黄敏；郑艳清
戊型肝炎病毒被发现后，对其检测方法的研究取得了重大进展。但是，戊型肝炎血清学检测还存在很多问题亟待解决。戊型肝炎病毒抗原特性的研究以及抗原的选择对于诊断试剂至关重要。研发适宜的戊型肝炎抗原并建立背景清晰的戊型肝炎IgG／IgM标准品对于诊断试剂的研发及评价具有重要意义。
作者：蓝海云(综述)；周诚(审校) 刊期： 2015年第05期
作者：《微生物学免疫学进展》编辑部 刊期： 2015年第05期
以前我们使用稳定的细胞系研制了类轮状病毒（ RV） VP2、VP6和VP7蛋白（ VLP2／6／7）颗粒。为评估其免疫原性，我们评估腹腔和直肠免疫的BALB／c小鼠VLP2／6／7诱导的体液及细胞因子应答。采用酶联免疫吸附试验（ ELISA ）和相对定量（ RQ）实时PCR来分别评估血清抗体（ IgG和IgA）的水平及脾细胞中IL－6、IL－10和IFN－γ的mRNA水平。结果表明经腹腔（ I．P ．）和直肠（ I．R．）免疫， VLP2／6／7能够诱导血清 IgG 和 IgA 应答。在经I．P．和I．R．途径免疫的粪便样品中检测到IgA。有趣的是I．R．途径诱导的IgA效价高于I．P．途径，且具有统计学意义。另外，与对照组相比用VLP2／6／7腹腔免疫小鼠的IL－6和IFN－γ的mRNA水平明显升高。因此，IFN－γ和IL－6平均变化值分别是7．4（P＜0．050）和14．8（P＜0．001）。在直肠免疫小鼠体内也发现了同样的情况。然而，与对照组相比， IL－10平均变化值的统计学意义并不明显。结果表明稳定的昆虫细胞系构建的VLP s能够诱导体液免疫和细胞免疫，在活RVs免疫后也观察到了相似的情况。
作者：苗鑫；江丽君 刊期： 2015年第05期
MHCⅡ类缺陷（ MHC－II KO； Aβ－／－）小鼠用于评价MHC－II类分子在接种疫苗后诱导保护性免疫应答中的作用。接种流感 A／P R8病毒样颗粒（ VLP ）疫苗后，完全不同于CD4 T细胞缺陷小鼠，在MHCⅡ类分子缺陷小鼠体内外均未检测到疫苗特异性免疫球蛋白IgG抗体。缺乏MHCⅡ类分子并没有明显影响血清中诱导产生特异性IgM抗体。用流感VLP （全灭活流感病毒）或减毒活流感病毒免疫MHCⅡ类分子缺陷小鼠，并没有保护小鼠免受流感A ／PR8病毒的感染。从野生型小鼠过继转移分级分离的脾细胞到MHCⅡ类分子缺陷小鼠，表明， MHC－II提供的CD43（＋）细胞群在产生疫苗特异性IgG抗体方面明显比 CD43（－） B220（＋）保守B细胞或CD4 T细胞群更重要，而且能对致死性感染提供保护。来自MHC －II KO小鼠的骨髓树突状细胞，在产生白介素－6和肿瘤坏死因子α时表现出明显的缺陷。因此，结果证明，接种流感疫苗后，MHC－II 分子在诱导保护性免疫应答中有多种作用。
作者：卓晓琴；江丽君(校) 刊期： 2015年第05期
作者： 刊期： 2015年第05期
手足口病（ Hand foot and mouth disease，HFMD）已成为西太平洋区严重的公共卫生问题之一，肠道病毒71型（Enterovirus 71，EV71）是引起HFMD的主要病原体，研发疫苗是控制HFMD流行的有效手段。目前世界范围已有5个EV71全病毒灭活疫苗进入临床试验，其中中国研制的3种EV71疫苗已分别完成III期临床试验，结果表明3种疫苗都具有良好的安全性和保护效果。在EV71疫苗研发中，抗原质控的方法和标准是研发的瓶颈，其中抗原活性测定是工序工艺优化、免疫原性评价和剂量确定的关键指标。综述了EV71疫苗抗原质控的研究进展。
