学术投稿

代谢组学中生物标志物确认方法研究进展

陈文才;高燕红;杨杏芬

关键词:代谢组学, 差异性代谢物, 生物标志物
摘要:随着进入环境的化学物质的种类及数量的增加,人类健康受到威胁的情况越来越严重,这些化学物质对人体的生物效应日渐成为研究者关注的焦点。目前,传统的生物检测方法和技术所采用的指标能够在一定程度上反映环境因素在个体、种群和生态水平上的影响,但由于个体差异较大,相关指标的监测耗时较长以及不能阐明作用机制等原因,使得这些指标缺乏预警价值。作为指示机体接触环境污染物或疾病状态的信号,生物标志物能够反映生物体从健康至疾病的过程,有利于早期掌握职业接触情况、环境污染情况或疾病状态,并制定相关的预防性管理措施,从而达到避免或减轻职业接触、环境污染或疾病带来的危害。代谢组学是20世纪90年代中期发展起来的一门新兴学科,是研究关于生物体被扰动后(如基因的改变或环境变化后)其代谢产物(内源性代谢物质)种类、数量及其变化规律的学科[1]。在正常情况下,生物机体处于内稳态,当机体受到外界干扰时,机体的内稳态即被打破,从而导致某些代谢通路上调或下调。代谢组学则是采用高通量、高精密的仪器测量和先进的数据分析方法,以期捕捉到生物体内代谢通路的变化,并结合其他手段寻找有关特异性生物标志物的学科[2]。
中国职业医学杂志相关文献
  • 放射治疗与放射性骨损伤关系研究进展

    放射治疗是恶性肿瘤治疗的重要手段之一,随着其应用的日益广泛,人们在注重疗效的同时,也更加关注射线所导致的不良反应。在进行恶性肿瘤的放射治疗时,往往更多的是观察其对血常规的影响,是否发生放射性胃肠炎、肺炎和皮肤损伤,而忽略了其对骨组织的影响。有关放射性骨损伤的研究结果指出,骨组织受到射线照射后出现(临床发现)骨损伤的时间为2.4~10.0年[1]。 Schmeler等[2]研究发现骨组织受到射线照射后,短2.1个月即可出现骨损伤。放射性骨损伤按照损伤程度及临床表现分为放射性骨质疏松、放射性骨髓炎、放射性骨折、放射性骨坏死和放射性骨发育障碍[3]。放射性骨损伤主要见于放射治疗的患者,目前国内外有关于该领域的临床研究主要集中于宫颈癌放射治疗对骨盆的影响。本文主要针对放射治疗所致骨损伤的剂量、时间、病因和表现等进行综述,以期为尽早发现及预防辐射引起的骨损伤提供参考。

    作者:马力文 刊期: 2015年第04期

  • γ射线辐射对人淋巴细胞端粒长度影响研究

    目的:探讨γ射线辐射对人淋巴细胞平均端粒长度的影响。方法培养非洲淋巴细胞瘤病毒转化正常人B淋巴细胞( Peng-EBV细胞),接受钴-60γ射线照射,剂量率为0.96 Gy/min,吸收剂量分别为0.2、0.6、1.6、3.0和6.0 Gy;以不进行照射的细胞作为对照组。分别收集照射后24、48和72 h细胞样品,提取基因组DNA。采用定量聚合酶链式反应( Q-PCR)法检测样品平均端粒长度。分析γ辐射影响人淋巴细胞端粒长度的剂量-效应和时间-效应。结果端粒标准DNA的标准曲线为Ct=B+M ×lg D=35.264-3.339 lg D(相关系数=0.964,P<0.05)。γ射线单次照射可导致Peng-EBV细胞在照射后24~72 h端粒长度较同时间点对照组延长(P<0.05)。在0.0~1.6 Gy剂量范围内,γ射线诱导的Peng-EBV细胞端粒长度在照射后48 h有随剂量增加而增加的趋势(P<0.05)。0.6和1.6 Gy 2个剂量组的端粒延长幅度有随照后时间延长而增大的趋势(P<0.05)。结论Q-PCR方法适用于淋巴细胞绝对端粒长度检测。γ射线单次照射可以导致Peng-EBV细胞平均端粒长度增加。

