学术投稿

HBV耐拉米夫定多聚酶基因变异检测方法的建立

张伟三;丁静娟

关键词:聚合酶链反应, 限制性片段长度多态性分析, 拉米夫定, 乙型肝炎病毒, 基因变异, 耐药
摘要:目的建立一种简便、准确、实用的乙型肝炎病毒(HBV)耐拉米夫定多聚酶基因变异检测方法.方法根据已公布的HBV DNA序列,在HBV多聚酶基因区设计并合成了两对寡核苷酸引物,其中一只为错配引物;应用巢式错配聚合酶链反应特异性扩增含有HBV多聚酶基因YMDD基序的片段,扩增产物用限制性内切酶(Nde Ⅰ)酶切,琼脂糖凝胶电泳,观察酶切后的目的片段限制性片段长度多态性(RFLP)图谱.部分标本进行DNA测序.结果 (1)所建立的巢式错配PCR-RFLP方法操作简便,快速,从DNA提取到酶切后电泳分析仅需要11小时;灵敏度高,可以检测到103copies/ml的HBV DNA;特异性强,结果准确,经DNA测序证实.(2)应用该方法对20例长期服用拉米夫定的慢性乙型肝炎患者的系列血清进行了检测,发现YMDD变异者(45%)9例,YMDD野毒株者(55%)11例,表明该方法可有效地鉴别HBV YMDD野毒株与变异株.结论本实验所建立的巢式错配PCR-RFLP方法简单、敏感、特异,适合于一般实验室应用及大规模的人群调查.
微创医学杂志相关文献
  • 心理疗法在辅助治疗不稳定性心绞痛中的作用

    为探讨心理因素在治疗不稳定性心绞痛过程中的作用,随机对60例不稳定性心绞痛患者分为观察组和对照组进行了临床观察,现报告如下.

    作者:柴玉萍 刊期: 2002年第03期

  • 经腹盆腔插管注药在不孕症中的应用(附40例分析)

    输卵管性不孕占不孕病因的30%~40%,多由盆腔感染引起,以往惯用静脉注入抗生素及中药灌肠治疗,但对于那些反复感染者及形成粘连包块的卵管炎症疗效并不理想.我院不孕不育诊疗中心自1996年1月~1999年6月,采用统一诊断标准及药物配方,行盆腔插管直接注药对输卵管慢性粘连梗阻所致不孕患者进行治疗,取得满意疗效.现报告如下.

    作者:李雪;王琳;叶健 刊期: 2002年第03期

  • 金标法用于首次无偿献血者献血前HBsAg初筛的效益分析

    目的探讨金标法用于首次无偿献血者献血前HBsAg初筛的社会效益和经济效益.方法对24497例首次无偿献血者用金标法和ELISA法进行HBsAg检测.结果金标法用于首次无偿献血者献血前HBsAg初筛后,避免了2118人共42.36万毫升不合格血液的无效采集、加工、检验、贮存、报废和运输,因HBsAg阳性而报废的血液由9.90%降至1.37%,从每1万名报名参与献血的首次无偿献血者中节省了采集和检测的费用约6万元,从每年的初筛工作中可节省1个多月的时间和人力.结论该法可避免血液资源的浪费,有效地预防交叉感染.

    作者:朱业华;余晋林;罗海玲;黄华松 刊期: 2002年第03期

  • 腹部创伤130例诊治分析

    腹部脏器较多,损伤后诊治较复杂,为进一步提高救治水平,现将我科1992~2000年收治的130例腹部脏器创伤病例总结分析如下.

    作者:李庆彦;梅桂色;李光辉 刊期: 2002年第03期

  • 葛根素治疗冠心病心绞痛40例疗效分析

    我院应用葛根素治疗冠心病心绞痛患者40例疗效显著,现报告如下.1 资料和方法1.1 病例选择 77例患者均符合WHO(1979)制定的冠心病心绞痛诊断标准[1],部分病例经冠状动脉造影证实.随机分为二组,治疗组40例,年龄45~82岁,男29例,女11例,合并高血压21例,血脂异常12例,陈旧性心肌梗死5例,抽烟15例;对照组37例,年龄47~81岁,男28例,女9例,合并高血压19例,血脂异常11例,陈旧性心肌梗塞5例,抽烟14例.

