童大跃;伍新尧;陆惠玲;蔡贵庆;区敬华;陈勇;曾艳红
[目的]通过视神经外伤后视网膜形态的变化,了解外伤性视神经损伤的手术时机与疗效间的相关关系.[方法]建立外伤性视神经损伤和不同时间减压动物模型,对视网膜神经节细胞(RGCs)、视网膜等进行了定量分析.[结果]正常对照组RGCs相对体积数密度(体密度,Vv)为0.072,小细胞所占比例为49.5%,视网膜厚度为108.9μm,节细胞以内层的厚度为19.5μm;48h减压组RGCs体密度为0.052,小细胞占比例为66.8%,视网膜总厚度为101.9μm,节细胞以内层厚度为16.9μm;14d减压组RGCs体密度为0.042,小细胞占比例为76.4%,视网膜总厚度为96.5μm,节细胞以内层为15.5μm.[结论]48h减压较14d减压可以较好的保存RGCs和视网膜的形态,外伤性视神经损伤后应该尽早解除周围因素对视神经的压迫.
作者:史剑波;文卫平;许庚;徐锦堂;狄静芳;夏潮涌 刊期: 2003年第04期
[目的]研究特异性c-Jun氨基末端激酶(JNK)抑制剂SP600125对低钾诱导的小脑颗粒神经元凋亡的保护作用.[方法]把体外培养的小脑颗粒神经元从含去极化浓度钾离子(KCl25mmol/L)的培养基中转移至低钾培养基(KCl5mmol/L)中诱导神经元凋亡.以Westernblot法检测JNK和c-Jun的磷酸化水平.[结果]低钾(KCl5mmol/L)磷酸化并激活JNK,诱导c-Jun磷酸化和小脑颗粒神经元凋亡.SP600125通过抑制cJun磷酸化而浓度依赖性地促进低钾环境中培养的小脑颗粒神经元的存活.其保护作用的半数有效量(ED50)为1.01μmol/L.[结论]SP600125通过特异性地抑制JNK活性而对低钾培养的小脑颗粒神经元具有保护作用;提示JNK是介导低钾诱导的小脑颗粒神经元凋亡的关键激酶,它可能可以作为干扰神经元凋亡的药物的作用靶点.
作者:王文雅;谢元斌;刘炜;朱振宇;黎明涛 刊期: 2003年第04期
用于处理 DNA检材以分离和提取 DNA的方法很多.不同的方法有不同的优缺点,其适用的分析技术也不同 [1~ 5].在法医检案的实际应用过程中经常会遇到不少的问题,如微量检材的 DNA提取,既要纯度高,又要回收率高;常用的几种方法单独进行时则很难达到这样的要求.本文就几种常用的方法进行了改良及它们效果比较.
作者:童大跃;伍新尧;陆惠玲;蔡贵庆;区敬华;陈勇;曾艳红 刊期: 2003年第04期
[目的]研究褪黑激素(MEL)对大鼠下丘脑弓状核(ARC)神经元自发单位放电活动的影响.[方法]记录ARC神经元自发单位放电,微电泳注射MEL.分析注射MEL前和注射MEL时ARC神经元自发单位放电的放电间隔(ISI)及其变化率.[结果]微电泳MEL时,220个ARC神经元自发单位放电活动的变化有3种情况:92个单位(41.82%)的ISI减小(兴奋);61个单位(27.73%)的ISI增加(抑制);67个单位(30.45%)的ISI无明显改变(不反应).[结论]MEL对ARC大部分神经元的自发放电活动有兴奋或抑制的调制作用,以兴奋作用为主,但对小部分神经元的自发放电活动无明显影响.
