学术投稿

流感病毒在MDCK细胞中培养的条件优化

余钧池;陈柳军

关键词:流感病毒, 细胞, 培养的, 实验室技术和方法
摘要:目的 探讨流感病毒在MDCK细胞中的佳培养条件.方法 将流感病毒以吸附法和直接接种法接种在MDCK细胞上,比较接种效果;选择佳病毒接种方案,分别通过调整细胞培养时间、培养温度、病毒生长液胎牛血清浓度、胰酶浓度、病毒接种量和染毒传代次数来优化选择佳培养条件.结果 直接接种法的培养效率较高;流感病毒在MDCK细胞中培养的佳收获时间为96 h;佳培养温度为35.5℃;胎牛血清对病毒的增殖有明显的抑制作用;病毒生长液含有终浓度为2.5μg/mL的胰酶可提高病毒血凝效价;用于流感病毒培养的MDCK细胞的传代次数不宜超过4代.结论 流感病毒在MDCK细胞中佳培养条件是:在病毒生长液环境下直接接种流感病毒,放置35.5℃、5%CO2培养箱培养96 h后收获.其中病毒生长液中无胎牛血清、胰酶终浓度为2.5 μg/mL.
国际检验医学杂志相关文献
  • 脂质清除剂Lipoclear消除脂血对常规生化项目检测干扰的效果评价

    目的 评价Lipoclear脂质清除剂消除脂血对常规生化项目检测的干扰.方法 分别收集正常标本40例为对照组,脂血标本35例为实验组,经Lipoclear试剂处理,同时测定处理前、后18项生化指标,记录检验结果,计算相关系数及相对偏差,以美国临床医学检验部门修正法规(CLIA' 88)允许总误差(TEa)的1/2为标准,判断其偏差是否为临床可接受.结果 对照组的18项生化指标除无机磷(P)、总蛋白(TP)、三酰甘油(TG)的相对偏差高于1/2 TEa外,其余指标均低于1/2 TEa;实验组标本经该试剂处理后其生化结果明显得到改善.结论Lipoclear脂质清除剂消除脂血的干扰效果较好,且操作简单、快速,对多数临床常规生化项目无明显干扰现象,值得在临床中推广应用.

    作者:隆维东;黄冬悦;李坚;冯莉;陈平 刊期: 2014年第01期

  • 实验室信息系统在分析后质量控制中的应用

    实验室信息系统(laboratory information system,LIS)[1-2]是指以实验室科学的管理模式为基础,借助现代通讯技术、网络技术、计算机技术,对实验室各种信息进行高效管理,从而整体上提高实验室综合效能的人机系统.便捷的LIS系统可提高实验室的工作效率,降低工作强度,减少检验出错率,实现了检验信息化、自动化、条码化的管理流程,强化了实验室的全面质量管理.鉴于三甲医院的发展及其实验室ISO15189对临床实验室信息系统改造的新要求[3],实验室信息系统模块同时进行了很大程度的更新,部分大医院已经意识到利用实验室信息系统在分析后质量控制的应用来提高实验室的工作质量,提出利用模块的提醒功能实现检验后的质量保证[4].检验科实验室信息系统在检验后的质量保证是实验室质量保证的重要内容,结果审核提示功能、未检测结果提示功能、危机值的三级播报、与电子病历对接、检验报告自助打印平台、标本后处理功能等功能的实现是检验分析后质量控制的重要保证.

    作者:梁映亮;徐灼均;莫和国 刊期: 2014年第01期

  • 血清同型半胱氨酸和C-反应蛋白在机体创伤时的变化

    目的 探索血清同型半胱氨酸(Hcy)和C-反应蛋白(CRP)在机体受到创伤时的变化,并探讨其变化规律.方法 选择因外伤住院的患者154例为研究组,年龄在25~45岁之间,平均35岁.并同时在门诊选择同一年龄段66例健康体检者为对照组,分别测定Hcy和CRP,进行统计学分析.结果 与健康对照组相比,研究组患者Hcy与CRP均明显提高,差异具有统计学意义(P<0.05).研究组根据创伤轻重分为轻伤、中伤和重伤3组,3组间Hcy和CRP比较差异有统计学意义(P<0.05).结论 联合检测Hcy与CRP对于外伤患者的病情变化和预后评估具有一定的临床意义.

