学术投稿

CD34阳性兔真皮干细胞的体外分离培养和鉴定

袁凌伟;夏亚一;鲁茂森;邢帅;汉华;沈海丽;王翠芳

关键词:真皮干细胞, 体外培养, 兔
摘要:目的 探讨兔真皮干细胞的体外分离培养和鉴定方法,初步对其生长特性进行研究,并为生物组织工程提供一种新的种子细胞及成熟的分离鉴定方法.方法 以新生新西兰大白兔为研究对象,机械法直接分离得到真皮组织,采用酶消化法获取细胞,利用干细胞贴壁黏附生长的特性获取高克隆细胞群,并进行传代筛选.应用流式细胞技术检测细胞周期,成骨诱导检测其分化潜能,免疫细胞化学法检测细胞表面分子的表达.结果 原代培养的兔真皮细胞经过连续传代培养至第3代,细胞形态均一.流式细胞仪细胞周期分析显示,体外培养3 d时DNA合成前期细胞(G1期)为55.8%,DNA合成期细胞(S期)为34.6%.免疫细胞化学显示:细胞表面波形蛋白(vimentin)、CD34表达阳性,细胞角蛋白19(cytoKeratin19)、Ⅷ因子和巢蛋白(nestin)表达阴性.结论 新生新西兰大白兔真皮组织中存在多能干细胞,该细胞可向成骨细胞分化,具有多向分化潜能.
中华显微外科杂志相关文献
  • 股前外侧阔筋膜瓣联合股外侧肌肌腱瓣修复足背肌腱与皮肤缺损一例

    患者 男性,32岁.因右足背绞扎伤1.5 h入院.检查:右足背侧从外踝前侧至跖趾关节平面有9 cm×14 cm软组织缺损,3~5跖骨基部、中间与外侧楔骨外露伴骨折,2~4伸趾长、短肌腱缺损10 cm.

    作者:张功林;章鸣;夏丽萍;陈剑峰;王干生;吴发林;郁辉 刊期: 2008年第05期

  • 人造血管在四肢血管损伤修复中的应用体会

    目的 报道应用人造血管移植修复四肢主要血管损伤的临床效果.方法 采用Gore-Tex膨体聚四氟乙烯(ePTFE)人造血管移植修复四肢主要血管损伤40例,修复血管缺损长度3.0~8.0 cm,平均10.5 cm;血管直径0.4,~1.0 cm,平均0.7 cm.并对结果进行研究分析.结果 进行人造血管移植40例,其中32例获得术后5个月~3年随访,术后肢体血液循环良好,经彩色多普勒检查显示血管通畅,属优良循环23例,良好循环9例,术后局部发生皮肤坏死4例,经植皮及皮瓣覆盖创面,肢体成活.结论 人造血管移植修复四肢主要血管损伤,治疗效果满意,是一种安全有效的手术方式.

    作者:王利;姚海波;李文庆;朱小弟;王文胜;陈传煌;杨涛;张鹏 刊期: 2008年第05期

  • 股骨头骨折后并发股骨头缺血性坏死的治疗

    目的 探讨股骨头骨折内固定术后并发股骨头缺血性坏死的治疗.方法 对单侧股骨头骨折内固定术后股骨头缺血性坏死采用带血运骨瓣转移术治疗的26例临床资料进行回顾分析.21例数字减影血管造影(DSA)检查明确股骨头及其周围骨的血供后行内固定物取出、带血运骨瓣转移术.1例内固定物取出后行全髋置换术.结果 施行带血运骨瓣转移术的术后平均随访23个月(12~38个月),根据Harris髋关节功能评分标准进行临床评价.根据手术前后Ficat分期改变进行影像学评价.对其中15例进行术后DSA检查以明确坏死股骨头血运重建情况.术后2髋改行人工全髋关节置换.股骨头得到重建的病例,术后Harris髋关节功能评分提高至平均86.2分(术前平均54分),其中临床成功率为92.0%,影像学成功率为84.0%.15例重建股骨头手术后DSA评估提示血管蒂充盈好,骨瓣血运丰富.结论 股骨头骨折内固定术后股骨头坏死发生率较高(可达40%).在取出内固定物同时行带血运骨瓣转移治疗股骨头缺血性坏死、股骨头血运重建良好,早期疗效满意.

