许苏容；宗利丽；刘木彪；何彦；黄雪梅；周宏伟
目的 研究血浆及心肌局部炎细胞髓过氧化物酶(MPO)及炎性细胞因子肿瘤坏死因子-α(TNF-α)在大鼠肢体缺血再灌注后心血管系统损害中的动态变化及意义.方法 应用止血带结扎构建大鼠双下肢缺血再灌注模型,按照缺血及再灌注不同时间点随机分为9组:①正常对照组(C)；②缺血2、4h组(I2,I4)；③缺血4h再灌注0.5、2、4、6、12、24 h组(R0.5,R2,R4,R6,R12,R24).观察各组大鼠血浆及心肌MPO、TNF-α水平的变化,以免疫组化法观察心肌组织TNF-α的表达.结果 与C组比较,I2组血浆及心肌MPO、TNF-α即开始明显上升；与I4组比较,血浆及心肌MPO分别于再灌注R0.5、R2组明显升高；R4组血浆TNF-α明显上升,R12组心肌TNF-α明显下降；R24组血浆MPO、TNF-α明显下降(P＜0.05).R4血浆MPO、TNF-α及心肌TNF-α达到峰值；R6组心肌MPO达到峰值.TNF-α免疫组化提示I4组大鼠心肌胞浆即可见较多棕色染色颗粒,R4组浆棕色染色颗粒继续增多,R24组明显减少.结论 炎细胞在心肌组织的聚集活化、全身及心肌局部炎性细胞因子的激活是肢体缺血期及再灌注期心肌损伤的重要病理学基础,其中再灌注期心肌损伤与全身性炎性细胞因子激活关系更大.
作者：陈雯；刘宁；齐迎春；张颖；邓昭阳；杨靖；谢晓华 刊期： 2013年第05期
目的 观察年轻恒牙牙髓血管再生治疗的临床疗效,以评价氢氧化钙糊剂介导牙髓感染的年轻恒牙血管再生治疗的可行性.方法 2011年1月～2012年12月于广州市妇女儿童医疗中心口腔科就诊的34例均为外伤、龋病或非龋病等因素导致的牙髓感染、坏死、根尖周炎或根尖脓肿的年轻恒牙,分为试验组和对照组,各17例.试验组局麻下将患牙进行常规开髓引流,冲洗消毒,并内封氢氧化钙糊剂以行血管再生治疗,对照组行传统的根尖诱导成形术.术后随访并观察两组疗效.结果 试验组4例分别于术后6～18个月复诊发现,根尖周病变愈合,根管腔变小,牙根形成,根尖孔闭合,10例术后12～18个月,根尖周病变愈合,牙根有延长,根管壁有增厚,根尖孔缩小,1例术后2个月出现疼痛和肿胀,2例分别于术后7个月和8个月出现疼痛,有牙龈瘘管形成,牙根发育停止.对照组1例根尖诱导12个月后根尖区病变消失,根端闭合,11例术后6～18个月后根尖孔有硬组织形成,根尖区病变区域缩小,但均未见牙根长度有明显改变；5例在诱导12～18个月后仍无明显的根尖屏障形成.两组治疗有效率的差异无统计学意义(P＞0.05).结论 通过内封氢氧化钙糊剂的血管再生治疗能够有效促进患有牙髓炎或根尖周炎的年轻恒牙的继续发育,具有广阔的临床应用前景.