    作者:郭月凤;张睿凤;张慧芳 刊期: 2015年第04期

  • 粉尘作业人员上岗前职业健康检查结果分析

    目的:分析粉尘作业人员上岗前职业健康检查结果。方法采用整群抽样方法,收集2013—2014年进行上岗前职业健康检查的26156名粉尘作业人员的检查结果进行分析。结果26156名调查对象均为男性,年龄中位数( M)为41.0(16.0~64.0)岁,其中年龄≤45岁者19388人(占74.12%);准备入职小型煤矿者26033人(占99.53%),入职中型水泥厂者123人(占0.47%);23399人(占89.50%)述称既往有粉尘作业史(有粉尘作业史组),2757人(占10.50%)否认既往有粉尘作业史(无粉尘作业史组)。该批调查对象疑似尘肺病检出率为1.25%;职业禁忌证检出率为21.38%,其中疑似观察对象检出率为20.10%,疑似肺结核检出率为0.43%,肺通气功能异常检出率为0.85%。有粉尘作业史组人群既往粉尘作业工龄M为4.0(1.0~40.0)年,粉尘作业工龄≤5年者16490人(占70.47%);既往曾在小型煤矿工作接触煤矽尘者23358人(占99.82%)。有粉尘作业史组人群疑似尘肺病检出率、疑似观察对象检出率和肺通气功能异常检出率均高于无粉尘作业史组(1.34% vs 0.47%,21.17%vs 11.06%,0.95%vs 0.00%,P<0.01)。结论开展粉尘作业人员上岗前职业健康检查有利于早期发现尘肺病和职业禁忌证。

    作者:黎东霞 刊期: 2015年第04期

  • 广东省职业病防治重点实验室简介

    改革开放30多年来,随着经济的快速增长和工业化进程,我国新发职业病病种不断增加,新职业病危害行业不断出现,严重威胁劳动者身体健康和生命。面对职业病防治的新问题、新形势和新挑战,我国既缺乏综合性职业病防治技术研究平台,也缺少人力、财力、物力等资源,难以解决职业病防治技术难题,迫切需要建立职业病防治重点实验室。为适应经济社会发展需要,2012年7月,我国第一个职业病防治重点实验室--广东省职业病防治重点实验室,经广东省人民政府批准立项建设。

    作者:广东省职业病防治重点实验室 刊期: 2015年第04期

  • 某铅蓄电池企业职业病危害综合治理效果分析

    目的:评价某铅蓄电池企业职业病危害综合治理效果。方法通过对某铅蓄电池企业的生产工艺、防护措施、防护用品和相关管理制度等进行综合治理,分析综合治理前后工作场所铅烟(尘)水平合格率和铅作业工人血铅水平超标率情况。结果综合治理后铅蓄电池企业生产工艺布局合理,职业性铅接触工人减少。综合治理后工作场所铅烟和铅尘水平合格率均高于综合治理前(100.0%vs 66.7%,95.6%vs 47.8%,P<0.01)。综合治理后铅作业工人血铅超标率低于综合治理前(20.6%vs 1.4%,P<0.01)。结论综合治理对减少铅蓄电池企业的职业病危害效果明显,仍应落实持续有效的管理措施,有效保护作业工人的健康。

    作者:曾运良;周志洋 刊期: 2015年第04期

  • 我国一般人群尿中铯、铍、锶、钡分布情况调查

    目的:调查我国一般人群尿中铯、铍、锶和钡元素水平,分析其人群分布特点。方法采用多阶段分层整群随机抽样方法,于2009—2010年抽取我国8个省级行政区的24个市县13309名6~60岁一般人群为调查对象,采集其尿样,采用电感耦合等离子体-质谱法检测尿中铯、铍、锶和钡的水平,分析其在不同性别和年龄人群中的分布情况。结果我国一般人群尿中铯、锶、钡的中位数( M)分别为4.32、47.80和0.87μg/L;尿铍的M低于方法检出限0.06μg/L,尿铍检出率为7.98%;男性人群尿中铯、锶和钡的水平均高于女性(4.57μg/L vs 4.10μg/L,51.33μg/L vs 44.04μg/L,0.96μg/L vs 0.77μg/L,P<0.001);不同年龄组人群尿中铯、锶和钡水平分别比较,差异均有统计学意义(P<0.001)。男性人群尿铍检出率高于女性(9.28%vs 6.63%,P<0.001);不同年龄组人群尿铍检出率比较,差异有统计学意义( P<0.001)。结论本调查获得我国一般人群尿中铯、铍、锶和钡水平的基础数据,不同性别和年龄人群尿中上述元素分布有差异。