    作者:王志尊;郝建宗;段艳梅;王广丽;李亚茹;刁恒飞 刊期: 2014年第01期

  • 血浆C-反应蛋白检测对睡眠呼吸暂停低通气综合征合并高血压患者的临床价值

    目的 评估血浆C-反应蛋白(CRP)检测对睡眠呼吸暂停低通气综合征(SAHS)合并高血压患者的临床价值.方法 收集102例SAHS合并高血压患者,依据血压水平分为3组,检测3组患者的血脂谱、糖化血红蛋白以及血浆C-反应蛋白水平.同时采用Pearson相关分析血浆C-反应蛋白水平与血压的关系.结果 (1)3组患者血脂、糖化血红蛋白水平差异无统计学意义(P>0.05),但血浆C-反应蛋白水平差异存在统计学意义(P<0.05);(2) Pearson相关分析提示血浆C-反应蛋白水平与收缩压呈正相关性(r=0.883,P=0.025),与DBP无明显相关性(r=0.536,P=0.074).结论 SAHS合并高血压患者的血浆C-反应蛋白水平与收缩压呈正相关,检测SAHS患者血浆C-反应蛋白能够在一定程度上反映患者的血压水平.

    作者:伍传琦;许文水;韦宏文;赵斌 刊期: 2014年第01期

  • 多种肿瘤标志物在结直肠癌患者术后腹腔引流液中水平的表达与疾病的相关性研究

    目的 探讨多肿瘤标志物在结直肠癌患者术后腹腔引流液中的表达与疾病的相关性研究.方法 2011年6月至2012年12月河北省唐山市丰南区医院消化科收治结直肠癌患者67例,术前均检测肿瘤因子[癌胚抗原(CEA)、糖类抗原19-9(CA19-9)、糖类抗原125(CA125)和糖类抗原242(CA242)]的水平,并术后第1天抽取腹腔引流液3 mL,采用电化学发光法检测CA19 9、CEA、CA242、CA125水平,与术前肿瘤因子的水平作比较,判断预后是否有淋巴转移,并经病理/细胞学证实其符合率.结果 39例患者肿瘤因子的水平术后为阴性,无淋巴结转移,经病理/细胞学证实符合率100%,28例患者肿瘤因子的水平术后为阳性,有淋巴结转移,经病理/细胞学证实符合率100%.结论 对结直肠癌患者术后腹腔引流液联合检测肿瘤标志物的水平有利于第一时间掌握患者病情发展,及时指导调整治疗方案,提高患者生存指数.

    作者:张海林;贾爱萍;邢丽 刊期: 2014年第01期

  • 广东中山地区糖化血红蛋白检测现状调查

    目的 对广东中山地区糖化血红蛋白的检测现状进行调查.方法 以Bio-Rad VARIANTⅡTURBO糖化血红蛋白分析仪作为比对系统,以通过NGSP认证的Bio-Rad D-10糖化血红蛋白分析仪作为参比系统,用20份不同浓度的新鲜全血进行比对;再以通过比对系统对两份新鲜全血进行赋值,两份赋值的新鲜全血与另外3个定值的Bio-Rad全球室间糖化血红蛋白调查物作为调查品派发给参与调查的17家实验室,对回报结果进行统计分析.结果 比对系统与参比系统具有可比性;17家实验室使用12套检测系统,分析方法包括3种,分别是离子交换高效液相层析法、免疫比浊法和微粒色谱法.糖化血红蛋白检测的百分偏倚范围和变异系数(CV)范围分别为0.00%~32.29% 、2.30%~14.59%,其中离子交换高效液相层析法的平均百分偏倚和CV均小,新鲜全血和室间调查物的平均百分偏倚和CV分别为1.79% 、2.30%和4.35%、6.28%.结论 Bio-Rad VARIANTⅡTURBO和Bio-Rad D10糖化血红蛋白分析检测系统检测结果相关性良好.中山地区糖化血红蛋白检测使用多个检测系统和检测方法,不同检测系统、检测方法间糖化血红蛋白检测结果一致性有待进一步提高.

    作者:徐全中;温冬梅;张秀明;索明环;吴剑杨;李曼;萧金丽;阚丽娟;庞嘉琳 刊期: 2014年第01期

  • 在医学检验本科开设《临床输血学检验》的教学探讨

    在过去的20年里由于大手术数量上的增加以及在恶性肿瘤治疗方法上的进步使血制品的需求也随之增加.因此,如何安全输血和合理使用血液资源,已经成为临床输血的重要内容[1].为适应医学教育新的需求,重庆医科大学检验医学院临床血液学教研室于2010年起针对检验专业本科生开设了新的特色课程——《临床输血学检验》,本课程的开展将进一步完善检验专业同学输血检验方面的知识.

