学术投稿

下咽癌相关血浆肿瘤标志物的蛋白质组学筛选

李军政;田文栋;刘雄;胡水旺;张宝;李湘平

关键词:下咽癌, 头颈部肿瘤, 肿瘤标志物, 蛋白质组学, 血浆
摘要:目的 分析下咽癌患者与健康人血浆中差异表达的蛋白质组,筛选潜在的与下咽癌诊断密切相关的血浆肿瘤标志物.方法 取下咽癌患者与健康人空腹血浆标本各6例分别等量混合成2组样本,去除血浆高丰度蛋白后,利用双向电泳(2-DE)进行分离,经软件分析后找出表达量变化2倍以上的差异蛋白点,接着利用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF/TOF)进行差异蛋白质鉴定,然后利用Western blotting对α2-HS-糖蛋白的表达量进行验证.结果 下咽癌患者与健康人血浆相比较,筛选出表达量差异2倍以上的差异蛋白点共11个,其中表达上调的有5个,表达下调的有6个,进行质谱分析后,表达上调的蛋白有α2-HS-糖蛋白、结合珠蛋白;表达下调的蛋白有免疫球蛋白1链C结构域、载脂蛋白A1.Western blotting结果表明,α-2-HS-糖蛋白的表达上调,与双向电泳结果一致.结论 下咽癌患者与健康人血浆的蛋白质表达谱表现出一定差异,这些差异蛋白有可能成为下咽癌患者早期诊断的特异性血浆肿瘤标志物.
南方医科大学学报杂志相关文献
  • 肝脏移植术后自身免疫性溶血性贫血:附3例报告

    目的 分析肝脏移植术后自身免疫性溶血性贫血的诊断和治疗方法.方法 回顾肝脏移植后发生自身免疫性溶血性贫血的3例患者的诊断及治疗前后的溶血象检查,血红蛋白、白细胞、血小板、总胆红素和谷丙转氨酶的变化趋势.结果 3例患者均出现与免疫抑制剂可能相关的自身免疫性溶血性贫血,经过治疗后均得到有效控制.结论 肝脏移植后自身免疫性溶血性贫血是肝脏移植后少见并发症之一,明确其诊断后进行针对性治疗,可成功治愈.

    作者:傅卫军;陈辉;徐建设;王慧;陈仲清;王瑞婷 刊期: 2013年第08期

  • 普伐他汀对P38MAPK信号通路介导的胰岛微血管内皮细胞炎症损伤的保护作用

    目的 研究脂多糖(LPS)诱导胰岛微血管内皮细胞(IMECs)炎症损伤的相关信号通路及采用普伐他汀干预后的作用机制.方法 以IMECs为实验材料,分为空白对照组、LPS组、SB203580组、普伐他汀组、SB203580+普伐他汀组.以Hoechst凋亡染色及Annexin V/PI双染色法对不同条件下IMECs的凋亡进行定性定量检测,Western blot法检测总P38MAPK(total-p38)、磷酸化P38MAPK(p-p38)蛋白及诱导型一氧化氮合酶(iNOS)蛋白的表达水平.结果 LPS组IMECs较对照组凋亡率升高,total-p38、p-p38、iNOS蛋白的表达水平上调.与LPS组比较,SB203580组、普伐他汀组与SB203580+普伐他汀组均有凋亡率降低,total-p38、p-p38、iNOS蛋白表达水平下调.结论 LPS诱导的IMECs炎症损伤与P38MAPK及iNOS/NO炎症通路的激活有关,普伐他汀可阻断以上通路,起到抑制IMECs凋亡、坏死,改善炎症损伤的保护作用.

