詹小亭；陈强；王珏；邓正华
目的 研究膀胱癌癌细胞株T24的VEGF、TGF-β1分泌与TLR2信号通路的关系.方法 采用实时荧光定量RT-PCR检测膀胱癌细胞株T24的TLR2表达情况;使用实时荧光定量RT-PCR和ELISA检测经TLR2激活物肽聚糖处理前后癌细胞VEGF及TGF-β1 mRNA的水平及蛋白质分泌状况;使用实时荧光定量RT-PCR和ELISA检测采取抗TLR2抗体封闭后再用肽聚糖处理前后肿瘤细胞VEGF和TGF-β1 mRNA的水平及蛋白质分泌状况.结果 膀胱癌细胞株T24膜上有TLR2表达;经TLR2激活物肽聚糖处理后癌细胞VEGF及TGF-β1 mRNA的水平显著增高,在细胞培养上清液中蛋白质分泌水平同样显著增高;在采用抗TLR2抗体封闭TLR2后,肽聚糖的刺激不会引起癌细胞VEGF和TGF-β1 mRNA的水平及蛋白质分泌水平的增高.结论 TLR2信号通路促进VEGF和TGF-β1分泌参与膀胱癌细胞免疫逃逸,这对预防、诊断和治疗膀胱癌可能会发挥重要作用.
作者：熊莺；孙午；涂艳；张士佩；郝猛 刊期： 2016年第09期
自噬是细胞维持内环境稳态的一种重要的自我保护机制,是依赖于溶酶体降解胞内受损的蛋白质和细胞器的过程.炎症是机体受到损伤或者病原体侵入时激活免疫系统以分泌多种细胞因子的一种保护性反应.异常的炎症反应能够扰乱细胞内环境的稳定,而自噬有助于抑制炎症反应以维持内环境的稳态.自噬在炎症反应中却是一把双刃剑,自噬既可以维持机体内环境稳定而起保护作用,过度的自噬也可能会损伤细胞.基于炎症与自噬之间的密切关系,本文介绍了3类炎症相关因子:先天免疫模式识别受体、细胞因子、炎症相关转录因子对细胞内自噬水平的调节作用,为深入研究自噬和炎症相互关系的作用机制提供参考.
作者：蔡永青；胡建辉；李小丽 刊期： 2016年第09期
目的 探讨膝骨关节炎(KOA)患者的高凝状态与核因子-κB(NF-κB)通路的活化及致炎脚炎细胞因子之间的关系以及新风胶囊(XFC)对其影响.方法 将80例KOA患者按随机数字表法分为2组:XFC组(40例)和氨基葡萄糖(GS)组(40例),另设正常对照(NC)组(30例).前2组均治疗3个月.用ELISA检测2组血清中的NF-κB信号通路指标(P50、P65、IκBd、ACT1、TRAF6)及肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素(IL)-17、IL-4、血管内皮生长因子(VEGF)、血小板活化因子(PAF)的含量;半定量PCR检测Act1、P65、P50、IκBα、Iκκα的mRNA水平;荧光定量PCR检测Act1、P65、P50的mRNA水平;Western blot法检测P50、P65蛋白表达水平并测定凝血指标、实验室指标的水平,观察2组之间的变化;采用KOA症状积分量表、LequesneMG、SF-36及VAS评分评定疗效并进行相关性分析.结果 与NC组比较,KOA患者各参数出现明显异常.其中PT、PAF-AH、IL-4明显缩短,PLT、FIB、D-D、PAF、VEGF、P50、P65、ACT1、TRAF6、IL-17、TNF-α、hs-CRP、ESR、IgG水平显著升高(P＜0.05,P＜0.01);与治疗前比较,2组治疗后PLT、FIB、D-D、PAF、VEGF、P50、P65、Act1、TRAF、IL-7、TNF-α、hs-CRP、ESR明显降低(P＜0.01),AOTT、PT、PAF-AH、IL-4显著升高(P＜0.05,P＜0.01).在降低PLT、FIB、D-D、VEGF、P65、TRAF、IL-17、hs-CRP、ESR,升高PT、IL-4等方面,XFC组明显优于GS组(P＜0.05,P＜0.01);疗效判定:XFC组在降低症状量化积分、LequesneMG、VAS积分,升高SF-36部分维度积分方面明显优于GS组.结论 XFC可能通过抑制NF-κB信号通路的异常活化,上调IL-10水平,下调IL-1、TNF-α、P50、P65、TAK1等水平的表达,降低异常的炎症免疫反应,从而延缓及抑制膝骨关节炎高凝状态的产生,减少关节病变,减轻关节疼痛及僵硬症状,从而改善患者的生活质量.
