李侃;李建华;曹冬妮;苏筠霞;刘天喜;王荣珍
目的:获得可对原代大鼠Leydig细胞的糖皮质激素受体(Glucocorticoid receptor,GR)产生干扰作用的含miRNA的重组腺病毒.方法:首先设计并构建针对大鼠GR基因的4对miRNA表达载体,将此4种miRNA表达载体经脂质体转染大鼠胚胎成纤维细胞(Rat embryonic fibroblast,REF),Western blot分析GR的表达变化,筛选出干扰效果佳的miRNA表达质粒.其次通过BP重组和LR重组,构建重组腺病毒质粒.后将重组腺病毒质粒转染293A细胞,包装扩增并检测腺病毒滴度,将合适滴度的重组腺病毒感染原代大鼠Leydig细胞,Western blot法检测重组腺病毒干扰原代大鼠Leydig细胞GR表达的效果.结果:重组腺病毒感染Leydig细胞的效率可达80%,与对照组相比,感染重组腺病毒的Leydig细胞,其GR蛋白表达显著减少.结论:本研究成功构建重组腺病毒,证实其对原代大鼠Leydig细胞中GR的表达具有特异性干扰效应.
作者:陈勇 刊期: 2011年第11期
目的:探讨中瘤坏死因子-α(Tumor necrosis factor-α,TNF-α)对3T3-L1脂肪细胞色素上皮衍生因子(Pigment epitheliumderived factor,PEDF)表达和分泌的影响.方法:体外培养和诱导分化3T3-L1前脂肪细胞.分别用不同浓度TNF-α (0.1、1、10、100 ng/ml)处理3T3-L1脂肪细胞24h,并选取10 ng/ml的TNF-α干预细胞3、6、12、24h,采用实时荧光定量PCR和ELISA技术检测3T3-L1脂肪细胞PEDF的mRNA表达和蛋白分泌情况.结果:①和对照组相比,不同浓度TNF-α对3T3-L1脂肪细胞PEDF的mRNA表达和分泌均有抑制作用,且浓度越大,其抑制效应越明显(P<0.05).②10 ng/ml的TNF-α干预3T3-L1脂肪细胞后,随着时间的延长,PEDF的mRNA表达逐渐降低,第12h达到低点(P<0.05).③10 ng/ml的TNF-α对其PEDF分泌的抑制率在第6h为15%,在第24h为33%(P<0.05).结论:TNF-α抑制3T3-L1脂肪细胞PEDF的表达和分泌,其抑制效应呈剂量和时间依赖性.
作者:夏伟;杨淑敏;罗梅;梅玫;宋颖;程庆丰;李启富 刊期: 2011年第11期
目的:探讨结肠癌细胞核受体PXR表达的变化对CPT-11化疗效果的影响.方法:用Western blot方法检测PXR蛋白在人结肠癌细胞株LS174T、HT29和HCT116中的表达.通过莱菔硫烷、利福平分别敲低或上调PXR受体的表达,利用MMT或流式细胞术研究其表达下调或上调对细胞增殖和凋亡的影响.结果:3株结肠癌细胞株LS174T、HT29、HCT116中,LS174T细胞的PXR表达水平高(P=0.000).莱菔硫烷处理后,LS174T细胞中PXR表达明显减弱(P=0.000),CPT-11作用后,细胞增殖明显受到抑制(P=0.013),对CPT-11敏感性增强;同时利用利福平处理后,LS174T细胞中PXR表达增强(P=0.000),CPT-11作用后,细胞增殖明显加速(P=0.019),对CPT-11敏感性降低.结论:结肠癌细胞核受体PXR表达的变化对于CPT-11化疗敏感性具有十分重要的影响,其可能在结肠癌耐药机制中具有重要作用.
