张崴；陈礼明；张世兰；王海滨
原发性肝细胞癌(简称肝癌)是一种常见的恶性肿瘤,随着超声、计算机体层扫描(computed tomography,CT)、核磁共振(magnetic resonance imaging,MRI)以及血管造影等影像检查方法的广泛使用,肝癌较易被检出并确定诊断.目前,在肝癌的治疗方法中,介入治疗占有相当重要的地位.
作者：官泳松；周翔平 刊期： 2003年第12期
目的探讨血管内皮细胞生长因子(VEGF)反义RNA转染人肝癌细胞后对细胞体内外生物学性状的影响. 方法将含正义、反义VEGFcDNA序列的质粒PCMV-VEGF、PCMV-FGEV及空载体质粒pcDNA3.1,在脂质体介导下导入SMMC-7721肝癌细胞,分别称为正义、反义及对照组,并通过G418筛选获得阳性克隆.细胞原位杂交和免疫组织化学方法检测转染后VEGF在肝癌细胞内的表达情况;MTT法和FCM检测转染后细胞在体外的增殖和凋亡情况;并制备裸鼠动物模型,观察转染后细胞的体内生长情况. 结果转染PCMV-FGEV后肝癌细胞内VEGF的转录及其蛋白的表达水平显著下降,但转染后体外细胞的增殖与凋亡情况均无明显变化.转染PCMV-FGEV后细胞在裸鼠体内的生长缓慢,反义组成瘤时间为(25.0±1.8)d,明显长于正义组(15.7±2.5)d和对照组(18.5±2.1)d,F＝19.455,P<0.01;而平均瘤重以反义组轻,为(0.96±0.28)g,F＝21.501,P<0.01;同时反义组裸鼠肿瘤细胞发生明显的凋亡. 结论 VEGF反义RNA转染人肝癌细胞可抑制肿瘤细胞VEGF的表达,在体外对细胞增殖和凋亡无影响,而体内可显著诱导细胞凋亡并抑制肿瘤生长.
作者：郝继辉；俞鸣；史玉荣；李强；郝希山 刊期： 2003年第12期
凝血弹性图(TEG)能及时、准确、动态地反映肝移植术中不同时期的凝血状况,指导血制品的输注及各种治疗药物(如鱼精蛋白、6-氨基己酸等)的应用[1,2].本研究试图探讨19例肝移植术中TEG的变化以及与激活的全血凝块形成时间(ACT)的相关性.
作者：任同悦；王凤祥；王方；陈健；王业贵；强万党 刊期： 2003年第12期
目的总结肝移植术后常见的心血管系统并发症及其可能的原因和防治方法. 方法对中山大学第一附属医院1993年4月至2001年12月间的肝移植病例住院期间术后近期发生的心血管系统并发症进行回顾性分析. 结果 88位患者实施了89例次肝移植,65例患者发生心血管系统并发症,同心血管并发症相关的病死率为12.4%(11/89).术后凝血功能紊乱可能是发生心肌缺血的主要原因;心力衰竭程度随术中输血量不同差异有显著性(χ2＝5.714,P<0.05);术后高血压的发生与多种因素有关. 结论心血管系统并发症是肝移植术后常见的和严重的并发症之一,并有较高的病死率.合适的病例选择,维持凝血机制及出入量的平衡是降低术后心血管并发症的关键.
作者：鞠卫强；何晓顺；陈规划；朱晓峰；陆敏强；王国栋；黄洁夫 刊期： 2003年第12期
目的探讨肝癌组织碱性磷酸酶(ALP) N-糖链结构的改变及与肝癌侵袭性的关系. 方法用凝集素亲和层析法检测9例正常肝组织、16例肝癌组织和16例肝癌癌旁组织中ALP的多种凝集素结合率.凝集素包括L型红腰豆凝集素(L-PHA)、小扁豆凝集素(LCA)、蔓陀萝凝集素(DSA)、E型红腰豆凝集素(E-PHA)和黑接木骨凝集素(SNA)等. 结果肝癌组织ALP的L-PHA、LCA、DSA、E-PHA和SNA结合率分别为22.94%±5.30%、55.97%±13.72%、38.16%±8.87%、11.56%±4.81%和69.80%±13.71%, 均明显高于正常肝组织(5.89%±2.75%、36.20%±11.58%、17.90%±6.71%、5.38%±2.20%和57.32%±11.27%),t值分别为8.94、3.64、5.94、3.62和2.32,P值均<0.01; 侵袭性肝癌组织ALP的L-PHA结合率(25.84%±4.67%)明显高于非侵袭性肝癌组织(18.10%±3.64%),t＝3.71,P<0.01. 结论肝癌组织ALP的糖链结构发生改变,且ALP的L-PHA结合率与肝癌侵袭性有关.