作者：谈冰；刘健；章平衡 刊期： 2016年第09期
目的 探讨多囊卵巢综合征(polycystic ovary syndrome,PCOS)不孕患者性激素与外周血NK细胞活性的相关性.方法 将2013年3月至2014年12月于我院诊疗的105例PCOS不孕患者作为观察对象,选择75例同期就诊于我院的正常非妊娠妇女作为对照组.于月经周期第2～4天抽血行性激素检查;使用流式细胞术检测NK细胞百分比.结果 PCOS不孕患者外周血淋巴细胞中NK细胞比例显著高于对照组(分别为14.05％±6.06％和6.53％±3.49％,P＜0.05);而NK细胞各亚群比例无显著差异(P＞0.05);NK与E2和T的相关性有统计学意义(r=0.384和0.333;P=0.007和0.021).结论 PCOS患者外周血NK细胞比例异常增高与内分泌失调状态有关,而NK细胞活性异常可能促进PCOS病程的发生.
作者：钟兴明；苗竹林；崔蓉；杨宁；王一峰；王小兰；韦相才 刊期： 2016年第09期
目的 寻找维甲酸受体相关孤儿受体γt (retinoic receptor-related orphan receptor,RORγt)抑制剂,并对其抗炎活性进行初步研究.方法 通过荧光偏振实验(FP assay)对本实验室的化合物库进行高通量筛选,然后再采用荧光素酶报告基因实验(luciferase reporter gene assay)测定目标化合物对RORγt和IL-17在细胞水平的抑制活性,MTr实验检测化合物对细胞毒性的影响.结果 通过荧光偏振实验发现了化合物尼麦角林,细胞转染实验结果进一步表明该化合物在细胞水平上对RORγt的转录活性和IL-17A的表达有抑制作用.结论 尼麦角林通过抑制RORγt的转录活性,继而影响IL-17A的表达,由此推断该化合物可能具有潜在的抗炎活性.
作者：王威；姚雪；黄瑾 刊期： 2016年第09期
目的 探讨原发性闭角型青光眼外周血IL-2、IL-6水平与视网膜神经纤维层损伤的相关性.方法 采用病例对照研究.病例组为临床诊断为原发性闭角型青光眼的患者80例,按眼压正常(10 ～ 21 mmHg)、轻度升高(22～30 mmHg)、重度升高(31 ～ 60 mmHg)分为A、B、C3组,同期住院老年性白内障患者40例作为对照组.采用双抗体夹心酶联免疫吸附法测定外周血IL-2、IL-6质量浓度,采用光学相干断层成像和视野计评价视网膜神经纤维层损伤.所得结果采用独立样本f检验,病例组数据进行Dunnett-t检验和相关性分析.结果 病例组RNFL(retial nerve fiber layer)厚度、IL-2、IL-6水平均较对照组低,差异有统计学意义(P＜0.05).A、B、C3组RNFL厚度、MD、IL-2、IL-6水平差异有统计学意义(P＜0.05).C组RNFL厚度、IL-2、IL-6水平均低于A组(P＜0.05),A、B组比较差异无统计学意义(P＞0.05).病例组眼压与IL-2、IL-6水平、MD及RNFL厚度呈负相关(r=-0.280、-0.237、-0.590、-0.549,P＜0.05).病例组RNFL厚度与IL-2、IL-6水平、MD呈正相关(r=0.309、0.261、0.590,P＜0.05).结论 外周血IL-2、IL-6水平降低与原发性闭角型青光眼视网膜神经纤维层损伤相关,提示免疫机制可能参与了原发性闭角型青光眼的发病和进展,IL-2、IL-6可能是原发性闭角型青光眼的保护性因素.