作者：王一平；姚昕(综述)；毛群颖；梁争论(审校) 刊期： 2015年第05期
作者研究了经由鼻腔免疫单价复制缺陷型delNS－H1N1流感病毒疫苗（7．7 log10 TCID50／志愿者）的志愿者的血清和鼻洗液样品中的交叉中和抗体水平。根据血清 IgG ELISA，黏膜 IgA ELISA、MNA或HAI在12名志愿者中有8名其抗体水平呈显著增高，有4名应答者血清和黏膜洗液中deINSI特异性ELISA IgA抗体明显升高且有极高的同亚型中和活性。然而4份血清不具有中和异亚型H3 N2和H5 N1流感病毒的中和活性，而四分之三的鼻洗液却具有中和上述异亚型流感病毒的活性。缺失试验结果表明是IgA而非IgG是鼻洗液具有交叉中和活性的原因。作者的发现表明病毒中和性IgA的诱导可能代表着鼻内免疫流感疫苗产生交叉保护的免疫相关物，也表明使用delNSI是一种制备保护人类免受季节性和大流行流感威胁的疫苗的有希望的方案。
作者：王爱秀；江丽君 刊期： 2015年第05期
Clp蛋白酶复合体在结核分枝杆菌蛋白质的代谢调控过程中发挥着极其重要的作用，维持结核分枝杆菌感染宿主后的正常生存和繁殖的功能。对Clp蛋白酶复合体的组成、作用机制及其生物学功能等方面的新研究进展进行综述。
作者：袁晋宁(综述)；鲍朗(审校) 刊期： 2015年第05期
作者：《微生物学免疫学进展》编辑部 刊期： 2015年第05期
目的：评价甲型H1N1流感病毒裂解疫苗（简称甲型H1N1流感疫苗）的免疫原性和安全性。方法按照随机、双盲、安慰剂对照的原则，采用0、21天免疫程序，选择3岁及3岁以上健康者1202人。分组为3～11岁、12～17岁、≥60岁组，按照人数基本为1∶1的比例随机分别接种7．5μg和15．0μg 甲型H1N1流感疫苗；18～59岁组按照人数基本为1∶1∶1的比例随机分别接种7．5μg、15．0μg甲型 H1 N1流感疫苗和安慰剂对照。观察各组接种后的不良反应率以及免疫前后血凝抑制（ HI）抗体阳转率、保护率、GMT水平和平均增长倍数。结果受试对象的安全性结果显示7．5μg和15．0μg组不良反应发生率分别为8．74％（48／549）和13．88％（74／533），其中Ⅱ级反应率分别为03．6％（2／549）和1．13％（6／533），未观察到Ⅲ级及以上不良反应和其他异常反应及严重不良事件。2剂接种未见不良反应叠加现象。7．5μg或15．0μg试验疫苗首剂免疫后，血清抗体阳性率分别为85．13％（395／464）和90．77％（413／455），保护率分别为85．56％（397／464）和91．43％（416／455），抗体GMT较免疫前分别增长36．1倍和526．倍。2剂免疫后，血清抗体阳性率分别是97．84％（454／464）和99．12％（451／455），保护率分别是98．06％（455／464）和99．56％（453／455），抗体GMT较免疫前分别增长63．3倍和96．0倍。4个年龄组（3～11岁、12～17岁、18～59岁及≥60岁年龄组）7．5μg和15．0μg组HI抗体阳性率和保护率均大于70％，GMT较免疫前均增长2．5倍以上，结果显示7．5μg和15．0μg甲型H1N1流感疫苗接种1剂后抗体水平已达到研究方案中设定的预期标准，免疫2剂后抗体阳性率和抗体水平明显提高。结论临床试验表明甲型H1 N1流感疫苗具有良好的安全性和免疫原性，且接种1剂15．0μg甲型H 1N1流感疫苗，即可在3岁和3岁以上人群中产生良好的免疫效果。
