学术投稿

光学蛋白质芯片法定量检测C-反应蛋白的研究

朱伟;孙红柳;靳刚;齐财;赵子彦

关键词:光学蛋白质芯片, 椭偏光生物显微成像技术, C-反应蛋白
摘要:目的 本研究利用光学蛋白质芯片系统定量检测心肌梗死早期标志物C-反应蛋白(CRP),探讨光学蛋白质芯片在医学检验诊断中的应用.方法 实验采用椭偏光学生物显微成像系统、光学蛋白质芯片分析系统及软件、芯片装置、微流控芯片加样系统等,在4×6点芯片上装配生物探针,然后用人血清蛋白(HAS)封闭检测位点,利用抗原、抗体特异性结合的特性定量检测CRP(选用浓度为200、100、50、20、10、5 μg/ml),并绘制了检测CRP的标准曲线.采用SPSS统计学软件10.0分析处理实验数据.结果 检测结果显示,CRP浓度与检测位点具有高度相关性, 具有浓度-灰度的一致性,可以绘制出定量检测标准曲线,检测灵敏度为5 μg/ml,符合临床检测CRP的灵敏度要求.各浓度(5、10、20、50、100、200 μg/ml)的组内变异系数(CV%)分别为:2.47%、1.15%、2.06%、4.32%、1.39%、0.36%,皮尔逊相关系数为95.3%.结论 光学蛋白质芯片可以定量检测CRP,灵敏度为5 μg/ml,符合临床检测CRP的灵敏度和实用要求,具有临床检测CRP的潜在应用前景.此外,利用椭偏光显微成像技术的光学蛋白质芯片不需要标记试剂,被测样品不需要任何处理,样品需要量少,操作简单.
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    2001年,Dillard等首次从淋病奈瑟菌(简称淋球菌)中鉴定出毒力岛.淋球菌毒力岛编码多个毒力因子,携带Ⅳ型分泌系统,多见于播散性淋病分离株.目前在淋球菌中发现的毒力岛基因主要有: atlA、traH、traG、cspA、exp1、exp2、orf7和orf8等.研究淋球菌毒力岛及其相关产物,对于揭示毒力与耐药性的关系、寻找抗生素新的作用靶位、制备疫苗和细菌的快速诊断具有重要的意义.

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  • 慢性肾功能衰竭患者血浆对氧磷酯酶-1活性与氧化应激相关性研究

    目的 通过对慢性肾功能衰竭(CRF)患者血浆对氧磷酯酶-1(PON-1)、氧化修饰低密度脂蛋白(ox-LDL)、丙二醛(MDA)含量和循环谷胱苷肽过氧化物酶(GSHPx)活性的观察,探讨PON-1和氧化应激之间的关系.方法 检测145 例CRF患者和53例健康对照者血浆PON-1活性、ox-LDL、MDA含量和GSHPx,分析PON-1活性与ox-LDL、MDA、GSHPx之间的关系.结果 CRF患者血浆PON-1活性(122.3±23.1)kU/L,ox-LDL(832.0±256.2)μg/L,MDA(18.3±7.1)μmol/L,GSHPx(144.5±31.1)U/L.对照组上述指标分别为:(175.6±28.2)kU/L,(455.2±178.3)μg/L,(8.2±5.1) μmol/L,(248.1±79.3) U/L.PON-1活性与GSHPx水平低于对照组(P<0.01),血浆ox-LDL与MDA水平高于对照组(P<0.01).血浆PON-1活性与GSHPx呈正相关(r=0.811,P<0.001),与ox-LDL、MDA呈负相关(r=-0.842,P<0.01;r=-0.745,P<0.01).结论 在CRF中血浆PON-1活性显著降低,PON-1可能通过降低抗氧化能力机制参与了CRF的病理生理过程.

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    作者:王新颖;何雪娟;侯振江;王新良 刊期: 2007年第07期

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    作者:孙顺昌;贺敬波 刊期: 2007年第07期

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    作者:寸树兰;屈柯瑄;牛华 刊期: 2007年第07期