作者:史祖宣;汤喻;李克;陈静;岳冬丽;樊青霞 刊期: 2011年第11期
目的:观察高能量聚焦超声(High intensity focused ultrasound,HIFU)治疗变应性鼻炎(Allergic rhinitis,AR)的疗效.方法:运用CZB型超声波鼻炎治疗仪,在鼻内镜下对220例按照2004年兰州会议AR诊断标准诊断为常年性变应性鼻炎(Perennial allergic rhinitis,PAR)患者进行鼻腔扫描,扫描部位分别为双侧下鼻甲、中鼻甲前部、鼻丘及鼻中隔前上部.按照2004年兰州会议“AR的治疗原则和推荐方案”,用记分法分别评定其疗效.结果:治疗后定期随访,3、6、12、18个月进行疗效评价.其中3个月显效率为68.2%(150/220),有效率为23.6%(52/220),无效率为8.2% (18/220),总有效率为91.8%(202/220);6个月显效率为60.6% (117/193),有效率为24.9%(48/193),无效率为14.5 (28/193),总有效率为85.5%( 165/193);12个月显效率为55.1%(59/107),有效率为17.8%(19/107),无效率为27.1%(29/107),总有效率为72.9%(78/107);18个月显效率为52.9%(18/34),有效率为20.6%(7/34),无效率为26.5%(9/34),总有效率为73.5%(25/34).结论:采用HIFU治疗AR,具有疗效可靠、无创、可重复性等优点.
作者:杨盈坡;安伟;李强 刊期: 2011年第11期
目的:探讨50 mg/kg剂量左旋多巴(L-dihydroxy-phenylalanine,L-dopa)对帕金森病(Parkinson disease,PD)大鼠神经行为学影响的动态变化.方法:采用经典的6-OHDA脑立体定向注射术建立大鼠PD模型,并将成功PD模型随机分成2组:PD模型组和L-dopa组,其中L-dopa组连续腹腔注射50 mg/kg剂量的L-dopa,共8周,并在不同时间点(2、4、6、8周)观察PD大鼠神经行为学(大鼠对侧旋转圈数、旋转启动时间、旋转持续时间、剂峰旋转圈数和大鼠AIM评分)变化.结果:随着L-dopa用药时间的延长,①大鼠对侧旋转圈数不断增加,且在6周时达到峰值,与2周比较,差异有统计学意义(P<0.05);②旋转启动时间不断减少,但差异无统计学意义(P>0.05);③旋转持续时间不断增加,且6、8周时与2、4周比较,差异均有统计学意义(P<0.05);④剂峰旋转圈数有不断增加趋势,且6周时与2周比较,差异有统计学意义(P<0.05);⑤AIM评分不断增加,其中6、8周时与2周比较,差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01),8周时与4周比较,差异有统计学意义(P<0.05).结论:50 mg/kg剂量的L-dopa对PD大鼠具有明显的神经毒性,模型动物具有典型的神经行为学改变且稳定可靠,可用于L-dopa毒副反应的研究.
作者:丁宏娟;何建成;王文武 刊期: 2011年第11期
目的:探讨FOXC1蛋白表达与复发性乳腺浸润性导管癌的临床病理特征间相关性.方法:采用免疫组化S-P法检测42例复发性乳腺癌石蜡组织中FOXC1蛋白的表达.结果:FOXC1蛋白在21例(50%)乳腺浸润性导管癌中表达,定位于胞核.FOXC1阳性表达与乳腺浸润性导管癌组织学分级相关(P<0.05),与复发性乳腺癌患者的耐药情况及患者辅助化疗后的PFS相关(P<0.05),与乳腺癌患者的年龄,淋巴结转移的数量以及原发肿块的大小无明显的统计学相关性(P>0.05).结论:FOXC1蛋白参与了复发性乳腺癌的耐药机制,但其可能与乳腺癌原发肿瘤的发生发展及淋巴结转移无关.
作者:贾海全;赵国强 刊期: 2011年第11期
甲硝唑氯己定洗剂具有抗菌消炎的临床作用,用于细菌、淋菌、霉菌或滴虫等病原体引起的各种阴道炎,国内未见甲硝唑氯己定洗剂安全性试验研究的相关文献报道,本试验的目的是按SFDA《化学药物刺激性、过敏性和溶血性研究技术指导原则》的要求,观察局部接触甲硝唑氯己定洗剂后所产生的刺激反应,观察给药部位可能出现的炎症反应、组织的变性和坏死等不良反应,评价甲硝唑氯己定洗剂的刺激性,为临床安全应用提供依据,具有一定的科学意义.