    作者:颜景涛;赵德伟;王本杰;刘宇鹏 刊期: 2008年第05期

  • 自发性小脑出血的超早期显微手术治疗

    目的 报道自发性小脑出血的超早期显微手术的临床疗效.方法 回顾性分析42例自发性小脑出血(其中高血压脑出血39例,脑动、静脉畸形出血3例)在手术显微镜下应用显微外科手术清除血肿及止血的临床资料及术后随访结果.发病4~5 h手术8例,5~6 h手术16例,6~7 h手术18例.结果 术后复查头颅CT显示血肿清除量达80%~90%者10例,>90%者32例,无再发出血.术后死亡4例,死亡率9.5%.术后随访3个月~5年,随访的28例根据日常生活能力(ADL)分级评定Ⅰ级7例,Ⅱ级10例,Ⅲ级6例,Ⅳ级4例,Ⅴ级1例.结论 应用显微外科手术治疗自发性小脑出血有助于减少术后再出血及提高患者生存质量.

    作者:柯春龙;余振华;金华伟 刊期: 2008年第05期

  • 先天性瞳孔残膜不同治疗方法的探讨

    目的 探讨先天性瞳孔残膜的不同治疗方法及临床效果.方法 根据5例(6只眼)先天性瞳孔残膜的类型,分别采用Nd:YAG激光先天性瞳孔残膜部分切断术(4只眼)、颞侧透明角膜隧道切口单纯先天性瞳孔残膜切除术(1只眼)以及颞侧透明角膜隧道切口先天性瞳孔残膜切除联合白内障超声乳化加囊袋内人工晶状体植入术(1只眼),观察术后佳矫正视力、角膜切口、房水、(人工)晶状体的情况,以及手术前后角膜曲率和角膜内皮细胞密度的改变情况;术中和术后并发症.结果 临床治疗6眼,术后视力均显著提高.术后无一例高眼压及前房出血.随访1年以上,4例(5只眼)晶状体保持透明.激光或手术后的角膜散光和内皮丢失均不明显.结论 先天性瞳孔残膜的治疗需根据患者和医生的具体情况选择适宜的方式,是获得理想术后视力、避免并发症和小化医疗成本的关键.

    作者:林浩添;李青;郑永欣;梁小玲;钟晓菁;张振平 刊期: 2008年第05期

  • 改良桡动脉头静脉端端吻合内瘘术的临床应用

    目的 探讨桡动脉远心端与头静脉近心端吻合内瘘术的可行性及临床效果.方法 先作Allen试验证明手掌动脉弓血管通畅,然后在腕关节近端压迫阻断桡动脉血流,检查在阻断处的远端仍可触及桡动脉明显博动者,再于术中开放桡动脉远心端确定有喷射状出血,血流充足的病例,选择将桡动脉远心端与头静脉近心端作对端吻合,临床应用30例.结果 术后6周内瘘穿刺透析血流量均在200 ml/min以上,随防6个月~4年,平均2年6个月,无肢端缺血并发症.结论 桡动脉远心端头静脉近心端对端吻合术,可作为腕部功能性内瘘的一种术式供临床选择.

    作者:李光昭;杨卫民;张克斌;李星洪;许哲;王乐浩;林建群;曾斌;郑会丰 刊期: 2008年第05期

  • 兔软骨细胞在可注射温敏型壳聚糖/聚乙烯醇凝胶中生长的研究

    目的 探讨以壳聚糖(CS)和聚乙烯醇(PVA)制备的可注射温敏型凝胶作为兔软骨细胞生长支架的可行性.方法 将壳聚糖和聚乙烯醇溶液混合制成温敏型凝胶,取第三代软骨细胞接种于凝胶支架,于接种后24、48和72 h采用MTT测定细胞活性及毒力;于1、2及3周后采用扫描电镜及共聚焦激光扫描荧光显微镜观察软骨细胞在凝胶中的形态及生长状态.结果 MTT结果显示接种细胞数量随着接种细胞生长时间的推移而明显增加,各组之间差异有统计学意义(P<0.05).扫描电镜及激光共聚焦荧光显微镜观察表明软骨细胞在CS/PVA凝胶支架中生长良好.软骨细胞在凝胶支架中保持了很高的增殖能力,材料对细胞无明显不良反应.结论 壳聚糖/聚乙烯醇混合凝胶可作为兔软骨细胞培养的生长支架,应用于软骨组织工程.