作者：黄义彬；陈柯；张颖；熊华翠；刘彩奇 刊期： 2013年第05期
目的 构建大容量且能高效展示于哺乳动物细胞表面的全长人源膀胱癌特异性抗体基因库.方法 分离膀胱癌患者的外周血单核细胞(PBMC),提取PBMC的总RNA,用RT-PCR方法扩增全套IgG1重链可变区(VH)和Kappa型轻链全长(LCκ)基因,经过相应的限制性内切酶酶切后分别插入pDGB-HC-TM载体,分别构建膀胱癌特异性的抗体重链基因库和轻链基因库(一级抗体库).随机挑取20个单克隆测定抗体基因序列,并瞬时转染FCHO细胞,结合流式细胞仪检测细胞表面抗体的表达.将上述构建好的轻重链基因库通过4片段连接方法插入双表达载体pDGB4,构建二级抗体库,转染FCHO后用流式细胞仪检测细胞表面抗体表达.结果 分别成功构建了膀胱癌特异性的重链基因库和轻链基因库,随机挑取的轻重链单克隆各有7个和9个含有正确的抗体基因编码序列,且能展示于哺乳动物细胞表面,理论库容量达到3.32×1011[(1.7× 106×70％)×(3.1×105×90％)].成功构建了膀胱癌二级抗体库,库容量为9×105.结论 利用哺乳动物细胞表面展示技术,我们成功构建了膀胱癌特异性的全长人源抗体基因库,一级抗体库的库容量达到3.32× 1011,二级抗体库库容量达到9x105,为下一步筛选特异性、高亲和力抗膀胱癌抗体奠定了基础.
作者：蓝开健；张哲欢；梁中锟；王俊洁；娄海波；周元平；刘叔文；李长征；谭万龙 刊期： 2013年第05期
目的 筛选不同致龋性变形链球菌临床分离株差异ssDNA配基并对其进行鉴定.方法 利用完整细胞为靶子的消减SELEX技术筛选不同致龋性变形链球菌临床分离株差异ssDNA配基,通过放射性同位素、流式细胞术、基因克隆测序、MEME在线软件和RNA structue分析软件分析配基的一、二级结构并对筛选得到的配基进行鉴定.结果 经过9轮消减SELEX筛选,放射性同位素检测文库已富集；流式细胞术检测经过测序和分析得到12条配基中的H1、H16、H4、L1、L10和H19与高致龋变形链球菌临床分离株特异结合,不与低致龋变形链球菌临床分离株特异结合,其中,H19的特异性结合程度强,解离常数为69.45±38.53 nmol/L.结论 筛选获得特异识别高致龋变形链球菌临床分离株的ssDNA配基.
作者：王成龙；胡丹阳；刘佼佼；李少华；苏东华；席庆；储冰峰；夏伟；赵强 刊期： 2013年第05期
目的 观察正反义人TIMP-1转染和酶抑制剂干预HKC细胞对PTEN、VEGF/Flk-1的表达的影响,为研究TIMP-1对肾脏器官衰老的影响机制提供参考.方法 将正义和反义人TIMP-1基因转染至人近端肾小管上皮细胞(HKC),同时用与正义转染组细胞酶抑制活性相当的MMP-2/MMP-9抑制剂(MMP-2/MMP-9 InhibitorⅢ,100 μmol/L)干预24 h,RT-PCR;间接免疫荧光法检测各组细胞PTEN、VEGF和Flk-1的表达.结果 研究显示,与未转染和空载体转染组相比,正义TIMP-1转染组中PTEN表达上调(P＜0.05),明胶酶活性降低(P＜0.05),VEGF和Flk-1表达下调(P＜0.05),而反义TIMP-1转染组则相反(P＜0.05)；MMP-2/MMP-9 inhibitorⅢ 100 μmol/L(酶抑制剂组)组PTEN、VEGF和F000000000000000000lk-1表达与未转染和空载体转染组相比无显著差异.结论 肾脏器官衰老过程中高表达的TIMP-1,通过上调PTEN(非MMP依赖途径),进而下调VEGF、Flk-1表达,提示PTEN在TIMP-1介导肾脏衰老微血管生成障碍中起重要作用,为揭示TIMP-1参与肾脏器官衰老分子机制提供了新的理论依据.
