汤呈怀;佘崇阳;万立华
目的:研究吴茱萸碱磷脂复合物水包油型纳米乳(evodiamine nanocomplex oil-in-water nanoemulation,OECNE)体外释放特性和在胃肠吸收情况.方法:采用透析法建立OECNE体外模型,用模型拟合法和相似因子法(f2)考察其体外释放行为;应用大鼠单向肠灌流模型研究其吸收情况.结果:在pH 1.2盐酸溶液和pH 6.8磷酸缓冲溶液中,OECNE的累积释放率均约为EDA的3倍,释放曲线均符合Weibull方程,f2说明OECNE能促进EDA释放;其吸收速率常数在胃部、十二指肠、空肠、回肠和结肠分别为EDA的2.32、2.74、3.36、4.13和2.74倍,有效渗透系数在4个肠段中分别为EDA的4.66、3.70、4.87和3.60倍,OECNE增加了在大鼠胃和不同肠段中药物的吸收.结论:OECNE改善了EDA的释放行为;OECNE提高了EDA的吸收.
作者:晏声蕾;胡江波;王薛;赵德璋;张景勍 刊期: 2018年第01期
肠易激综合征(irritable bowel syndrome,IBS)是以腹痛、腹部不适或排便异常为主要表现的一种功能性疾病.应激是机体受到内外源刺激后,机体的一种适应性自我保护反应.长期慢性应激从多个方面诱发或加重肠易激综合征.全文就慢性不良应激对肠易激综合征的多方面影响进行综述.
作者:梁世杰;裴丽霞;徐万里;李静;司鹤华;孙建华 刊期: 2018年第01期
目的:比较6His-SUMO融合的人全长环核苷酸磷酸二酯酶4B2(SF-hPDE4B2)及152-528aa截短突变体(ST-hPDE4B2)在大肠杆菌融合表达、亲和纯化及酶学特征,以明确ST-hPDE4B2用于筛选抗炎活性hPDE4B2抑制剂的优势.方法:分别将6His-SUMO融合到人全长PDE4B2基因编码区的N端和152-528aa截短突变体N端得到SF-hPDE4B2和ST-hPDE4B2;大肠杆菌BL21(DE3)诱导表达,Ni2+-NTA亲和层析纯化,用偶联碱性磷酸酶的孔雀绿定磷法测定酶活性.结果:纯化后ST-hPDE4B2比活性接近SF-hPDE4B2的40倍,活性收率超过100倍;SDS-PAGE和6His标签免疫印迹发现纯化后2种融合蛋白都有多种带6His标签的降解片段;测定咯利普兰[(R)-Rolipram]和罂粟碱的抑制常数表明,SF-hPDE4B2对(R)-Rolipram主要为高亲和力结合构象,而ST-hPDE4B2主要为低亲和力结合构象.结论:与SF-hPDE4B2相比,ST-hPDE4B2用于筛选抗炎活性hPDE4B2抑制剂可能更有优势.
作者:张祥;何姝;胡小蕾;廖飞;杨晓兰 刊期: 2018年第01期
目的:探讨全凭静脉麻醉联合超声引导下腹横肌平面(transverses abdominis plane,TAP)阻滞在腹腔镜胃肠道手术中的临床效果.方法:选取择期进行腹腔镜胃肠道手术的患者84例,按随机数字表法分为2组,每组42例.对照组采用全凭静脉麻醉,观察组在对照组基础上实施超声引导下TAP阻滞,比较2组视觉模拟评分法(visual analogue scale,VAS)评分、术后恢复情况及不良反应情况.结果:观察组术后1、4、8、12、24 h VAS评分较对照组均降低,差异有统计学意义(均P<0.05);手术48 h后,观察组第1次补救性镇痛时间为(11.67±1.23)h,较对照组的(4.32±1.21)h明显延长,差异有统计学意义(t=27.607,P=0.025);手术48 h后,观察组下床时间及胃肠道恢复时间与对照组比较,差异无统计学意义(P>0.05);观察组术后右肩疼痛12例(28.57%),与对照组16例(38.10%)比较,差异无统计学意义(x2=0.857,P=0.355);2组患者均未出现呼吸抑制、皮肤瘙痒、呕吐、恶心及精神障碍等不良反应.结论:在腹腔镜胃肠道手术中实施全凭静脉麻醉联合超声引导下TAP阻滞可有效减轻术后疼痛程度,延长第1次补救性镇痛时间,具有临床推广价值.
