对Sj26GST DNA疫苗有明显的增效作用,提高了DNA 26Kda疫苗对小鼠的保护作用.
作者：郭广洲；陈延娥；甘燕；姜昌富；石佑恩 刊期： 2006年第05期
目的探讨神经内镜技术和手术显微镜结合单鼻孔经蝶微侵袭垂体瘤切除的效果.方法从2003年7月～2005年8月在神经内镜和手术显微镜下单鼻孔经鼻蝶入路切除23例垂体瘤.结果在神经内镜和手术显微镜下全切肿瘤19例,近全切4例,术后21例内分泌化验恢复正常,10例视力好转,4例病人出现暂时性尿崩,2例病人出现脑脊液漏,均于1～2周后恢复.23例病人随访3～16个月,未见复发,无传统唇下入路常见的唇部麻木、鼻中隔穿孔等并发症.结论神经内镜辅助下经鼻蝶入路切除垂体瘤能达到微创的目的,能更好显示鞍上和鞍旁的肿瘤,神经内镜能清晰显示手术显微镜不能看清的部位,而手术显微镜能提供三维视野,在经鼻入路过程及切除鞍区肿瘤的主体等方面具有其优势,二者结合能更安全更完全切除肿瘤.
作者：杨炳湖；罗洪海；荆国杰；黄月红 刊期： 2006年第05期
目的对钩端螺旋体黄疸出血群赖株ompL1基因进行克隆、表达及产物的纯化.方法从我国钩端螺旋体黄疸出血群赖株基因组中扩增全长ompL1基因片段,克隆至pGEM-T载体,回收经EcoR Ⅰ+HindⅢ双酶切产物,将其与表达载体pET32a连接,通过酶切图谱和序列分析法筛选出重组质粒.将含重组质粒的宿主菌诱导表达后,提取全菌总蛋白进行SDS-PAGE电泳分析.结果获得pET9L重组质粒,经诱导表达后得到分子量为31 000的重组蛋白.测序得到的ompL1基因核苷酸序列与已发表ompL1基因序列(GenbankI61405)同源性为99.8%,所推导的氨基酸序列(Genbank LA3138)的同源性达100%.结论成功构建了ompL1基因的原核表达系统,为进一步制备以OmpL1为检测靶抗原的免疫层析试剂盒奠定基础.
作者：林琳；赵卫；罗军；龙敏；张文炳；杨军；曹虹 刊期： 2006年第05期
目的探讨大肠癌伴转移性肝癌的门静脉的特点.方法回顾250例大肠癌伴转移性肝癌患者的门静脉流速、直径及癌栓发生率,分析其门静脉的特点.结果大肠癌伴转移性肝癌患者门静脉的直径为(10.4±1.34)mm,门静脉流速为(19.7±5.2)cm/s;门静脉癌栓发生率为0;与原发性肝癌的门静脉癌栓发生率相比,存在显著性差异(P＜0.01).结论在大肠癌伴转移性肝癌中,门静脉的流速及直径改变不显著;与原发性肝癌的门静脉癌栓发生率相比较,大肠癌伴转移性肝癌的门静脉癌栓发生率罕见.
作者：王辉；曾山崎；盛立红 刊期： 2006年第05期
目的分析重庆市2002年霍乱疫情流行特点及规律,为制定防制措施提供依据.方法对确诊的霍乱患者及其密切接触者进行个案调查,采肛拭和(或)大便取样,进行霍乱弧菌培养分离和鉴定.结果全市发生霍乱疫情23起,确诊病例173例,死亡5例,带菌者101人.霍乱感染率、发病率、死亡率和病死率分别为0.884/10万、0.558/10万、0.016/10万、2.89%.病例相对集中在渝西地区,6～8月为发病高峰,以农民发病为主.食物因素引起的病例数显著高于其它传播因素(U=6.62,P＜0.01).优势流行菌型为埃尔托霍乱弧菌稻叶1d菌型,同时首次出现霍乱弧菌O139群.结论重庆市霍乱传播方式以食源性传播为主,流行株发生改变,应制定针对性强的综合防制措施,控制和减少疫情的发生和流行.