    作者:陶雪;丁春光;潘亚娟;张爱华;吴邦华;黄汉林;朱醇;刘徳晔;朱宝立;许光;邵华;郑玉新;闫慧芳 刊期: 2015年第04期

  • 激光辐射对作业人员眼睛健康影响因素分析

    目的:观察激光作业人员眼睛健康情况,分析激光辐射作业人员眼睛健康的影响因素。方法采用横断面调查方法,以在2家电子加工企业从事激光辐射岗位作业的95名员工为接触组,以该2家企业从事非激光辐射岗位作业的136名员工为对照组,对2组人员进行眼睛自觉不适症状调查和眼科检查。结果对照组、接触组分别有98和64人自述有不同程度的视力下降、视物模糊、眼睛干涩、眼痛、眼胀、畏光、流泪、异物感、视物有黑点等不适症状;2组人群眼睛自觉不适症状总体发生率比较,差异无统计学意义(72.06% vs 67.37%,P>0.05)。对照组和接触组人群眼科总异常检出率分别为19.12%(70/190)和36.84%(52/272);接触组人群眼科总异常检出率高于对照组(P<0.01)。其中,接触组人群晶状体异常和眼底异常检出率均高于对照组(24.74% vs 9.56%,8.42%vs 1.10%,P<0.01)。多因素Logistic回归分析结果显示,激光作业、性别和年龄是导致发生眼科检查异常的独立影响因素(P<0.05);激光作业人群发生眼科检查异常的风险为非激光作业人群的5.37倍,女性人群发生眼科检查异常的风险高于男性人群,年龄越大者发生眼科异常的风险越高。结论电子加工企业激光接触可对作业人员的眼睛健康造成危害,性别和年龄是协同影响因素。

    作者:严茂胜;王恰;陈青松;江嘉欣;林瀚生;佘惜金;郎丽;林巧记;陈嘉斌 刊期: 2015年第04期

  • 溶剂解吸-气相色谱法测定工作场所空气中氯乙烯

    目的:建立工作场所空气中氯乙烯的溶剂解吸-气相色谱测定方法。方法以活性炭管采集空气样品,采用二硫化碳溶液解吸后,经DB-624弹性石英毛细管色谱柱分离,采用气相色谱仪进行检测。结果氯乙烯质量浓度在8.00~800.00 mg/L呈线性关系,相关系数为0.9999,低定量浓度和低检出浓度分别为0.15和0.05 mg/m3(采集3.00 L空气计);平均解吸效率为95.00%~95.50%,批内、批间精密度分别为2.98%~5.00%和3.40%~5.33%。平均采样效率为95.20%~95.80%;100 mg活性炭管吸附剂对氯乙烯穿透容量为0.87 mg;空气样品在常温下至少可以保存7d。结论本方法解吸效率和灵敏度高,精密度好,样品保存时间长,操作方法简便,适用于工作场所空气中氯乙烯的采样与测定。