作者:冯兴龙;王涵;冯麟;刘红 刊期: 2018年第01期
目的:探讨外源性注射骨髓来源的血管内皮祖细胞(endothelial progenitor cells,EPCs)或基质细胞源性因子-1α(stromal derived factor-1 alpha,SDF-1α)或两者联合,比较性评估3种方法对大鼠肝移植术后缺血再灌注损伤(ischemia reperfusion injury,IRI)的影响.方法:LEWIS大鼠骨髓EPCs提取培养,流式表型鉴定,激光共聚焦功能鉴定;建立大鼠原位肝移植模型,随机分为5组:A组(假手术组),B组(手术组),C组(SDF-1α组),D组(EPCs组),E组(SDF-1 α±EPCs组);再灌注12h后处死各组大鼠,免疫组化检测肝组织再生以及肝细胞生长因子(hepatocyte growth factor,HGF)的表达情况;WB检测肝组织血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)、HGF、转化生长因子-β(transforming growth factor-beta,GF-β)、B细胞淋巴瘤/白血病-2(B cell lymphoma/lewkmia-2,Bcl-2)、含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶3(cysteinyl aspartate specific proteinase-3,Caspase-3)蛋白表达;ELISA检测VEGF、HGF、TGF-β表达.结果:LEWIS大鼠骨髓提取的EPCs CD34、CD133的阳性比例分别为78.32%、70.76%,同时具有结合ac-LDL和UEA-1功能的EPCs,阳性率达80%以上;SDF-1α诱导EPCs穿过的细胞数[(79.6±6.3)个]明显高于对照组[(36.2±2.9)个](P=0.000);各组大鼠肝组织中,C、D组肝组织HGF分泌和再生情况免疫评分明显高于A、B组(P=0.000),E组免疫评分明显高于C、D组(P=0.000);各组VEGF、HGF、TGF-β、Bcl-2、Caspase-3蛋白表达结果,C、D组VEGF、HGF、TGF-β、Bcl-2蛋白表达明显高于A、B组(P=0.000),E组VEGF、HGF、TGF-β蛋白表达明显高于C、D组(P=0.000),而C、D、E组Bcl-2蛋白表达比较差异无统计学意义.B、C、D组Caspase-3蛋白表达明显高于A组(P=0.000),而E组Caspase-3蛋白明显低于C、D组(P=0.000);ELISA结果与Western blot结果一致.结论:外源性联合应用EPCs和SDF-1α能有效保护肝移植缺血再灌注的损伤,诱导肝细胞再生,减少肝细胞凋亡.
作者:姜飞;吴皓;王孟皓;曹丁;吴涯昆;段世刚 刊期: 2018年第01期
目的:构建分化抑制因子-1 (inhibitor 1 of differentiation,Id1)重组腺病毒(recombinant adenovirus,Rad),并建立Id1过表达的小鼠动物模型.方法:在HEK293细胞中将腺病毒重组质粒AdEasy-Id1进行包装以获得Id1重组腺病毒(RAd-Id1);通过绿色荧光蛋白(green fluorescent protein,GFP)标记法测定腺病毒滴度;通过qRT-PCR和Western blot验证RAd-Id1感染的HepG2细胞中的Id1过表达效果,用MTS比色法检测RAd-Id1对HepG2细胞增殖的影响;通过尾静脉注射RAd-Id1的感染方式建立肝组织中过表达Id1的小鼠动物模型,病毒载量梯度实验分PBS空白组、RAd-GFP对照组及RAd-Id1实验组(n=5/组)以测定RAd-Id1感染小鼠的适合载量;病毒感染时间梯度实验每5d检测1次为1组,共7组(n=5/组)以测定感染小鼠的适合时间;通过Western blot检测小鼠肝组织中Id1的过表达效果及甲胎蛋白(alpha fetal protein,AFP)和癌胚抗原(carcinoembryonicantigen,CEA)的表达水平,再采用ELISA检测小鼠血清中Id1的免疫原性及AFP和CEA的表达情况.结果:成功包装获得RAd-Id1,测得其滴度为1.5×1011 GFU/mL;RAd-Id1感染HepG2细胞48 h和72 h后,Id1的转录和蛋白水平均明显升高(P<0.01);96 h时RAd-Id1实验组的MTS检测值较PBS空白组和RAd-GFP对照组(2.00±0.06 vs.1.18±0.05,2.00±0.06 vs.1.10±0.07;F=51.350,P=0.000)明显升高;Western blot结果显示:在RAd-Id1感染的小鼠肝组织中,Id1、AFP和CEA蛋白水平较PBS空白组和RAd-GFP对照组升高;ELISA实验结果表明:血清中AFP和CEA蛋白水平与RAd-Id1的载量呈正相关(rsAFP=0.903,PAPP=0.014;rs CEA=0.964,PCEA=0.002),不同载量RAd-Id1感染小鼠的血清中Id1抗体滴度无显著差异(尸>0.05).结论:成功构建了RAd-Id1及其介导的小鼠动物模型;RAd-Id1可作为细胞水平上研究Id1对肝癌影响的载体工具;AFP和CEA的升高提示Id1可能参与诱导AFP和CEA的表达.