    作者:陈彪;喻爱喜;祝少博;漆白文;汤玉峰 刊期: 2008年第05期

  • 静脉动脉化再植完全性离断拇指12例体会

    我院自2004年3月至2007年3月,采用静脉动脉化再植完全性离断拇指12例,取得良好临床效果.临床资料

    作者:武运喜;李海州;李海林;程永振;李建党;刘振杰 刊期: 2008年第05期

  • 种植脂肪干细胞的去细胞神经修复坐骨神经缺损的实验研究

    目的 探讨脂肪干细胞(ADSCs)应用于组织工程化外周神经修复大鼠坐骨神经缺损的效果.方法 48只体重200~220 g的雌性F344大鼠随机分成6组,每组8只,分别用下面6种不同的实验组修复15 mm长坐骨神经缺损.A组:种植ADSCs的去细胞神经;B组:种植诱导ADSCs的去细胞神经;C组:种植许旺细胞(SCs)的去细胞神经;D组:去细胞神经;E组:自体神经移植;F组:空白对照.通过神经电生理检测、荧光金逆行示踪、组织学检测和坐骨神经功能指数测定评价各组修复神经缺损的效果.结果 术后12周,F组未见桥接物,A组和B组的神经电生理等各项指标均分别优于D组(P<0.05或P<0.01),与C组和E组间差异无统计学意义(P>0.05).结论 初步结果显示ADSCs及诱导后ADSCs作为种子细胞,与去细胞神经构建的组织工程化外周神经移植体,能够修复外周神经缺损.

    作者:江丽;朱家恺;刘小林;牛晓锋;周丽华;梁英杰;戚剑;胡军 刊期: 2008年第05期

  • 人造血管在血液透析通路中应用17例

    目的 观察人造血管动、静脉内瘘在血液透析中的临床应用效果.方法 应用膨体聚四氟乙烯(ePTFE)人造血管在前臂建立动、静脉内瘘17例,分析其成熟时间、使用时间、透析时血流量及并发症.结果 术后4~6周开始使用内瘘,早期通畅率100%,随访4年,1例感染后出现瘘管裸露;5例血栓形成,行人造血管切开取栓;1例出现假性动脉瘤破裂出血后拔除人造血管,改行腹膜透析;2例行桥式闭塞后改行袢式.使用时间短2周,长时间4年,仍在继续使用.全部患者均在临床定期进行血液透析治疗.结论 对于周围血管硬化,多次自体内瘘失败的血透患者,人造血管移植建立血液透析通路有较好可行性.提高手术质量,术后正确认识和处理并发症,加强护理可提高长期的通畅率.

    作者:鄢艳;谢建军;陈钦开;张莉 刊期: 2008年第05期

  • 应用显微外科技术再植全头皮撕脱伤七例

    目的 报道应用显微外科技术治疗全头皮撕脱伤的临床效果.方法 根据头皮的解剖及损伤特点,应用显微外科技术对7例全头皮撕脱伤吻合单侧或双侧颞浅动、静脉,其中行血管移植6例.结果 术后全部成活,术后头发生长均良好,外形颇佳.结论 应用显微外科技术修复头皮撕脱伤,能够恢复原有外形,头发生长浓密,临床效果良好.

    作者:赵国红;谢振军;孙华伟;郑竞舟;邓小兵;邓名山;章剑;刘斐 刊期: 2008年第05期

  • 逆行足背内侧皮神经营养血管皮瓣急诊修复前足缺损

    目的 探讨逆行足背内侧皮神经营养血管皮瓣急诊修复前足缺损的可行性.方法 沿足背内侧皮神经走行设计皮瓣,内侧支以踝间线中点稍外侧至第1跖趾关节内侧缘连线为轴线,外侧支以踝间线中间至第2趾蹼中点连线为轴线,蒂位于足远端,根据创面大小由深筋膜层切取,皮瓣中的足背内侧皮神经近断端与创面附近足底趾固有神经吻合,急诊修复11例.结果 皮瓣全部成活,8例随访6~11个月,前足皮肤耐磨无破溃,足行走负重功能较好,痛触觉恢复,两点辨别觉为2~3 cm.结论 逆行足背内侧皮神经营养血管皮瓣修复前足缺损,手术简单,不损伤知名血管,供区损伤小,感觉恢复满意,是急诊修复足前端组织缺损的较好方法.