作者：陈国千；章清；许艳芳；张万忠；关明；苏兵；梁惠琪；吕元 刊期： 2003年第12期
目的观察不同活化状态肝星状细胞 (HSC) 对外源性转化生长因子-β1(TGF-β1)旁分泌刺激的生物学效应作用. 方法原代分离培养大鼠HSC,无包被塑料培养皿上分别培养1、4、7d,细胞处于静止、中间活化与完全活化状态,继以10～500pmol/L TGF-β1温育细胞24h,3H-TdR掺入法测定细胞增殖,western blot法检测细胞α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)与I型胶原蛋白表达沉积,3H-脯氨酸掺入与胶原酶消化法测定细胞总胶原的分泌量.100pmol/L TGF-β1温育细胞15～90min,northern blot法检测细胞I型前胶原mRNA的表达水平. 结果 TGF-β1浓度依赖性抑制培养1d HSC的细胞增殖,10～500pmol/L TGF-β1浓度组细胞内3H-TdR掺入率分别为对照组的52.8%～16.8%,与对照组比较,q值为5.44～10.37,P<0.01.但TGF-β1对培养4d与7d的细胞增殖无影响.随细胞活化,HSC基础性α-SMA、I型胶原蛋白与mRNA水平明显增加,而TGF-β1刺激各培养时间HSC以上蛋白与基因的表达.培养1、4、7d HSC基础水平与TGF-β1刺激的总胶原分泌量分别为(804±274)dpm/孔与(1200±708)dpm/孔;(2966±1701)dpm/孔与(6160±1123)dpm/孔;(2580±767)dpm/孔与(4583±1467)dpm/孔,后2组组内比较,t值分别为3.84与2.96,P<0.01或P<0.05.以培养4d HSC的总胶原分泌与α-SMA表达的效应增加较为明显. 结论 TGF-β1明显抑制静止HSC的细胞增殖,对活化状态HSC生长无影响,促进各种活化状态HSC的表型活化与胶原生成,TGF-β1对活化过程中HSC的增殖与胶原生成功能发生岐化.中间活化状态HSC对TGF-β1促表型活化与胶原生成为明显,可以作为较理想的药理研究细胞模型.
作者：刘成海；宣红萍 刊期： 2003年第12期
当器官遭受缺血再灌注损伤时,机体可以通过基因调控增生性反应和拮抗损伤的机制,对损伤器官和组织进行大限度的修复.现重点综述器官缺血再灌注损伤中分子调控机制的作用.
作者：张劭；何晓顺 刊期： 2003年第12期
目的探讨成纤维细胞在肿瘤血管形成中的作用. 方法对肿瘤成纤维细胞模型L929-H22细胞,用免疫细胞化学测定其促进血管形成因子的表达、双室联合培养测定其促进内皮细胞形成管型的能力与促进肿瘤细胞侵袭的能力,分析其粘贴能力、条件培养基(CM)对H22细胞生长的影响,并与其亲代细胞L929比较. 结果与L929细胞相比,L929-H22细胞粘贴能力增强(F≥104.32,P<0.001);表达血管形成因子基质金属蛋白酶9(MMP-9)、转化生长因子β1(TGF-β1)、细胞粘合素(TN)、bcl-2增强(t≥3.055,P<0.01);更能促进肿瘤细胞侵袭(F＝266.30,P<0.001)与ECV304细胞形成管型(q≥3.2289,P<0.01).其CM对H22细胞生长有一定的促进作用(F＝19.41,P<0.05). 结论肿瘤成纤维细胞表达血管形成因子增强,在肿瘤侵袭与血管形成中有一定作用.
作者：朱红梅；汤为学；周卫平 刊期： 2003年第12期
目的构建并表达分泌性内皮抑制素真核表达质粒,以此对肝癌进行基因治疗. 方法人工合成Igκ信号肽序列,和内皮抑制素编码序列一起克隆入pcDNA3.1质粒.重组质粒转染上清液作用于ECV304内皮细胞,MTT法检测内皮细胞的增殖.局部注射重组质粒治疗接种在小鼠腿部肌肉内的H22肝癌瘤株,疗程结束后解剖称取瘤重. 结果构建的内皮抑制素真核表达质粒转染上清液可以抑制内皮细胞的增殖抑制率为29.2%.经质粒裸DNA注射治疗后,治疗组瘤重[(1.34±0.96)g]比空载体组[(2.70±0.82)g]和生理盐水组[(3.73±1.41)g]明显减小(P<0.05). 结论分泌性内皮抑制素真核表达质粒用于H22肝癌的基因治疗有一定效果.