    作者:胡南;孙嘉;康远程;陈建生;罗丽珊;张菊嫦;陈松源;蔡德鸿 刊期: 2013年第08期

  • 腹腔镜下假包膜内子宫肌瘤剔除术患者的预后和生育结局

    目的 通过回顾性研究来评价腹腔镜下假包膜内子宫肌瘤剔除术的预后和生育结局.方法 2007年3月~2012年3月,673例浆膜下和肌壁间肌瘤患者接受了腹腔镜下假包膜内子宫肌瘤剔除术,观察指标为术后合并症,症状缓解,需要再次手术及生育结局.结果 浆膜下肌瘤占42.4%,肌壁间肌瘤占57.6%,平均手术时间是96±41 min,平均失血量是128±46.2ml,82.3%的患者在术后48 h出院,无近期并发症.2.3%的患者因肌瘤复发而接受了二次腹腔镜下子宫肌瘤剔除术.有生育要求的297例患者中71%终成功妊娠,剖宫产率为49.8%,阴道助产分娩8%,自然分娩率为42.2%,无子宫破裂.结论 腹腔镜下假包膜内子宫肌瘤剔除术保留了纤维假包膜,通过保留子宫肌层的完整性而增强了愈合,没有近期手术并发症,有较好的妊娠率和分娩结局.

    作者:游艳琴;孟元光;李立安;彭红梅;范文生;李亚里 刊期: 2013年第08期

  • 自发性蛛网膜下腔出血患者CD4+CD25+调节性T细胞变化特点与意义

    目的 探讨CD4+CD25+节性T细胞(Treg)在自发性蛛网膜下腔出血(SAn)发病的作用.方法 收集自发性(A组)及外伤性(B组)SAn患者各15例,并选取15例头痛查因而行腰穿后被证实为非器质性神经系统病变的患者作为对照(C组).使用流式细胞术检测以上3组外周血及脑脊液内Treg及其胞内细胞因子白介素-10(IL-10)及转化生长因子p1(TGF-β1)的百分含量.比较自发性及外伤性SAH患者格拉斯哥评分(GCS)、神经功能缺损评分(NIHSS)、头痛视觉评分(VAS)及住院时间的差异,并进行相关性分析.结果 (1)自发性SAH患者外周血及脑脊液内Treg、IL-10及TGF-p1的含量均明显低于外伤性SAH组及头痛对照组(P<0.05),但外伤性SAH组以上三者却与头痛对照组无统计学差异(P<0.05);(2)随着治疗的进展,SAH患者的Treg含量呈进行性上升趋势,前2次腰穿两组患者脑脊液Treg含量存在统计学差异,以自发性SAH偏低(P<0.05),但第3及第4次腰穿脑脊液的Treg含量无组间差异,且第3及第4次腰穿的脑脊液Treg含量明显高于第一及第二次(P<0.05);(3)自发性SAH组的GCS、NIHSS、VAS及住院时间均显著少于(短于)外伤组;(4)相关性分析显示Treg、IL-10及TGF-β1三者当中的任意一者与NIHSS、VAS及住院时间之间四者当中的任意一者呈负相关性,但与GCS呈显著正相关性(r绝对值均大于0.6,P均小于0.05).结论 CD4+CD25调节性T细胞数量的减少可能是自发性SAH的一个重要机制;该细胞含量越高,自发性SAH患者预后越好.

