学术投稿

高效液相色谱法测定心肌腺苷酸含量

陈建斌;饶邦复;周远大;何海霞

关键词:高效液相色谱法, 腺苷酸
摘要:目的:用改良高效液相色谱法测定小鼠心肌腺苷酸含量.方法:ODSC18柱,检测波长254nm.甲醇-50mmol/L磷酸盐(1:99)缓冲液(pH6.07)为流动相.结果:心肌ATP、ADP和AMP平均回收率分别为101.1%±9.3%、94.8%±10.6%及98.3%±5.7%;日内RSD分别为3.5%、6.9%和4.8%;日间RSD分别为6.4%、8.6%及8.2%.结论:该方法简便、快速、灵敏.采用该法发现病毒性心肌炎小鼠心肌ATP、ADP和AMP含量降低.
重庆医科大学学报杂志相关文献
  • VEGF、CD44v6及Ki67在非小细胞肺癌组织中的表达

    目的:为探讨血管内皮生长因子(VEGF)、淋巴细胞分化抗原(CD44v6)及细胞核增殖抗原(Ki67)在非小细胞肺癌(non-small cell lung carcinoma,NSCL)组织中的表达.方法:采用SP免疫组织化学方法观察VEGF、CD44v6及Ki67在62例NSCLC组织的表达.结果:VEGF、CD44v6及Ki67在NSCLC组织中阳性表达率均明显高于癌旁正常组织,P<0.01,它们的表达与临床分期及有无淋巴结转移有明显相关,Ⅲ-Ⅳ期NSCLC组织中此3项指标均明显高于Ⅰ-Ⅱ期,有淋巴结转移组其阳性率明显高于无淋巴结转移组,P<0.05;VEGF、CD44v6及Ki67阳性的患者3年生存率均明显低于阴性者.结论:通过这3个指标的检测,可以判断和预测NSCLC患者的预后及指导其临床治疗.

    作者:张桂蓉;梅同华 刊期: 2003年第04期

  • HLA-DQA1基因多态性与儿童Graves'病的相关性研究

    目的:分析重庆地区汉族儿童Graves'病(Graves'disease,GD)与人类白细胞抗原DQA1基因(HLA-DQA1)多态性的相关性.方法:用聚合酶链反应-单链构象多态性(PCR-SSCP)及DNA测序方法,对已经确诊的重庆汉族GD患儿85例和正常对照组50名儿童的外周血白细胞基因组DNA的HLA-DQA1基因多态性进行分析.结果:在GD组和对照组中检测到7种单链构象,分别标为a b c d ef g带型.GD组中d(HLA-DQA1*0102)、f(HLA-DQA1*0302/0501)两带型频率(分别为43.5%,VS 8.0%;27.0%VS 8.0%)显著高于正常对照组(χ2=18.79,P=0.001,RR=8.86;χ2=6.80,P=0.009,RR=4.27),而b带型(HLA-DQAt*0101/0301)频率(8.2%VS 52.0%)显著低于正常对照组(χ2=29.43,P<0.001,RR=0.08).结论:HLA-DQA1*0102和HLA-DQA1*0302/0501可能与GD易感性相关,而HLA-DQA1*0101/0301可能与GD的保护性相关.提示上述3基因位点可能分别是重庆地区汉族儿童GD的易感基因和保护基因.

    作者:程昕然;邓蕾丽;熊丰;朱岷 刊期: 2003年第04期

  • 结节型肝癌的螺旋CT三期扫描

    目的:比较结节型肝细胞癌(HCC)在螺旋CT增强扫描中,其动脉期、门脉期、延迟期的病灶检出率.方法:30例结节型Hcc行螺旋CT检查,先平扫,再以3rnl秒团注对比剂150ml,分别作动脉期(注射后25s)和门脉期(注射后60~70s)、延迟期扫描(注射后4~6min).观察病灶的强化方式,统计各期的病灶检出率.结果:30例中发现肿瘤病灶51个,平扫、动脉期、门静脉期、延迟期扫描的病灶检出率分别是23.5%、84.3%、66.7%、72.5%.结论:螺旋CT增强扫描能显示结节型HCC的强化特点,三期结合可明显提高病灶的检出率.

