学术投稿

全血染色法和分离外周血单个核细胞染色的五聚体技术检测抗原特异性CTL的比较

邓洪;韩晓燕;陈幼明;张富程;高志良;姚集鲁

关键词:T淋巴细胞, 细胞毒性, HLA抗原, 全血直接染色法, MHC-五聚体
摘要:目的分别采用分离外周血单个核细胞(PBMC)法和全血直接染色法的组织相容性抗原-肽五聚体(MHC pentamers)流式细胞技术定量分析慢性乙型肝炎(下称慢性乙肝)患者体内乙型肝炎病毒(HBV)特异性的细胞毒性T淋巴细胞(CTL),并对两种方法进行比较.方法从慢性乙肝患者外周血中分离PBMC,用HLA-A2*HBcAg抗原表位肽-MHC Pentamers及CD8单克隆抗体染色后,用流式细胞仪检测HBV特异性的CTL细胞,部分患者同时采用全血直接染色方法进行HBV特异性的CTL细胞的检测.结果32例HLA-A2阳性的慢性乙肝患者外周血均可检测到HBV特异性的CTL细胞,五聚体阳性细胞占CD8阳性细胞的比例平均为(1.34±1.06)%,两种染色方法检测的特异性的CTL细胞无统计学差异.结论全血直接染色结合五聚体流式细胞技术检测抗原特异性CTL是一种简便、敏感和可行的抗原表位特异性CTL检测方法.
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    作者:练玉银;杨杏芬 刊期: 2006年第05期

  • 猕猴自体骨髓CD133+细胞肝门静脉移植治疗肝损伤的实验研究

    目的探讨自体CD133+细胞肝门静脉移植对猕猴肝损伤的治疗意义,为人类肝损伤治疗提供新技术.方法猕猴每日皮下注射40%CCL4 0.5 ml/kg复制肝损伤模型后连续饲喂高脂饲料,经肝功能生化指标检测及肝穿组织病理学观察确认肝损伤后,免疫磁珠法分离自体骨髓CD133+细胞,按3×105细胞/kg将细胞植入肝门静脉,植入后60 d进行肝功能相关指标检测及组织病理学观察.结果连续注射CCL4 4 d后,血清谷草转氨酶(AST)、谷丙转氨酶(ALT)、球蛋白(GLOB)均显著升高,而总蛋白(TP)和白蛋白含量无变化(P>0.05),肝组织结构紊乱,部分肝细胞水肿、变性和坏死,汇管区及周围有大量炎性细胞浸润.第二次肝门静脉细胞移植后30 d,血清AST、ALT活性和GLOB、BIL含量显著低于对照组(P<0.05),而TP、ALB、LDL含量高于对照组(P<0.05),治疗组肝组织结构清楚,而对照组有部分纤维增生和肝细胞有脂肪变性.结论自体CD133+细胞肝门静脉移植能有效促进肝损伤修复和阻止猕猴肝损伤的发展,改善猕猴肝组织结构和功能.

    作者:侯宝华;潘兴华;庞荣清;和占龙;张步振;简志祥;孙建;区金锐 刊期: 2006年第05期

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    作者:谭万龙;谢毅;郑少斌;吴元东;朱文辉 刊期: 2006年第05期

  • 水痘爆发病例的接种效率分析

    目的为了解佛山市水痘疫苗免疫效力(即疫苗保护效果),进而探讨水痘爆发的原因.方法选择2004年以来4起有代表性的水痘爆发,进行1:2配比的病例对照研究,共调查370例,并计算配比和不配比的水痘疫苗效力.结果病例组的水痘疫苗接种率显著低于对照组.配比后得出的水痘疫苗效力为84.4%.结论水痘疫苗效力<90%,仍偏低.水痘疫苗效力不够高和免疫接种率偏低是水痘爆发的主要原因.

    作者:梁飞琼;何炳欣;杨国;郭志强 刊期: 2006年第05期

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    作者:赵文忠;罗招凡;刘艳君;杨翠兰;朱平;江丽芳 刊期: 2006年第05期

  • 微柱凝胶技术在新生儿溶血病检测中的应用

    目的建立微柱凝胶技术在新生儿溶血病(HDN)血清学检查的方法.方法采用微柱凝胶抗人球蛋白方法和传统抗人球蛋白试验检测HDN标本,通过比较,进行两种方法学评价.结果2004年送检标本中共检出430例HDN,其中ABO-HDN416例,RH-HDN13例,MN-HDN1例,两种方法HDN实验阳性率无显著性差异.在直抗试验中微柱凝胶法阳性率65.38%,抗人球法阳性率58.17%,结果有差异(x2=4.518,0.025<P<0.05).结论微柱凝胶技术敏感度高,操作简单,结果客观,值得推广.

    作者:黎世杰;罗广平;赵阳 刊期: 2006年第05期

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    目的分析重庆市2002年霍乱疫情流行特点及规律,为制定防制措施提供依据.方法对确诊的霍乱患者及其密切接触者进行个案调查,采肛拭和(或)大便取样,进行霍乱弧菌培养分离和鉴定.结果全市发生霍乱疫情23起,确诊病例173例,死亡5例,带菌者101人.霍乱感染率、发病率、死亡率和病死率分别为0.884/10万、0.558/10万、0.016/10万、2.89%.病例相对集中在渝西地区,6~8月为发病高峰,以农民发病为主.食物因素引起的病例数显著高于其它传播因素(U=6.62,P<0.01).优势流行菌型为埃尔托霍乱弧菌稻叶1d菌型,同时首次出现霍乱弧菌O139群.结论重庆市霍乱传播方式以食源性传播为主,流行株发生改变,应制定针对性强的综合防制措施,控制和减少疫情的发生和流行.

    作者:罗兴建;肖邦忠;张静秋;吴国辉;易娟;龙江 刊期: 2006年第05期

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    作者:杨炳湖;罗洪海;荆国杰;黄月红 刊期: 2006年第05期

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    作者:魏泉德;黄艳;余新炳 刊期: 2006年第05期

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    目的分别采用分离外周血单个核细胞(PBMC)法和全血直接染色法的组织相容性抗原-肽五聚体(MHC pentamers)流式细胞技术定量分析慢性乙型肝炎(下称慢性乙肝)患者体内乙型肝炎病毒(HBV)特异性的细胞毒性T淋巴细胞(CTL),并对两种方法进行比较.方法从慢性乙肝患者外周血中分离PBMC,用HLA-A2*HBcAg抗原表位肽-MHC Pentamers及CD8单克隆抗体染色后,用流式细胞仪检测HBV特异性的CTL细胞,部分患者同时采用全血直接染色方法进行HBV特异性的CTL细胞的检测.结果32例HLA-A2阳性的慢性乙肝患者外周血均可检测到HBV特异性的CTL细胞,五聚体阳性细胞占CD8阳性细胞的比例平均为(1.34±1.06)%,两种染色方法检测的特异性的CTL细胞无统计学差异.结论全血直接染色结合五聚体流式细胞技术检测抗原特异性CTL是一种简便、敏感和可行的抗原表位特异性CTL检测方法.

    作者:邓洪;韩晓燕;陈幼明;张富程;高志良;姚集鲁 刊期: 2006年第05期

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    作者:张光玉;王云甫;黄朝芬;钟萍;王绍基;杨树国 刊期: 2006年第05期

  • 不同佐剂的弓形虫复合黏膜疫苗鼻内免疫小鼠诱导的黏膜免疫应答

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