    作者:梁仔;罗赛华 刊期: 2013年第08期

  • 高尿酸通过miR-155下调eNOS表达而导致内皮细胞功能障碍

    目的 高尿酸血症是心血管和肾脏疾病的独立风险因素,本研究拟从miR-155人手初步探索其在高尿酸导致内皮功能障碍过程的作用机制.方法 培养人脐静脉内皮细胞系HUVEC,以600 μmol/L的尿酸孵育24、48 h之后收集细胞及细胞上清液,检测eNOS的蛋白表达及上清液的NO含量;预测并利用双荧光素酶系统验证miR-155的靶基因,随后利用荧光定量PCR检测高尿酸环境中内皮细胞miR-155的表达情况,通过miR-155 inhibitor的转染检测它对内皮功能障碍的影响.结果 600 μmol/L的尿酸能诱导内皮细胞eNOS表达下降,NO分泌减少;microRNA在线分析软件及双荧光素酶报告实验提示eNOS的翻译水平受miR-155直接调控;同时发现高尿酸刺激内皮细胞后miR-155的表达上调,而miR-155 inhibitor能抑制它的表达;内皮细胞转染miR-155 inhibitor之后再进行高尿酸的孵育,eNOS的表达及NO的分泌水平与单独高尿酸孵育组相比均显著升高.结论 高尿酸可通过miR-155下调eNOS表达而导致内皮细胞功能障碍.

    作者:张雪光;洪权;侯剀;王远大;吴镝;陈香美 刊期: 2013年第08期

  • 海洛因成瘾患者眶额叶皮层功能连接异常与决策能力缺失的关系

    目的 探讨慢性海洛因成瘾者眶额叶皮层(OFC)功能连接的变化及其与慢性海洛因成瘾者冲动性决策行为的关系.方法 慢性海洛因成瘾男性患者14例,与之年龄、受教育程度和尼古丁依赖水平匹配的健康被试14例参加本研究.采用1.5 T磁共振扫描仪,16通道神经血管线圈,对被试分别进行头颅结构和静息态功能磁共振扫描,后利用SPM8软件以双侧眶额叶皮层为感兴趣区,分别进行组内和组间眶额叶皮层静息态功能网络分析.采用爱荷华赌博任务(IGT)对两组被试进行决策能力评估.结果 与对照组比较,慢性海洛因成瘾组眶额叶皮层与右侧顶下小叶(rIPL)之间功能连接显著下降(t=3.5,P<0.05,多重比较校正).IGT的行为学结果发现,随决策次数递增,两组被试的净分数均逐渐提高(P<0.001),但正常对照组的净分数明显高于海洛因成瘾组(P<0.001).海洛因成瘾患者OFC-rIPL功能连接与IGT评分呈明显负相关性(r=-0.550,P=0.041).结论 慢性海洛因成瘾者OFC-rIPL脑网络存在异常,而这种异常可能是其在行为学上存在冲动性决策障碍的神经基础,也可能是其成瘾行为的产生、维持和复吸的原因之一.

    作者:邱迎伟;江桂华;苏欢欢;马晓芬;李黎明;田军章;张雪林 刊期: 2013年第08期

  • 甲状腺激素可抑制人胰腺癌裸鼠移植瘤的生长

    目的 探讨甲状腺激素对人胰腺癌裸鼠移植瘤生长的影响.方法 建立BALB/c人胰腺癌细胞裸鼠皮下移植瘤模型,将成瘤裸鼠随机分为对照组(灭菌蒸馏水)、甲状腺激素(T3)高浓度组、T3低浓度组、丙基硫氧嘧啶(PTU)高浓度组、PTU低浓度组,干预21 d.测量各组裸鼠体质量变化;测量各组移植瘤体积与瘤体质量变化;应用ELISA法检测裸鼠血清中甲状腺激素T3浓度;应用免疫组化染色法检测瘤体组织中细胞增殖核抗原(PCNA)的表达和肿瘤微血管密度(MVD)的变化.结果 与对照组相比,甲状腺激素组裸鼠体质量较干预前均明显减轻(P<0.05),而PTU组变化不明显.甲状腺激素组移植瘤体积增长明显滞后于PTU组和对照组(P<0.05).甲状腺激素组瘤体质量显著低于PTU组和对照组(P<0.05).与PTU组和对照组相比,甲状腺激素组的PCNA增殖指数与MVD亦明显降低(P<0.05),但不同浓度组间无显著统计学差异(P>0.05).结论 甲状腺激素可抑制人胰腺癌裸鼠移植瘤的生长,通过抑制肿瘤细胞的增殖和新生血管的形成来发挥抗肿瘤效应,具有潜在的临床应用价值.