    作者:文明;朱明霞;郭幼文 刊期: 2003年第04期

  • 重庆地区先天性心脏病家系筛查的初步分析

    目的:对重庆地区先天性心脏病(简称先心病)的家系进行筛查,以探讨先心病家系的遗传关系.方法:在群体调查中收集重庆地区资料凡一个家系中有2例及2例以上先心病患者,对高发家系绘制家系谱图,对无证者及其一、二级亲属成员逐个筛查,填写个案调查表,对高发家系进行分析.结果:调查了4387个家系中有21个高发家系,其中亲属患者的病种与先证者不完全一致,符合率为33.33%(7/21).一、二级亲属先心病先证者条件患病率,其中一级亲属为16.49%(16/97),二级亲属先证者条件患病率为1.89%(5/265),一、二级亲属先证者条件患病率比较,差异有显著性(χ2=27.73,P<0.001).采用EmeryAEH分离分析法对高发先心病的遗传方式进行分析,结果符合常染色体单基因显性遗传,但同胞数不符合自然状态,故不能肯定其常染色体显性遗传方式;常染色体隐性遗传因剩下的家系样本太少,难以预测;而性连锁遗传中,Y连锁伴性遗传和X连锁遗传,与实际调查不符,可排除这种遗传方式.结论:重庆地区先心病家系调查尚未发现地区差别,但有家族聚集现象,其亲属发病率高低与血缘关系近远相关,与先证者血缘关系越近的亲属先证者条件患病率越高;同时,由于我们的调查在独生子女或双胎的状态中进行,不符合自然状态,为遗传流行病学研究带来新的问题,需要探索新方法应用于临床.

    作者:陈沅;余更生;田杰;桂永浩;江德勤;钱永如;魏光辉 刊期: 2003年第04期

  • 经鼻盲探气管内插管在颌面外科麻醉中的应用

    目的:探讨经鼻盲探气管内插管用于颌面外科手术全麻插管的效果.方法:在安定镇痛麻醉(NLA)下经鼻盲探气管内插管术应用于1000例颌面部各类手术麻醉.结果:在1000例患者中10min内顺利完成插管占73.5%,11~20min内完成的较困难插管占21.2%,21~30min完成的困难插管占4.5%,气管切开后插管仅占0.8%.插管期间患者无明显不适反应,术后无回忆,心血管副效应轻.结论:此方法能安全有效地解决颌面部手术许多疑难插管问题.

    作者:罗玉琳;张青 刊期: 2003年第04期

  • 人参总皂甙诱导人骨髓基质细胞表达GM-CSF的实验研究

    目的:研究人参总皂甙(TSPG)对人骨髓基质细胞表达GM-CSF的影响及其与人粒单系血细胞发生的关系.方法:采用造血祖细胞与骨髓基质细胞体外培养、造血生长因子生物学活性检测、免疫细胞化学和核酸分子原位杂交等技术.结果:TSPG能显著刺激粒单系造血祖细胞(CFU-GM)增殖;经TSPG诱导制备的骨髓基质细胞条件培养液富含GM-CSF样活性;TSPG能显著促进骨髓基质细胞的GM-CSF蛋白和mRNA表达.结论:TsPG可能通过直接和/或间接途径促进造血诱导微环境中的骨髓基质细胞合成和分泌GM-CSF,进而促进CFU-GM的增殖分化.

    作者:陈笛;王莎莉;王亚平;王璐;姜蓉 刊期: 2003年第04期

  • 反流性食管炎与幽门螺杆菌感染关系的探讨

    目的:探讨反流性食管炎与幽门螺杆菌感染的关系.方法:选取胃镜诊断为食管炎的病人1488例,根据食管炎的Tytagat内镜分级将其分为Ⅰ~Ⅴ五级;取胃黏膜组织,用HP检测试纸行快速尿素酶测定,对照组慢性胃炎的病人1600例;消化性溃疡的病人1600例.结果:反流性食管炎组幽门螺杆菌感染率63.04%.胃炎组感染率65.15%,同反流性食管炎组相比无差异(P>0.05).溃疡组感染率为74.50%(P<0.01).Ⅰ~Ⅴ级反流性食管炎中反流性食管炎愈重HP检出率愈低(P<0.01);反流性食管炎严重程度同HP感染严重程度成负相关(P<0.01).结论:1)幽门螺杆菌感染同反流性食管炎发病的关系尚有争议.2)幽门螺杆菌在反流性食管炎的发病过程中起着保护的作用.3)反流性食管炎患者抗幽门螺杆菌的治疗应在反流性食管炎经治疗后症状消失而药物未停的情况下,谨慎进行.