作者：黎培员；林菊生；冯作化；张慧；周鹤俊；章金艳 刊期： 2003年第12期
近年来,肿瘤疫苗备受关注,已成为肿瘤免疫治疗的研究热点之一.其研究主要涉及树突状细胞(dendritic cells，DC)疫苗、基因修饰疫苗、高强度聚焦超声(high-intensityfocusedultra-sound,HIFU)固化疫苗、化学修饰肝癌细胞疫苗、人细胞融合肝癌疫苗和细胞因子-微粒肝癌疫苗等方面.
作者：周旻；杨冬华 刊期： 2003年第12期
血小板衍生生长因子(PDGF)是纤维化发生过程中的一个重要促进因子.在临床工作中发现,行脾切除术的患者肝纤维化发展速度变慢.为此我们对7例脾切除术前后的肝硬化患者的双份血清进行PDGF的定量检测.
作者：陈黎明；王陆军；张鸿飞；程云；辛绍杰；陈菊梅；张晓峰 刊期： 2003年第12期
目的借助酵母的免疫特性,设计一种新型抗乙型肝炎病毒(HBV)治疗性疫苗,探索一种全新的可有效活化机体抗病毒免疫应答方式. 方法以基因工程技术构建内含乙型肝炎表面抗原(HBsAg)和热休克蛋白(HSP)70(1～370)-HBsAg的重组毕赤酵母,皮下免疫BALB/C小鼠,检测小鼠对HBsAg的体液及细胞免疫反应. 结果重组酵母成功诱导了小鼠体内表面抗体的产生,显示其抗原性并未受到影响.细胞免疫检测未能获得预期的结果. 结论整体重组酵母活菌具有疫苗特性,整体重组酵母用于抗HBV治疗是一个新的思路,未能检测到细胞免疫反应可能与重组酵母的用量、注射方式等有关.
作者：曾彦；蔡大川；彭明利；任红 刊期： 2003年第12期
目的构建抗凋亡因子survivin的短发夹状RNA(shRNA),观察其在肝癌细胞株HepG2、SMMC-7721中对survivin基因表达的抑制作用. 方法设计、合成两对survivin编码基因的反向重复序列,中间分别间隔4和8个nt,分别定向克隆至载体pTZU6+1的U6转录启动子下,构建pshRNA-survivin 1和pshRNA-survivin 2重组质粒,与表达survivin基因的质粒pEGFP-C1-survivin共转染肝癌细胞株HepG2和SMMC-7721,荧光显微镜下观察融合蛋白中GFP的表达以分析pshRNA-survivin对survivin基因表达的抑制作用. 结果酶切分析和测序证实pshRNA-survivin 1和pshRNA-survivin 2构建成功;两组shRNA对survivin的表达均有明显的抑制作用,抑制率达80%以上;两重组质粒在HepG2和SMMC-7721两种细胞中抑制目的基因的作用无明显差异;反向重复序列中间隔4或8个nt构建的shRNA,对抑制目的基因的表达无显著差异. 结论构建的pshRNA-survivin重组质粒能有效抑制survivin 基因在肝癌细胞株HepG2、SMMC-7721中的表达.
作者：闫歌；黄爱龙；唐霓；张秉强；蒲丹；向明确；兰英华；吴刚 刊期： 2003年第12期
射频消融(radio-frequency ablation,RFA)术是近年发展起来的新的肝癌介入治疗手段.射频波进入肝脏后通过激发分子振荡转换成热能,当温度超过50℃数分钟即可使细胞死亡,大于60℃可使细胞立即死亡[1],临床上应用这一原理治疗肝癌已取得相当疗效.