    作者:王楠;商博鑫;史海涛;马汉伟;姜炅;秦斌;董蕾 刊期: 2013年第08期

  • β淀粉样蛋白通过升高ROS水平上调晚期糖基化终末产物受体的表达

    目的 探讨β淀粉样蛋白(Aβ)调控海马晚期糖基化终产物受体(RAGE)表达及其机制.方法 通过脑立体定向仪及微量注射器于大鼠海马内注射Aβ1~40,注射3周后,利用Western blot检测海马组织RAGE、还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(NADPH)氧化酶(gp91phox及p47phox亚基)、核因子-κb(NF-1κB)、NF-κB抑制蛋白(IκB)的表达变化,利用流式细胞仅检测大鼠海马组织活性氧(ROS)的变化.结果 海马注射Aβ1~403周后,海马组织的RAGE的表达显著升高(P<0.01),同时检测到注射Aβ1~40引起海马组织内ROS水平明显增高(P<0.01),gp91phox、p47phox的表达及p47phox的磷酸化水平均显著升高(P<0.01),IκBα的表达显著降低(P<0.01),IκBα的磷酸化水平显著增加(P<0.01),NF-κB的表达及NF-κB的磷酸化水平均显著升高(P<0.01).结论 Aβ阿引起海马组织RAGE的表达升高,NADPH氧化酶/ROS/NF-κB信号通路可能在Aβ秀导海马神经元RAGE的表达过程中发挥重要作用.

    作者:孔卫娜;张佳;高维娟;刘清涛;周利明;柴锡庆 刊期: 2013年第08期

  • 下咽癌相关血浆肿瘤标志物的蛋白质组学筛选

    目的 分析下咽癌患者与健康人血浆中差异表达的蛋白质组,筛选潜在的与下咽癌诊断密切相关的血浆肿瘤标志物.方法 取下咽癌患者与健康人空腹血浆标本各6例分别等量混合成2组样本,去除血浆高丰度蛋白后,利用双向电泳(2-DE)进行分离,经软件分析后找出表达量变化2倍以上的差异蛋白点,接着利用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF/TOF)进行差异蛋白质鉴定,然后利用Western blotting对α2-HS-糖蛋白的表达量进行验证.结果 下咽癌患者与健康人血浆相比较,筛选出表达量差异2倍以上的差异蛋白点共11个,其中表达上调的有5个,表达下调的有6个,进行质谱分析后,表达上调的蛋白有α2-HS-糖蛋白、结合珠蛋白;表达下调的蛋白有免疫球蛋白1链C结构域、载脂蛋白A1.Western blotting结果表明,α-2-HS-糖蛋白的表达上调,与双向电泳结果一致.结论 下咽癌患者与健康人血浆的蛋白质表达谱表现出一定差异,这些差异蛋白有可能成为下咽癌患者早期诊断的特异性血浆肿瘤标志物.

    作者:李军政;田文栋;刘雄;胡水旺;张宝;李湘平 刊期: 2013年第08期

  • 促血管生成素-2和血管内皮生长因子在结直肠癌组织中的表达

    目的 探讨促血管生成素-2(Ang-2)及血管内皮生长因子(VEGF)在结直肠癌组织及血液中的表达,研究其与肿瘤疾病分期的关系.方法 采用实时荧光定量PCR检测结直肠癌患者正常组织、癌旁组织及腺癌中Ang-2、Tie-2mRNA的表达,采用酶联免疫竞争法检测Ang-2及VEGF在正常组织、癌旁组织及腺癌和外周血中的表达.结果 癌组织Ang-2mRNA和Tie-2mRNA表达与正常组织有明显差异(P<0.05),相关分析表明,2者表达存在着明显的相关(r=0.879,P=0.000).癌组织Ang-2和VEGF含量与正常组织有明显差异(P<0.05),与癌旁组织有明显差异(P<0.05).癌外周血液Ang-2含量与正常对照外周血有明显差异(P<0.05),与癌肠系膜血无明显差异(P>0.05).肿瘤组织中Ang-2和VEGF含量与疾病分期明显相关,肿瘤患者显著高于正常对照组(P<0.05),Dukes'C期和D期显著高于A期和B期(P<0.05).结论 在大肠腺癌组织中,Ang-2、Tie-2及VEGF的过度表达对肿瘤的血管生成和发展过程起着重要作用.