    作者:王晶;张伶;陈婷梅;冯文莉;黄峥兰;蔡晓钟 刊期: 2014年第01期

  • 类风湿性关节炎患者血清IL-17和IL-22的表达及临床意义

    目的 研究类风湿性关节炎(RA)患者血清IL-17和IL-22含量并分析其临床意义.方法 采用ELISA方法检测83例RA患者血清IL-17和IL-22含量,免疫比浊法检测血清类风湿因子RF值,并分析其相关性.结果 RA患者血清IL-17含量[(33.10士0.86)pg/mL]和IL-22含量[(59.89±1.84) pg/mL]均高于健康对照组(P<0.05);活动期RA患者血清IL-17含量[(35.47±1.07) pg/mL]显著高于非活动期RA患者[(30.29±1.25)pg/mL](P<0.05),且均高于健康对照组(P<0.05);活动期RA患者和非活动期RA患者血清IL-22含量差异无统计学意义(P>0.05),但活动期RA患者IL-22含量[(61.60±2.36)pg/mL]和非活动期患者IL-22含量[(58.44±2.74) pg/mL]均高于健康对照组(P<0.05).RF值阳性患者IL-17含量[(35.02±1.04) pg/mL]显著高于RF值阴性患者IL-17含量[(29.87±1.32)pg/mL](t=3.039,P=0.003);患者IL-22含量与RF值大小无关.相关性分析显示,患者血清IL-17含量与RF值大小呈正相关,患者血清IL-22含量与RF值大小无相关性.活动期患者血清IL-17含量与IL-22含量呈正相关.结论 IL-17较IL-22在RA的发生、发展中起更重要的作用.

    作者:刘志华;黄石;齐青松;张志安;张晓静 刊期: 2014年第01期

  • 极低体质量新生儿血型错误交叉配血1例

    1 临床资料李某,男,18 d,极低体质量儿,临床医生2010年11月27日12:50时申请1单位A型悬浮红细胞,因小包装的红细胞悬液用量少,无库存,中班工作人员临时在网上订1单位A型悬浮红细胞,下午血库的检验员用凝聚胺法和盐水法同时交叉配血后发出血制品,护士取走血制品在准备输血核对时发现该患儿的病历中检验单的血型为B型,马上电话通知血库工作人员,血库工作人员接到电话后,立即要求把血制品送回血库,重新复查血型,重新交叉配血.

    作者:张慧莲;王中兴;肖海军;高水湾 刊期: 2014年第01期

  • 胶体金法检测尿毒品假阳性结果分析

    目的 回顾性分析学校入学新生尿吗啡、甲基安非他明的检测结果.方法 采集当日早晨新鲜尿液标本,用MOR/MAMP二合一试剂盒(胶体金法)联合检测.结果 初检者中有16例呈阳性反应,其中吗啡阳性反应者12例,甲基安非他明阳性反应者4例,调查询问情况后,排除干扰因素,一周后再次复查,结果均为阴性.结论 尿毒品检测造成假阳性结果的因素很多,除了一些药物外,饮食的影响也需要引起重视.

    作者:卢秋菊;谷费菲;胡凯 刊期: 2014年第01期

  • 广东南海地区非缺失型α地中海贫血分子流行病学调查

    目的 调查广东省南海地区育龄人群中常见非缺失型α地中海贫血(简称地贫)的基因携带率及分布特征.方法 连续采集佛山市南海区37 962例计划怀孕夫妇的外周静脉血,以红细胞平均体积(MCV)<80 fL为地贫筛查血液学阳性指征,对筛查出的3 988例阳性样品进一步进行常见3种非缺失型α地贫基因型分析.结果 育龄人群中常见非缺失型α地贫基因携带率为0.47%,其中异常血红蛋白WS(HbWS)为0.19%,异常血红蛋白QS(HbQS)为0.17%,异常血红蛋白CS(HbCS)为0.11%;3种常见非缺失型α地贫的构成比依次为·HbWS 40.45%、HbQS 35.39%和HbCS 24.16%.结论 该研究首次阐明了广东省南海地区育龄人群中常见非缺失型α地贫的分子流行病学情况,为本地区开展地贫干预工作提供了重要的科学依据.

    作者:潘干华;申芫子;黄勇;刘国先 刊期: 2014年第01期

  • 鼻咽癌患者肿瘤周围分泌物细菌培养及耐药性分析

    目的 对鼻咽癌患者肿瘤周围分泌物进行细菌培养,寻找是否存在鼻咽癌相关的特异细菌感染.方法 20例健康成人和65例鼻咽癌患者取肿瘤周围分泌物进行细菌培养和药物敏感试验.结果 65例患者标本中,1份(1.5%,1/65)标本无菌生长,3份(4.6%,3/65)标本少量杂菌生长,61份(93.8%,61/65)标本细菌培养阳性.结论 鼻咽癌患者鼻咽部的细菌培养阳性率明显高于健康人,但其菌群分布与慢性鼻窦炎患者相似,未发现与鼻咽癌相关的特异细菌感染.