作者：闫绍宏；陈平纡；马俊清；武贵森；许建斌；顾苏仪；徐冬冬；邹勇 刊期： 2015年第05期
目的：观察枯草杆菌二联活菌肠溶胶囊（制剂）与传统四联疗法治疗老年人幽门螺杆菌感染的安全性及临床效果，寻找较为适合老年人的根除幽门螺杆菌的方案。方法对14 C呼气试验阳性的老年（≥60岁）患者224例随机分为2组，观察组受试者每人口服雷贝拉唑钠肠溶胶囊20 mg（1次／d）、复方铝酸铋1．3 g（3次／d）、阿莫西林胶囊0．5 g（2次／d）、克拉霉素0．5 g（2次／d）和2 h后服用枯草杆菌二联活菌制剂2粒（3次／d），治疗2周；对照组受试者每人除不服用枯草杆菌二联活菌制剂外，与观察组服药相同，治疗2周。结果观察组有效率为78．90％（86／109），对照组有效率为81．25％（91／112），两组间差异无统计学意义（χ2＝0．20，P ＞0．05）。治疗结果显示两种方案对根治老年人幽门螺杆菌感染均获得了良好的效果。在不良反应方面，观察组总不良反应率为20．54％；对照组总不良反应率为为49．11％，观察组的不良反应率显著低于对照组，其差异具有统计学意义（P＜0．05）。结论实验所用两种方案治疗老年人幽门螺杆菌感染均有良好的效果，而枯草杆菌二联活菌制剂联合四联疗法治疗幽门螺杆菌感染可以减少不良反应，提高治疗的安全性。
作者：杜宏伟；张爱萍；薛迪强 刊期： 2015年第05期
目的：研究伤寒Vi多糖蛋白结合疫苗免疫效果及不同剂量伤寒Vi多糖蛋白结合疫苗在小鼠体内诱导的抗体水平，以确定合适的免疫剂量。方法将150只清洁级NIH雌性小鼠随机分为5组，分别为A组（06．25μg 结合疫苗组）、B组（1．250μg结合疫苗组）、C组（2．500μg结合疫苗组）、D组（2．500μg多糖组）及阴性组（10 mmol／L PBS），每组30只；另领取10只为空白对照（不接种）。 A、B、C、D 组及阴性组小鼠经腹股沟皮下注射，剂量0．1 mL／只，每隔2周免疫1次，共免疫3次，每次免疫后第7天采血。采用ELISA检测小鼠血清抗体效价，同时对不同剂量伤寒Vi多糖蛋白结合疫苗在小鼠体内诱导的抗体效价进行分析比较。结果与D组相比，A 、B、C 三组诱导的抗体水平与之均有统计学意义（P＜0．05）；A组与B组、A组与C组之间的抗体水平也具有统计学意义（P＜0．05），而B组与C组之间的抗体水平无统计学意义（P＞0．05）。说明与多糖疫苗相比，伤寒Vi多糖蛋白结合疫苗能够诱导更高的抗体水平，且具有明显的剂次加强效应。同时证明1．250μg的伤寒Vi多糖蛋白结合疫苗可诱导与25．00μg伤寒Vi多糖蛋白结合疫苗相同的抗体水平。结论伤寒Vi多糖蛋白结合疫苗的两种免疫剂量在小鼠体内可诱导相同的抗体水平，在选择接种剂量时，可致免疫应答的无统计学意义的低剂量可能是较为经济和安全的选择。
作者：刘月萍；罗树权；冯宜扬；冯琪蓉；金鑫；周晖国；周海飞；谢贵林；谭小梅 刊期： 2015年第05期
目的：了解海口市人群乙型肝炎表面抗原（HBsAg）和乙型肝炎表面抗体（抗－HBs）状况，评价乙型肝炎疫苗（乙肝疫苗）纳入儿童计划免疫后的效果。方法采用分层整群抽样方法，按接种率高、中、低分为3层，每层采取完全随机的方式将调查对象分为8个年龄组，并采集静脉血进行HBsAg和抗－HBs检测分析。结果共筛选调查对象1162人，乙肝疫苗接种率为74．18％，15岁以下者乙肝疫苗接种率（83．61％）明显高于15岁以上者（58．82％）。 HBsAg 阳性率为5．94％，15岁以下者HBsAg 阳性率（4．16％）低于15岁以上者阳性率（8．82％）。抗－HBs阳性率为57．32％，15岁以下者与15岁以上者抗－HBs阳性率分别为60．69％和51．81％。接种率越高地区HBsAg阳性率越低，抗－HBs阳性率越高。结论海口市乙肝疫苗纳入儿童计划免疫效果显著，明显降低了15岁以下儿童HBsAg阳性率，抗－HBs阳性率上升幅度明显，乙型肝炎的控制成效显著。