    作者:潘巧裕;张子群;吴邦华;林佐侃;孙毅 刊期: 2015年第04期

  • 稀土氧化钕粉尘对大鼠支气管肺泡灌洗液中白细胞介素-1和肿瘤坏死因子-α影响研究

    目的:探讨白细胞介素-1(IL-1)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)在稀土氧化钕(Nd2O3)粉尘所致大鼠肺损伤中的作用机制。方法无特定病原体级健康成年雄性SD大鼠195只,采用非暴露式气管内一次性灌注法建立肺损伤模型。①剂量-效应关系实验:设置25、50、100和150 mg/kg剂量组(每组15只),分别予相应剂量的Nd2 O3混悬液染尘,对照组(10只)予生理氯化钠溶液处理,均于染尘后第28天处死。②时间-效应关系实验:染尘组大鼠(75只)予剂量为100 mg/kg的Nd2 O3混悬液染尘,对照组大鼠(50只)予生理氯化钠溶液处理,分别于染尘后第3、7、14、21、28天各处死15和10只大鼠。称量大鼠体质量并计算肺脏脏器系数,观察大鼠肺组织病理学改变情况,酶联免疫吸附实验法测定大鼠支气管肺泡灌洗液( BALF)中IL-1和TNF-α水平。结果肺组织病理学观察显示成功建立染尘大鼠肺损伤模型。4个剂量组大鼠体质量均低于对照组( P<0.05),肺脏脏器系数和BALF中IL-1、TNF-α水平均高于对照组(P<0.05);大鼠体质量随染尘剂量的增加而减轻,肺脏脏器系数和BALF中IL-1、TNF-α水平均随染尘剂量的增加而增加,均存在剂量-效应关系( Spearman相关系数分别为-0.825、0.953、0.566和0.544,P<0.01)。大鼠体质量在染尘处理和观察时间的主效应上均有统计学意义(P<0.01),但在两者的交互效应上无统计学意义( P>0.05)。大鼠肺脏脏器系数在染尘处理与观察时间的交互效应上有统计学意义( P<0.01);其中,染尘组大鼠在5个时间点的肺脏脏器系数均高于相同时间点的对照组(P<0.05),并呈现随观察时间的增加而增加的时间-效应关系( P<0.05)。染尘组大鼠BALF中IL-1和TNF-α水平均高于对照组( P<0.01),但未发现Nd2O3粉尘染尘处理与IL-1、TNF-α水平之间存在时间-效应关系。结论稀土Nd2O3粉尘可导致大鼠发生具有剂量-效应和时间-效应关系特征的肺损伤,并可导致大鼠BALF中IL-1和TNF-α水平发生具有剂量-效应关系特征的升高,表明IL-1和TNF-α在Nd2 O3粉尘所致肺损伤的发生和发展中具有一定的作用。

    作者:刘建国;王素华;苏鑫;高艳荣;黄丽华 刊期: 2015年第04期

  • 《2014年版中国科技期刊引证报告(核心版)》公布本刊指标检索数据

    根据中国科学技术信息研究所新发布的《2014年版中国科技期刊引证报告(核心版)》,经多项严格的学术指标综合评定及同行专家评议推荐,《中国职业医学》期刊继续被收录为“中国科技核心期刊(中国科技论文统计源期刊)”。在被收录的24种流行病学与环境医学类核心期刊中,2013年本刊核心影响因子为0.615,排名第9位。2012年本刊核心影响因子为0.477。

    作者:《中国职业医学》编辑部 刊期: 2015年第04期

  • 砷的表观遗传学作用及其机制研究进展

    砷是重要的环境污染物和生产性毒物,饮水型砷中毒和燃煤污染型砷中毒是危害较严重的公共卫生问题,而职业性砷接触可引起接触者急性和慢性砷中毒,甚至导致职业性肿瘤。砷及其化合物的致癌作用机制包括氧化应激、基因突变和染色体畸变等。但近的研究表明,表观遗传学作用也是砷致癌作用的重要机制[1]。表观遗传学是指研究不涉及遗传物质核苷酸序列的改变,但可以通过有丝分裂和减数分裂实现代间传递(遗传)的生物现象的遗传学分支领域[2]。其主要研究内容包括DNA甲基化、组蛋白修饰和非编码RNA等对基因表达的调控。揭示砷的表观遗传学作用已成为当前研究热点。本文对砷的表观遗传学作用及其机制的研究进展进行总结,为进一步开展砷致癌作用机制研究特别是表观遗传学研究提供学术依据。

    作者:黄丹妮;廖维瑶;黎静;余日安 刊期: 2015年第04期

  • “中国毒理学会毒性病理学专业委员会成立大会暨首届学术交流会”在广州成功召开

    2015年4月10~12日,由中国毒理学会主办、广东省职业病防治院承办的“中国毒理学会毒性病理学专业委员会成立大会暨首届学术交流会”在广东省广州市成功召开。中国毒理学会名誉理事长庄志雄教授和王捷教授、中国毒理学会周平坤理事长、付立杰秘书长、军事医学科学院放射与辐射医学研究所彭瑞云研究员、美国毒性病理学会李宪堂博士、广东省疾病预防控制中心杨杏芬教授以及中国毒理学会毒性病理学专业委员会挂靠单位广东省职业病防治院瞿鸿鹰院长等来自63家单位的140余人参加了成立大会暨首届学术交流会。此次大会由广东省职业病防治院组织筹备,黄振烈研究员代表筹备组作中国毒理学会毒性病理学专业委员会筹备情况的报告。

