衣作安;陈翠萍
制备抗H3N2型流感病毒特异性鸡卵黄免疫球蛋白(IgY),防治同型流感病毒引起的流感.制备H3N2型流感病毒,通过两种途径免疫母鸡,以水稀释-硫酸铵沉淀及离子交换层析法提纯,并进行理化性质分析和动物效力试验.两种途径免疫均可使母鸡产生特异性IgY,其中以静脉为主的混合免疫法效果较好,提纯后纯度可达90%以上,通过被动免疫可使小鼠对同型流感病毒的攻击产生保护作用.结果表明,已成功地制备出高效价的H3N2型流感病毒特异性IgY.
作者:张雪梅;盛军;王玉梅;赵大鹏;刘畅;蒙冲;王晓宇;石晓丽;郭凤云 刊期: 2002年第03期
口服脊髓灰质炎减毒活疫苗(OPV)或接触了服苗者后,极个别人可发生疫苗相关脊髓灰质炎(VAPP),尤其是近10年来,国内外均报道了小规模的VAPP暴发流行,监测发现,这些VAPP病人的发生与OPV疫苗出现基因突变或基因重组,以致疫苗病毒恢复其毒力有关.本文就目前VAPP发生情况、OPV疫苗基因的变化如基因突变或重组的类型和机制、如何预防和控制OPV疫苗衍生病毒的发生等方面的进展作了介绍.
作者:严有望;王祖森 刊期: 2002年第03期
抗人淋巴细胞免疫球蛋白制品已经临床研究,证实有效,其中包括在肾、心脏、肝等器官移植的免疫排斥预防和治疗,骨髓移植的移植物抗宿主反应的预防,以及再生障碍性贫血的治疗等.
作者:艾智武;康光明;吴克 刊期: 2002年第03期
感染性病原是引起人类发病和死亡的主要原因之一,研制预防性疫苗和治疗性疫苗仍然是解决感染性疾病有效和有前景的方法.本文就疫苗研制领域的近来研究现状,包括疫苗研制技术的发展阶段,载体疫苗,粘膜免疫,新型佐剂和治疗性疫苗进行了综述,并对理想的新一代疫苗进行了简要的展望.
作者:刘纯杰;张兆山 刊期: 2002年第03期
为建立一种快速、简易胶体金免疫层析法(GICA)用于检测血清中的甲胎蛋白(AFP),将AFP单克隆抗体分别标记胶体金并包被硝酸纤维素膜,制成免疫检测层析试剂.血清中的AFP与金标记抗体结合,沿着硝酸纤维素膜移动,与膜上的固相抗体结合可形成肉眼可见的紫红色线条.此检测试剂对本室自制AFP参比品进行了检测,灵敏度达20ng/ml;对甘肃省肿瘤医院的176份癌症患者血清进行了检测,结果与ELISA法相一致.本法检测AFP快速、简便、结果准确,具有推广价值.
作者:张正雷;张云涛;缑宇虹;袁皓加;张甲菊;曹咏梅;杨宗模 刊期: 2002年第03期
为研究浓缩Vero细胞狂犬病疫苗蛋白浓度对纯化效果的影响,用超滤浓缩法对狂犬病疫苗进行不同倍数的超滤浓缩,将浓缩后不同倍数的样品分别用凝胶柱层析法进行纯化.结果样品浓度在40mg/ml以下时,狂犬病毒收集液中杂蛋白去除率可达99%以上,小牛血清含量在25~37.5ng/ml之间;浓度超过40mg/ml时,并随着样品浓度的增加,狂犬病毒收集液中杂蛋白去除率逐渐下降,且有病毒丢失.因此采用凝胶柱层析法纯化狂犬病疫苗,蛋白浓度应低于40mg/ml.
作者:李福安;秦怡;杨平学 刊期: 2002年第03期
由于胞内感染菌与宿主细胞之间的相互作用,使相应的减毒活疫苗有可能成为更为理想的DNA疫苗载体.本文就减毒活疫苗作为理想的DNA疫苗的生物学基础、研究进展、存在的问题等方面进行综述.
作者:刘莉;曾蔚;贾文祥 刊期: 2002年第03期
对麻疹疫苗生产工艺进行了改进研究.在病毒培养过程中,以病毒生长稳定剂替代白蛋白、减少维持液加量、延长病毒培养时间并缩短病毒释放时间,提高了病毒原液的滴度.由此可使分装量减少,而每一剂量中实际病毒含量并不减少,从而使麻疹疫苗的冻干条件得到改善.采用改进工艺后,麻疹疫苗的质量、中间产品和成品合格率均有了较大的提高.