作者:李晓君;刘甘泉;郭廖南;陈培熹 刊期: 2003年第04期
[目的]探讨肾病肾小球细胞凋亡(脱噬作用)介导因子的表达及依那普利对其的影响.[方法]8~10周雄性SD大鼠72只,随机分为干预组、模型组和对照组,各24只.于实验第1天、第21天分别对干预组、模型组大鼠注射阿霉素2mg/kg,对照组注射等量生理盐水.第2次注药后干预组大鼠的饮用水加入依那普利50mg/L.第2次注药后4周、12周、20周、28周各组分别处死4只大鼠,取肾组织行病理检测,并用末端标记法及电镜检测肾组织细胞凋亡.用免疫组化法检测肾组织Fas抗原(CD95)、Bcl-2蛋白和Ⅱ型血管紧张素Ⅱ受体(AT2R)表达;并计算其在肾小球中表达的阳性单位.[结果]在20周后,干预组和模型组大鼠肾小球出现硬化,肾小球细胞凋亡频率也显著增加.但干预组大鼠肾小球硬化指数(GSI)和肾小球细胞凋亡指数(GAI)均较模型组小.在20周和28周,干预组和模型组肾小球Fas抗原表达较对照组显著性增加,Bcl-2蛋白表达较对照组显著性降低;28周时,干预组肾小球Bcl-2蛋白表达较模型组显著性增高.3组大鼠肾组织AT2R的表达主要在远曲小管,肾小球中未见表达.在干预组和模型组,Fas抗原和Bcl-2蛋白阳性单位值与GSI和GAI相关均有显著性.[结论]大鼠阿霉素肾病肾小球硬化时,肾小球细胞凋亡可能是受Fas抗原介导和Bcl-2蛋白调控的.依那普利干预可减少Bcl-2蛋白表达降低的程度,这可能是干预组大鼠细胞凋亡减少的原因.
作者:孙良忠;岳智慧;陈述枚;许韩师;汤洁如 刊期: 2003年第04期
[目的]将nm23-H1导入口腔癌BcaCD885细胞株,观察nm23-H1对BcaCD885细胞株侵袭转移能力的影响,并对相关机制进行分析.[方法]制备高纯度的nm23-H1真核表达质粒,并用阳离子脂质体介导的转染技术,完成转染方法的建立.检测转染前后的NDPKA的表达并观察转染前后细胞的侵袭转移行为能力的变化.[结果]将nm23-H1转染口腔癌细胞,获得了稳定表达,发现BcaCD885细胞株nm23-H1基因的转染前后表达水平有明显差异,实验组和对照组的侵袭细胞相对数目分别为41.1%±1.2%和64.5%±6.3%,趋化运动细胞相对数目为50.0%±6.3%和81.0%±3.9%,实验组的粘附能力也显著降低.[结论]nm23-H1对BcaCD885细胞的侵袭转移能力具有显著抑制作用.
作者:陈绍维;黄洪章 刊期: 2003年第04期
[目的]构建A型流感病毒血凝素(hemagglutinin,HA)基因真核表达载体,研究其作为DNA疫苗的免疫效果.[方法]从流感病人体内分离流感病毒(A/Guangdong/376/2001/H1N1),提取RNA,用特异引物进行RT-PCR,扩增HA基因,先将其克隆到pMD18TVector,进行序列测定和分析;然后将HA基因亚克隆到真核表达载体(pCI-neo),进行鉴定.[结果]获得一个核苷酸长度为1698bp的基因,编码565个氨基酸;同源性比较结果表明:和A/HongKong/1131/98(GenBank/NCBI:AF386775)有98%同源,序列分析表明有10个氨基酸出现变异;酶切和序列测定表明HA基因正确插入pCI-neo载体(HA-pCIN).[结论]HA基因真核表达载体的成功构建,可以进一步研究其免疫功能.
作者:陆家海;张欣;鄢新革;郭中敏;林锦炎;许锐恒;余新炳 刊期: 2003年第04期
[目的]比较正常新生儿、黄疸新生儿(新生儿病理性黄疸和高胆红素血症)和早产儿的畸变产物耳声发射(DPOAE)的检出率和幅值,以探讨黄疸及早产对听力的影响.[方法]对20例正常新生儿、37例的异常黄疸患儿及23例早产儿使用CELESTA503进行DPOAE测试.[结果]①首次筛查仅f0=1.0kHz、3.0kHz时的检出率差异有显著性,两两间比较显示正常组与早产组间的差异有显著性;②首次未通过耳3个月后再次复查,病理性黄疸组原未通过耳均通过再次筛查,仅早产儿组3例4耳仍未通过;③幅值比较显示f0=2.0kHz、4.0kHz和6kHz时黄疸组的幅值高于早产组幅值,其差异有显著性;f0=2.0kHz时正常组的幅值高于早产组幅值,其差异有显著性.[结论]新生儿病理性黄疸或高胆红素血症及时而有效治疗使体内胆红素增高的时间短而轻,对内耳外毛细胞的影响就可能较轻而且可恢复;早产对听力的影响较大.
