胡润磊；江洪；马胜林
目的 诱导表达可生物素化的人类白细胞抗原HLA-DRB1*07:01蛋白,以制备MHC四聚体,为后续研究肽段与MHCⅡ的结合力、检测抗原特异性T细胞提供必要工具.方法 从GenBank中获得HLA-DRB1*07:01的cDNA序列,人工合成基因片段时,α链、β链的跨膜区加入亮氨酸拉链,其中β链还在跨膜区加入Avi标签.α链和β链分别与表达载体pET-44a和pETduet-1-Bira连接后转入大肠杆菌Rosetta构建原核表达体系,通过氨苄青霉素(Amp)抗性基因筛选,利用异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达,获得目的蛋白,并用免疫印迹法分析鉴定目的蛋白.结果 成功构建了重组质粒pET-44a-HLA-DRB1*07:01 α链和pETduet-1-HLA-DRB1 *07:01β链-BirA,0.25 mmol/L的IPTG可高效诱导目的蛋白表达,α链可被HLA-DRA抗体特异识别,目的蛋白可生物素化且可被链霉素特异识别.目的蛋白主要以包涵体形式表达,经反复洗涤可获得高纯度的蛋白.结论 成功构建了HLA-DRB1*07:01蛋白的原核表达系统,并得到纯化的可生物素化重组表达蛋白,为进一步制备HLA-肽四聚体奠定了实验基础.
作者：李敏英；李文；陶爱林 刊期： 2018年第07期
目的 分析体外受精-胚胎移植(IVF-ET)中正常反应者采用拮抗剂方案相较于激动剂长方案的临床特点及寻找与获卵率相关的因素.方法 回顾性分析2015年1月至2017年6月汕头市中心医院生殖中心拮抗剂方案和激动剂长方案各150周期,比较两组的基本资料和临床结局.结果 拮抗剂组的Gn时间、获卵数、获卵率、OHSS发生率低于激动剂组(P＜0.05);拮抗剂组启动剂量、受精率、卵子利用率高于激动剂组(P＜0.05);两组的Gn用量、优胚数、优胚率、妊娠率、流产率;HCG日E2、LH、P差异均无统计学意义(P＞0.05).拮抗剂组扳机次日的孕酮值是重要的获卵率独立预测指标,孕酮值越高获卵率越好,孕酮的cut-off值为31 nmol/L.结论 对正常反应者,拮抗剂方案较激动剂长方案有优势;扳机后次日的孕酮值对获卵率有较好的预测价值.
作者：杨军 刊期： 2018年第07期
目的 探讨张力蛋白同源基因(PTEN)基因在子宫内膜癌细胞上皮间质转化(EMT)中的作用.方法 PLVX-PURO-PTEN慢病毒载体转染后获得ishikawa-PTEN细胞,以QPCR检测CDH1、CDH2的mRNA表达水平、流式细胞术检测CD133表面标志物阳性表达水平.结果 ishikawa-PTEN细胞的CDH1mRNA表达量低于对照组,CDH2 mRNA表达量则高于对照组,CD133阳性表达比对照组低.结论 PTEN在抑制子宫内膜癌细胞EMT中起重要作用,可为判断子宫内膜癌预后提供依据.
作者：李品莹；李小毛 刊期： 2018年第07期
目的 探讨术前血小板分布宽度(PDW)在子宫内膜癌筛查及诊断预测中的价值.方法 纳入2012-2016年中山大学附属第三医院收治的135例子宫内膜癌患者和135例子宫内膜息肉患者,收集其临床资料并行回顾性分析.结果 子宫内膜癌患者术前PDW中位值低于子宫内膜息肉患者,差异有统计学意义(P＜ 0.001).随着FIGO分期增加,术前PDW中位值呈现逐渐下降趋势(P＜0.05).ROC曲线分析示,灵敏度75.9％,特异度60.9％,AUC 0.673 (95％ CI 0.541～0.806)(P＜ 0.05).有淋巴结转移、深肌层浸润、淋巴脉管间隙受累、宫颈浸润、附件转移患者术前PDW中位值低于无淋巴结转移、深肌层浸润、淋巴脉管间隙受累、宫颈浸润、附件转移患者,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 术前PDW数值有助于预测子宫内膜癌高危因素和肿瘤进展程度.