    作者:张俊文;王丕龙 刊期: 2003年第04期

  • c-erbB2反义寡核苷酸对人卵巢癌细胞放射敏感性的影响

    目的:探讨癌基因c-erbB2的反义寡苷酸对人卵巢癌细胞放射敏感性的影响.方法:设立c-erbB2正义寡核苷酸组和非处理组作对照,用RT-PCR检测卵巢癌细胞处理前后c-erbB2表达水平的变化.用MTT法及平板克隆形成试验检测人卵巢癌细胞株SKOV3在脂质体c-erbB2反义寡核苷酸作用前后受60Coγ射线不同剂量照射后的细胞存活分数和集落形成率.结果:c-erbB2反义寡核苷酸能抑制c-erbB2癌基因的表达,经脂质体介导的c-erbB2反义寡核苷酸作用的卵巢癌细胞经γ射线照射后其存活分数和集落形成率较转染正义寡核苷酸组及单纯照射组明显下降(P<0.01),而转染c-erbB2正义寡核苷酸组的存活分数和集落形成率与单纯照射组相比无明显差异(P>0.05).结论:c-erbB2反义寡核苷酸通过抑制c-erbB2的表达降低人卵巢癌细胞株SKOV3放射抗拒性.该作用可能与c-erbB2反义寡核苷酸抑制了引起细胞辐射抗拒的细胞信号转导途径有关.

    作者:任庆兰;吴永忠;刘渝;李少林 刊期: 2003年第04期

  • 胎盘瘦素mRNA表达水平及其与胎儿生长发育的相关性研究

    目的:探讨胎儿体内瘦素的来源,胎盘组织瘦素mRNA的表达水平与胎儿生长发育的关系.方法:收集52例正常产妇的胎盘组织,依据其新生儿出生体重分为:大于胎龄儿(LGA)14例,适于胎龄儿(AGA)21例,小于胎龄儿(SGA)17例.采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)技术结合荧光定量分析,检测胎盘组织瘦素mRNA表达水平,分析胎盘组织瘦素mR-NA表达水平与胎盘重量、新生儿体重、新生儿Ponderal指数、孕妇体重、孕妇体重指数(BMI)、性别的关系.结果:LGA胎盘组织瘦素mRNA的表达水平高于AGA(P<0.001),AGA胎盘组织瘦素mRNA的表达水平高于SGA(P<0.05),胎盘组织瘦素mRNA表达水平与胎盘重量(r=0.54)、新生儿体重(r=0.59)、新生儿Ponderal指数(r=0.56)呈正相关,与孕妇体重(r=0.21)和孕妇体重指数(r=0.18)无明显相关.男婴和女婴胎盘组织瘦素mRNA表达水平的差异无显著性(P>0.05).结论:胎盘组织表达和分泌的瘦素是胎儿体内瘦素的来源之一.胎盘瘦素mRNA表达水平与胎儿生长发育有关.

    作者:漆洪波;胡丽娜;吴味辛 刊期: 2003年第04期

  • 替勃龙改善绝经期功能性消化不良症状

    目的:探讨替勃龙能否改善绝经期功能性消化不良患者临床症状及其相关机制.方法:143例绝经期功能性消化不良患者随机分成3组,分别给予替勃龙、西沙必利及替勃龙+西沙必利,治疗4周,观察治疗前后各组患者上腹胀痛、餐后胀满、早饱、暖气等临床症状积分的变化.在随机分成的3组中再随机各抽出20例患者治疗前后测定胃30min排空率及胃半排空时间,观察治疗前后胃动力的变化.结果:3组药物治疗后2周和4周上腹胀痛、餐后胀满症状积分均明显下降.西沙必利治疗后2周和4周对早饱、暖气症状无明显缓解,替勃龙及替勃龙+西沙必利则对所观察的所有症状均有明显缓解,替勃龙改善早饱和嗳气症状优于西沙必利,但与西沙必利合用无增强效应.3种药物治疗后,胃30min排空率均明显增加、胃半排空时间缩短,与治疗前比较有显著差异(P<0.05),但3种治疗方案之间无显著性差异(P>0.05).结论:替勃龙能通过增强胃动力,明显改善部分绝经期功能性消化不良患者的临床症状,疗效优于促动力药.

    作者:古赛;唐承薇 刊期: 2003年第04期

  • 三苯氧胺对大鼠乳腺增生形态学的影响

    目的:探讨不同剂量的三苯氧胺(TAM)对实验性乳腺增生症形态学的影响.方法:用雌二醇和黄体酮诱导Wistar大鼠乳腺增生动物模型.180只雌性大鼠随机分为六组:A组:空白对照组,B组:模型对照(单用性激素)组,C组:性激素加TAM(166.7μg)组,D组:性激素加TAM(333μg)组,E组:性激素加TAM(500μg)组,F组:性激素加TAM(667μg)组,喂养2个月后,经光镜及电镜观察.结果:光镜观察:C组、D组用药前后P>0.05,无明显差别.E组、F组P<0.01,用药前后对比有显著差别.说明E组及F组剂量的TAM有明显抑制乳腺增生的作用.结论:三苯氧胺有抑制雌二醇和黄体酮诱导的Wistar大鼠乳腺增生的作用,尤E组及F组明显.