作者：陈俊香；蔡广研；卓莉；马强；师锁柱；陈香美；刘伏友 刊期： 2013年第05期
目的 检测hsa-miR-186在结肠癌组织及细胞中的表达,探讨hsa-mir-186对结肠癌细胞生物学特性的影响及作用.方法 应用实时荧光定量PCR检测了miR-186在12对配对的结肠癌组织、癌旁组织和5株结肠癌细胞中的表达情况；扩增包含miR-186前体序列在内的基因片段,并将其克隆至PLVTHM载体,将PLVTHM-miR186质粒转染SW620细胞,流式分选慢病毒感染的SW620细胞；CCK-8法、划痕实验和Transwell检测细胞检测细胞的增殖、迁移和侵袭能力.Western Blot检测靶基因YY1蛋白水平的表达.结果 与癌组织相比,12例癌组织中miR-186的平均表达量为0.0024±0.0027,显著低于癌旁组织的0.066±0.068,P=0.008;miR-186在高转移潜能的人结肠癌细胞SW620和LOVO相对表达量分别为0.118±0.138和0.157±0.001,与在低转移潜能HT-29细胞中表达量1.000±0.00,差异具有统计学意义P＜0.05;质粒双酶切及测序鉴定PLVTHM-hsa-miR186重组质粒构建成功；荧光定量PCR表明稳定过表达miR-186的结肠癌细胞株SW620构建成功,且过表达miR-186后降低了细胞的增殖、迁移及侵袭能力,差异均具有统计学意义P＜0.05.稳定过表达miR-186的细胞中,miR-186的表达明显高于对照组和未处理组,YY1蛋白质水平有所下降.结论 hsa-miR-186在结肠癌组织以及在高转移潜能的人结肠癌细胞SW620、LOVO中低表达,具有类似抑癌基因的作用；成功构建PLVTHM-miR186慢病毒重组质粒,并稳定转染结肠癌细胞SW620,抑制了细胞的增殖、迁移和侵袭能力.miR-186调控YY1表达可能是抑制结直肠癌生物特性的重要机制之一.
作者：陈芳；周畅；陆艳霞；袁理；彭璠莉；郑林；李学农 刊期： 2013年第05期
目的 探讨下调microRNA-221 (miR-221)表达对人结直肠癌细胞的放射敏感性的影响及其分子机制.方法 常规培养人结直肠癌Caco2细胞系,以脂质体转染反义miR-221 (anti-miR-221)后,应用实时荧光定量PCR(Real-time Q-PCR)检测Caco2细胞中miR-221和PTEN mRNA表达水平,应用Western-blot分析肿瘤细胞中PTEN蛋白表达变化；不同处理组的肿瘤细胞经照射后,流式细胞仪检测各处理组细胞的死亡情况.结果 Real-time Q-PCR显示转染anti-miR-221后miR-221的表达水平明显下调(P＜0.05),同时PTEN蛋白表达增高(P＜0.05)；流式细胞仪检测可见anti-miR-221转染组及anti-miR-221转染联合照射组死亡细胞比例均明显增多(P均＜0.01),转染anti-miR-221可明显提高Caco2细胞的放射敏感性,且此效应能被PTEN-siRNA部分但不完全阻断.结论 Anti-miR-221可通过上调PTEN蛋白表达增加结直肠癌细胞的放射敏感性.
作者：张晓槟；孙凯；雷尚通；钟育波；邓海军；区文弢；吴承堂 刊期： 2013年第05期
目的 探索硫酸氨基葡萄糖溶液能否在超声作用下透过离体兔皮肤,并筛选超声辅助透皮条件.方法 自制简易Franz扩散池,使用超声辅助硫酸氨基葡萄糖溶液体外经皮渗透.通过紫外分光光度法测定接受夜中硫酸氨基葡萄糖的浓度,计算透过量和透过速率.分析不同功率和辐照时间、溶液浓度、对透过量和透过速率的影响.结果 声强为0.2 W/cm2的超声辐照辅助硫酸氨基葡萄糖透皮的透过量和透过速率大.超声辐照5 min组的接受液中未检测出硫酸氨基葡萄糖；辐照时间组的透过量和透过速率随时间增加而增大.透过量和透过速率均随硫酸氨基葡萄糖的浓度增大而增大.背部和侧部的皮肤厚度分别为2.0士0.1 mm和1.2±0.1 mm,对超声辅助的透过量和透过速率无显著影响(P＞0.05)；对照组的接受液未检测到硫酸氨基葡萄糖.结论 硫酸氨基葡萄糖不能自行透过皮肤,1.0 MHz超声辐照超过5 min,硫酸氨基葡萄糖方能透过兔皮肤,透过量和透过速率随时间增加而增大,透过量和透过速率均随原液浓度增加而增大,不同部位皮肤厚度变化不会明显影响超声辅助硫酸氨基葡萄糖溶液效果.