    作者:中国毒理学会毒性病理学专业委员会秘书处 刊期: 2015年第04期

  • 介入放射学工作人员受照剂量调查及调查水平研究

    目的:探讨介入放射学工作人员受照剂量的调查水平,为其个人剂量监测中可疑数据的调查提供科学方法。方法收集2013年度13家医院介入放射学工作人员4个周期1219对内、外热释光个人剂量计( TLD)的受照剂量监测资料,经统计分析甄别其TLD佩带情况。选取正确佩带TLD人员的受照剂量数据计算、确定其调查水平。对可疑数据,根据TLD佩带情况,结合内、外TLD的受照剂量确定调查内容。结果内、外TLD的受照剂量范围分别为低探测水平( MDL)~17.91和MDL~25.57 mSv。1219对TLD中,正确佩带307对(占25.18%),对调佩带81对(占6.64%),混合佩带287对(占23.54%),不佩带内TLD者4对(占0.33%),540对无法判定佩带情况(占44.30%)。内TLD剂量的调查水平为>2.27 mSv,外TLD调查水平小值为0.04 mSv,大值为46.23 mSv。根据介入放射学工作人员受照剂量的可疑数据确定相应的调查内容。结论应加强对介入放射学工作人员及其管理人员的辐射防护培训,定期修订其受照剂量的调查水平,当其受照剂量低于或高于调查水平时,应进行相应调查。

    作者:刘小莲;麦维基;张素芬;李明芳;贾育新;黄伟旭;胡世杰 刊期: 2015年第04期

  • 2012-2013年山东省医学放射工作人员个人剂量监测结果分析

    目的:了解山东省医学放射工作人员外照射个人剂量情况。方法通过国家卫生和计划生育委员会《放射工作人员职业健康管理系统》中的《外照射个人监测管理》子系统,收集2012—2013年由山东省医学科学院放射医学研究所检测的医学放射工作人员个人剂量监测结果,对数据进行整理分析。结果2012年共监测7083人次,其中个人年有效剂量≥5.00 mSv/a但<20.0 mSv/a者142人次(占2.00%),21人次(占0.30%)个人年有效剂量≥20.0 mSv/a,人均年有效剂量为0.52 mSv/a,年集体有效剂量为3.72人? Sv。2013年共监测6492人次,其中个人年有效剂量≥5.00 mSv/a但<20.0 mSv/a者79人次(占1.20%),24人次(占0.37%)个人年有效剂量≥20 mSv/a,人均年有效剂量为0.44 mSv/a,年集体有效剂量为2.91人? Sv。结论山东省医学放射工作人员个人剂量总体处于较低水平,但仍有部分人员个人剂量监测结果超过职业接触限值。

    作者:毕明卫;陈英民;宋钢;许家昂;闵楠;尚云英;李海亮 刊期: 2015年第04期

  • 加拿大《工作场所心理健康与安全国家标准》介绍

    随着全球经济的高速发展,市场竞争日益激烈,用人单位对劳动者的要求也越加严苛,不断增加的工作压力严重影响劳动者的生理和心理健康[1-2]。因此,健康的工作环境对于保障劳动者身心健康,提高企业生产效率,形成和谐的劳资关系,进而实现体面劳动具有重要意义。当前劳动者的心理健康问题相当突出,出现心理健康问题的劳动者亦日趋增加,是全世界职业卫生领域普遍面临的重要问题。国际劳工组织已将精神和行为失调列入2010年版职业病名单[3],一些国家和地区(如日本和中国台湾地区)亦将职业精神疾患纳入职业病名单并制定了诊断标准[4]。欧盟工作健康与安全署于2011年发布的《职场心理健康促进--优秀案例报告》认为,企业关注员工的心理健康促进,将为企业带来更稳定的员工队伍,以及更高的生产效率和更有吸引力的口碑[5]。2013年1月16日,加拿大精神卫生委员会发布了《工作场所心理健康与安全国家标准》[6],这是全球首个职业心理健康方面的国家职业卫生标准,为在全世界范围内实现预防和控制职业心理健康问题的规范化和标准化开启了新的篇章。本文对该标准的主要内容进行介绍,以期为职业卫生工作者和有关部门研究、制定我国工作场所心理健康相关政策和标准提供参考。