    作者:王瑞华;谢建国;陈华;任婷婷;张奕翠 刊期: 2013年第08期

  • 硫氢化钠防治截肢术后大鼠肾脏损伤的机制

    目的 探讨截肢术后大鼠肾脏损伤的机制,探索外源性硫化氢(H2S)供体硫氢化钠(NaHS)的应用对肾脏结构和功能的影响,并了解硫化氢在防治肾脏损伤中的作用机制.方法 实验分为两部分.第1部分:将雄性Wistar大鼠按手术时间随机分为正常对照、手术后6h、NaHS干预、炔丙基甘氨酸(PPG)干预组,每组7只.测定血浆H2S、肾组织肾损伤分子-1(KIM-1)、髓过氧化物酶(MPO)、丙二醛(MDA)、一氧化氮、尿素氮、肌酐浓度和肾组织胱硫醚β-裂解酶(CSE)活性、MPO、MDA、KIM-1水平;光镜观察肾组织形态学变化,电镜观察线粒体结构变化.第2部分:将雄性SD大鼠随机分为4组,每组大鼠8只.提取各组肾线粒体后测定呼吸控制率、膜电位及ATP酶活性.结果 截肢后6h大鼠肾脏细胞和线粒体结构出现了损伤性变化,血浆及肾脏KIM-1含量明显增加(P<0.01),而H2S/CSE水平明显下降(P<0.01),NaHS干预后血浆H2S/肾脏CSE水平明显升高(P<0.01),而肾组织损伤减轻,血浆及肾脏KIM-1含量明显降低(P<0.01).与正常对照组相比,手术后大鼠肾脏线粒体呼吸控制率、膜电位及ATP酶活性显著降低(P<0.01),应用NaHS后以上指标出现明显升高,而应用PPG后无明显改善.结论 截肢创伤可导致大鼠肾脏结构和功能的损害,并导致线粒体的损伤,H2S供体NaHS的应用可使线粒体功能明显改善,并进一步减轻肾脏结构和功能的损害,表明H2S作为是一种新的内源性介质,可能通过多条途径作用于线粒体,调节能量代谢途径,参与组织了损伤与修复的一系列病理生理过程.

    作者:张颖;刘宁;任青爱;张海峰;谢晓华 刊期: 2013年第08期

  • 芹菜素对人肺癌NCI-H460细胞增殖及凋亡的影响

    目的 研究芹菜素对人肺癌NCI-H460细胞增殖及凋亡的影响.方法 应用10~80 μmol/L芹菜素处理NCI-H460细胞,MTT法检测细胞增殖抑制率;Hoechst 33258细胞核染色法观察细胞凋亡的形态学改变;流式细胞仪AnnexinV-FITC/PI双染色法检测细胞凋亡率;Western blotting检测凋亡相关信号分子Bax、Bcl-2和caspase-3的蛋白表达水平.结果 芹菜素对NCI-H460细胞的增殖抑制作用呈浓度和时间依赖性;芹菜素处理组细胞出现核固缩、染色质凝集和核碎片化等典型的细胞凋亡特征;NCI-H460细胞凋亡率随着芹菜素浓度增加逐渐增高;芹菜素处理组细胞Bax和caspase-3蛋白表达增加,Bcl-2蛋白表达降低.结论 芹菜素能够抑制人肺癌NCI-H460细胞的增殖,并诱导其凋亡,其机制可能与上调Bax和下调Bcl-2的表达,导致Bcl-2/Bax比值下降,caspase-3活化有关.