作者：曾凡强；乔海；佘朝堃；王智彪 刊期： 2013年第05期
目的 对1例左顶枕部脑出血导致纯失读症的患者于急性期及恢复期分别进行语言能力检查并分析其神经语言学特点.方法 采用汉语失语成套测试(ABC)、汉字阅读检查表(1999年,林谷辉)、汉语失写成套测验(CAB)对患者的阅读和书写能力进行检查.结果 (1)ABC检查发现该患者急性期口语表达和理解正常,语言障碍表现以阅读障碍为主,合并部分书写障碍；恢复期复查可见阅读障碍较书写障碍恢复更显著；(2)汉字阅读检查表检查结果为患者单字阅读的朗读、释义、配画能力基本平行.急性期单字阅读障碍以近形错误为主,兼有语义性错误、规则化发音错误及近音错误.恢复期复查仅出现近形错误；(3)CAB检查发现书写障碍由重到轻依次为看图书写、听写、主动书写,系列书写及抄写保留完好.恢复期看图书写和听写仍有损害,余书写项目为满分.书写障碍表现为失语性失写,均有明显的构字障碍和字词错写；主动书写过程为先有自发言语后有文字书写,写后能重新读出.结论 汉语纯失读症患者语言各个成分的损害及恢复均不一致,推测语言各个成分均有其特有的神经心理学途径.
作者：陈晨；刘晓加；潘速跃；吴小琴；吴积宝 刊期： 2013年第05期
目的 构建含有登革Ⅱ型病毒(DENV-2)前膜蛋白(prM)基因反向重复序列(irRNA)的重组质粒,评价其抑制病毒复制的效果.方法 DENV-2接种乳鼠,提取总RNA,在正义和反义引物两端分别加上XhoⅠ和EcoR Ⅰ的识别位点,将经RT-PCR扩增的prM全长基因片段插入pcDNA3.1(+)中,形成含有prM反向序列的重组质粒pcDNA-asprM;于另一对正义和反义引物两端引入酶切位点Nhe Ⅰ和BglⅡ,经RT-PCR扩增prM全长基因片段插入pMD18-T-vector中,形成含有正向序列的重组质粒pMD 18-T-prM.限制性内切酶Nhe Ⅰ和Kpn Ⅰ分别酶切重组质粒pMD18-T-prM和重组质粒pcDNA-asprM,得到片段prM和线性化载体pcDNA-asprM,连接构建成含有prM反向重复序列的重组质粒pcDNA-irRNA.筛选的阳性重组质粒pcDNA-irRNA用脂质体法转染至BHK-21细胞中,半定量PCR和实时荧光定量PCR分析评估该质粒抑制登革病毒复制的效果.结果 成功构建具有prM反向重复序列的重组质粒pcDNA-irRNA.经转染pcDNA-irRNA的实验组与未转染质粒阳性对照组相比,半定量PCR结果显示DENV-2攻击96 h后NS3的mRNA表达水平下降28％；实时定量PCR分析显示,DENV-2攻击72 h后实验组病毒拷贝数比阳性对照组少1.44倍,攻击96 h后实验组的NS1表达量明显低于阳性对照组(P＜0.05).结论 DENV-2 prM反向重复序列具有干扰病毒复制的效果,为登革病毒基因疫苗的研究提供理论依据.
作者：朱娉婷；潘京；郑学礼 刊期： 2013年第05期
目的 探讨MALAT1在鼻咽癌细胞细胞株中的表达及生物学功能.方法 通过Real-time PCR检测MALAT1基因在鼻炎癌细胞株5-8F、C666-1、CNE-1、CNE-2、HONE-1、6-10B及永生化鼻咽上皮细胞NP69株中的表达；采用RNAi技术和RNA激活技术,构建MALAT1慢病毒干扰载体和激活载体载体并稳定转染鼻咽癌细胞株CNE-1,采用CCK8、平板克隆、划痕等试验分析MALAT1基因对CNE-1细胞生物学行为的影响.结果 MALAT1在高转移的鼻咽癌细胞株中高表达,在正常鼻咽上皮细胞低表达；经激活过表达MALAT1后,CNE-1细胞的上皮性标志物E-Cadherin的表达显著下调,间质细胞标志物Vimentin表达上调,侵袭转移能力明显增强(P＜0.05).结论 MALAT1基因上调能够促进鼻咽癌CNE-1细胞的增殖、侵袭和转移能力.