    作者:刘晓曼;王超;李霜 刊期: 2015年第04期

  • 本刊对来稿中表格编排处理的要求

    1.表式采用三线表式,即顶线(粗线)、底线(粗线)和栏目线(细线),如有合计行或表达统计学处理结果的行,则在该行上再加1条分界横线。在纵栏头中,可根据分层需求加用非贯通性短横线。表格应具自明性。

    作者:《中国职业医学》编辑部 刊期: 2015年第04期

  • 2001-2012年河北省煤工尘肺分布特征分析

    目的:了解2001—2012年河北省新发煤工尘肺( CWP)的分布特征。方法收集2001—2012年河北省职业病诊断机构报告的新发CWP病例资料,进行统计分析。结果2001—2012年河北省累计报告1041例CWP新发病例,占本省同时期新发尘肺病病例总数的22.84%(1041/4558);2006—2012年年均报告CWP新发病例数为2001—2005年的3.6倍(124/34)。 CWP新发病例中,壹期、贰期和叁期病例分别占89.63%(933/1041)、8.65%(90/1041)和1.73%(18/1041)。发病年龄中位数(M)为54.6岁,发病工龄M为25.0年。新发病例主要集中在唐山市729例(占70.03%)和煤炭行业941例(占90.39%);以煤矿混合工、采煤工和掘进工为高危工种(共占80.31%,836/1041)。其中,2006—2012年报告的870例CWP新发病例主要集中在国有经济企业和大型企业,分别占95.40%(830/870)和86.32%(751/870);不同规模企业CWP期别分布差异有统计学意义(P<0.01)。结论河北省新发CWP的分布呈现地区、行业、工种和企业经济类型、规模的集中趋势,应有针对性地加强防治工作。

    作者:李莎;赵春香;郝海燕;李建国;刘惠田;李增敏 刊期: 2015年第04期

  • 微核、染色体试验用乙醇固定淋巴细胞可行性研究

    目的:探讨微核、染色体试验中用乙醇部分代替甲醇固定淋巴细胞的可行性及相关技术方法。方法采用周围血半微量全血常规培养法进行试验。试验按固定液中甲醇和乙醇的比例不同分为Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ组,4种方法固定液中甲醇、乙醇和冰醋酸的比例分别为3∶0∶1、2∶1∶1、1∶2∶1、0∶3∶1( V∶V∶V),其他条件和操作均相同。取周围静脉血适量接种于RPMI-1640培养基中,于37℃培养72 h(染色体培养48 h),用体积分数为10%吉姆萨染液染色。结果Ⅰ、Ⅱ和Ⅲ组淋巴细胞均分散良好、染色均匀适中,胞浆呈蓝灰色,胞核呈紫红色,胞核轮廓清楚、边界清晰,均适合微核观察计数;Ⅳ组细胞容易聚集成团、胞浆易于破裂,致使适合观察的淋巴细胞数太少,从而影响微核的观察计数。Ⅰ、Ⅱ和Ⅲ组之间淋巴细胞着色良好率比较,差异有统计学意义( P<0.05);其中Ⅱ组淋巴细胞着色良好率高于Ⅲ组(P<0.05)。Ⅰ、Ⅱ和Ⅲ组淋巴细胞胞浆完整率和淋巴细胞微核细胞率分别比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ和Ⅳ组淋巴细胞细胞成团指数比较,差异有统计学意义(P<0.05);其中Ⅰ、Ⅱ和Ⅲ组细胞成团指数均低于Ⅳ组( P<0.05)。Ⅰ、Ⅱ和Ⅲ组淋巴细胞染色体呈紫红色、分散良好、大小适中、背景清楚,均适合染色体观察;Ⅳ组不适用于染色体观察。结论微核和染色体试验的固定液中加入一定比例的乙醇(乙醇与甲醇的体积比不超过2∶1)代替甲醇固定淋巴细胞,不影响微核和染色体的观察,并可降低甲醇中毒风险。