作者：黄敏；郑艳清 刊期： 2015年第05期
一些针对流感病毒血凝素的中和抗体主要通过抑制血凝素和宿主细胞表面受体的结合而发挥作用，还有一些中和抗体可以阻止低pH介导的血凝素的构象改变，这种构象改变对膜融合是必须的。总的来说，前一种抗体主要结合在球状HA1的顶端，其针对的毒株特异性不强，而后一种抗体主要结合在HA2的中间，有较强的毒株特异性。在本研究中，我们分析了一种具有广泛中和作用的抗H3 N2流感病毒的人源抗体F005－126的表位及功能。对F005－126的Fab和血凝素所形成复合物的晶体结构研究表明，在血凝素的三聚体中，抗体跨越了其中两个血凝素单体所形成的交叉口，链接其球状顶端，并且将三个血凝素单体都链接起来。通过抗体重链骨架区3和三个互补决定区来识别两个多肽片段（部位L和R）和残基285位天冬氨酸链接的多糖。抗体结合到位点L （残基171～173、239、240）和R （残基91、92、270～273、284、285）主要是由多肽主链这些位点处的范德瓦尔斯力介导的，其次还可以通过HA1保守序列的一些侧链氢键来介导结合。此外，由F005－126识别的多糖在H3 N2病毒中均保守。 F005－126还可以阻止低pH 环境下介导的血凝素构象改变。一些新鉴定的保守型抗原表位，包括多糖，应该可以在人体中产生免疫原性，而且可以诱导产生抗H3病毒的广谱中和抗体。
作者：房明；江丽君 刊期： 2015年第05期
水疱性口炎病毒（ VSV）被广泛地用于疫苗载体及瘤细胞溶解剂的研究。但出于对安全性的考虑，大大限制了它在人体中的应用。归属于细胞因子的Ⅲ型λ干扰素（ IFN－λ）家族与IFN－α／β家族有着相同的信号转导路径，所以也能激发相似的抗病毒活性。不过，IFN－λ是通过一种细胞型特异性方式表达的独特的受体－复合物形式实现信号转导的，正是这个原因限制了它只对上皮屏障组织具有活性，尤其是呼吸道和胃肠道的上皮细胞。我们在此项研究中明确了由重组VSV表达的IFN－λ如何影响载体复制、传播及干扰素的免疫原性。此项研究表明， ；IFN－λ的表达大大减弱了细胞培养的VSV的致病性。在活体中鼻内给药后， IFN－λ限制了VSV在小鼠肺部的复制增值，也减少了病毒向其他器官的扩散。此外，尽管有这种减毒作用，在接受单次免疫后，疫苗载体获得了产生保护性CD8 T细胞及抗体应答的能力。这些发现向我们展示了一个减弱病毒性载体致病性的全新方法，并可将之运用到疫苗及瘤细胞溶解剂的研究中去。
作者：马燕妮；江丽君(校) 刊期： 2015年第05期
目的：研究不同条件下、不同生长期易致污染的支原体在固体培养基中的形态特征。方法通过改变支原体菌体浓度、培养时间及培养基组成，观察支原体在固体培养基中的形态变化。结果支原体菌体浓度小于103 cfu／mL时，培养至2～3天后可在固体培养基中形成典型的“油煎蛋”状形态，以蔗糖作为碳源培养支原体会导致葡萄糖发酵型支原体（肺炎支原体）不能在固体培养基中形成典型菌落，当使用牛血清代替马血清为支原体提供外源胆固醇时，猪鼻支原体在固体培养基中不能形成典型菌落。结论支原体的不同生长期、菌体浓度、培养基的组成都会使易致污染的支原体在固体培养基上的形态发生变化。