作者:余成浩;孙涛;冯业琼;廖建;李敏;陈西平;曾代文 刊期: 2011年第11期
目的:探讨高位颈椎原发性椎管内肿瘤的手术治疗及临床疗效.方法:对40例高位颈椎原发性椎管内肿瘤手术患者进行回顾性分析,分析临床资料,手术方法及术后疗效.结果:患者术后疼痛、神经根性刺激症状及颈髓压迫症状较术前明显改善,内固定无松动移位,颈椎稳定性好.结论:颈后入路半椎板或全椎板切除可以完整清除肿瘤,并加以坚强内固定及植骨融合治疗高位颈椎椎管内肿瘤切除,可获良好近期及远期疗效.
作者:钟华;卢畅;吕国华;李晶;陈威 刊期: 2011年第11期
目的:分析多种肿瘤标志物(Tumor marker,TM)与肺癌的相关性,筛选相关指标,为建立检测肺癌的小型蛋白芯片提供依据.方法:使用TM蛋白芯片系统,检测311例肺癌患者血清中多种TM:癌抗原125(Cancer antigen 125,CA125)、癌抗原153(Cancer antigen 153,CA153)、糖链抗原199 (Carbohydrate antigen,CA199)、癌胚抗原(Carcinoembryonic antigen,CEA)、甲胎蛋白(Alpha fetoprotein,AFP)、铁蛋白(Ferritin,FER)、游离型前列腺特异性抗原(Free prostate specific antigen,free-PSA)及前列腺特异性抗原(Prostate specific antigen,PSA)的水平.筛选出肺癌中阳性率高的的指标,采用Kappa检验比较其与TM蛋白芯片系统检测结果的一致性,寻找佳联检组合.结果:311例肺癌患者中TM升高主要集中在4项指标:CEA(41.5%)、CA153(15.2%)、CA199(20.9%)、CA125 (37.0%);Kappa检验得出,一致性极强的小型组合有5种,使用成本-效果分析法得出佳组合为CA125+CEA.结论:血清CEA和CA125水平升高对肺癌的诊断有较高的临床价值,选择CA125+CEA联合检测,可以在不降低检出率的情况下降低检测成本.
作者:赵顺林;胡卫东;徐闻博;刘越;吴洲清 刊期: 2011年第11期
目的:观察核孔蛋白88 (Nucleoporin 88,Nup88)在结直肠腺瘤中的表达,分析其与临床病理特征间的关系.方法:采用SP免疫组织化学法检测163例结直肠腺瘤、43例结直肠癌和23例正常肠黏膜组织中Nup88蛋白的表达,统计学分析比较3组间Nup88蛋白表达的差异,及Nup88表达与结直肠腺瘤临床病理特征间的关系.结果:Nup88蛋白在正常黏膜组、结直肠腺瘤组及结直肠癌组的阳性表达率分别为0%,43.56%,55.81%,差异有统计学意义(P<0.01).重度不典型增生的结直肠腺瘤中Nup88蛋白的阳性表达率明显高于轻、中度不典型增生者(60.71%vs 40%,P=0.044);Nup88的表达还与结直肠腺瘤的位置有关,腺瘤位于左半结肠及直肠者Nup88的表达明显高于右半结肠(P<0.017).结论:Nup88在结直肠腺瘤中的高表达提示Nup88可能与结直肠癌的发生、发展有关.
作者:张丽静;赵增仁;张志勇;郑铮;王园园;胡月明 刊期: 2011年第11期
目的:无血清悬浮培养生成5种人结直肠肿瘤细胞球,体外稳定传代培养,研究其在体外增殖、分化及转移等生物学特性.方法:人结直肠癌细胞SW480、SW620、LOVO、HT29和HCT116在添加了细胞生长因子的无血清培养基(Serum-free medium,SFM)中悬浮培养,稳定传代并诱导分化.选择其中HCT116细胞系用流式细胞技术检测单层细胞及其肿瘤细胞球干细胞标记分子CD133+的表达.Transwell小室实验、免疫荧光及RT-PCR分别检测HCT116单层细胞及其肿瘤细胞球的体外转移能力,以及间质化标记分子N-cadherin及Vimentin的表达.结果:5种人结直肠癌细胞系均在SFM中形成能稳定传代培养的肿瘤细胞球,其在含血清培养基(Semm supplemented medium,SSM)中重新贴壁生长并各自恢复亲代细胞的生物学特性.与HCT116单层细胞相比,HCT 116肿瘤细胞球中CD133+细胞比例显著增多,并具有更强的转移能力,以及高表达间质化标记分子N-cad-herin及Vimentin.结论:通过无血清培养可以生成人结直肠肿瘤细胞球,这些球体中富含肿瘤干细胞样特性的细胞.