作者：蒋慧云；李小毛；王佳；唐欣然；黄珊瑜 刊期： 2018年第07期
目的 探讨ⅢA(N2)期非小细胞肺癌(NSCLC)患者中单站N2和多站N2术后远期生存的差异.方法 2010-2016年50例入选的ⅢA(N2)期NSCLC患者.分析临床因素对ⅢA(N2)期患者生存的影响;比较不同N2状态的生存差异及影响因素.结果 全组5生存率为35％,中位生存时间38个月.单因素分析显示单站N2者(n=34)5年生存率为43.6％,多站N2者(n=16)为24.8％(P=0.01).Ⅲ a1/a2期(n=36)5年生存率为41.7％,Ⅲ a3/a4期(n=14)为23.4％(P=0.03).多因素分析显示单站N2转移(HR=0.724,95％CI:0.636～0.891,P=0.001);Ⅲ a1+a2期(HR=0.575,95％CI:0.225 ～ 0.963,P=0.005)是N2-Ⅲ A期患者术后远期生存较好的独立预后因素.结论 Ⅲ A(N2)期NSCLC中单站N2、Ⅲ a1+a2期预后好于多站N2、Ⅲ a3/a4期.单站N2、Ⅲ a1+a2期是患者术后远期生存较好的独立因素.
作者：王沐廷；李锐雄；马陈声；蓝斌；方忠民；陈恕 刊期： 2018年第07期
目的 观察右美托咪定预给药对切口痛模型大鼠脊髓胶质细胞的影响.方法 成年雄性SD大鼠60只,随机分为4组(n=15):S组为假手术组,O组为手术对照组,D1、D2组分别为低剂量及高剂量右美托咪定组.O组、D1组和D2组大鼠行左后足切开术制备切口痛模型,D1、D2组于术前10 min分别腹腔注射右美托咪定30 μg/kg及50 μg/kg.S组和O组腹腔注射等量生理盐水.于建立切口痛模型前(T0)及术后2、6、12、24h(T1-4)观察机械缩足反射阈值(MWT),于行为学测试结束后每组随机取6只大鼠,取L4-6脊髓进行Western blot方法测定小胶质细胞标记物(OX42)和星形胶质细胞标记物(GFAP)的蛋白表达水平及测定IL-1β、IL-6和TNF-α含量.结果 与S组比较,O组大鼠T1-3时MWT值下降,脊髓OX42表达上调,脊髓IL-1β、IL-6和TNF-α含量升高(P＜0.05);与O组比较,D1组及D2组大鼠T1-3时MWT值升高,脊髓OX42表达下调,脊髓IL-1β、IL-6和TNF-α含量降低(P＜0.05).结论 在切口痛模型中,右美托咪定主要抑制大鼠脊髓小胶质细胞OX42的表达及炎性因子IL-1β、IL-6和TNF-α释放.
作者：肖凡；罗振中；卢俊；陈受琳；黄丹；周斌；陈琴琴；华福洲 刊期： 2018年第07期
目的 探讨前交叉韧带(ACL)解剖重建中股骨侧分别使用不同固定方式对术后骨道扩大的影响和临床疗效.方法 回顾性分析2014年6月至2015年6月自体腘绳肌腱单束解割重建ACL患者60例,随机分为Rigidfix固定组和Endobutton固定组(各30例),记录患者手术前后膝关节KT-1000测量值、IKDC评分及Lysholm评分评估膝关节功能恢复情况;使用多排螺旋CT测量重建术后股骨侧隧道4个位置的直径,分析术后骨道扩大的变化.结果 所有患者均获得12个月随访,两组患者手术前后的膝关节IKDC评分、Lysholm评分及KT-1000测量位移值差异无统计学意义(P＞0.05).术后12个月两组患者股骨侧骨道扩大相比,P1位置骨道直径差异有统计学意义(P＜0.05),余位置骨道差异无统计学意义(P＞0.05).结论 ACL单束解剖重建中股骨侧使用Rigidfix固定组较Endobutton固定骨隧道内口扩大较小,而股骨隧道其他位置骨道扩大二者无明显差异;ACL重建术后骨道扩大不影响术后膝关节功能恢复.