作者:魏杰;张祥;王石磊;靳鑫;阳媛;师悦嫄;牛司强;汪德强 刊期: 2018年第01期
目的:MRI钆剂瘘管造影与动态对比增强磁共振成像(dynamic contrast enhanced MRI,DCE-MRI)联合使用,对高位复杂型肛瘘进行诊断,探讨其对高位复杂型肛瘘术前评估的指导意义.方法:收集2014年12月10日至2016年12月10日MRI平扫初步证实为高位复杂型肛瘘但细小内瘘口、分支瘘管显示不清的患者264例,首先行DCE-MRI检查,30 min后再行瘘管内注入钆特酸葡胺4 mL+生理盐水16 mL造影检查同步DCE-MRI扫描.分别对MRI平扫、DCE-MRI及瘘管造影+DCE-MRI诊断结果特异度及敏感度行约登指数、ROC曲线下面积(AUC)进行检验.结果:瘘管造影+DCE-MRI示高位复杂型肛瘘外瘘口、内瘘口及分支瘘管显示清晰,瘘管T1WI、T2WI上呈高信号;脓肿为不规则形或马蹄状,T1WI等、稍低信号,T2WI、脂肪抑制高信号.对照手术结果,瘘管造影+DCE-MRI对于术前诊断对于细小内瘘口及细小分支瘘管的诊断价值明显提高;MRI平扫对于细小瘘管显示约登指数为31.60%,曲线形面积为0.576,对于细小内瘘口约登指数为-23.70%,曲线形面积为0.176;DCE-MRI对于细小瘘管显示约登指数为69.40%,曲线形面积为0.603,对于细小内瘘口约登指数为-4.80%,曲线形面积为0.201;瘘管造影+DCE-MRI对于细小瘘管显示约登指数为87.80%,曲线形面积为0.798,对于细小内瘘口约登指数为79.50%,曲线形面积为0.898.结论:钆剂瘘管造影与DCE-MRI联合使用检查对临床高位复杂型肛瘘的术前评估具有较高指导意义.
作者:王军大;崔渺;李艳艳;任何;梅秀婷;冷静 刊期: 2018年第01期
目的:探讨B细胞淋巴瘤6B (B cell lymphoma 6 member B,BCL6B)对人结直肠癌细胞HCT116增殖、迁移的影响及机制.方法:采用定量聚合酶链反应(quantitative polymerase chain reaction,qPCR)和Western blot检测和比较人正常肠上皮细胞FHC及人结直肠癌细胞HCT116中BCL6B的内源性表达;用脂质体法将pcDNA3.1-BCL6B转入HCT116细胞,同时设转入空载体的对照组;运用MTT法、流式细胞术、划痕愈合及Transwell试验检测BCL6B对癌细胞增殖、周期及迁移能力的影响;采用Western blot检测细胞中β-连环蛋白(β-catenin)、磷酸化的糖原合成酶激酶-3β(p-GSK3β)、细胞周期蛋白(CyclinD1)、基质金属蛋白酶-7 (matrix metalloproteinase-7,MMP-7)和E-钙黏蛋白(E-cadherin)的表达.结果:qPCR和Western blot结果显示,与正常肠上皮细胞FHC相比,BCL6B在结直肠癌细胞HCT116中呈明显低表达(P=0.017);转染pcDNA3.1-BCL6B后,细胞内BCL6B表达水平明显升高(-0.000).与阴性对照组相比,BCL6B组HCT116细胞4d时的增殖活性降低41.79%(P=0.040),且G1期细胞百分比增加62.09% (P=0.001);同时,BCL6B组HCT116细胞48 h划痕愈合率及穿膜细胞数均明显减少(P=0.001).Western blot结果表明,BCL6B组HCT116细胞内β-catenin、p-GSK3β、CyclinD1和MMP-7的表达水平较阴性对照组分别降低65.66% (P=0.028)、62.03%(P=0.001)、60.87%(P=0.021)和50.88%(P=0.030),E-钙黏蛋白的表达升高63.64% (P=-0.018).结论:BCL6B可抑制结直肠癌细胞HCT116的增殖及迁移,其机制可能涉及Wnt/β-catenin通路的抑制.