    作者:鲍迎春;应仲良 刊期: 2002年第03期

  • 提高《劳动卫生与职业病》教学效果方法的探索

    中等卫校的<劳动卫生职业病学>是预防专业中一门重要专业课程,但由于内容多,且涉及范围广,需要有工厂环境和医学临床的综合知识,使缺乏具体体验的学生倍感抽象、繁锁、枯燥而难以理解掌握,导致学习的兴趣和信心缺乏而影响教学效果.针对这种现象,笔者通过多年的教学实践,针对教学内容的要求和学生的心理特点,运用多种教学方法,充分调动了学生学习的积极性,达到提高教学效果的目的.以下就此谈些粗浅体会.

    作者:梁惠琦 刊期: 2002年第03期

  • 呼吸道反复感染发病机制

    小儿呼吸道反复感染(RRI)是小儿常见病之一,据报道呼吸道感染占小儿科门诊患儿的80%,其中30%为反复呼吸道感染,严重危害小儿的身心健康.其发病机制及防治研究一直受到人们的关注,近年大量研究发现,除与先天性因素,免疫功能缺陷、遗传因素等有关外,还与微量元素、胃食管返流等有密切关系,现综述如下:

    作者:黎敏 刊期: 2002年第03期

  • 生发片总黄酮含量的测定

    生发片由伏苓、丹皮、首乌、黑枣、桑椹子等十二种中药提取制成的一种中草药浸膏复方制剂,具有补血、健肝肾,促进头发生长,增强体质等功效,用于全秃、脂秃.生发片的质量标准已收入国家卫生部<中药成方制剂>第十七册,但缺少含量测定指示,本文主要对其主要活性成份黄酮类化合物进行含量测定[1],可有效地控制其内在质量.

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  • 改进静脉尿路低张造影对输尿管梗阻的诊断价值

    常规静脉尿路造影和静脉尿路低张造影是检查输尿管梗阻积水简便易行的方法,但这两种方法都存在诸多不足,为此,作者结合这两种方法的优点,设计了一种新的静脉尿路低张造影方法,称之为静脉尿路延迟低张造影,经过临床106例实验,效果满意,报告如下.

    作者:李文芳 刊期: 2002年第03期

  • 脑血管母细胞瘤的诊断和治疗

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    作者:张征军;蒋广元;梁新强 刊期: 2002年第03期

  • CT血管造影对小肝癌诊断价值的探讨

    小肝癌的早期定性诊断十分重要.它关系到其治疗方法、预后及提高患者的生存率.常规CT平扫及增强扫描对直径≤2cm者缺乏特征性,定性困难.肝脏CT血管造影(CTA)是发现小肝癌敏感的方法之一,它包括肝动脉造影CT扫描(CTHA)和动脉性门脉造影CT扫描(CTAP).CTA可以在判断肝癌的血供及其与邻近组织关系的关键问题上提供常规CT和血管造影难以获得的有用信息.鉴于此,我们为24例小肝癌病人进行了CTA,旨在探讨CTA对小肝癌定性诊断的价值.

    作者:黎军强 刊期: 2002年第03期

  • 超早期手术治疗高血压脑出血围手术期的护理

    高血压脑出血是发生率、死亡率、致残率很高的征候.我院神经外科采用超早期(6h内)手术治疗脑出血36例,获得满意效果,现将护理体会报告如下.