    作者:潘雪刁;杨周萍;杨志英;周四桂;张海涛;臧林泉 刊期: 2013年第08期

  • 基质金属蛋白酶-9在后交通动脉瘤瘤周蛛网膜中的表达及临床意义

    目的 初步探讨基质金属蛋白-9(MMP-9)在后交通动脉瘤瘤周蛛网膜中的表达及意义.方法 选取南方医科大学南方医院2010年11月~2011年11月手术切除的颅内动脉瘤标本12例作为颅内动脉瘤组,并选取同期行海绵状血管瘤手术或颞叶癫痫手术患者后交通动脉起始部附近蛛网膜组织6例作为对照组.标本行常规HE染色,并采用Envision法行免疫组化染色,比较组间MMP-9的阳性表达情况.结果 HE染色提示动脉瘤瘤周的蛛网膜存在一定的组织破坏,表现为蛛网膜结构松散,与血管壁之间的连接程度下降,局部存在脱离现象.动脉瘤组瘤周蛛网膜中MMP-9阳性表达均高于照组,具有统计学意义(P<0.05).动脉瘤组内蛛网膜中MMP-9的阳性表达强度较血管壁弱,具有统计学意义(P<0.05);动脉瘤组内不同年龄、Hunt-Hess分级的MMP-9表达情况无显著性差异.结论 动脉瘤瘤周蛛网膜中MMP-9表达明显增加预示着细胞外基质的溶解,破坏蛛网膜对血管壁的保护作用,可能与后交通动脉瘤的形成有重要关系.

    作者:冯文峰;王刚;张国忠;李伟光;李明洲;何小艳;张龙;漆松涛 刊期: 2013年第08期

  • 拓扑替康联合环磷酰胺的维持化疗方案可安全和有效治疗完全缓解的晚期神经母细胞瘤

    目的 观察拓扑替康与环磷酰胺作为维持化疗方案治疗完全缓解的晚期神经母细胞瘤患儿的相关毒副反应及近期疗效.方法 回顾分析经诱导化疗和手术治疗后完全缓解的16例Ⅳ期神经母细胞瘤患儿临床资料,均予3疗程拓扑替康联合环磷酰胺的维持化疗方案(拓扑替康0.75 mg·m-2·day-1,第0~4天;环磷酰胺:250 mg·m-2·day-1,第0~4天).应用美国国立癌症研究所通用不良反应分级标准对化疗相关毒副反应进行评价,观察完全缓解后2年的无病生存率.结果 16例患儿化疗相关毒副反应主要是对骨髓的抑制,粒系100%达到Ⅳ级,红系、巨核系Ⅲ、Ⅳ级毒性损害累积达100%.所有患儿均出现不同程度的感染,经积极的抗感染治疗均可以控制.消化道、肝脏损害多为Ⅰ、Ⅱ级,经治疗可恢复.未见肾脏、神经、心脏毒副反应病例.该维持化疗方案2年内无病生存率可达68.75%(11/16).结论 扑替康联合环磷酰胺的维持化疗方案可以安全、有效的治疗Ⅳ期完全缓解的神经母细胞瘤患儿,是无经济条件应用造血干细胞移植患儿可以选择的维持化疗方案之一.