作者:刘敏;李广智;苏振忠;陈锡辉;熊观霞 刊期: 2003年第04期
[目的]探讨淋巴管增殖和分布、血管内皮生长因子C(VEGF-C)表达与舌鳞癌淋巴转移的关系.[方法]采用RT-PCR和免疫组织化学法研究VEGF-C在22例舌鳞癌中的表达、酶组织化学法显示癌周淋巴管并结合图像分析和医学统计学分析.[结果]VEGF-C表达阳性病例的癌周淋巴管各参数高于VEGF-C表达阴性病例(P<0.01);淋巴结转移组VEGF-C阳性率和淋巴管各参数均高于无淋巴结转移组.[结论]VEGFC表达和癌周淋巴管正相关,对舌鳞癌淋巴结转移有一定影响.
作者:唐海阔;黄洪章;潘朝斌;王建广;侯劲松 刊期: 2003年第04期
[目的]报告首例妊娠合并严重急性呼吸综合征( SARS)的诊治成功经验.[方法] 回顾我院收治的 1例双胎妊娠 30周合并严重急性呼吸综合征的诊治经过和围产结局.[结果] 患者于妊娠 31周 5天因胎膜早破剖宫产两活男婴,产后 2月孕妇痊愈,新生儿未发现 SARS病征.[结论] 妊娠合并严重急性呼吸综合征经过适当的内科和产科处理可取得良好的围产结局.
作者:张睿;张建平;王蕴慧;黄雪梅 刊期: 2003年第04期
[目的]探讨电脉冲刺激进行人卵母细胞的人工辅助激活的可行性.[方法]不同卵龄和来源的人卵母细胞分为4组,49个新鲜成熟的卵母细胞作为A组,42个常规体外受精(IVF)中未受精的成熟卵母细胞为B组,C组为卵浆内单精子注射(ICSI)后未受精卵母细胞57个,D组为体外培养48h的ICSI后未受精卵母细胞37个,所有卵母细胞以直流电脉冲刺激2次,观察电脉冲刺激后卵母细胞激活和胚胎发育情况.[结果]A组卵母细胞激活率为43%(21/49),与B、C、D3组相比偏低,差异具有统计学意义(P均<0.05),A组中激活后卵母细胞主要表现为一原核二极体(1PN+2PB),而C组和D组则以二原核二极体(2PN+2PB)占多数.A、B、C组激活后卵母细胞分裂率分别为81%(17/21),83%(24/29)和88%(38/43),较D组(19%,5/26)显著增加(P<0.01),在电脉冲刺激后第3天,A、B、C组分别有18%(3/17),29%(7/24),31%(11/35)的胚胎发育到8细胞阶段.[结论]不同来源和卵龄的人卵母细胞在电脉冲刺激后表现为不同的激活类型和胚胎发育情况,直流电脉冲作为一种有效的卵母细胞人工激活方法可以应用于辅助受精.
作者:舒益民;庄广伦;张敏芳;方丛;彭文林 刊期: 2003年第04期
临床上常将压疮分为 4期.瘫痪患者由于局部长期受压,感觉差,血循环障碍,神经营养不良,伤口恢复缓慢,尤其是第Ⅲ、Ⅳ期压疮,常规的治疗方法效果不明显.临床研究显示,在慢性损伤的治疗中,紫外线照射能直接刺激新生组织的生长,增加组织张力,提高局部血液循环和供氧,降低水肿,抑制细菌生长 [1].为此,我科使用紫外线治疗瘫痪患者第Ⅲ、Ⅳ期压疮,并进行对比观察,取得较好效果,现报道如下.