作者：李嘉；朴海旺；常乾坤；刘向林；徐丛 刊期： 2018年第07期
近年来研究发现γδT细胞对支气管哮喘的气道高反应性、气道炎症和气道重塑有抑制作用,但目前其作用机制尚未完全清楚.IL-17是重要的促炎因子,主要由Th17产生,然而大量研究发现γδT细胞也是重要来源,并且其产生的IL-17可以抑制气道高反应性及气道炎症.本文主要就γδT细胞、IL-17对支气管哮喘的作用机制做一综述.
作者：刘位位；李超乾 刊期： 2018年第07期
目的 建立血红蛋白Bart's水肿胎儿综合征诱导多能干细胞模型.方法 通过收集血红蛋白Bart's水肿胎儿综合征孕妇患者羊水标本,分离培养其中的羊水细胞;然后通过使用仙台病毒将hOct3/4、hSox2、hKlf4和hL-Myc四种因子转导羊水细胞进行重编程;后通过形态学、碱性磷酸酶染色、干细胞多能表面标志物免疫荧光、RT-PCR、EB自发三胚层分化和畸胎瘤体内分化潜能实验对获得的诱导多能干细胞进行检测分析.结果 获得的诱导多能干细胞呈现出明显的干细胞样形态,碱性磷酸酶染色、多能性标志物免疫荧光染色及逆转录PCR等检测结果均符合干细胞特征,与人胚胎干细胞特性相似.体外EB自发分化和体内畸胎瘤分化实验也证实具有完全的三胚层分化发育潜力.结论 成功建立血红蛋白Bart's水肿胎儿综合征诱导多能干细胞系,为后续疾病特异性造血分化模型的建立、疾病治疗的研究及药物开发应用奠定基础.
作者：冼业星；严金梅；陈玉嫦；李东至；孙筱放 刊期： 2018年第07期
目的 检测烟酰胺磷酸核糖转移酶(NAMPT)在卵巢子宫内膜异位囊肿患者中的表达及探讨其与新生血管生成的关系.方法 选择2016年1月1日至2016年12月31日于中山大学附属第一医院妇科行腹腔镜手术的卵巢囊肿患者80例,分为卵巢子宫内膜异位囊肿组(OEM,n=50)和卵巢子宫内膜异位囊肿患者在位内膜组(EM,n=30);对照组为同期接受孕前腹腔镜下宫颈环扎术的非子宫内膜异位症患者(NEM,n=30).检测患者血清中NAMPT水平和病灶中微血管密度(MVD)以及NAMPT、VEGF、VEGFR-2的表达,对结果进行分析.结果 OEM组中的NAMPT的血清浓度比NEM组高;OEM组病灶中的NAMPT、VEGF、VEGFR-2的表达均显著高于EM组及NEM组中的在位内膜.OEM组患者血清中NAMPT水平与病灶中MVD呈正相关(r=0.81).结论 NAMPT可能通过促进内异症病灶新生血管形成参与内异症的发生和发展.