作者:贾健锋;程勇;郑梦颖;饶明月 刊期: 2011年第11期
目的:探讨原发于前列腺的血管内大B细胞淋巴瘤(Intravascular large B cell lymphoma,IVLBCL)的临床病理特征及治疗效果.方法:对1例原发于前列腺的IVLBCL进行组织学观察、免疫组化染色检测和临床随访,并复习了文献报道的6例前列腺IVLBCL.结果:IVLBCL累及前列腺的患者中位年龄为68岁,患者常出现下尿路阻塞症状,体检发现前列腺肥大.前列腺组织病理活检发现前列腺间质小血管内异形的淋巴样细胞增生.免疫组化染色结果显示瘤细胞表达B细胞标记物CD20和CD79α,细胞增殖核抗原Ki67阳性率较高.患者在确诊为前列腺血IVLBCL后,接受CHOP化疗或联合利妥昔单抗治疗效果较好.结论:仅累及前列腺的IVLBL患者经手术切除前列腺并结合药物化疗预后较好.
作者:徐曼;杨清平;黄文炼;耿卫朴;陈瑜;王婷婷 刊期: 2011年第11期
目的:观察细胞松弛素B (Cytochalasin B,CB)预处理对小鼠卵母细胞玻璃化冻融后发育潜能的影响.方法:用浓度为0(对照)、5、10、20、40 μg/ml的CB分别预处理小鼠成熟卵母细胞后玻璃化冷冻,解冻后进行体外受精,观察卵母细胞的复苏率、受精率、6~8 cell胚胎形成率.结果:CB 20、40μg/ml预处理组复苏率高于对照组,差异有统计学意义(P<0.01),20μg/ml组与40μg/ml组组间比较差异无统计学意义(88.7% vs 87.6%,P=0.767);各组受精率、6~8 cell胚胎形成率差异无统计学意义(P>0.05).结论:浓度为20、40μg/ml的CB对小鼠成熟卵母细胞冻融复苏率有改善作用.
作者:唐宇铃;丘彦;幸贵邦;孟江萍 刊期: 2011年第11期
目的:探讨复方脑复康防治去卵巢后骨质疏松的效果.方法:4月龄Sprague-dawley (SD)雌性大鼠38只随机分为5组:基础组,6只,于实验前取材;假手术组,8只,给予生理盐水灌胃;去卵巢组,8只,去卵巢后给予生理盐水灌胃;已烯雌酚组,8只,去卵巢后给予已烯雌酚30 μg/(kg·d)灌胃;复方脑复康组,8只,去卵巢后给予吡拉西坦432mg/(kg·d)和司坦唑醇0.54mg/(kg·d)灌胃.连续灌胃90d后,处死大鼠并取左胫骨包埋、切片、染色后作静态和动态骨组织形态计量学测定.结果:与假手术组相比,去卵巢组骨小梁面积百分数(%Tb.Ar)、骨小梁厚度(Tb.Th)、骨小梁数目(Tb.N)和标记周长百分数(%L.Pm)均显著降低(P<0.01),骨小梁分离度(Tb.Sp)增加(均P<0.01);每毫米破骨细胞数目(Oc.N)和破骨细胞周长百分数(%Oc.Pm)均显著增加(P<0.01);骨形成率(BFR/BV)增加(P<0.05).与去卵巢组相比,已烯雌酚及复方脑复康都可使%Tb.Ar显著增加(均P<0.01),Tb.N显著增加(均P<0.01),Tb.Th增加(P>0.05,P<0.05);并使Tb.Sp显著降低(均P<0.01);使Oc.N和%Oc.Pm显著减少(均P<0.01).与已烯雌酚组相比,复方脑复康可以使胫骨骨小梁Tb.Th和%L.Pm增加(均P<0.05).结论:复方脑复康可以预防大鼠去卵巢后骨质疏松,其作用效应与雌激素相当,作用机制可能与复方脑复康促进骨形成,抑制骨吸收有关.