作者:蒋伶俐;陈燕;毛玉容;丁建新;许燕玲;赵敏 刊期: 2003年第04期
[目的]报道传染性非典型肺炎(SARS)的X线的临床特征.[方法]分析105例SARS的X线胸片表现.所有病人均为本院2003年1月30日至3月31日诊治的患者,均符合我国卫生部的临床诊断标准,有完整的胸部X线照片资料.按病变早期表现及进展情况将其分为两个类型.①渗出型:由肺内局限或多发病灶发展至弥漫分布.②间质型:以肺部间质性炎症为早期主要表现,其后或可出现肺实质渗出性病变.[结果]75例SARS表现为肺内渗出性病灶,25例早期呈间质性炎症,随后出现明显肺内实变.5例主要表现为肺间质性炎症.首次发现肺内病变至病变完全吸收时间,为7~46d,平均19d.[结论]SARS的X线影像学表现以肺实质渗出性病变和间质性炎症为主,首诊后7~10d达高峰.大部分病人肺内病变可完全吸收,目前尚未见有后遗症.
作者:梁碧玲;许晓矛;任俊杰;江容坚;邓雪莲 刊期: 2003年第04期
[目的]检测p15蛋白在舌鳞状细胞癌(TSCC)中的表达,探讨其与临床病理及预后的关系.[方法]应用免疫组化超敏S-P法检测45例TSCC和10例正常舌组织中p15蛋白的表达,染色结果进一步用图像分析仪定量测定.[结果]TSCC中p15表达缺失率为46.7%(21/45);临床Ⅰ、Ⅱ期p15表达水平(54.25±21.14)明显高于Ⅲ、Ⅳ期(29.62±9.28),无颈淋巴结转移组(59.05±18.03)明显高于有转移组(26.83±8.58),各组间差异显著(P<005);Cox模型分析表明p15缺失与预后不良有关(P<005).[结论]p15蛋白表达缺失是TSCC发生发展中较常见分子事件,对准确评估TSCC的生物学行为和预后有重要的临床意义.
作者:曾融生;刘习强;黄洪章;杨小平 刊期: 2003年第04期
[目的]了解造血干细胞移植病人出血性膀胱炎发生的危险因素.[方法]对29例造血干细胞移植病人出血性膀胱炎的危险因素进行统计学分析.[结果]出血性膀胱炎的发生率34%(10/29例),经Logistic回归分析发现出血性膀胱炎的危险因素是预处理方案(OR值0.0580),马利兰/环磷酰胺预处理方案出血性膀胱炎发生率高.[结论]预处理方案对出血性膀胱炎的发生有重要影响.
作者:吴祥元;杨海虹;林曲;李芳;董敏 刊期: 2003年第04期
[目的]探索不同细胞因子(IL-2、IL-7、IL-15)组合的诱导培养体系对人脐血来源细胞因子诱导杀伤(CIK)细胞、自然杀伤(NK)细胞和自然杀伤样T(NKT)细胞的扩增效果.[方法]通过IL-2、IL-7、IL-15的不同组合诱导扩增脐血来源的CIK细胞、NK细胞和NKT细胞,通过流式细胞分析法对不同培养条件下CIK细胞、NK细胞和NKT细胞免疫表型的比例进行了分析.[结果]经过21d的培养,CD3+CD56+CIK细胞以IL-2+IL-7+IL-15组扩增比例高,为(24.5±5)%;NK细胞以IL-2+IL-15组扩增比例高,为(59.1±0.5)%;上述细胞因子体系对脐血Vα24+CD161+NKT细胞扩增效果不明显.[结论]脐血中免疫效应细胞CIK、NK细胞等可通过IL-2、IL-7、IL-15的联合培养体系进行扩增.