作者:魏至栋;胡磊;王玉琳 刊期: 2002年第03期
应用PCR技术成功地从溶脲脲原体14个血清型中获得尿素酶基因片段.经分析发现各序列间高度保守,但也存在一定程度的变异.据此绘制的系统进化树可将14个血清型分为两大群,与现在两个生物型划分的唯一区别是将属于生物1型的血清型3归于生物2型.在14个型的序列中,不同的核苷酸可作为区分各血清型的特征性碱基.
作者:彭清忠;郭兆彪;朱厚础;杨瑞馥 刊期: 2002年第03期
为确定A+C群脑膜炎球菌多糖疫苗有效期,对该疫苗在不同储藏温度下的稳定性进行了系统研究.将C群多糖抗原放置在37℃,A+C群多糖疫苗分别放置在2~8℃、37℃和56℃,定期取样,用琼脂糖CL-4B凝胶柱层析后,测定Kd值在0.5以前的多糖回收率.结果表明,C群多糖抗原在37℃保存9周,A+C群多糖疫苗于2~8℃保存4年、37℃保存88周、56℃保存10个月,多糖抗原或多糖疫苗的Kd值小于0.4,多糖回收率大于75%,符合规程要求;因而A+C群脑膜炎球菌多糖疫苗的有效期可定为在2~8℃储藏条件下3年6个月.
作者:朱莉萍;赵星华;崔萱林;张军;李芙 刊期: 2002年第03期
通过聚合酶链式反应(PCR)技术,以戊肝病毒cDNA为模板将开读框架3的基因片段扩增并克隆入载体pUC18中.再对扩增片段进行酶切鉴定及测序,结果表明此片段与膜板序列的同源性达到99%以上.将此片段克隆后通过一系列分子生物学技术装入真核胞内表达载体PPIC3及分泌性载体PPIC9中,并对载体进行酶切鉴定证实外源基因插入的正确性.终完成表达载体的构建.
作者:李启明;沈心亮;蒋琳;张春江 刊期: 2002年第03期
本文从载体材料、点样方式、芯片固定的生物分子和功能等方面对生物芯片进行了详细的分类;并以芯片所固定的生物分子的分类方式为基础,就基因芯片、蛋白质芯片及芯片实验室的国内外研发进展作了介绍;后指出了目前生物芯片研究和开发中存在的问题.
作者:白东亭;祁自柏 刊期: 2002年第03期
将纯化的基因重组HIV-1 P24和融合蛋白P24-gp41包被微孔板,用ELISA分别检测正常人血清和HIV-Ab国家参比品(Panel).rP24对20份HIV-Ab阳性Panel的检出率为95%(19/20),对20份HIV-Ab阳性Panel通过率为90%(18/20),P24-gp41对20份HIV-Ab阳性Panel检出率为90%(18/20),对20份HIV-Ab阴性Panel的通过率为60%(12/20);rP24和P24-gP41对正常人血清的检测结果均为阴性.结果表明研制的P24具有较高的敏感性和特异性,可作为组份抗原用于HIV抗体诊断试剂盒的生产.
作者:陈伟;陈克金;朱华松;余模松 刊期: 2002年第03期
生物芯片技术针对DNA、RNA、蛋白质及其它生物分子,在芯片上完成一个或多个功能的检测分析,使大量与生命有关的信息集中在一块芯片上,达到对生物分子、细胞、组织的高通量检测分析.本文根据生物芯片的结构与功能特点,将生物芯片分为微点阵(阵列)芯片、微流路芯片两大类,每大类中又进行了较详细地分门别类,同时扼要介绍各自的技术原理.目前生物芯片技术正向着更加微型化和集成化方向发展,芯片实验室代表着更高的发展阶段.