作者:黄健萍;林思恩;吴玲芝;崔燎;吴铁 刊期: 2011年第11期
目的:探讨高频超声在SD大鼠肾上腺区人神经母细胞瘤(Neuroblastoma,NB)移植瘤模型中的应用价值,分析超声测量结果与肿瘤实际生长情况的相关性.方法:建立SD大鼠荷瘤模型53只.肿瘤接种后分别于5d~6周,每4d随机选取5只SD大鼠行高频超声检查,观察肿瘤的形态、回声和边界,测量肿瘤大小,彩色多普勒超声观察肿瘤内血流分布情况.每次超声检查后剥离肿瘤,测量肿瘤实际大小,并行病理活检,对比两者的相关性.结果:肿瘤成瘤率为100%;超声观察肾上腺区移植肿瘤呈类椭圆形中低回声团块,5~13 d肿瘤生长旺盛,其内血供丰富,>13~17 d生长速度减缓,>17 d肿瘤开始逐渐缩小,29d后肿瘤内部出现液化坏死和钙化,血供减少;高频超声测量结果与肿瘤实际生长情况呈高度正相关(r=0.993,P<0.001).结论:高频超声能较准确监测SD大鼠肾上腺区人NB移植瘤模型的建立及成瘤后肿瘤生长情况,具有较高的实用价值.
作者:刘沁;王荞;全学模;王珊;向娟;白洁 刊期: 2011年第11期
目的:观察丹参(Salvia miltiorrhiza)对大鼠小肠缺血再灌注损伤(Ischemia reperfusion injury,IRI)中肾脏p38丝裂素活化蛋白激酶(p38 mitogen-activated protein kinases,p38MAPK)信号转导通路的影响.方法:雄性SD大鼠36只,随机分为空白组、缺血再灌注组、丹参处理组.采用钳闭大鼠肠系膜上动脉缺血再灌注模型.酶联免疫吸附实验(Enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)测定肾组织中肿瘤坏死因子-α(Tumor necrosis factor-α,TNF-α)和白介素- 1β (Interleukin-1β,IL-1β)的含量,蛋白印记(Western blot)法检测肾组织中磷酸化p38丝裂素活化蛋白激酶(Phospho-p38 mitogen-activated protein kinase,P-p38MAPKs)的表达;紫外分光光度法检测血浆二胺氧化酶(Diamine oxidase,DAO)的活性;HE染色形态学方法评价肠及肾组织损伤;血清生化分析仪检测尿素氮(Blood urea nitrogen,BUN)和肌酐(Crea,Cr).结果:缺血再灌注组与空白组比较,小肠及肾组织结构损伤严重,肾脏中p38MAPK、TNF-α和IL-1β表达明显增高,血浆DAO、BUN、Cr含量升高(P<0.01);丹参处理组与缺血再灌注组比较,肾组织中p38MAPK表达显著降低,肾组织中TNF-α和IL-1β含量减少,血浆DAO含量下降,小肠和肾组织结构损伤显著减轻.BUN、Cr明显降低(P<0.05).结论:丹参可减轻小肠缺血再灌注肾损伤;其机制与其抑制肾组织中p38MAPK信号转导通路的活化进而减少TNF-α、IL-1β的释放有关.
作者:田野;董哲 刊期: 2011年第11期
目的:研究clusterin(CLU)基因沉默对卵巢癌SKOV3细胞放射敏感性的影响.方法:靶向CLU基因的siRNA转染卵巢癌SKOV3细胞,Western blot法测定CLU基因蛋白表达水平.给予不同放射剂量(2、4、6Gy)处理后,通过MTT法及克隆形成实验检测卵巢癌SKOV3细胞的存活率及克隆形成率,流式细胞仪Annexin V/PI法检测凋亡率.结果:靶向CLU基因的siRNA特异性地从蛋白水平抑制了CLU基因表达.MTT及克隆形成实验结果显示卵巢癌SKOV3细胞的存活率及克隆形成率与放射剂量呈反比,剂量越大,存活率及克隆形成率越低,差异均具有统计学意义(P<0.05).流式细胞仪Annexin V/PI法检测结果表明:2Gy放疗后实验组细胞凋亡率明显增加,达(24.32±1.75)%,较单纯放射组升高约12%,差异具有明显统计学意义(P<0.05).结论:CLU基因沉默可以明显增强卵巢癌SKOV3细胞对放射的敏感性,为卵巢癌放疗增敏基础研究提供了新的靶点.