作者:黎阳;黄绍良;魏菁;吴燕峰;周敦华 刊期: 2003年第04期
[目的]克隆酪氨酸酶基因(tyr),构建pcDNA3.1(+)-tyr真核表达重组体,并导入NIH3T3细胞表达.[方法]用RTPCR法从小鼠B16黑色素瘤细胞中克隆tyr全长cDNA片段,利用DNA重组技术将其定向插入真核表达质粒pcDNA3.1(+)的T7启动子下游,并用脂质体法导入NIH3T3细胞,RT-PCR,酪氨酸酶活性测定及多巴染色法检测tyr的表达.[结果]成功克隆1.74kb的全长tyrcDNA片段,经测序证实与GenBank所报道的序列完全一致,tyr准确克隆入pcDNA3.1(+)的多克隆位点,RT-PCR及酪氨酸酶活性测定等方法检测到转染了重组体的NIH3T3细胞中有tyr的表达.[结论]本实验成功构建了pcDNA3.1(+)-tyr真核表达重组体,并成功导入NIH3T3细胞中表达.
作者:吉琼梅;朱振宇;张海涛;李秀英;岳滔;李茜;马涧泉 刊期: 2003年第04期
[目的]采用彩色多普勒超声检查对糖尿病大鼠视网膜中央动脉(CRA)血流进行测定,探讨糖尿病早期视网膜病变的血流动力学的变化规律.[方法]链脲佐菌素(STZ)腹腔注射诱导而成糖尿病大鼠模型共66只并随机分为4周、8周及12周3组.采用彩色多普勒超声检查测定大鼠右眼CRA的血流参数,包括峰值血流速度(PSV)、舒张期低流速(EDV)、平均血流速度、阻力指数(RI)、搏动指数(PI)以及血管内径.检查结束后,立即摘除大鼠右眼,进行视网膜血管消化铺片的制作.[结果]光镜下,糖尿病大鼠的视网膜血管消化铺片在12周,始观察到视网膜的早期病变,表现为毛细血管周细胞的形态学变化.4周时,糖尿病大鼠CRA的各血流参数与对照组无显著性差异;8周时,糖尿病大鼠的CRA的PSV及EDV显著下降;12周时,糖尿病大鼠的CRA的流速均显著低于对照组,而RI、PI则显著增高.[结论]在糖尿病早期,视网膜出现血管病变之前,视网膜血流动力学已经出现异常改变,并进行性加重.视网膜血流减少与血液灌注不良是糖尿病视网膜病变的重要发病原因.
作者:王梅;蓝育青;刘嫣芬;文艳玲;朱邦豪;李海刚 刊期: 2003年第04期
[目的]探讨早期釉质龋中釉质微晶的溶解方式及病变体部的形成机制.[方法]应用透射电子显微镜(TEM)结合氩离子减薄制样技术对早期釉质龋病变体部的超微结构进行观察.[结果]在早期釉质龋病变体部,釉柱间区增宽,釉柱中心区微晶的破坏程度较周边严重,釉柱中心区多数微晶出现中心穿孔,釉柱周边两侧微晶边缘圆钝、增大,并可见大量形态不一、大小不等的晶粒散布其间.[结论]早期釉质龋中单个晶粒的溶解方式主要表现为中心部优先溶解;早期釉质龋病变体部的形成,是以微晶脱矿为主,脱矿和再矿化过程同时存在的结果.
作者:赵玮;凌均棨;汪说之;樊明文;于世凤 刊期: 2003年第04期
[目的]探讨胸大肌肌皮瓣在修复鼻咽癌放疗后颈部皮肤溃疡的作用.[方法]1991年10月2001年10月,对16例鼻咽癌放疗后颈部皮肤溃疡进行了手术切除,再用胸大肌肌皮瓣Ⅰ期修复.[结果]本组16例中,皮瓣全部存活,术后7~12d拆线,其中4例皮瓣边缘部分愈合不良,经换药和营养支持疗法后,20~25d愈合.术后病理报告均为慢性溃疡,中位随访时间为3.5年,全部皮瓣无坏死、无新的溃疡形成.[结论]胸大肌肌皮瓣取瓣面积大,血管蒂较长,旋转度大,血运可靠,可用于鼻咽部放疗后颈部皮肤放射性坏死的较大缺损的修复.
作者:彭解人;宋新汉;黄晓明;蔡翔;许耀东;龚坚;关中 刊期: 2003年第04期