作者：罗迪；牛刚；梁炎春；吴锦杰；谢鸿玉；李佳颖 刊期： 2018年第07期
目的 观察整合素αvβ3拮抗剂HYPOO23对耐药神经胶质瘤细胞凋亡的影响.方法 用替莫唑胺溶液浓度递增的方法,培养耐药胶质瘤细胞U251TR.将U251TR分为4组:对照组、HYPOO23组、替莫唑胺组和HYPOO23+替莫唑胺组,分别采用对照试剂、HYPOO23、替莫唑胺和HYPOO23+替莫唑胺处理.用流式细胞术Annexin V FITC/PI双染法测细胞凋亡;用Western blot检测MGMT、P-gp、MRP和GST蛋白表达水平.结果 成功培养耐药细胞U251TR,耐药指数RF=8.03.HYPOO23+替莫唑胺组凋亡率较其他3组升高(P＜0.05).与对照组和替莫唑胺组相比,HYPOO23组和HYPOO23+替莫唑胺组的MGMT和P-gp蛋白表达水平降低(P＜0.05).结论 整合素拮抗剂可以调节耐药胶质瘤细胞对替莫唑胺的敏感性,促进凋亡,这现象可能与MGMT和P-gp表达下降有关.
作者：吕帅；王艳林；刘彦廷；蔡宏新；艾文兵 刊期： 2018年第07期
目的 探讨血必净注射液对老年患者关节置换术后早期认知功能的影响.方法 选取择期行全髋关节置换术的老年患者60例,随机分为血必净组(X组,n=30)和对照组(C组,n=30).X组手术前30 min血必净注射液50 mL+生理盐水100 mL静滴,术后血必净注射液50 mL+生理盐水100 mL静滴,每天2次,连用5d;C组等量生理盐水静脉滴注.检测两组患者不同时间点血清中C反应蛋白(CRP)、白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的浓度.术前1d、术后7d采用简易精神状态检查量表(MMSE)对患者进行认知功能测试.结果 两组患者手术后CRP、IL-6、TNF-α明显增高(P＜0.05),X组增高的幅度低于C组(P＜0.05);两组术后认知功能障碍(POCD)的发生率比较差异无统计学意义,术后X组的MMSE评分高于C组(P＜0.05).结论 围术期静滴血必净注射液可抑制术后炎性细胞因子CRP、IL-6、TNF-α等的释放,降低麻醉及手术创伤的应激反应,改善老年患者关节置换术后早期认知功能.
作者：杨淼；方华；章放香；章建平 刊期： 2018年第07期
目的 探讨3,4-二羟基苯乙酮(3,4-DHAP)抑制脂多糖(LPS)诱导小鼠巨噬细胞株(RAW264.7)炎症反应的可能机制.方法 常规培养的RAW264.7细胞随机分为正常组(A);LPS组(B);3,4-DHAP组(C)、辛伐他汀组(D).酶联免疫吸附(ELISA)法检测肿瘤坏死因子(TNF-α)、血管细胞黏附分子(VCAM-1)水平;免疫印迹(Western blot)法检测磷酸化IκB(P-IκB)、总IκB、核因子-κ Bp65(NF-κBp65)蛋白表达;实时定量荧光聚合酶链式反应(qRT-PCR)法检测IκB mRNA表达.结果 3,4-DHAP显著抑制TNF-α、VCAM-1分泌;抑制IκB蛋白磷酸化;细胞核内NF-κBp65蛋白表达明显减少(P＜0.05),抑制了NF-κBp65核转位.结论 3,4-DHAP通过抑制NF-κB核转位,有效抑制LPS诱导RAW264.7细胞炎症反应.