作者:黄锣;张幸平;陈诚;罗茜;吴永忠 刊期: 2011年第11期
1临床资料患者,男,30岁,婚后2年未避孕女方未孕,否认家族遗传病史,否认有毒物质接触史,否认外伤史及手术史.体格检查:胡须正常,喉结存在,乳腺未见发育.阴毛分布正常,阴茎长约6 cm,双睾丸体积各约15ml,质地可,双精索静脉未触及曲张,双输精管存在.精液检查:第一次精液常规精液量3.0 ml,pH=7.4精子密度1.6×106个/ml,精子活力8.1%;第2次精液常规精液量3.0 ml,pH=7.2,精子密度9.1×106个/ml,精子活力9.7%.性激素水平检查:促卵泡刺激素5.29 mIU/ml(参考值1.27~18.96mIU/ml),促黄体生成素3.81 mIU/ml(参考值1.24~8.62 mIU/ml),睾酮4.10 ng/ml(参考值4.14~7.26ng/ml),雌激素42 pg/ml(参考值20~75 pg/ml),泌乳素10.32ng/ml(参考值2.64~13.13 ng/ml).外周血染色体核型检查结果为45,XY,rob(13;15)(q10;q10),inv(9)(p11q13)(图1).
作者:沙艳伟;宋岳强;孔辉;邱乒乒;郑仁瑞;韩斌 刊期: 2011年第11期
目的:研究N5,10-亚甲基四氢叶酸还原酶基因(Methylenetetrahydrofolate reductase,MTHFR)C677T多态性在宁夏回、汉族高血压人群中的分布差异及其与原发性高血压(Essential hypertension,EH)之间的关系.方法:收集回、汉族EH患者146例和155例以及回、汉族健康体检正常血压者(Normal tensive,NT) 112例和140例,采用聚合酶链反应-限制性片段长度(Polymerase chain reaction-restriction fragment length polymorphism,PCR-RFLP)多态性技术分析检测MTHFR基因多态性.结果:回、汉族EH组间比较基因型频率及等位基因频率均无统计学差异(P>0.05).回、汉族NT组间比较基因型频率和等位基因频率亦无统计学差异(P>0.05).回族EH组TT基因型频率及T等位基因频率均高于回族NT组(P<0.05).汉族EH组变异型TT+CT及T等位基因频率均高于汉族NT组(P<0.05).二项逐步Logistic回归结果显示,TT基因型为EH的独立危险因素(OR=2.34,95%CI为1.363~4.016,P=0.002).结论:MTHFR基因C677T多态性在回、汉族人群之间无种族差异;该位点多态性与宁夏地区回、汉族人群EH发病具有相关性,T等位基因有可能是EH的遗传易感基因.
作者:马萍;覃数;刘海燕;徐清斌 刊期: 2011年第11期
目的:了解脊髓损伤后雄性大鼠前列腺、附睾、睾丸细菌感染及IL-1、TNF-α、SOD蛋白的表达情况.方法:80只SD大鼠采用随机数字法分为对照组(n=40)和实验组(n=40),采用改良Allen法建立脊髓损伤动物模型,分别喂养1、2、4、8、16 d,2组均于每个时间点摘取8只大鼠的前列腺、附睾、睾丸组织进行细菌培养和免疫组织化学SABC法检测白介素-1(Interleukin-1,IL-1)、肿瘤坏死因子-α(Tumor necrosis factor-α,TNF-α)、超氧化物歧化酶(Superoxide dismutase,SOD)的表达.结果:与对照组相比,实验组前列腺、附睾细菌培养阳性数显著提高(P<0.05),大肠杆菌的检出率高于其他细菌;睾丸IL-1、TNF-α表达明显增多(P<0.05),实验组间以术后第4天表达水平高(P<0.05);SOD表达无明显差异(P>0.05).结论:脊髓损伤后大鼠前列腺、附睾易受到以大肠杆菌为主的细菌感染,睾丸炎性反应增强,生殖系抗氧化反应可能很弱.
作者:杨春林;王明;邓远忠;田禄海 刊期: 2011年第11期