作者:谷月;李爱芳;赵佳丽;谢佳卿;彭棋;陈露;黄茂;周兰 刊期: 2018年第01期
目的:评价自主研制的可吸收形状记忆聚氨酯(shape memory polyurethane,SMPU)腰椎间融合器(cage)在尸体腰椎单节段的生物力学特性.方法:将15具腰骶椎(L1~S1)标本随机分为3组:自体髂骨组(n=5),SMPU cage组(n=5),聚醚醚酮(polyetheretherketone,PEEK)cage组(n=5).通过腰椎侧方入路,摘除L3~4椎间盘髓核后植入3种内植物,在力学试验机上测试每组标本术前与术后的运动范围(range of motion,ROM)及轴向破坏载荷.结果:ROM结果显示:术前自体髂骨组、SMPU cage组及PEEK cage组在前屈、后伸、左侧弯、右侧弯、左旋转、右旋转6个方向上的ROM相比较,差异均无统计学意义(P>0.05).自体髂骨组在6个方向上的术后ROM均较术前明显增加(P<0.05);SMPU cage组在6个方向上的术后ROM均较术前明显减少(P<0.05);PEEK cage组在6个方向上的术后ROM均较术前明显减少(P<0.05).SMPU cage组与PEEK cage组术后在6个方向上的ROM均明显低于自体髂骨组(P<0.05);SMPU cage组与PEEK cage组术后在6个方向上的ROM相比较,差异无统计学意义(P>0.05).轴向压缩测试结果显示:PEEK cage组的破坏载荷较SMPU cage组和自体髂骨组明显增加(P=0.000),SMPU cage组的破坏载荷较自体髂骨组明显增加(P=0.000).结论:SMPU cage能满足腰椎椎间融合的初始稳定性,并能够承载腰椎的生理负荷.
作者:罗帅红;邓忠良;田冬冬;罗敏;罗彦凤 刊期: 2018年第01期
肠重复畸形是一种少见的先天性消化道畸形,胰腺表面肠重复畸形并囊肿形成则更为罕见[1-2].我院今收治1例该病患者,现一并综合国内外文献报道的病例进行相关分析与讨论,以提高对本病的认识.
作者:吴鹏;方路;梁博;王超;王军 刊期: 2018年第01期
目的:报告1例孤立性直肠结核患者的诊治过程,并综合国内外文献进行讨论,以提高对此病的认识.方法:对本院收治的1例孤立性直肠结核患者的临床表现、实验室检查、内镜及病理资料、诊断和治疗进行分析,并结合文献加以讨论.结果:本例患者以腹痛、排脓血便及消瘦入院,肠镜提示孤立性直肠巨大溃疡,病理检查未发现干酪样肉芽肿和抗酸杆菌,粪便细菌培养和结核杆菌聚合酶链反应(tuberculosis polymerase chain reaction,TB-PCR)阴性,结核菌素纯蛋白衍生物(tuberculin purified protein derivative,TB-PPD)+++,未见直肠外结核感染证据.诊断性抗结核治疗3个月后患者临床症状明显缓解,内镜下直肠溃疡较前好转,持续规范抗结核治疗15个月后痊愈,随访至今未见复发.结论:孤立性直肠结核临床罕见,缺乏特异的临床、影像及内镜下表现,易导致误诊.病理发现干酪样肉芽肿和抗酸杆菌阳性率低;结核菌素试验和诊断性抗结核简单、有效,对提高结核诊断率仍有重要意义.