作者：张代娟；刘江月；王建英 刊期： 2018年第07期
目的 初步探讨320排容积CT双入口灌注参数对肺内占位性病变诊断的价值.方法 前瞻性地分析2016年5月至2017年5月在河南科技大学第一附属医院行CT灌注检查的肺部占位性病变106例,所有病例终经病理学明确诊断,其中恶性病变85例,包括肺鳞癌38例,肺腺癌34例,肺小细胞癌11例,肺肉瘤并腺癌2例;良性病变21例,其中炎性包块19例,硬化性血管瘤2例.通过320排CT动态容积扫描后,利用灌注软件计算得到肺内病变的灌注参数:肺动脉血流量(PF)、支气管动脉血流量(BF)和灌注指数(PI),其中PI=PF/PF+ BF.结果 肺内恶性肿块BF值大于良性,PI值小于良性,良恶性肿块的BF、PI值差异具有统计学意义(P＜0.01),其中PI的ROC曲线下面积大,为0.933.取PI≤52.75阈值,确诊恶性病变的敏感度为81.0％,特异度为91.9％.肺腺癌跟肺小细胞癌PF值差异有统计学意义(P＜0.01),肺鳞癌跟肺腺癌,肺腺癌跟肺小细胞癌PI值差异有统计学意义(P＜0.05).结论 320排CT双入口灌注指数PI可以作为肺部良恶性病变影像诊断的重要参考数据,PF值及PI值能够对本次研究中3种肺癌的诊断和治疗提供一定的指导.
作者：彭楠；陈殿森；徐志宾 刊期： 2018年第07期
目的 研究类风湿关节炎(RA)合并单克隆免疫球蛋白病(MG)患者的临床特征、治疗及预后.方法 2010-2017年我院11例RA合并MG患者作为试验组,以同期入院,年龄、性别匹配的33例未合并MG的RA患者为对照组进行病例对照研究.正态分布计量资料比较采用t检验、非正态分布采用Mann-Whitney U检验;计数资料比较采用X2检验或Fisher确切概率法;危险因素分析采用单因素比较及多因素Logistic回归分析.结果 试验组脾大(27.3％ vs.3.0％,P=0.043)和低免疫球蛋白血症(54.5％ vs.6.1％,P=0.001)发生率、血沉[(89.9±30.5)mm/h vs.(56.1±28.4) mm/h,P=0.002]及24 h尿蛋白[0.3 (3.2)mg/dvs.0.1 (0.1)mg/d,P=0.030]均高于对照组,差异有统计学意义.初诊多发性骨髓瘤(MM)1例、意义未明的单克隆免疫球蚕白病(MGUS)8例,未确诊2例.MGUS患者随访期间1例发展为MM、1例出现肾小管间质浆细胞浸润所致肾功能不全.结论 RA患者可合并MG,以MGUS为常见,也可发生恶性转化.合并脾大、血沉快、低免疫球蛋白血症和肾脏受累者需高度警惕以便及时诊治.
作者：杨月；陆松松；陈龙；温磊；贾园；栗占国 刊期： 2018年第07期
目的 研究EGCG和顺铂合用对人肺腺癌NCI-H1975和鳞癌NCI-H520细胞增殖及EGFR的影响.方法 CCK-8法检测细胞增殖;Hoechst33258染色检测细胞凋亡;Western blot检测Phospho-EGFR和EGFR表达;q-PCR检测细胞EGFR mRNA.结果 EGCG和顺铂合用明显抑制细胞增殖,呈时间和剂量依赖性.EGCG增加DNA-顺铂加合物;促进细胞核固缩;同时下调Phospho-EGFR和EGFR mRNA表达.结论 EGCG和顺铂合用抑制NCI-H1975和NCI-H520细胞增殖,促进凋亡,该作用可能通过增加细胞DNA-顺铂加合物和破坏DNA实现,且与抑制EGFR mRNA和Phospho-EGFR有关.
作者：黄洁；李承红；陈实；钟金男；刘敏；李发久 刊期： 2018年第07期
目的 探讨体外受精-胚胎移植中,首次胚胎移植不同周期的妊娠结局.方法 选择女方年龄＜ 40岁首次行胚胎移植的患者,将首次移植周期分为新鲜胚胎移植周期组和冻融胚胎移植周期组,对首次移植不同周期的妊娠结局进行了回顾性分析.研究不同移植周期的妊娠结局有何差异.结果 首次移植中,新鲜胚胎移植周期组的年龄、受精率、优质胚胎率、移植日内膜厚度和平均移植优质胚胎数均显著高于冻融胚胎移植组(P＜0.05),而基础激素黄体生成素、平均获卵数、可利用胚胎率和单胎率则相反(P＜0.05).结论 首次移植只要移植胚胎数一致,两种移植方式临床妊娠率相同,但减少移植优质胚胎数可显著降低多胎妊娠的发生,并且不影响抱婴率.