    作者:冯晨;唐锁勤;王建文;刘英;杨光 刊期: 2013年第08期

  • LASP1下调和ferritin上调在rhBMP-2诱导的比格犬BMSCs成骨分化中起重要作用

    目的 建立稳定的比格犬骨髓间充质干细胞(BMSCs)诱导成骨分化模型;鉴定参与比格犬BMSCs细胞成骨分化过调控的蛋白质,探讨其可能的调控机制.方法 分离培养比格犬BMSCs细胞,rhBMP-2诱导细胞成骨分化7d,基于蛋白质双向凝胶电泳的蛋白质组学分析成骨分化组与对照组差异表达的蛋白质,对感兴趣的蛋白质LASP1、ferritin轻链和重链表达情况用Q-PCR、Western blot进行验证.结果 成功诱导比格犬BMSCs成骨分化;蛋白质组学分析获得rhBMP-2诱导上调的蛋白质9个,下调的蛋白质11个.荧光定量PCR技术和Western blot对LASP1和ferritin表达情况进行了验证,发现rhBMP-2诱导7d后,LASP1显著下调而ferritin显著上调,与蛋白质组学结果一致.结论 LASP1在调节细胞骨架活性方面发挥重要功能,而ferritin是细胞铁离子稳态维持的重要分子,提示这两种蛋白质在rhBMP-2诱导的比格犬BMSCs成骨分化过程中发挥重要作用.

    作者:胡稷杰;刘亚伟;何敏毅;余斌;王钢 刊期: 2013年第08期

  • Nestin转基因小鼠模型的建立及nestin基因在器官中的表达

    目的 构建人nestin基因表达载体,制备nestin过表达转基因小鼠.方法 以人神经胶质瘤细胞株U251的cDNA为模板,分3段扩增出nestin基因eDNA全序列,并将其克隆入含有强启动子ROSA26的pBROAD3载体,酶切鉴定、测序,除去原核序列,纯化.显微原核注射建立转基因小鼠.PCR验证nestin基因整合,确定建立首建者.将阳性鼠传代.Westemblot方法检测F3代转基因小鼠与野生型小鼠主要器官(心、肺、脑、肾)的nestin表达.结果 测序结果证明成功构建了受ROSA26启动子调控的nestin转基因载体.出生34只小鼠,PCR检测证实存在首建者2只.Westemblot方法证实,与野生型小鼠相比,F3代转基因小鼠脑、肺组织存在较高水平nestin表达.结论 首次成功建立nestin过表达转基因小鼠,外源基因可遗传到子代并在脑和肺组织中稳定表达,为深入研究nestin在肿瘤转移、细胞“干性”的维持和细胞的分化等功能提供了良好的实验动物模型.

    作者:郑文宏;李振林;贾俊双;安靓 刊期: 2013年第08期

  • 高胆汁酸血症影响兔呼吸功能的实验研究

    目的 比较研究经典血压下降反射性引起呼吸功能改变与高胆汁酸血症引起呼吸功能改变是否特性相同,为认识胆汁酸调节呼吸功能提供实验依据.方法 70只新西兰雄性大白兔,20%乌拉坦以5nl/kg体质量耳缘静脉注射麻醉,颈部正中切开,气管插管、颈总动脉插管,与呼吸、血压换能器相连,生物信号通过BL-420生物信号采集系统采集,显示记录.观察刺激迷走神经、耳缘静脉注射稀释胆汁液、5种不同游离胆汁酸单品水溶液后血压、呼吸变化的特性.结果 刺激迷走神经与注射稀释胆汁液均可降低血压,两者在血压总的反应时间方面差异不大,但呼吸反应时间RT(胆汁)远远长于自身血压总反应时间T(胆汁),有9~10倍的差异(P<0.001),呼吸幅度峰峰值RR(胆汁)明显大于经典反射性活动引起的RR(迷走神经)变化(P<0.001).在RT1(胆汁)区间,RR(胆汁)值显著高于RT2(胆汁)区间的RR(胆汁)值(P<0.001);熊脱氧胆酸对血压、呼吸没有明显影响(P>0.05);其他4种游离胆汁酸单品对呼吸、血压有影响(P<0.001).结论 高胆汁酸血症引起的呼吸功能变化有反射性的因素,也有对呼吸功能直接的调节作用;在我们的实验条件下,熊脱氧胆酸对血压、呼吸没有影响;其他4种单品均具有降低血压的能力,并且具有剂量依赖性;其他4种游离胆汁酸单品对呼吸功能都有明显影响.