作者:刘浏;罗夏朋;黄鹤;谌黄威;何海;贾柳萍 刊期: 2018年第01期
目的:在溺死尸体不同时间点模型中,筛选大鼠稳定表达的内参基因和探讨水通道蛋白5 mRNA(AQP-5 mRNA)的表达.方法:先建立溺死尸体不同时间点模型(0 min,n=6;15 min,n=6;4h,n=6;16h,n=6;48 h,n=6;72 h,n=6),提取样本总的RNA,逆转录合成cDNA,qRT-PCR定量候选内参基因,geNorm和NormFinder排序各候选内参基因的表达,筛选出稳定的内参基因,后定量目的基因AQP-5 mRNA的表达.结果:该模型中筛选出ACTB为稳定的内参基因,除72 h时间点,AQP-5 mRNA的表达均显著下调(15 min/0 min=0.51,P<0.05;4 h/0 min=0.53,P<0.05;16 h/0 min=0.63,P<0.05;48 h/0 min=0.81,P<0.05;72 h/0min=0.89,P>0.05).结论:本研究AQP-5 mRNA在大鼠溺死表达有一定阳性意义,有助于法医溺死鉴定.
作者:汤呈怀;佘崇阳;万立华 刊期: 2018年第01期
目的:筛选硅藻叶绿体核酮糖-1,5-二磷酸羧化酶大亚基(large subunit of ribulose-1,5-bisphosphate carboxylase oxygenase,rbcL)基因的特异性引物,建立溺死尸体组织内硅藻rbcL基因的聚合酶链式反应-毛细管电泳(polymerase chain reactioncapillary electrophoresis,PCR-CE)检测方法,探讨在溺死诊断中的应用价值.方法:采用荧光标记引物扩增硅藻rbcL基因,对21种标准藻株、5种浮游水生标准菌株、3种人体共生标准菌株和人类DNA扩增产物进行PCR-CE检测,验证引物特异性和灵敏度.检测溺死尸体组织样本中硅藻,并比对微波消解-真空抽滤-自动扫描电镜法(microwave digestion-vacuum filtration-automated scanning electron microscopy,MD-VF-Auto SEM)检测结果.结果:使用引物ND-rbcL对21种标准藻株、5种浮游水生标准菌株、3种人体共生标准菌株和人类DNA进行扩增,其中舟形藻、菱形藻、小环藻、变异直链藻、针杆藻和骨条藻6种硅藻的CE检测结果为阳性,DNA片段为197 bp,其他为阴性.6种硅藻DNA检测阳性的灵敏度分别为0.502、0.117、0.029、0.042、0.275和0.215 ng(20 μL扩增体系).PCR-CE方法检测35例尸体(3例陆地正常死亡尸体,2例水中发现非溺死尸体,30例溺死尸体)的组织样本,肺脏、肝脏和肾脏硅藻检出率分别为100%、63.3%和53.3%,检测总阳性率为83.3%.当溺水死亡尸体脏器组织内硅藻含量>10个/10 g时,使用MD-VF-Auto SEM方法检测,其检测总阳性率为100%,PCR-CE方法检测,其检测总阳性率为92.6%,两者对检测溺死尸体脏器中硅藻阳性率无统计学差异(x2=2.077,P=0.491);当硅藻含量<10个/10 g时,PCR-CE方法检测为阴性,与MD-VF-Auto SEM方法检测溺死尸体各种脏器中硅藻阳性率具有统计学差异(P<0.05).结论:基于ND-rbcL引物建立的PCR-CE法能快速检测硅藻rbcL基因,所需检材量小,易于推广,在溺死诊断中有较好地应用前景.
作者:彭帆;刘超;徐曲毅;刘向东;赵建;刘宏;李越;胡孙林;宋旭恒;李明;韩雅莉 刊期: 2018年第01期
目的:通过定点突变初步表征绿脓杆菌芳香硫酸酯酶(Pseudomonas Aeruginosa arylsulfatase,PAAS)序列-活性关系,识别通过迭代饱和突变提高突变体比活性的合适位点.方法:分析PAAS活性中心三维构象初步识别催化相关位点;定点突变获得突变体,重组表达后Ni2+-NTA亲和纯化,表征其酶学性质.结果:与野生型相比,R55、M72、G138、D317、K375等位点用常见氨基酸替换/突变都显著降低其催化活性;R55、D317和K375等突变显著降低底物选择性和/或热稳定性,而M72和G138突变主要改变其催化活性.结论:M72和G138适合作为通过迭代饱和突变实施定向进化的候选位点.