作者：罗兴建；肖邦忠；张静秋；吴国辉；易娟；龙江 刊期： 2006年第05期
目的探讨急性心肌梗死患者出现完全性右束支传导阻滞的临床特点及对预后的影响.方法对近8年来收治的急性心肌梗死患者的资料进行回顾性分析,将临床资料分为两组,观察组(25例)为有新出现持续性完全性右束支传导阻滞的急性心肌梗死患者;对照组(160例)为同期收治的无束支传导阻滞的急性心肌梗死患者.进行一般情况及并发症比较,临床经过及住院病死率比较.结果两组一般情况及并发症比较无明显差异(P＞0.05),两组临床经过及住院病死率比较,观察组中的休克、恶性心律失常、前壁心肌梗死的发生率,心功能不全、房室传导阻滞的发生率及病死率均较对照组显著增高(P＜0.05).结论急性心肌梗死出现持续性完全性右束支传导阻滞提示病情重、并发症发生多,预后差.
作者：王树源；崔翠萍 刊期： 2006年第05期
目的分别采用分离外周血单个核细胞(PBMC)法和全血直接染色法的组织相容性抗原-肽五聚体(MHC pentamers)流式细胞技术定量分析慢性乙型肝炎(下称慢性乙肝)患者体内乙型肝炎病毒(HBV)特异性的细胞毒性T淋巴细胞(CTL),并对两种方法进行比较.方法从慢性乙肝患者外周血中分离PBMC,用HLA-A2*HBcAg抗原表位肽-MHC Pentamers及CD8单克隆抗体染色后,用流式细胞仪检测HBV特异性的CTL细胞,部分患者同时采用全血直接染色方法进行HBV特异性的CTL细胞的检测.结果32例HLA-A2阳性的慢性乙肝患者外周血均可检测到HBV特异性的CTL细胞,五聚体阳性细胞占CD8阳性细胞的比例平均为(1.34±1.06)%,两种染色方法检测的特异性的CTL细胞无统计学差异.结论全血直接染色结合五聚体流式细胞技术检测抗原特异性CTL是一种简便、敏感和可行的抗原表位特异性CTL检测方法.
作者：邓洪；韩晓燕；陈幼明；张富程；高志良；姚集鲁 刊期： 2006年第05期
目的探讨小鼠肝癌微波消融(microwave ablation,MA)对宿主Th2/Th1免疫应答的影响.方法建立C57BL/6J小鼠Hepa1-6细胞移植肝癌模型,对肿瘤微波消融或手术切除,取正常、荷瘤、手术后及MA后四组小鼠,每组6只,用ELISA法检测各组周围血血浆Th1(IL-12、IFN-γ)和Th2(IL-4、IL-10)细胞因子水平(pg/ml).结果荷瘤组比正常组,细胞因子IL-10增加,IL-4、IL-12和IFN-γ下降(均P＞0.05).MA组较荷瘤组,IL-12、IFN-γ显著上升(均P＜0.01),IL-4明显降低(P＜0.05),IL-10有所下降(P＞0.05).手术组比荷瘤组,IL-12、IFN-γ上升,IL-4、IL-10下降(均P＞0.05).MA组比手术组,IL-12明显上升(P＜0.05),IFN-γ升高,IL-4和IL-10下降(均P＞0.05).结论MA原位灭活小鼠肝癌可促进宿主免疫应答的Th2/Th1偏移,并且MA较手术切除具有较强的免疫刺激效应.
作者：刘大全；冯炼强；吕明德；谭进富；王竹；周忠信 刊期： 2006年第05期
目的观察抗小鼠TLR2胞外段单表位抗体(TSP-2)对C48/80诱导的肥大细胞瘤P815细胞脱颗粒的影响.方法用RT-PCR、免疫组化检测了小鼠肥大细胞瘤P815细胞在mRNA水平的表达及膜表面TLR2与抗体TSP-2的结合;利用激光共聚焦显微镜观察小鼠TLR2胞外段单表位抗体TSP-2对C48/80诱导的肥大细胞瘤P815细胞脱颗粒的影响.结果P815细胞在mRNA水平以及膜表面均有TLR2表达,抗体TSP-2能有效抑制C48/80诱导的肥大细胞瘤P815细胞脱颗粒反应所致的形态学改变与钙流出.结论抗小鼠TLR2胞外段单表位抗体TSP-2可与P815细胞膜表面TLR2结合,并能抑制C48/80诱导的P815肥大瘤细胞脱颗粒.
作者：杨翠兰；郑健；罗冰；刘艳君；富宁 刊期： 2006年第05期
尘螨变应原是室内主要的致敏因素,可引起哮喘、过敏性鼻炎、变应性球结膜炎等过敏性疾病.对居室中尘螨含量的检测可用尘螨计数、尘螨变应原(house dust mite allergen,HDMA)测定和尘螨代谢物鸟嘌呤测定等,其中对尘螨变应原定量测定的方法有放射免疫测定(RIA)、酶联免疫吸附试验(ELISA)双抗体夹心法等.通过这些方法可检测环境中尘螨过敏原含量,监测人群暴露水平,从而可有效地预防尘螨过敏性疾病的发生;还可检测采取的控制措施的有效性,同时为尘螨的流行病学调查提供了一个有效的手段.