  • 糖原磷酸化酶同工酶BB和肌钙蛋白Ⅰ在急性冠脉综合征中的临床应用

    目的 探讨糖原磷酸化酶同工酶BB(GPBB)和肌钙蛋白Ⅰ(cTnI)在急性冠脉综合征(ACS)早期诊断中的意义及对预后判断的价值.方法 对125例急性心肌梗死(AMI)、120例不稳定型心绞痛(UAP)、29例稳定型心绞痛(SAP)患者和50例健康人分别进行血清GPBB和cTnI测定,并与肌红蛋白(Mb)、肌酸激酶同工酶(CK-MB)相比较,同时观察UAP组住院期间心脏事件发生的次数.结果 健康人GPBB水平为(3.42±1.19)μg/L.在AMI发作后12 h内,AMI患者血清中有119例GPBB浓度超过正常值上限(URL)6.99 μg/L,诊断灵敏度为95.2%,稍高于cTnI的灵敏度93.6%,明显高于CK-MB、Mb(71.2%, 43.2%);不稳定型心绞痛(UAP)患者血清中GPBB水平明显高于健康对照组(P<0.01),cTnI差异有统计学意义( P<0.05), CK-MB、Mb则P>0.05,伴有cTnI和GPBB升高的UAP患者住院期间心脏事件发生次数与健康对照组相比明显增加(P<0.01);稳定型心绞痛(SAP)组与健康对照组比较,GPBB、cTnI、CK-MB、Mb(P>0.05).结论 GPBB是心肌损伤敏感、特异的指标,对急性心肌梗死的早期诊断、UAP患者预后判断有一定的临床价值.

    作者:李美珠;李健文;陈社安;范敏珊;区文华;林爱珍;李炜煊 刊期: 2007年第07期

  • ABCA1转录水平上脂质调节的研究进展

    ABCA1是ATP结合盒转运子(ABC) 基因超家族中的一个亚型,在胆固醇逆转运和HDL生成的起始步骤中起着极重要的作用,现从转录水平总结氧化固醇和肝孤儿受体(LXR)、合成的LXR激活剂、类视黄醇和过氧化物酶体增殖物激活受体(PPAR)配体等多种物质对ABCA1在动脉粥样硬化和其他代谢综合征方面对脂质的影响,为如何调节ABCA1提供新的视点,并为进一步认识ABCA1的功能和调控提供线索.

    作者:甘淋;江渝 刊期: 2007年第07期

  • 情感障碍患者碳酸锂治疗的血清尿酸、尿素水平分析

    目的 分析情感障碍患者碳酸锂治疗的血清尿酸、尿素水平.方法 随机工作日选择情感障碍患者血锂浓度监测样本317例,在日立7020型生化仪上采用酶法测定尿酸、尿素浓度.结果 住院、门诊碳酸锂治疗组男女患者尿酸水平分别显著高于健康对照组(P<0.001),尿酸水平偏高的比率在男性分别为37.8%、26.1%,在女性分别为25.0%、33.3%;尿素水平分别显著低于健康对照组(P<0.001),尿素水平偏低的比率在男性分别为6.8%、4.5%,在女性分别为37.5%、8.0%.结论 情感障碍患者碳酸锂治疗的血清尿酸水平显著偏高、尿素水平显著偏低而呈现尿酸、尿素水平分离现象.这一现象可能与锂引发肾毒性损害并产生抗利尿激素抵抗有关.

    作者:王元彬;陆亚文;刘秀英;李英霞;颜少广 刊期: 2007年第07期

  • 急性胰腺炎的实验诊断指标及其临床应用

    急性胰腺炎是一种常见的临床急腹症,其实验诊断的传统指标主要为淀粉酶和脂肪酶等.随着实验诊断技术的进步,可反映胰腺炎性损伤程度的急性时相蛋白和胰蛋白酶原及其激活肽等标志物正逐步取代传统的实验诊断指标.现就急性胰腺炎的实验诊断指标及其临床应用作一综述.

    作者:廖海燕;敖必蓉;鲍依稀 刊期: 2007年第07期

  • 丙氨酸氨基转移酶测定波长设置的实验研究

    目的 观察波长设置对含有不同干扰物丙氨酸氨基转移酶(ALT)标本测定的影响.方法 对NADH纯品溶液、试剂样本及含不同干扰物的样品进行全波长扫描.依据吸收曲线设定不同的副波长,然后对含不同干扰物的定值血清进行测定,以定值血清所给的值为参照,确定佳波长组合.结果 定值血清测量结果,单波长340 nm与双波长(340/380 nm,340/404 nm)差异无统计学意义(P>0.05);血红蛋白(Hb)和胆红素(BIL)干扰的ALT标本,340/404 nm测定结果与靶值差异无统计学意义(P>0.05), 340/380 nm测定结果与靶值差异有统计学意义(tHb = 2.144,PHb=0.042<0.05;tBIL=2.453,PBIL<0.05);血脂(TG)干扰的ALT标本340/380 nm测定结果与靶值差异无统计学意义(P>0.05),而340/404 nm测定结果与靶值差异有统计学意义(t=-3.338,P<0.01).结论 利用单波长即可准确测得低干扰程度丙氨酸氨基转移酶(ALT)标本的活性.若采用双波长时应视标本干扰物的种类而选择不同双波长,溶血、黄疸干扰应选择340/404 nm,血脂干扰应选择340/380 nm.