作者：贾俊龙；张丽媛；桑元坤；张文华；王玲 刊期： 2018年第07期
目的 探讨在意识指数监测下联合使用小剂量瑞芬太尼用于无痛人流的安全性.方法 择期行无痛人流术200例,随机分为对照组和瑞芬太尼10、20、30和40 μg组.对照组采用单纯丙泊酚麻醉,其他组接受丙泊酚+相应剂量瑞芬太尼麻醉.记录各组患者丙泊酚用量、苏醒时间、丙泊酚注射痛及围术期低血压、高血压、心动过缓、心动过速、低氧血症、体动反应和恶心呕吐发生情况.结果 随着瑞芬太尼剂量增加,丙泊酚用量渐减少,苏醒时间缩短,丙泊酚注射痛发生率降低,疼痛程度减轻,体动反应发生率降低(P＜0.05);各瑞芬太尼组心动过缓及低氧血症发生率随剂量增加渐升高,其中低氧血症R4组与C组比较差异有统计学意义(P＜0.05).结论 IOC监测下联合使用小剂量瑞芬太尼有助于减少无痛人流术中丙泊酚用量,缩短苏醒时间,降低注射痛及体动反应发生率,但瑞芬太尼单次剂量达40μg时增加需警惕发生心动过缓及低氧血症的风险.
作者：刘民强；李仁宰；何俊永；石浩文；马明飞；何仁亮 刊期： 2018年第07期
鼻咽癌治疗方式是以放射治疗为主的综合治疗,其5年生存率从20世纪80年代的50％上升至20世纪90年代的70％[1-2],复发是鼻咽癌治疗失败的主要原因之一.对复发累及颈内动脉且需手术治疗的病例,有必要术前行颈内动脉闭塞试验评估脑血流代偿情况.本研究回顾我院2012年5月至2016年12月行颈内动脉闭塞试验患者的临床资料并进行分析.
作者：陈锐聪；白小欣；陈锦华；邹志敏；刘诗万；蔡军；黎劭学 刊期： 2018年第07期
目的 探讨胎儿脐动脉彩色多普勒对狼疮肾炎(LN)孕妇不良妊娠结局(APOs)的监测作用.方法 回顾性分析于中山大学附属第一医院、广州中医药大学第一附属医院就诊的158例LN妊娠患者.结果 共有39例为妊娠期初发LN,119例为妊娠前已确诊LN.118例(74.7％)患者发生1种或1种以上胎儿APOs,40例(25.3％)未发生任何胎儿APOs.54例(34.2％)发生妊娠丢失,104例(65.8％)活胎分娩,其中足月产49例,早产55例,IUGR 24例,胎儿宫内窘迫14例,新生儿狼疮9例.胎儿脐动脉彩色多普勒检查提示出现APOs组的脐动脉血流搏动指数(PI)、阻力指数(RI)、S/D值均高于未出现APOs组(P＜0.05).受试者运算特征曲线(ROC)中三个多普勒参数曲线下面积均为0.7 (95％CI 0.6 ～ 0.8).PI、RI、S/D的佳截点为0.9、0.6、2.5,其敏感性分别为28.3％,45.7％,39.1％,特异性分别为97.2％,80.6％,90.0％.结论 LN患者不良妊娠结局发生率高,尤其是妊娠丢失和早产.脐动脉彩色多普勒检查是监测LN患者孕晚期胎儿生长情况的重要手段.
作者：王晓东；詹钟平；田媛媛；王淑平；詹雁峰；陈冬莹；梁柳琴 刊期： 2018年第07期
实用医学杂志
主管:广东省卫生厅
主办：广东省医学情报研究所