作者：谢林英；胡志燕；王晓燕；李祖国 刊期： 2013年第05期
目的 应用meta分析的方法对各项研究进行系统分析以研究鱼的摄入与肾癌发病风险关系.方法 在PubMed,Embase,CNKI,CA中检索有关鱼及其产品的摄入与肾癌关系的病例对照研究以及队列研究的文献.通过meta分析方法研究鱼的摄入与肾癌的关系.运用I2检验各项研究的异质性,并使用漏斗图检验发表偏倚.结果 共纳入17篇文献,采用随机效应模型合并分析后的结果未发现鱼的摄入与肾癌的发病风险相关(RR=0.90;95％ CI,0.78～1.02)且异质性明显(P=0.003,I2=52.3％),针对研究类型、研究地区以及发表时间进行亚组分析,同样没有明显的证据证明两者相关,但在性别亚组的分析中发现,男性增加鱼的摄入可降低肾癌的发病率,而在女性中则没有关系.结论 meta分析结果提示增加鱼的摄入未发现有预防肾癌发病的作用.
作者：万沛；李妍；李飞；马天骏；蓝开健；陈炜；陈三三；何成武；谭万龙 刊期： 2013年第05期
目的 从菌群总体角度分析和比较健康育龄期女性和细菌性阴道病(BV)患者阴道菌群差异.方法 采集临床Amsel标准及Nugent评分筛选的37例BV患者及37例健康育龄期女性阴道穹窿分泌物标本,提取总基因组DNA,对16S rRNA V6区基因进行扩增,所有扩增的PCR产物经Illumina测序后,通过BIPES、UCHIME、TSC、GAST终得到样品的物种信息.结果 健康育龄期女性阴道分泌物乳酸杆菌占95％以上,单独以惰性乳酸杆菌或卷曲乳酸杆菌为主,或者两者比例相当,同时存在少量加德纳氏菌属,颗粒链球菌属,链球菌属,普氏菌菌属,埃希氏杆菌属和其它菌属；30例BV患者阴道菌群Alpha多样性明显增加(P＜0.001),Beta多样性也发生了明显变化,表现为乳酸杆菌明显减少,其相对比例从45％到1％(24例),以惰性乳酸杆菌为主,部分患者(6例)甚至未检出,同时加德纳氏菌属,普氏菌菌属,颗粒链球菌属,厌氧球菌,微单胞菌属,Peptoniphilus.harei,消化链球菌属,戴阿李斯特杆菌属等相对丰富度增加,不同于既往研究的是7例BV患者以少见的格氏乳杆菌,嗜酸乳杆菌为优势菌群,约占75％～50％.结论 健康育龄女性阴道菌群以乳酸杆菌占绝对优势,单独以惰性乳酸杆菌或卷曲乳酸杆菌为主,或者两者相当,并与多种微生物并存；大部分BV患者阴道菌群表现为乳酸杆菌显著减少甚至缺失,小部分BV患者以少见的格氏乳酸杆菌、嗜酸乳酸杆菌为优势菌群.
作者：许苏容；宗利丽；刘木彪；何彦；黄雪梅；周宏伟 刊期： 2013年第05期
目的 在炎症氧化应激细胞模型中筛选参与Nox1启动子活化的相关调控蛋白.方法 TNF-α激A549细胞建立炎症氧化应激细胞模型,运用DNA pull-down技术筛选出Nox1启动子区结合蛋白,再用二维凝胶电泳技术分离pull-down后的结合蛋白,然后在2D凝胶上选取与对照组表达差异大于1.5倍的蛋白质点进行切胶,后经基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱鉴定,筛选出Nox1启动子区差异结合蛋白.结果 2D凝胶上共筛选出1.5倍以上差异蛋白点7个,均为表达上调蛋白,鉴定出GLE1 、DDX19A,KRT1、KRT10四种蛋白质.结论 GLE1、DDX 19A,KRT1、KRT10参与了TNF-α诱导的A549细胞Nox1活化的基因调控,为研究炎症氧化应激细胞模型的Nox1启动子区调控蛋白的生物学功能奠定了实验基础.