    作者:李茂进;李春素;赵培青 刊期: 2015年第04期

  • 三价砷甲基转移酶基因在 UROtsa 细胞系的转导及表达研究

    目的:构建人源三价砷甲基转移酶( AS3MT)的基因逆转录病毒表达载体,转导UROtsa细胞,建立稳定表达的细胞系。方法采用逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR),从人源HEK293细胞基因库中扩增出AS3MT基因,将AS3MT基因克隆到逆转录病毒表达载体pRetroX-IRES-ZsGreen1中,经病毒包装后,转导UROtsa细胞,荧光倒置显微镜下观察绿色荧光蛋白(GFP)的表达,采用流式细胞仪筛选阳性克隆,半定量RT-PCR法检测AS3MT mRNA表达水平,免疫印迹法检测AS3MT蛋白表达水平。结果经RT-PCR扩增AS3MT基因、限制性双酶切及基因测序鉴定,证实AS3MT基因正确插入逆转录病毒表达载体。以该载体转染病毒包装细胞RetroPack PT67后获得的病毒液滴度>106 cfu/mL。将病毒转导UROtsa细胞,转导效率达50.00%。经3次流式细胞分选仪筛选,获得成功转染并稳定表达GFP的URO-RetroX-AS3MT细胞株;半定量RT-PCR和免疫印迹检测结果均表明所转导的AS3MT基因在UROtsa细胞中成功表达。结论成功构建能高水平稳定表达AS3MT基因的UROtsa细胞系,为研究AS3MT在砷的代谢、毒性和致癌性中的作用机制奠定基础。

    作者:葛怡琛;曾丽海;殷霄;陆丰荣;黄金城;任雪峰 刊期: 2015年第04期

  • 骨髓间充质干细胞移植方式对染矽尘大鼠肺损伤修复作用比较

    目的:比较骨髓间充质干细胞( BMMSCs)经静脉和经气管2种移植方式对染矽尘大鼠的肺损伤修复作用。方法取14只无特定病原体级健康雄性SD大鼠培养BMMSCs,另取48只同类大鼠随机分为对照组、染尘组、静脉组和气管组,每组12只。对照组大鼠气管内注入无菌生理氯化钠溶液1.0 mL,另3组大鼠均气管内注入质量浓度为40 g/L的无菌矽尘混悬液1.0 mL,静脉组、气管组再分别经鼠尾静脉和气管内注入细胞密度为5×109个/L的BMMSCs 0.5 mL。第28天放血处死大鼠,检测肺脏脏器系数;观察肺组织病理学改变情况,进行肺泡炎症和肺间质纤维化评分;检测肺组织羟脯氨酸( HYP)、转化生长因子-β1( TGF-β1)和肿瘤坏死因子-α( TNF-α)水平,以及周围血血常规和血生化指标。结果染尘组、静脉组和气管组大鼠肺脏脏器系数均高于对照组( P<0.05),静脉组和气管组大鼠肺脏脏器系数均低于染尘组( P<0.05),但静脉组和气管组大鼠肺脏脏器系数差异无统计学意义( P>0.05)。肺组织病理学观察显示:对照组大鼠肺组织结构正常;染尘组肺部炎症严重,并可见大量矽结节和胶原纤维沉积;静脉组和气管组炎症、矽结节数量以及胶原纤维增生均较染尘组有改善。染尘组、静脉组和气管组大鼠的肺泡炎、肺间质纤维化评分以及肺组织TGF-β1、TNF-α水平均高于对照组(P<0.05),静脉组和气管组大鼠上述4个指标均低于染尘组( P<0.05),但静脉组和气管组大鼠上述4个指标差异均无统计学意义( P>0.05)。染尘组大鼠肺组织HYP水平高于其余3组( P<0.05);但静脉组、气管组和对照组HYP水平分别两两比较差异均无统计学意义( P>0.05)。染尘组、静脉组和气管组大鼠周围血白细胞计数、红细胞计数、血红蛋白水平、红细胞压积均分别高于对照组(P<0.05)。气管组大鼠血清尿素氮水平高于静脉组(P<0.05),染尘组大鼠血清铜蓝蛋白水平高于其余3组(P<0.05)。4组大鼠周围血血小板和血清丙氨酸氨基转移酶、天冬氨酸氨基转移酶、肌酸激酶、总蛋白、白蛋白、球蛋白、肌酐等指标的差异均无统计学意义(P>0.05)。结论经静脉和经气管2种BMMSCs移植方式对矽尘所致大鼠肺损伤均具有修复作用,2种移植方式的修复作用没有显著性差异。

    作者:黄明;周永梅;程樱;王艳艳;陈铿铿;燕玲;赖关朝;梁伟辉 刊期: 2015年第04期

中国职业医学杂志

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