    作者:秦媳秀 刊期: 2002年第03期

  • 狼疮性肾炎的临床与病理分析

    目的了解狼疮性肾炎的临床与病理的关系.方法对25例系统性红斑狼疮患者行肾活检检查,进行临床与病理分析.结果临床表现为肾病综合征者病理多为Ⅳ型,急性肾炎综合征者为Ⅱ型,慢性肾炎综合征者为Ⅱ型或Ⅳ型.Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ型者临床常现狼疮活动,Ⅴ型呈临床非活动状态,临床活动指数与病理活动指数无相关性.结论系统性红斑狼疮临床表现复杂,肾脏是主要受累器官,狼疮性肾炎临床与病理之间有一定关系.

    作者:谢勇;李雪峰 刊期: 2002年第03期

  • 头皮式静脉留置针在综合内科的应用

    静脉留置针静脉穿刺置管输液作为一项新的护理技术,已广泛用于临床,越来越受到广大护理同行的关注.我科自2001年3~12月,对80例需要长期输液的病人使用美国BD公司生产的全封闭式静脉留置针,取得了满意的护理效果,现将护理过程概述如下.

    作者:蓝林荣 刊期: 2002年第03期

  • 压宁定治疗充血性心力衰竭53例临床报道

    乌拉地尔(商品名:压宁定)是一种苯哌嗪取代的尿嘧啶衍生物,作为选择性α1肾上腺素能受体阻滞剂具有外周和中枢的双重作用.我们通过静脉使用压宁定治疗充血性心力衰竭患者53例,临床观察心功能得到明显改善,现报告如下.

    作者:彭环庆 刊期: 2002年第03期

  • 氯胺酮麻醉术后护理体会

    我科自1998年至2000年,共对各类病人实施氯胺酮麻醉120例,其中成年人16例,小儿104例,男74例,女46例,大年龄62岁,小年龄4个月,术后无一例意外及并发症,现将护理体会报告如下.

    作者:陈秀莲;邵俊玲;王春霞 刊期: 2002年第03期

  • 医源性尿道狭窄原因分析

    2000年1月至2001年2月,我院共收治医源性尿道狭窄患者11例,现将其发生原因和防治措施报告如下.

    作者:凌海亮 刊期: 2002年第03期

  • 我国儿童单纯性肥胖症研究进展

    儿童肥胖问题近年来日益受到人们的关注.据广州、上海、北京三城市的调查,7~17岁儿童的超重率是12%,肥胖率是11%.12~16岁是上海市男童超重率的高峰,可达51%,是女童的2倍.台湾城市小学儿童1974年肥胖者仅为2%,1990年其青少年肥胖率已达17.4[1].肥胖不仅影响儿童的形态、功能的发育,还在一定程度上影响了儿童的心理行为,小儿肥胖也易发展为成人肥胖[2],成为成年期高血压、糖尿病、高血脂症等病的诱因之一.本文就我国儿童单纯性肥胖症的病因、生理机能、社会心理行为和防治作一综述.

    作者:潘毅 刊期: 2002年第03期

  • 中药治疗慢性盆腔炎30例

    慢性盆腔炎为妇科常见病、多发病,该病病程迁延,常见下腹坠胀疼痛、腰骶酸痛、经行腰痛、月经不调、带下异常和不孕等症.近年来共应用中药治疗30例,效果满意,现总结如下.

    作者:姜秀云 刊期: 2002年第03期

  • 复方硒制剂对小鼠血细胞的影响

    目的探讨复方硒制剂对荷瘤小鼠和环磷酰胺化小鼠血细胞的影响.方法应用灌胃给药予荷瘤小鼠及环磷酰胺化小鼠,观察血细胞数量的变化.结果本品能降低环磷酰胺化小鼠对血细胞的毒性,使血细胞总数明显回升,能提高S180荷瘤小鼠的血细胞总数.结论本品能明显提高荷瘤小鼠和环磷酰胺化小鼠的血细胞总数.

    作者:李伟芳;李茂;周军;覃良;韦宝伟 刊期: 2002年第03期

微创医学杂志

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主管:广西壮族自治区卫生厅

主办:广西壮族自治区医学科学情报研究所