作者:李雨薇;袁梅;杨晓兰;廖飞 刊期: 2018年第01期
目的:用基因捕获技术在肝癌细胞SMMC7721细胞中寻找与肝癌侵袭和迁移相关的基因.方法:首先,将pU21质粒转染到肝癌细胞SMMC7721细胞,用G418筛选出单克隆稳定细胞系;其次,采用Transwell小室实验和划痕实验,检测这些单克隆细胞侵袭和迁移能力的变化;后,用5'-Full RACE实验、T克隆及基因测序检测这些细胞系中被pU21质粒捕获的基因.结果:成功获得了约300株稳定转染pU21质粒的单克隆细胞系,得到了约30株侵袭和迁移能力增强的细胞株和约40株侵袭和迁移能力减弱的细胞株.通过5'-Full RACE实验、T克隆及基因测序检测,证明了在A554细胞系中,被pU21质粒捕获的基因是long inter-genic non-protein coding RNA 52(LINC00052).结论:应用基因捕获技术筛选肝癌侵袭和迁移相关基因是可行的.
作者:熊冬梅;朱士胜;汤华 刊期: 2018年第01期
目的:对溴吡斯的明纳米乳(pyridostigmine bromide nanoemulsion,PBNE)在体外的释放行为和体内的药动学行为进行初步研究.方法:建立高效液相色谱法考察体外释放行为和体内药动学行为.结果:PNBE与溴吡斯的明(pyridostigminebromide,PB)在4种释放介质(pH1.2的盐酸溶液,pH6.8、pH7.4、pH7.8的磷酸缓冲溶液)中的体外释放行为相似,PBNE的MRT(0-h)值较PB增加0.98 h,PBNE的Cmax值是PB的1.55倍,PBNE的口服生物利用度是PB的1.82倍.结论:PBNE在不同介质中的体外释药行为相似,PBNE可改变体内的药动学行为,其口服生物利用度比PB好,PBNE具有一定的缓释作用.
作者:陈学梁;赵静;赵华;张馨;张景勍 刊期: 2018年第01期
目的:观察血浆置换(plasma exchange,PE)联合连续性血液滤过(continuous hemodiafiltration,CHDF)治疗肝衰竭前期(pre-liver failure,pre-LF)患者的临床疗效.方法:对49例肝衰竭前期患者临床资料回顾性分析,对照组为20例单纯内科综合治疗患者,治疗组为29例在内科综合治疗基础上进行PE联合CHDF治疗的患者.比较2组患者治疗1周后的血生化指标、临床转归等情况.结果:治疗组进行非生物型人工肝治疗(non-biologic artificial liver support system,NBALSS)后患者乏力、纳差、黄疸等症状得到改善,血C-反应蛋白(C reactive protein,CRP)[(19.04±11.37) mg/L vs.(54.81±37.60) mg/L]、白介素-6(inter-leukin 6,IL-6)[(17.01±9.86) pg/mL vs.(31.86±13.01) pg/mL]、谷氨酸转氨酶(alanine aminotransferase,ALT)[(88.59±51.06)U/L vs.(279.93±69.75) U/L]、总胆红素(total bilirubin,TBIL)[(67.39±35.22) μmol/L vs.(133.21 ± 26.52) μmol/L]均明显下降(t值分别为6.28、7.51、12.26、7.40,均P=0.00),血凝血酶原活动度(serum prothrombin activity,PTA)水平明显升高[(88.86±20.16)%vs.(45.70±3.47)%,t=8.81,P=0.00];与对照组比较,差异均有统计学意义[C-反应蛋白:(19.04±11.37) vs.(29.21±22.05),t=2.04,P=0.02;白介素-6:(17.01 ±9.86) vs.(31.37±11.02),t=4.26,P=0.00;谷氨酸转氨酶:(88.59±51.06) vs.(194.70±90.86),t=4.93,P=0.00;总胆红素:(67.39±35.22) vs.(103.63±69.65),t=2.12,P=0.02;血凝血酶原活动度:(88.86±20.16)% vs.(66.20±14.33)%,t=3.48,P=0.00].此外,治疗组患者1周后好转率为86.21%,高于对照组的55.0% (x2=5.94,P=0.015).29例治疗组患者中死亡1例,20例对照组患者中死亡2例.结论:血浆置换联合连续性血液滤过治疗肝衰竭前期疗效优于对照组,提高了患者近期的好转率.