作者：张军；杨祖奎 刊期： 2003年第12期
目的探讨肝脏移植后多种信号传导通路及相关信号分子的变化规律. 方法将标本按病理表现分为5组:A(无排斥反应)组10例、B(轻/中度急性排斥反应)组10例、C(重度急性排斥反应)组8例、D(慢性排斥反应/肝纤维化)组6例、E(正常对照)组10例.每例标本行丝裂素活化蛋白激酶(MAPK)、Ras、p53蛋白检测和MAPK、Ras mRNA表达水平检测. 结果 MAPK、Ras蛋白表达在A、B和C组依次增高(MAPK分别为1.42±0.28,3.88±0.87,6.68±0.57;Ras分别为1.27±0.12,2.80±0.30,3.93±0.20),在D和E组降低(MAPK分别为1.49±0.37,0.88±0.20;Ras分别为1.47±0.21,1.01±0.12),p53蛋白表达在移植后各组均升高(A到E组分别为2.09±0.13,2.39±0.11,2.03±0.19,2.26±0.18,0.35±0.08);在MAPK和Ras组中,B、C组与A、D、E组差异有统计学意义,MAPK和Ras各组的F值分别为178.39和320.59,C、D组比较q=25.8,C、A组比较q＝29.75,C、E组比较q＝32.8,B、D组比较q＝12.42,B、A组比较q＝14.76,B、E组比较q＝17.996,以上各组两两比较均P<0.001,Ras比较的结果与MAPK相似,各组p53比较,F值为360.08,其中E组与其它各组比较均P<0.001.MAPK、Ras mRNA表达与蛋白表达呈现同步性. 结论 MAPK途径和p53途径分别在肝移植后细胞周期调控中的不同方面承担保护肝细胞的作用.
作者：李国逊；宫念樵；叶启发；郭晖 刊期： 2003年第12期
我国原发性肝癌的治疗已取得显著进展.肝癌切除术是目前有效的根治性治疗手段.由于原发性肝癌极易发生早期播散和转移,且相当部分为多中心发生,我国肝癌患者又多伴严重肝硬化,因此手术切除在肝癌治疗中的作用也有一定限度,切除率低和复发率高仍是制约肝癌疗效的关键因素.对大多数肝癌、特别是中晚期患者,非手术治疗仍不失为重要的治疗方法.
作者：叶胜龙 刊期： 2003年第12期
目的研究抗组织相容性复合物(MHC)Ⅱ类分子转录激活因子(CⅡTA)核糖核酸酶P(RNaseP)抑制肝细胞表面MHCⅡ分子的表达. 方法 M1-RNA是RNaseP的催化活性单位,设计并克隆针对CⅡTA第629位点的M1-RNA(M1-629-GS)及其对应的CⅡTA靶序列,分别插入腺相关病毒载体psNAV(psNAV-M1-629-GS)及pGEM-7zf(+)载体(pGEM-629),进行体外转录和切割反应鉴定其活性.通过纳米载体介导psNAV-M1-629-GS稳定转染人胎肝细胞,流式细胞术检测MHCⅡ类抗原表达,逆转录聚合酶链反应检测CⅡTA mRNA水平. 结果 M1-629-GS与pGEM-3176体外切割产物电泳见预期切割条带(553nt和176nt).psNAV-M1-629-GS+肝细胞表面人白细胞抗原(HLA)-DR、DP、DQ的诱导型表达分别为(1.01±0.51)%、(4.37±1.28)%、(1.98±0.42)%,对照组psNAV-M1-452-GS+分别为(10.81±3.09)%、(40.12±2.60)%、(5.71±0.11) %,两组比较分别下调90.65%、89.11%及65.32%;psNAV-M1-629-GS+克隆诱导型CⅡTA mRNA与β-actin比值为0.94±0.25,空载体组比值为2.30±0.49,M1-629-GS可明显下调CⅡTA mRNA含量(t＝5.56,P<0.01). 结论抗CⅡTA RNaseP-M1-629-GS可发展为新一代抗肝移植排斥的核酸药物.
作者：郭荣；邹萍；吴树山；曹谊林；陆华中；范华骅；高峰 刊期： 2003年第12期
肝癌的基因治疗策略包括自杀基因治疗、免疫基因治疗、导入抑癌基因、抗肿瘤血管形成和转移、核酶以及RNA干扰等.
作者：林菊生 刊期： 2003年第12期
新一代核苷类似物拉米夫定作为抗乙型肝炎病毒(HBV)感染的有效药品用于临床已取得了较好疗效,但因YMDD变异株的出现,又使部分慢性乙型肝炎(CHB)的治疗复杂化.目前尚无理想的抗YMDD变异病毒治疗方案,我们用干扰素联合拉米夫定治疗YMDD变异株CHB近两年,效果比较满意.
作者：吴国祥；查雁生；郑剑；王永忠；周国平 刊期： 2003年第12期
通过对102例肝硬化腹水患者血浆降钙素原(PCT)和内毒素(ET)水平检测,探讨血浆PCT对肾功能状态的影响及其相互关系.
作者：张崴；陈礼明；张世兰；王海滨 刊期： 2003年第12期
中华肝脏病杂志
主管:中国科学技术协会
主办：中华医学会