作者：傅元欣；魏然；宣俊文；于佳；王轶峰；姜宝芹；刘晓凡 刊期： 2015年第05期
在人类中，乙肝病毒（ HBV）是普遍也是主要导致肝病的传染性病原体。之前的调查研究确认了长期乙肝病毒感染的患者不能将HBV完全从肝细胞清除。形成长期感染的主要机制尚未被阐明。然而研究者相信，和能够成功清除HBV感染的患者相比，那些患者基因和免疫参数的不同，可能是长期感染的原因。有研究证明，趋化因子在调节免疫细胞迁移和活化中有重要作用，并在抗HBV的全面免疫应答中是至关重要的。 RANTES、MIP－1a和 MIP－1b是重要的CC 趋化因子，通过 CC 趋化因子受体5（ CCR5）发挥作用。几种免疫效应细胞表达这种受体，包括NK细胞、T淋巴细胞、吞噬细胞，在抗病毒（包括HBV）的免疫应答中，对调节免疫细胞的活化和迁移都有重要作用。因此，它的表达或功能的变化可能是与抗HBV免疫应答减弱有关。另外，有研究确定，外显子1中一个32碱基对缺失（Δ32）以及CCR5基因启动子区的3种多态性导致分子量的下调。之前的研究表明， CCR5的表达在乙肝中有所改变，但是在这个疾病中，变异的CCR5（Δ32）和CCR5启动子多态性的作用还有争议。本文着重描述了近期关于CCR5在免疫细胞的表达状态以及CCR5启动子多态性和感染HBV患者之间的关系。
作者：卓晓琴；江丽君 刊期： 2015年第05期
作者：《微生物学免疫学进展》编辑部 刊期： 2015年第05期
耐碳青霉烯类肠杆菌科细菌（ Carbapenem－resistant enterobacteriaceae，CRE）在临床中的分离率越来越高，在抗菌药物的选择性压力下，碳青霉烯酶耐药基因可位于不同的移动元件，在不同种属和同种属细菌之间播散，给临床抗感染治疗带来了极大的困难。对碳青霉烯酶耐药基因可移动元件进行了简要综述，旨在阐明CRE耐药基因传播机制，为CRE感染的预防、治疗及感染的控制提供了参考依据。
作者：杜娜(综述)；杜艳(审校) 刊期： 2015年第05期
目的：对门诊2709例病例的支原体培养标本进行泌尿生殖道解脲脲原体（ Ureaplasma urealyticum ，Uu）与人型支原体（ Mycoplasma hominis，Mh）感染情况及耐药性的分析，为临床的诊断及治疗提供参考依据。方法采用商品化试剂盒对2709例标本进行Uu、Mh半定量培养及药物敏感试验。结果2709例标本中总阳性率为56．15％，其中Uu占比39．87％、Mh占比8．08％、Uu和Mh共同阳性者占比8．19％，男性标本阳性率为47．78％、女性标本阳性率为66．26％。药敏结果显示，单独Uu感染者对喹诺酮类（5．00％～34．40％）、红霉素（42．80％）敏感率较低，而对四环素类（88．90％～95．00％）、交沙霉素（97．30％）敏感率较高。单独Mh感染者与Uu和Mh混合感染者耐药情况均较为严重，除四环素、强力霉素、交沙霉素、美满霉素敏感率在50％以上，对其余药物的敏感率均在50％以下。结论泌尿生殖道支原体感染以Uu感染为主，其中女性感染率高于男性；药敏结果显示感染者对四环素、强力霉素、交沙霉素、美满霉素敏感率较高，单独Mh感染者与Uu和Mh混合感染者耐药情况更为严重。
作者：张扬丽；蒋明栋；王智华；李静梅 刊期： 2015年第05期
微生物学免疫学进展杂志
主管:中华人民共和国卫生部
主办：中华预防医学会 兰州生物制品研究所