    作者:甘长清;吴凯南;苏新良 刊期: 2003年第04期

  • 胚胎心肌细胞移植治疗心脏病的研究进展

    Soonpaa等[1]1994年首次报道了将胎鼠心肌细胞植入成鼠心肌内获得存活、增殖,并与宿主心肌细胞间建立了细胞连接.

    作者:赵辉;韩璞 刊期: 2003年第04期

  • 131I治疗前后甲亢患者外周血淋巴细胞CAR、MNR、FS及血清Tg含量变化的研究

    目的:研究甲亢患者131I治疗前后外周血淋巴细胞染色体畸变率(CAR)、微核率(MNR)、脆性表达率(FS)的变化及其血清甲状腺球蛋白含量与FS的关系.方法:本文对100名甲亢患者在131I治疗前1周,治疗后7天、3个月、6个月分别进行外周血淋巴细胞培养(Tcl99),观察CAR(CNAR、CSAR)、MNR、FS的变化;同时应用RIA法测定血清Tg含量.结果:131I治疗后7天,CNAR、CSAR、MNR及FS明显增高(P<0.005~0.05),其后逐渐下降,CNAR在131I治疗后3个月、CSAR和FS在131I治疗后6个月降至治疗前水平(P>0.05).血清Tg水平在治疗后7天明显升高(P<0.01);治疗后3个月降至治疗前水平(P>0.05).结论:131I治疗甲亢患者可诱发人体细胞遗传物质即染色体一定程度的损伤,但这种损伤是暂时的、可恢复的.血清Tg含量的变化与Fra8q22表达频率可能存在一定的关系.

    作者:郭玉萍;唐吟宇;张静 刊期: 2003年第04期

  • 大鼠骨髓巨噬细胞的分离,纯化,培养以及鉴定

    目的:为深入研究骨髓巨噬细胞的生物学功能,探索一种简便的骨髓巨噬细胞的分离,纯化和培养的方法.方法:分离获取大鼠骨髓细胞,在60%DMEM培养液,20%马血清,20%(v/v)L929培养上清的诱导条件下进行体外贴壁培养,6~7天时获得纯度较高的贴壁细胞.采用倒置显微镜下观察生活状态、Wright′s染色光镜观察、电子显微镜观察检测贴壁细胞形态学;酸性磷酸酶及非特异性酯酶染色测定细胞内酶的表达;吞噬鸡红细胞及墨汁颗粒实验检测其吞噬功能;免疫细胞化学染色观察细胞表面标志等生物学技术鉴定培养的贴壁细胞性质.结果:获得高纯度的巨噬细胞,且具有良好的吞噬功能,并且具备巨噬细胞的形态特征,特有的水解酶类及特有的表面标志-CD68.结论:本法是一种简易实用的体外分离、纯化、培养骨髓巨噬细胞的方法.

    作者:李静;王亚平 刊期: 2003年第04期

  • 丹参注射液对腹腔感染状态下胃粘膜Na+-K+-ATPase活性和电位差的影响

    目的:探讨丹参注射液对严重腹腔感染状态下大鼠胃粘膜Na+-K+-ATPase活性变化和电位差的影响.方法:利用大鼠盲肠结扎穿孔造成腹腔严重感染动物模型,应用生化法检测穿孔前和穿孔后3h、6h、12h、24h、48h各时相大鼠胃粘膜Na+-K+-ATPase活性.应用电生理记录仪检测穿孔前和穿孔后3h、6h、12h、24h、48h GTPD变化.结果:盲肠穿孔后3hNa+-K+-ATPase活性显著降低(P<0.05),12h降至低(P<0.01),仅为对照组的48.5%,48h仍末恢复正常;丹参组12h、24h Na+-K+-ATP酶活性比感染组显著升高(P<0.05).GTPD穿孔后3h即有下降,6h下降显著(P<0.05),12h下降至低(P<0.01),24h和48h仍然显著低于对照组(P<0.05,P<0.05);丹参组12h、24h比感染组明显升高(P<0.05).结论:严重腹腔感染状态下胃粘膜Na+-K+-ATPase活性降低可能是引起胃粘膜屏障功能受损的原因之一.早期应用丹参对有效地预防应激性溃疡的发生有重要的临床意义.