    作者:王斐;赵丛;田映红;尹艳茹 刊期: 2013年第08期

  • 小鼠脂肪间充质干细胞的分离培养及其在肝内归巢

    目的 建立小鼠脂肪间充质于细胞(ADSCs)分离培养的方法,并将ADSCs移植于体内,观察其致瘤性及肝脏归巢情况.方法 取皮下脂肪用0.075%Ⅰ型胶原酶消化,贴壁培养获取小鼠ADSCs,通过流式细胞技术检测其表面分子、细胞周期;并将ADSCs注射到小鼠皮下观察其致瘤性,及尾静脉注射观察其肝脏的归巢.结果 分离培养的细胞高表达CD29、CD44,不表达CD34、CD45、CD11b、CD14;细胞周期显示G0/G1、S、G2/M的细胞所占的比例分别为80.1%、7.9%、12%;ADSCs具有低免疫原性,不表达CD40、CD80、CD86、MHCⅠ、MHCⅡ以及PDL-1.在IFN-作用下,可轻度上调CD40、CD80以及PDL-1.ADSCs移植后未见成瘤,且可在肝脏实质内多处定居.结论 胶原酶消化、贴壁培养可以从小鼠脂肪中分离出高纯度的间充质干细胞,且ADSCs移植后能在肝内定居.

    作者:赵文秀;张磊;刘建明;尹震宇;王效民 刊期: 2013年第08期

  • 微型营养评定法在老年慢性阻塞性肺疾病患者中的应用及其与BODE指数的相关性

    目的 探讨微型营养评定法(MNA)在老年慢性阻塞性肺疾病(COPD)患者中的应用,分析其与BODE指数的相关性.方法 选择2012年4月~10月南方医科大学珠江医院呼吸内科门诊稳定期COPD老年患者139例,采用MNA评估营养状态并分为营养良好组、营养风险组及营养不良组.测定患者的体测指标、肺功能、6分钟步行距离(6MWD),采用MMRC评估呼吸困难程度.按BODE指数评分标准进行评分,并分析其与MNA评分间的相关性.结果 3组间性别构成无统计学意义(P>0.05),年龄及体测指标差异具统计学意义(P<0.001).3组间BODE指数参数FEV1% Pred、BMI、MMRC、6MWD的评分情况差异均有统计学意义(P<0.001).MNA评分与BODE指数呈负相关(r=-0.605,P<0.001).结论 MNA与体测指标、BODE指数密切相关,适用于COPD人群;营养是COPD患者症状的重要影响因素,改善营养状态是缓解症状的有效措施之一.

    作者:孙嘉;郑晶晶;郭松文;朱哲;陈新 刊期: 2013年第08期

  • 大鼠血浆中辣椒素的HPLC-MS/MS测定

    目的 建立一种简单方便的血浆中辣椒素浓度的液质联用检测方法(HPLC-MS/MS).方法 血浆样本100 μl加入终浓度为50 ng/ml的维拉帕米(内标),用混合溶剂乙酸乙酯∶丙酮(85∶15)萃取后用安捷伦6460三重四级杆质谱系统进行分析.采用多反应监测(MRM)扫描方式,在ESI源正离子模式下,选择m/z 306→137作为辣椒素监测离子,m/z455→165为内标物监测离子.结果 样品分析时间仅需1.5 min,方法线性范围在1.85~370 ng/ml (r=0.9997),低检测限为1.85 ng/ml.辣椒素在三个质控浓度(3.7、37、370 ng/ml)检测下的提取回收率为77.34%,70.64%及78.02%.结论 HPLC-MS/MS灵敏、快速、准确,可应用于检测血浆中存在的微量辣椒素.

    作者:段炼;晏媛;刘媛;刘思佳;李国锋 刊期: 2013年第08期

南方医科大学学报杂志

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