作者：邱娴；胡水旺；徐俊；李理；黄文杰 刊期： 2013年第05期
目的 研究钙离子/钙调蛋白依赖性蛋白激酶Ⅱγ(CaMKⅡγ)体内外促进结直肠癌细胞增殖的作用并探讨其机制.方法 半定量RT-PCR法测定5种结直肠癌细胞系及20对结直肠癌组织及其配对癌旁组织中CaMKⅡγmRNA表达水平.用慢病毒载体pLenti6.3-MCS-IRES2-eGFP制备慢病毒颗粒Lenti-CaMKⅡγ,转染SW620细胞,建立稳定表达CaMKⅡγ结直肠癌细胞系SW620-CaMKⅡγ.测定SW620-CaMKⅡγ细胞的生长曲线及克隆形成能力.Western blotting检测SW620-CaMKⅡγ细胞IKKα、IKKβ、IKKγ、p-IKKα/β、p-IκB和IκB表达水平.免疫荧光检测SW620-CaMKⅡγ细胞NF-κB p65核浆及核内的表达情况.检测裸鼠移植瘤的瘤体积.结果 CaMKⅡγ在5种结直肠癌细胞系中的mRNA水平均高,在20对组织中有18对癌组织mRNA水平比癌旁组织高.慢病毒转染的CaMKⅡγ过表达细胞系增殖能力增强(P＜0.05).CaMKⅡγ能够激活细胞内的NF-κB 信号通路,促进NF-κB p65进核.CaMKⅡγ过表达细胞的裸鼠移植瘤瘤体积大于阴性对照(P＜0.05).结论 CaMKⅡγ体内外均能促进结直肠癌细胞的增殖,并激活NF-κB通路.
作者：徐菲；齐海燕；于晓方；徐荣臻 刊期： 2013年第05期
目的 观察机械法准分子激光上皮瓣下角膜磨镶术(epi-LASIK)术中上皮瓣去留对术后角膜上皮下雾状混浊(haze)和泪液中haze形成的主要调控因子转化生长因子β1(TGF-β1)的影响.方法 将30例(60眼)接受epi-LASIK的患者分为两组,右眼(30眼)术中保留上皮瓣为留瓣组,左眼(30眼)术中弃上皮瓣为去瓣组,采用酶联免疫反应吸附实验双抗体夹心法测定两组术后1、3、7d泪液中TGF-β1的水平,并观察两组术后1、3、6个月haze的情况.结果 术前等效球镜留瓣组(-4.98±2.28 D)与去瓣组(-5.20±4.02 D)比较无统计学意义(P=0.80).两组术后1、3、6个月haze程度的比较无统计学意义(P分别为0.98,0.52,0.72).两组术前及术后1、3、7天泪液中TGF-β1的水平比较亦无统计学意义(P分别为0.11,055,0.45,0.19).观察期间两组术后泪液中TGF-β1水平不断下降,但始终高于术前水平.结论 上皮瓣去留对epi-LASIK术后haze及泪液中TGF-β1水平无明显影响,术后泪液中TGF-β1可能在角膜伤口愈合反应中起一定作用.
作者：陈静；陈艺；韩苏宁；邹玉平；邹秀兰 刊期： 2013年第05期
目的 评估喉罩全麻小潮气量高频双肺通气胸腔镜手术治疗肺大疱的可行性和安全性.方法 试验组与对照组各30例肺大疱患者.试验组在喉罩小潮气量高频双肺通气全麻下行胸腔镜手术；对照组在双腔气管插管全麻单肺通气下进行胸腔镜手术.结果 喉罩组与插管组在麻醉和手术时间、低氧饱和度、高呼末二氧化碳分压、术野和麻醉满意度、失血量无明显差异.喉罩组手术前后白细胞、中性粒细胞百分比升高程度明显低于插管组,术后清醒时间、开始进食时间、下地时间、术后住院时间和引流时间均比插管组短；喉罩组胃肠道反应、咽部不适、声嘶发生率也低于对照组.结论 喉罩全麻胸腔镜手术治疗肺大疱具有良好的可操作性和安全性.