作者:周冬生;杨瑞馥 刊期: 2002年第03期
近年来,对TSE检测的研究发展非常迅速.尽管朊病毒的分类本质尚不明确,但一些生物学特性已有研究,如传染性、抵抗力等,其检测技术包括:早期利用宿主动物牛或转基因小鼠的生物学方法;有多种免疫诊断方法可区分正常和异常的朊病毒蛋白,欧盟验证了三种免疫诊断方法,瑞士Prionics公司的免疫印迹法、爱尔兰EnferScientific公司的ELISA法和法国CEA和英国Bio-Rad公司开发的夹心免疫法,三种检测方法准确性为100%,因此,欧盟授权这三种检测方法用于欧洲检测疯牛病,此外,基于免疫荧光方法和毛细管免疫电泳的方法也有应用;研究人员还尝试通过对TSE感染过程中出现的相关蛋白、朊病毒的形态变化的检测来诊断TSE,也有针对TSE发病过程中,异常朊病毒蛋白在脑部出现聚集,采用不同手段用以诊断;在体外模拟感染性PrP(&)引起正常细胞表面蛋白PrP构象改变的过程也应用于TSE的检测.对潜伏期的诊断试剂研究正在进行中,但目前并未取得满意的结果.对朊病毒污染生物制品的可能性进行评估非常必要,对生产过程的监测非常重要.相信未来3~5年将开发出高敏感性、高特异性和使用方便的TSE诊断方法.
作者:曾明;漆文革;雷殿良;李德富 刊期: 2002年第03期
为了解职业献血员中庚型肝炎病毒(HGV)的感染状况,应用ELISA法和RT-PCR法进行检测.在10 069名职业献血员中有516例抗-HGV阳性,总感染率为5.12%,其中男性感染率5.79%、女性感染率4.45%;甘肃省感染率4.96%、宁夏区感染率5.70%、青海感染率5.67%以及陕西感染率4.91%;年龄18~25岁的感染率4.48%、26~35岁感染率4.87%;36~45岁感染率6.90%;将抗-HGV阳性作RT-PCR、HBsAg、抗HCV检测,其中HGV-RNA阳性362例、HBsAg阳性25例、抗HCV阳性37例、HBsAg和抗-HCV阳性8例.以上说明,在职业献血员中,HGV的感染与性别、地域及年龄无关,与HBV、HCV有重叠感染现象.
作者:席仲兴;张云涛;彭林峰;贾晓莉;张雯;张正雷;袁皓加 刊期: 2002年第03期
目前,对乙型肝炎病毒(HBV)的S基因变异的研究,仍然是国内外关注的热点.S基因变异是导致HBV基因序列多样性的重要原因,它与乙型肝炎的各种临床表现有密切的关系.本文就S基因变异的形成机制及其医学意义做一简要综述.
作者:马春玲;季晓辉;房德兴 刊期: 2002年第03期
目前国内对小瓶清洗、干热灭菌、灌封三位一体联动分装线的验证处于起步阶段,而国外的某些验证试验方法对于国内大多数制药行业又是不切实际的.依据国内外的有关资料,按照现行GMP的要求,结合生产的实际情况,建立了一套验证试验方法,实验证明是适用的.
作者:徐斌;李国晏;崔萱林;周园;李睿;杨勇 刊期: 2002年第03期
炭疽是由炭疽杆菌芽胞引起的疾病.炭疽杆菌的主要毒力因子在毒力质粒上编码pXO1和pXO2.pXO1184.5kbp大小,编码分泌外毒素的基因,此二个外毒素为二亚单位毒素,二个A蛋白,致死因子(LF,83kD)和水肿因子(EF,89kD);一个B蛋白,保护因子(PA,85kD);分别由pXO1上的独立基因,Lef,Cya和Pag编码;pXO2为95.3kbp大小的小质粒,携带三个基因,CapB,CapC和CapA,与聚-γ-D谷氨酸构成的荚膜合成有关.
作者:褚佩英;鲍行豪 刊期: 2002年第03期
为更替第二批人凝血因子VⅢ浓制剂国家标准品,以WHO97/616批重组人凝血因子Ⅷ浓制剂国际标准品为对照,采用一期法协作标定第三批人凝血因子Ⅷ浓制剂二个候选国家标准品X和Y.并将标准品分别置4℃、22℃、37℃保存4.5个月,用加速破坏试验进行稳定性考查.结果表明,X(20010606批)候选标准品效价为3.8IU/支;Y(20010607批)候选标准品效价为7 3 IU/支.X批候选标准品比Y候选标准品稳定性好.其它项目均达到国家标准品要求.故已完成建立第三批人凝血因子Ⅷ浓制剂国家标准品.
作者:沈琦;任跃明;刘大英;季荣科;吴志华;王德生;薛镭;贾玉华;何慧敏;杨晓敏;曹勤立;王丹君;沈宝荣;王坚 刊期: 2002年第03期