    作者:陈奕霞;彭颂国;田丽贞;陈浩;罗耀凌 刊期: 2014年第01期

  • 耐甲氧西林金黄色葡萄球菌PBP2a蛋白的低温诱导表达纯化及免疫原性的鉴定

    目的 探讨耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA) PBP2a的原核表达及其免疫源性的鉴定.方法 根据基因文库登录的mecA基因的编码序列,设计合成了一对寡核苷酸引物,将mecA基因的70~2 006 bp克隆至pET28a载体,转化E.coliBL21(DE3);经IPTG低温诱导表达后,利用镍琼脂糖凝胶亲和层析技术纯化目的蛋白;用抗PBP2a抗体鉴定纯化蛋白的免疫源性.结果 成功构建了不合跨膜区的PBP2a原核表达载体,在低温诱导条件下获取的蛋白纯化后无杂蛋白;该蛋白能与商品化抗PBP2a单克隆抗体结合.结论 利用分子克隆技术,获得了高纯度的不合跨膜区的PBP2a蛋白,且该蛋白具有免疫源性,为进一步制备抗PBP2a单克隆抗体奠定了基础.

    作者:金姝;邹玉涵;朱祖怀;闫佩毅;黄德魁;郑佐娅 刊期: 2014年第01期

  • 降低血培养污染的对策

    人们早已认识到,血培养是血液感染诊断的重要工具.目前,因污染导致的假阳性血培养率在0.6%~6.0%之间.受污染的血液培养对患者有显著的临床和经济影响,如住院时间延长、药物成本增加等.为了减少血培养污染(BCC),医疗工作者近几年在这方面做了很多的努力.从主观方面,包括防止人员将外源细菌带人血培养瓶和加强对采血者的培训.在客观方面,采用包括降低阳性血液培养中病原体污染物,或引入以计算机程序为基础的消除污染物的方法.本文回顾了近些年国内外减少BCC率的对策与方法.

    作者:张婷菊;刘贵建 刊期: 2014年第01期

  • 高龄及高脂血症与首发缺血性卒中后再发不同类型卒中的关系

    目的 探讨高龄及高脂血症与首发缺血性卒中后再发不同类型卒中的关系.方法 回顾分析该院2008年8月至2012年12月神经内科、神经外科再发卒中患者980例.患者必须是首发缺血性卒中,对其危险因素如高血压、糖尿病、高血脂、心脏病、酗酒、吸烟等情况进行收集并记录.通过Logistic多因素回归分析确定再发卒中的相关危险因素.结果 980例复发卒中患者中,出血性复发268例,年龄(63.11±3.26)岁,高血压151例(56.3%)、糖尿病144例(56.3%)、高血脂109例(40.7%)、心脏病101例(37.7%)、酗酒98例(36.6%)、吸烟87例(32.5%),缺血性卒中患者612例,年龄(67.25±2.67)岁、高血压298例(48.7%)、糖尿病198例(32.4%)、高血脂134例(21.9%)、心脏病191例(31.2%)、酗酒88例(14.4%)、吸烟77例(12.6%).高龄(t=2.139,P=0.021)和高血脂(t=4.607,P=0.030)为复发缺血性卒中的独立危险因素.结论 年龄及高脂血症是预测首发缺血性脑卒中后再发缺血性卒中的独立危险因素,值得高度重视,应采取积极的二级预防措施.

    作者:周曼云 刊期: 2014年第01期

  • PEG-6000纯化流感病毒鸡胚尿囊液的研究

    目的 探讨PEG沉淀法纯化鸡胚培养流感病毒尿囊液的工艺,对PEG-6000的浓度、沉淀时间、离心力进行优化,为流感病毒抗原和抗体制备提供了便捷的手段.方法 向流感病毒鸡胚尿囊液添加PEG后进行高速离心收集沉淀,检测纯化病毒液效价、病毒形态,以及卵清蛋白含量.结果 PEG浓度为4%,沉淀时间2h,离心力8 000 g条件下,病毒能完全沉淀,杂蛋白卵清蛋白含量低,病毒颗粒完整,浓缩液中病毒血凝效价为1∶10 240.以纯化病毒免疫山羊3次后,血清抗体滴度为1∶1 024且无交叉.结论 本研究初步证明优化后的PEG沉淀法对鸡胚培养流感病毒尿囊液中的病毒浓缩、纯化达到了很好的效果.