    作者:张茂;张超;杨宗诚 刊期: 2003年第04期

  • 人幽门螺杆菌热休克蛋白A编码基因的克隆及序列分析

    目的:获取含人幽门螺杆菌(Hp)热休克蛋白A编码基因并构建其重组载体,进行核苷酸序列分析,为在E coli BL21中表达,疫苗的开发奠定基础.方法:利用分子克隆技术从Hp DNA染色体中,扩增热休克蛋白A编码基因片段.将目的基因与pET32a(+)同时经kpnⅠ、BamHⅠ双酶切、纯化、连接后.转化含有目的基因的重组载体,进行序列分析.结果:经酶切、测序分析表明,插入的基因片段为Hp热休克蛋白A编码基因,与GenBank的报道相比较,有1.4%的bp发生变异,1.6%的氨基酸残基改变.其同源性高达98%.结论:成功地克隆了Hp热休克蛋白A编码基因,为Hp蛋白质疫苗的研制和快速诊断试剂盒的开发奠定了良好的基础.

    作者:姜政;黄爱龙;蒲丹;陶小红;王丕龙 刊期: 2003年第04期

  • 高效液相色谱法测定心肌腺苷酸含量

    目的:用改良高效液相色谱法测定小鼠心肌腺苷酸含量.方法:ODSC18柱,检测波长254nm.甲醇-50mmol/L磷酸盐(1:99)缓冲液(pH6.07)为流动相.结果:心肌ATP、ADP和AMP平均回收率分别为101.1%±9.3%、94.8%±10.6%及98.3%±5.7%;日内RSD分别为3.5%、6.9%和4.8%;日间RSD分别为6.4%、8.6%及8.2%.结论:该方法简便、快速、灵敏.采用该法发现病毒性心肌炎小鼠心肌ATP、ADP和AMP含量降低.

    作者:陈建斌;饶邦复;周远大;何海霞 刊期: 2003年第04期

  • STAT3与VEGF在非小细胞肺癌中的表达及关系

    目的:探讨非小细胞肺癌中STAT3蛋白与VEGF表达的关系,以进一步探讨肿瘤的发生及转移机制.方法:利用SABC免疫组织化学技术检测40例非小细胞肺癌(NSCLC)组织中STAT3蛋白和VEGF的表达.结果:(1)STAT3在低分化肺癌组织中的表达明显高于高分化肺癌组织,在有淋巴结转移肺癌组织中的表达明显高于无淋巴结转移肺癌组织,与肿瘤的大小及组织学类型无关.(2)VEGF在直径≥3cm肺癌组织中的表达明显高于直径<3cm肺癌组织,在有淋巴结转移肺癌组织中的表达明显高于无淋巴结转移肺癌组织,与肿瘤的组织学类型及分化程度无关.(3)STAT3与VEGF表达呈显著正相关.结论:本组资料提示STAT3与VEGF可能在肺癌的发生及转移中发挥重要作用.二者之间的相关性证实VEGF基因直接由STAT3蛋白调节的论点.由此也为目前肿瘤抗血管生成治疗的研究提供了新的证据.

    作者:胥文春;罗春丽;冯文莉;林晓;唐敏 刊期: 2003年第04期

  • 乳腺原发性恶性淋巴瘤诊断和治疗

    目的:探讨乳腺原发性恶性淋巴瘤的诊断和治疗.方法:总结收治的2例乳腺原发性恶性淋巴瘤.结果:2例病人经术中冰冻、石腊切片和免疫组化确诊,治疗后随访无复发征象.结论:乳腺原发性恶性淋巴瘤主要靠病理学检查确诊,并根据临床分期采用合理的综合治疗,以提高生存率.

    作者:孙治君;姚榛祥;管小琴 刊期: 2003年第04期

  • 大鼠心肌缺血预处理中COX2与P38MAPK间信号传导关系的研究

    目的:探讨大鼠心肌细胞缺血预处理时COX2的作用及其与P38MAPK的关系.方法:实验分为4组(对照组、缺血预处理组、SB组和NS398组),用Western blotting法测定心肌细胞的COX2表达量和Phosph-P38MAPK量,以LDH释放和台盼蓝排斥试验判断心肌细胞损伤程度.结果:缺血预处理组的LDH释放较对照组少、细胞存活率则较高;SB组和NS398组LDH释放较缺血预处理组多、细胞存活率则较低.NS398组的Phosph-P38MAPK量与缺血预处理组无差异(P>0.05),SB组的COX2表达量比缺血预处理组低,差异显著(P<0.01).结论:缺血预处理时COX2和P38MAPK表达、活化,COX2活化依赖P38MAPK,在其信号传导中,P38MAPK活化是COX2的上游.

    作者:韩君勇;陈运贞 刊期: 2003年第04期

重庆医科大学学报杂志

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主管:重庆市教育委员会

主办:重庆医科大学