作者：练玉银；杨杏芬 刊期： 2006年第05期
目的通过调查广州市水源水中存在的污染物质的种类,分析各类污染物质的可能危害,并提出解决饮用水源水的方向.方法所需资料来自于1999～2004年广州市排入Z江的主要河涌水污染指标实验室监测数据以及各水厂水源水的实验室监测数据,按照<生活饮用水标准检验法>GB5750-1985、GB/T5009-2003、卫生部<生活饮用水检验规范>2001监测各项理化指标.结果广州地区水源水中有机污染物占所有污染物的70%以上,无机污染物中金属锰和亚硝酸盐氮是常见的超标项目;有机污染物主要来源于城市生活污水和工业废水,无机污染物主要是工业废水以及河底沉积重金属的溶解,致病性微生物主要来源于粪便和医院污水.结论有机污染物是广州市水源水污染的主要因素,污染主要来源是城市污水和生活垃圾,水源水的处理不能完全去除有害因素,需要寻找新的水源或采用新技术改善水质.
作者：孙兰；杨轶戬；廖育煌；钟嶷；黎淑端；黄汝明 刊期： 2006年第05期
目的探讨自体CD133+细胞肝门静脉移植对猕猴肝损伤的治疗意义,为人类肝损伤治疗提供新技术.方法猕猴每日皮下注射40%CCL4 0.5 ml/kg复制肝损伤模型后连续饲喂高脂饲料,经肝功能生化指标检测及肝穿组织病理学观察确认肝损伤后,免疫磁珠法分离自体骨髓CD133+细胞,按3×105细胞/kg将细胞植入肝门静脉,植入后60 d进行肝功能相关指标检测及组织病理学观察.结果连续注射CCL4 4 d后,血清谷草转氨酶(AST)、谷丙转氨酶(ALT)、球蛋白(GLOB)均显著升高,而总蛋白(TP)和白蛋白含量无变化(P＞0.05),肝组织结构紊乱,部分肝细胞水肿、变性和坏死,汇管区及周围有大量炎性细胞浸润.第二次肝门静脉细胞移植后30 d,血清AST、ALT活性和GLOB、BIL含量显著低于对照组(P＜0.05),而TP、ALB、LDL含量高于对照组(P＜0.05),治疗组肝组织结构清楚,而对照组有部分纤维增生和肝细胞有脂肪变性.结论自体CD133+细胞肝门静脉移植能有效促进肝损伤修复和阻止猕猴肝损伤的发展,改善猕猴肝组织结构和功能.
作者：侯宝华；潘兴华；庞荣清；和占龙；张步振；简志祥；孙建；区金锐 刊期： 2006年第05期
目的在CHO细胞中表达小鼠TLR2(mTLR2).方法将目的基因克隆到真核表达载体pcDNA3.1中,并将其转染到CHO细胞,用G418筛选阳性克隆.采用PCR方法,检测外源基因的整合.采用Western blot、免疫组织化学对转染细胞的mTLR2表达进行鉴定.结果成功构建了pcDNA-mTLR2重组质粒.将其转染到CHO细胞,经G418筛选获得阳性细胞克隆.阳性细胞克隆经PCR检测表明TLR2基因得到稳定整合.Western blot分析显示在分子量约95 000处可见清晰的阳性反应条带.免疫组织化学检测显示转染细胞表达mTLR2.结论获得了表达mTLR2的细胞株,为进一步进行相关研究奠定了基础.
作者：赵文忠；罗招凡；刘艳君；杨翠兰；朱平；江丽芳 刊期： 2006年第05期
目的探讨血清中游离的血红蛋白(不同程度溶血)对检测血清磷酸肌酸激酶(CK)活力的影响.方法用自制血红蛋白(Hb)液,制成不同浓度Hb含量的血清标本,用自动血细胞计数仪检测其Hb浓度,用自动生化仪配对检测原血清以及含不同浓度Hb血清的CK活力(U/L).结果含不同浓度Hb血清比原血清CK活力均有不同程度的升高,且CK活力升高的程度与血清中Hb的浓度成正相关.结论在检测血清CK活力时,不宜采用溶血的血清标本,以免造成CK活力的假性增高.
作者：陈勇；吴建曾；黎玉坚 刊期： 2006年第05期
热带医学杂志
主管:广东省科学技术协会
主办：广东省寄生虫学会 中华预防医学会