    作者:李冬;王志富;焦连亭;王兆成 刊期: 2007年第07期

  • 慢性淋巴细胞白血病微小残留病研究进展

    近年来,很多技术用于慢性淋巴细胞白血病微小残留病的检测,本组比较目前常用的流式细胞术及聚合酶链反应这两种技术的优缺点,并进一步探讨微小残留病在慢性淋巴细胞白血病预后中的意义.

    作者:沈秋丹;徐卫;李建勇 刊期: 2007年第07期

  • 质粒介导AmpC β-内酰胺酶的研究进展

    质粒介导AmpC β-内酰胺酶主要由肠杆菌科细菌产生,迄今已发现至少10个类型30多个亚型.其特点是对青霉素类、氧亚氨基头孢菌素、7-α-甲氧基头孢菌素和单酰胺类耐药,不被临床常用的酶抑制剂所抑制,但对氯唑西林敏感;其编码基因常与其他类抗生素的耐药基因位于同一质粒,表达对多类抗生素的耐药;并通过质粒复制、接合、转化及转座子移位,在革兰阴性菌种内或种间传播,引起更大范围的暴发流行.

    作者:李金钟;栗瑛洁 刊期: 2007年第07期

  • 医疗卫生单位的科技档案与科技信息

    医学科技信息资源的开发利用同医学科技活动和科研管理活动的关系十分密切,本文主要分析了医学科技档案在科技活动中的作用、关系,指出医学科研管理人员应开发利用医学科技档案资源和信息网络资源,拓宽医学信息服务.

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  • 肺炎克雷伯菌质粒介导AmpC酶的研究进展

    肺炎克雷伯菌是医院获得性感染常见的致病菌之一.近年来,在肺炎克雷伯菌中发现了质粒介导的AmpC酶,给临床抗感染治疗带来了更多困难.该文主要针对肺炎克雷伯菌质粒介导AmpC酶的种类、耐药表型、分子生物特性以及实验室检测方法等研究进展进行综述.

    作者:郑港森;宋秀宇 刊期: 2007年第07期

  • 三种不同采血方式的样本进行血细胞分析的对比研究

    目的 探讨三种不同采血方式对血细胞分析5项测定参数的影响.方法 随机选择在该院门诊检验科进行血细胞分析的患者40例,对同一患者按采血方式与采血容器的不同组合同时采取三种EDTA抗凝血样:(1)采集2 ml静脉血置于真空负压管(简称真空管);(2)取静脉血160 μl置于微量抗凝管(简称微量管);(3)采集末梢血160 μl置于微量抗凝管(简称末梢血管).所有样本均用XT-1800i血细胞分析仪进行检测.结果 (1)静脉血微量管5项主要参数均略高于真空管;末梢血WBC、RBC、Hb、MCV检测结果高于静脉血真空管和微量管,血小板则偏低,尤以<100×109/L组为明显.但微量管与真空管、末梢血与静脉血检测数据呈显著相关,且微量管与真空管、末梢血与静脉血之间的偏差均低于CLIA'88规定的允许范围.(2)三种血样在血细胞分析仪上的Plt检测结果不同程度地低于显微镜计数结果,以末梢血Plt B组(Plt<100×109/L)为明显.同时血膜片镜检发现,三种血样均约有半数可见大血小板和/或血小板聚集现象.结论 不同样本类型及采血容器对血细胞分析检测结果的影响在可接受的范围之内,利用EDTA真空负压管采集静脉血具有结果稳定、样本量多、便于复查等诸多优点,在优先推行静脉采血的同时可根据临床实际情况选择样本类型及采血容器.当出现血小板减少的数据,应重采静脉血或应用相差显微镜-草酸铵法计数,有条件的好采用免疫血小板计数法进行复检.

    作者:肖秀林;王昌富;汪永红;高清萍;陈芳 刊期: 2007年第07期

国际检验医学杂志

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