    作者:厉孟;刘旭东;刘兴炎;段永宏 刊期: 2008年第05期

  • 侧脑室内肿瘤的显微外科治疗

    目的 探讨侧脑室内肿瘤的临床特点及显微手术方式,旨在提高对该疾病的认识及手术疗效.方法 65例侧脑室内肿瘤,男39例,女26例,首发症状主要是头痛、呕吐(48例);分别经皮层-脑室前入路(34例)、皮层-脑室后入路(20例)和胼胝体前部入路(11例)采用显微外科技术切除;回顾分析其临床特点、手术方式、病理诊断及术后并发症.结果 手术全切54例,大部分切除11例.术后病理诊断以室管膜瘤及星形细胞瘤常见.术后并发症:术后发热26例;术后脑积水9例;脑室内积血或血肿形成7例,其中2例因出现意识障碍后行开颅血肿清除术;术后癫痫7例;术后出现意识障碍4例,均治疗后好转;伤口感染3例.手术死亡3例,其中2例系继发术后癫痫出现呼吸衰竭死亡.结论 早期发现侧脑室内肿瘤、周密的手术方案和精细的显微操作以及正确的术后处理是提高显微手术治疗侧脑室内肿瘤全切率、减少术后并发症和死亡率的关键.

    作者:杨正明;陈坚;陈劲草;周游;王玉平;张平;鲍文公;雷霆 刊期: 2008年第05期

  • 十指离断再植成功一例

    患者 男,23岁,工人,2007年12月14日15点30分因切纸机挤压切割致双手十指完全离断,伤后4 h入院.查体:血压16/10 kPa(1 kPa=7.5 mmHg),一般情况好.右手,拇指于近节指骨处完全离断,近节指骨碎成5块;示指于近节指问关节处离断;中、环、小指由近节指骨处离断,软组织及骨缘整齐,中、环、小指间均有0.5 cm的指蹼相连.左手,拇指于近节指骨斜型离断;示指于中节指骨处离断;中、环、小指于近节指骨处离断,边缘较整齐.

    作者:夏霆;李进;黄卫东;徐基农;周宪章;李展新;郑秋菊;招铭辉 刊期: 2008年第05期

  • 细胞周期因子4抑制因子a和星形细胞上调基因-1与少突胶质细胞瘤的预后关系

    目的 探讨细胞周期因子4抑制因子a(inhibitor of CDKda,p16INK4a)和星形细胞上调基因-1(astrocyte elevated gene-1,AEG-1)在少突胶质细胞瘤中的表达,以及其与少突胶质瘤预后的关系.方法 回顾性分析经病理证实的42例少支胶质瘤资料,采用EnVision免疫组化法检测p16INK4a和AEG-1表达,随访患者生存情况.结果 42例中6例失访,p16INK4a总阳性表达率为66.7%,不同级别肿瘤p16INK4a表达阳性率随肿瘤恶性程度增加而降低,而AEG-1阳性率随肿瘤恶性程度的增加而增高,其总阳性表达率为45.2%.p16INK4a表达与生存时间呈正相关,而AEG-1表达则呈负相关.AEG-1与p16INK4a表达之间呈负相关.结论 p16INK4a和AEG-1的表达强度对判断少支胶质瘤恶性程度和预后具有参考价值,可作为临床评估预后的生物学指标之一.

    作者:余振华;金华伟;徐桂兴;黄正松 刊期: 2008年第05期

  • 背阔肌节段肌瓣一期修复晚期面瘫的应用解剖

    目的 为联合应用背阔肌两块节段肌瓣一期动力矫正晚期面瘫表情肌功能提供解剖学依据.方法 解剖20具10%福尔马林固定的成人尸体共40侧背阔肌标本,醋酸乙酯血管灌注2具新鲜成人尸体共3侧背阔肌标本,观察肌外、肌内神经血管的分布特点.结果 ①92.5%的胸背神经分为内、外侧支;7.5%的胸背神经分为内、中、外侧支.胸背神经内、外侧支分叉点的坐标为(7.94±1.23)em、(3.71±1.68)cm,在该交角的中线区域,神经血管的数量相对较少.②背阔肌外侧肌瓣可以分为3~5个亚单位,内侧肌瓣可以分为2~4个亚单位.③肌内神经血管分支排列关系(由内向外),内侧节段100%为NVAV(神经、静脉、动脉、静脉),外侧节段85.0%为VAVN,其余15.0%为NVAV.④在神经蒂分支点外侧切断,第三段内侧肌瓣神经蒂平均达16 cm,第三或四段外侧肌瓣神经蒂平均达12 cm.结论 吻合血管神经的背阔肌双节段肌瓣移植可一期跨面修复晚期面瘫.