作者：蔡开灿；王向东；叶靖；刁定伟；何建行；刘君；黄志勇；吴华 刊期： 2013年第05期
目的 建立一种可用于后续双向电泳研究的细胞骨架及相关蛋白的提取方法.方法 采用亚细胞组分蛋白分步提取方法,根据提取过程中细胞形态变化,提取后组分蛋白电泳图谱等优化提取条件.用双向凝胶电泳、免疫印迹分析、蛋白质点质谱鉴定等方法验证该提取方法的重复性和各组分蛋白提取纯度.结果 各组分蛋白的双向电泳蛋白图谱差异明显,具备各自特征性的蛋白点分布,各组分标志蛋白FAK、Integrin-β1、Histone Hl和cytokeratin 19分别只表达在细胞浆、细胞膜、细胞核和细胞骨架组分.细胞骨架蛋白组分中约90％以上的蛋白质点经质谱鉴定为细胞骨架及相关蛋白.结论 亚细胞组分蛋白顺序提取方法具有较好的重复性,提取组分选择性较高,并且能够有效提高低丰度蛋白的检出效率,是一种比较理想的进行蛋白质组学研究的样本预处理方法.
作者：蔡贞；熊石龙；周园；籍会彩；向春艳；郑磊 刊期： 2013年第05期
目的 研究染色质重塑复合物SWI/SNF核心亚单位SNF5对骨髓瘤细胞系基因表达谱的调控作用.方法 在KM3细胞中构建四环素诱导的表达SNF5 siRNA的稳定细胞系,通过四环素诱导敲低SNF5,检测SNF5敲低前后的基因表达谱,对差异表达基因进行生物信息学分析,并对部分基因进行验证.结果 SNF5敲低抑制KM3细胞生长,基因表达谱分析发现545个表达差异基因,其中214个上调,331个下调.结论 SNF5是多发性骨髓瘤细胞生长所需的,它通过影响与细胞生长及凋亡相关基因的表达来发挥作用.
作者：谢莹莹；徐旸 刊期： 2013年第05期
目的 确定α-毒素诱导脐静脉内皮细胞(HUV-EC-C)的凋亡在金葡菌L型垂直感染中的作用.方法 在培养的HUV-EC-C细胞中加入不同浓度(0、10、30、90、270 ng/ml)的金葡菌α-毒素,处理不同时间(0、2、4、6、8h)后经Annexin V-PI染色,流式细胞仪检测HUV-EC-C细胞的凋亡率.通过ELISA检测α肿瘤坏死因子(TNF-α)、caspase-3与caspase-8的表达量,并观察加入TNF-α中口抗体、caspases-3抑制剂zDEVD-FMK、caspase-8抑制剂zIETD-fmk对α-毒素诱导HUV-EC-C细胞凋亡的影响.结果 α-毒素能够诱导HUV-EC-C细胞凋亡并表现为时间、剂量依赖性,明显增加HUV-EC-C细胞中TNF-α、caspase-3与caspase-8的表达；在加入TNF-α中和抗体、zDEVD-FMK、zIETD-fmk后可部分阻断α-毒素能够诱导的HUV-EC-C细胞凋亡.结论 α-毒素通过TNF-α及caspase-8介导的外源性死亡途径诱导HUV-EC-C细胞凋亡,表明α-毒素诱导内皮细胞凋亡是金葡菌L型垂直感染影响胎儿发育的主要机制之一.
作者：管俊昌；朱翔；余峰玲；杨文选；刘婷婷；张涛；林娜；刘勇；刘从森 刊期： 2013年第05期
南方医科大学学报杂志
主管:广东省教育厅
主办：南方医科大学