    作者:戴宗祥;耿兴良;周健;马磊;郭晨;周竟贤;高清霞;张新文;姜述德 刊期: 2014年第01期

  • 医学实验室员工授权探讨

    授权既是一门科学,也是一门艺术[1].它是指领导者授予下属一定的权力与责任,使其在领导的监督下,有适当的自主权、行动权来完成任务,其目的在于促使组织发挥其佳功能作用[2].通过对员工适当的授权,实现分层管理,合理利用有限的人力资源,使实验室的管理更加规范化、科学化.《医学实验室质量和能力认可准则》规定所有人员的职责、权力和相互关系;指定1名质量主管(或其他称谓),赋予其职责和权力以监督所有活动遵守质量管理体系的要求;指定所有关键职能的代理人.但也需认识到,在小型实验室一人可能会同时承担多项职责,对每项职责指定一位代理人不切实际.以下就结合本实验室按照ISO15189认可体系要求就员工授权实施情况进行探讨.

    作者:程红革;陈晓丽;韦汝珍;戴盛明 刊期: 2014年第01期

  • PBL教学法作为临床输血与检验实验考试形式的实践

    问题导向学习法(PBL)作为一种新型的教学理念和教学模式,自90年代引入我国后,迅速在国内许多高等院校的多个学科领域掀起一股学习高潮,也成为医学教育改革和探索的热点话题[1-4].目前很多院校采用了PBL教学模式,但考核方式依然沿用传统的书面考试形式,这种考核方式对学生的主动学习、发现问题解决问题的积极性是一个打击,使学生不再愿意投入更多的时间和精力主动探索新知识、解决新的问题,不能有效的提高学生的综合素质能力[5].PBL是一种集教学过程和结果于一体的教学方法[6],而将PBL应用于学生考试中的探索鲜有报道,本课题组将PBL应用于《临床检验基础》实验的考核中[7]进行了探索,随后又将其应用于《临床输血与检验》的实验考核中,为今后的考试改革积累经验.

    作者:丁肖华;张晓琴;杜纪英;王凡平;王明永 刊期: 2014年第01期

  • 人附睾分泌蛋白4和CA125对卵巢癌的联合诊断价值

    目的 研究血清人附睾分泌蛋白4(HE4)和糖类蛋白125(CA125)的检测对卵巢癌的诊断价值.方法 对45例健康女性、28例卵巢癌患者、41例卵巢良性疾病的患者,采集血清标本,用酶联免疫吸附法(ELISA)检测血清中HE4浓度;用罗氏411电化学发光法检测CA125浓度.结果 卵巢癌患者血清CA125和HE4浓度明显高于健康组和卵巢良性疾病组,差异均有统计学意义(P<0.01);健康组和卵巢良性疾病组CA125结果比较差异有统计学意义(P<0.01),HE4检测结果差异无统计学意义(P>0.05).CA125单独检测对卵巢癌诊断的敏感度为71.5%,特异度为83.5%;HE4单独检测对卵巢癌诊断的敏感度为53.6%,特异度为95.2%;HE4+CA125联合检测对卵巢癌诊断的敏感度为91.6%,特异度为83.6%.结论 HE4是卵巢癌检测的重要标志物,与CA125联合检测能够更准确的检测出卵巢恶性肿瘤,提高诊断的敏感性.

    作者:王瑞红 刊期: 2014年第01期

  • 重庆地区泌尿生殖道感染患者支原体培养及药物敏感性分析

    目的 分析重庆及周边患者泌尿生殖系统解脲支原体(Uu)及人型支原体(Mh)感染情况和药物耐受性特点.方法 分析2010~2011年该院皮肤性病科实验室对1 189例非淋菌性尿道(宫颈)炎(NGU)患者进行的支原体培养及药敏试验.结果 1189例患者中支原体培养阳性555例,检出阳性率为46.7%,其中单纯Uu阳性标本386例(69.5%),Uu+Mh混合感染157例(28.3%),单纯Mh阳性12例(2.2%).12种抗菌药物中对支原体敏感度高的是交沙霉素(96.0%),其次是米诺环素(95.5%)、强力霉素(94.4%)和四环素(84.0%),其余敏感度均低于60.0%.结论 支原体在体外对多种抗菌药物耐药现象严重,治疗宜首选交沙霉素、米诺环素、强力霉素和四环素.

    作者:李凤增 刊期: 2014年第01期

国际检验医学杂志

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主管:重庆市卫生局

主办:重庆市卫生信息中心