    作者:沈俊;许扬滨 刊期: 2008年第05期

  • 白内障超声乳化显微手术治疗急性闭角型青光眼的临床体会

    目的 分析、探讨超声乳化白内障吸除联合人工晶状体植入术治疗原发性急性闭角型青光眼的疗效.方法 回顾急性闭角型青光眼合并明显白内障21例(21眼)的临床资料,分析超声乳化白内障吸除联合人工晶状体植入术的术前、术后视力、眼压、前房深度、前房角及C值的变化.结果 随访1~2年,21眼眼压控制正常,其中4眼需滴降眼压药物.全部病例手术后前房加深.佳矫正视力有不同程度提高.结论 白内障超声乳化手术治疗急性闭角型青光眼效果良好,并发症少.

    作者:罗玉蓉;卓业鸿;白玉婧;卞新浩;李彦峰 刊期: 2008年第05期

  • 脑干肿瘤的显微外科治疗

    目的 探讨脑干肿瘤的临床表现、病理及神经影像学特点,及其手术适应证、入路和显微手术技巧.方法 回顾性分析17例应用显微外科手术治疗的脑干肿瘤的临床资料.其中10例采用枕下后正中入路,应用于5例脑桥肿瘤,3例延髓肿瘤,2例位于脑桥下段累及延髓上部的肿瘤;4例采用枕下乳突后人路,应用于2例脑桥肿瘤,1例延髓肿瘤,1例主体位于脑桥侧方累及部分中脑的肿瘤;3例中脑不同部位肿瘤分别采用枕下幕上入路、颞枕下入路及翼点入路.结果 病变全切除16例,次全切除1例,无手术死亡.随访5个月~4年,总体效果良好,7例恢复正常生活,4例可从事轻微体力活动,3例生活基本自理,2例需人照料,1例因肺部感染于出院后6个月死亡.结论 适宜的手术入路和精细的显微外科技巧,可显著提高治愈率、降低致残率.

    作者:蒋宇钢;陈靖;彭雍;周倩 刊期: 2008年第05期

  • 远端神经变性对神经再生放大规律的影响

    目的 探讨应用正常供体神经修复预变性受体神经时,再生神经纤维放大的效果.方法 将雄性SD大鼠12只,随机分为变性组、对照组,所有动物均实行手术.变性组应用部分正常腓总神经修复变性8周胫神经远端;对照组应用部分正常腓总神经修复即刻损伤后胫神经远端.术后3个月进行神经电生理测量、肌力测量、组织学观察、神经锇酸染色及有髓神经纤维计数,并计算两组神经再生放大率.结果 变性组和对照组神经传导速度分别为(16.992±3.737)m/s和(23.092±2.788)m/s;肌肉强直收缩力恢复率为(39.642±5.865)%和(71.098±6.778)%;再生有髓神经纤维数分别为1718.2±282.0和3340.0±506.5;神经再生放大率1.581±0.329和3.098± 0.642;以上指标变性组均低于对照组(P<0.05).结论 应用正常神经修复8周变性神经远端时,神经纤维再生放大率降低,说明损伤远端神经较长时间变性,接受再生神经纤维长入的能力降低.

    作者:寇玉辉;殷晓峰;姜保国;王艳华;张培训;张宏波 刊期: 2008年第05期

  • 外固定器结合软组织移植治疗指骨间关节骨折脱位

    目的 探讨微型外固定器结合一期软组织移植治疗开放性指骨间关节周围骨折脱位的优缺点.方法 对开放性手部指骨间关节骨折脱位12例(13指),采用微型外固定器结合有限固定固定骨折,修复损伤的韧带和掌板,修复或桥接修复损伤的血管神经,皮瓣移植修复软组织缺损.结果 随访6个月~2年,所有指体全部存活,皮瓣顺利成活,外固定架平均固定37 d,骨折均愈合.手指感觉恢复达S3+~S4;关节活动度:近指骨间关节活动范围25°~90°;远指骨问关节活动范围5°~20°.结论 微型外固定器结合一期软组织移植治疗开放性指骨间关节骨折脱位,利于保持骨折和关节位置,利于软组织损伤修复,是治疗复杂手外伤的可靠方案.

    作者:杨润功;张伟佳;郑晓勇;侯树勋 刊期: 2008年第05期

中华显微外科杂志

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