作者:万克强;田文广;苏畅 刊期: 2018年第01期
目的:根据全国31个地区2010至2015年手足口病发病的时间序列特征,划分不同的疫情模式,为该疾病防控的统一规划和实施提供科学依据.方法:提取各地区手足口病发病率的时间序列特征,包括季节波动、趋势、自相关和混沌等;通过层次聚类分析,划分不同的时间序列疫情模式.结果:聚类分析共产生3类疫情模式,分别为非季节模式、单发季节模式和多发季节模式.结论:对非季节模式地区,需随时加强疾病监控,进一步分析其相关因素;对单发季节模式和多发季节模式,仅需在周期性高发来临时作好相应的预防措施,从而降低疾病大面积流行的可能性.
作者:周亮;陈虹汝;李高明;张彦琦;伍亚舟;易大莉;易东;刘岭 刊期: 2018年第01期
目的:初步研究78 kD的葡萄糖调节蛋白(the 78 kD glucose-regulated protein,GRP78)与乙型肝炎病毒(hepatitis B virus,HBV)的前S1蛋白(PreS1)的相互作用位点.方法:利用PCR技术扩增GRP78的基因,将扩增的目的基因克隆至pW28载体质粒,在大肠杆菌(Escherichia coli,E.coli)B834中表达,经过镍离子亲和层析柱纯化GRP78蛋白;将PreS1 3个截短片段的重组质粒(pGST-PreS1-X1/X2/X3)在B834中表达后,经过GST亲和层析柱纯化相应蛋白;利用蛋白质体外结合实验(pull down)、微量热泳动(microscale thermophoresis,MST)检测GRP78与PreS1 3个截短片段的相互作用.结果:成功构建重组质粒pW28-GRP78;获得GRP78蛋白及PreS1 3个截短片段的融合蛋白;pull down及MST实验验证了GRP78可以与PreS1的3个片段结合,且GRP78与GST-PreS1-X1结合效果好.结论:利用分子克隆技术及蛋白质表达纯化技术,获得GRP78蛋白及PreS1截短片段的融合蛋白,并初步筛选了PreS1与GRP78的相互作用位点,为后续研究打基础.
作者:靳鑫;王石磊;吴爽;张祥;魏杰;阳媛;师悦嫄;牛司强;汪德强 刊期: 2018年第01期
目的:观察铜绿假单胞菌(Pseudomonas aerltginosa,PA)分泌的信号分子N-3-氧代十二烷酰-L-同型丝氨酸内酯(N-3-oxododecanoy1-L-homoserine lactone,3-O-C12-HSL)阻碍单核细胞来源的树突细胞(monocytes derived-dendritic cells,Mo-DCs)成熟过程中长链非编码RNA(long non-coding RNA,lncRNA)表达谱的变化情况.方法:采用免疫磁珠法分选人外周血CD14+单核细胞,经重组人粒-单核细胞集落刺激因子和重组人白细胞介素-4诱导分化为Mo-DCs.不同因素处理Mo-DCs,实验组加入终浓度0.1 μg/mL的LPS和口终浓度为40 μmol/L的3-O-C12-HSL,对照组加入相应体积的含0.1%DMSO的PBS,模型组加入终浓度0.1 μg/mL的LPS.利用lncRNA芯片技术检测对照组、模型组和实验组间lncRNA表达谱的差异.对筛选数据进行分析处理,利用散点图分析2倍以上差异lncRNA在各处理因素间的总体变异情况,利用聚类分析研究表达差异5倍以上lncRNA的聚类情况.结果:与对照组和模型组相比较,实验组筛选出2倍以上表达差异的lncRNA为1 386条,其中上调表达的548条,下调表达的838条.筛选出具有5倍以上表达差异的lncRNA共153条,占2倍表达差异lncRNA的11.04%,其中上调表达的22条,下调表达的131条.散点图发现2倍表达差异的lncRNA总体分布呈集中趋势,存在特征性改变.聚类分析发现5倍表达差异的lncRNA能根据处理因素进行有效的分层聚类.结合GO分析和mRNA通路分析,差异lncRNA的相关基因可富集至PPAR信号通路、钙信号通路和NF-κB信号通路中.结论:3-O-C12-HSL作用于Mo-DCs后,lncRNA表达谱发生了特征性变化,表达差异的lncRNA可能参与了3-O-C12-HSL阻碍Mo-DCs成熟过程.
作者:李有强;张云燕;陈茶;徐建华;罗燕芬;肖倩;李沫;李启伟 刊期: 2018年第01期