作者：蔡春华；黄翠玲；李华；吕莎；张永烨；宋胜仿 刊期： 2016年第09期
目的 探讨病原相关模式分子(PAMPs)对抗体诱导的关节炎(CAIA)样小鼠模型建立的影响.方法 7～8周龄Balb/c雌鼠,第0天使用抗体混合物诱导,第3天使用LPS(TLR4激动剂)或CpG ODN 1826(TLR9激动剂)激发,每天定时观察四肢关节发病情况并进行关节评分;小鼠腹腔注射O111:B4和O55:B5,绘制生存曲线进行毒性分析;ELISA检测PAMPs刺激小鼠巨噬细胞后IL-6、TNF-α的分泌水平;鲎实验定量检测相同浓度下O111:B4和O55:B5的有效活性.结果 PAMPs成功激发CAIA模型炎症,其中O55:B5低死亡率、高成模率;O111:B4的毒性强于O55:B5;O55:B5的炎症因子分泌量显著高于O111:B4和CpG ODN 1826(P＜0.01);O111:B4的有效活性显著高于O55:B5 (P＜0.01).结论 低毒高致炎性的O55∶B5激发模型效果佳,说明PAMPs能够影响建模效果,而低毒高致炎性PAMPs适合该模型的激发.
作者：刘万成；杨雪姣；祝元锋；鲁永玲；范仕郡；李彦 刊期： 2016年第09期
目的 了解四川凉山地区彝族家系KIR单体型的基因组成情况.方法 采用多重PCR-SSP的方法对89个四川凉山地区彝族家系共364人的16个KIR基因位点进行基因分型;根据KIR基因型结合家系分析推导KIR单体型.对部分样本中某些不能确定拷贝数的KIR基因进行荧光定量PCR分析,再结合家系分析得到其KIR单体型.结果 89个四川凉山地区彝族家系中发现22种KIR基因型,21种单体型,其中3种A单体型,18种B单体型;并发现了2种较为独特的KIR单体型.结论 四川彝族家系有其独特的KIR单体型种类,其基因组成具有以下规律:2DL1、2DP1总是和3DP1同时出现;有2DS1时则2DS4缺失,反之亦然;2DS2总是和2DL2同时出现.
作者：詹小亭；陈强；王珏；邓正华 刊期： 2016年第09期
目的 探究我国HIV-1感染者T细胞分泌TGF-β和IL-10的水平,以及重组IL-10 (rIL-10)和重组TGF-β(rTGF-β)对T细胞功能的影响.方法 分离HIV-1感染者PBMC,加入rIL-2、rIL-15、rIL-12细胞因子体外刺激,采用胞内染色、流式细胞术检测T细胞内TGF-β、IL-10的产生情况.结果HIV-1感染者总T细胞和CD8+T细胞分泌的TGF-β明显高于正常人(P=0.000 1,P=0.003),分泌的IL-10在HIV-1感染者和正常人之间没有统计学差异;总T细胞分泌的TGF-β、IL-10与CD8+T细胞分泌的TGF-β、IL-10有明显的正相关和正相关趋势(r=-0.758,P=0.000 1;r=0.346,P=0.056);体外实验发现,rIL-10或rTGF-β对T细胞CD107a或IFN-γ的分泌具有抑制作用.结论HIV-1感染者T细胞分泌的抑制性细胞因子TGF-β水平增加,抑制T细胞功能的发挥,因此在临床抗病毒治疗中,应注意调节细胞因子的平衡,降低TGF-β的抑制作用.
作者：杨梅；孙晓娟；姜拥军；张子宁；傅雅静；陈会会；尚红 刊期： 2016年第09期
目的 探讨钙调蛋白(Calmodulin,CaM)对急性骨骼肌炎症反应的影响.方法 心毒素(Cardiotoxin,CTX)肌内注射,诱导C57BL/6小鼠胫骨前肌(tibialis anterior,TA)急性损伤.肌损伤小鼠腹腔注射钙调蛋白抑制剂R24571或激动剂CALP1.分别检测TA肌组织自身抗原和TLRs表达以及单核/巨噬细胞的肌内浸润程度.结果 CTX注射导致急性肌损伤,TA肌内出现大量的炎性渗出,并伴随肌纤维坏死.损伤肌组织内CaM、自身抗原(Mi-2,HRS和Ku70)以及TLR3表达上调.较之CTX损伤组,CALP1处理导致损伤TA肌内单核/巨噬细胞数量增多,肌内自身抗原和TLR3 mRNA和蛋白水平上调,R24571则减少肌内炎性浸润并下调上述炎性介质.结论 CaM信号参与介导急性骨骼肌炎症反应.
作者：史丹丹；曹永英；曹标；刘幸卉；术蓉；谷瑞彩；肖将尉；丁茂超；黄涛 刊期： 2016年第09期
免疫卡控点是机体免疫应答的重要组成部分,参与信号传递并且维持自身免疫耐受和机体免疫稳态.随着CTLA-4阻断剂伊匹单抗被FDA批准用于黑色素瘤的临床治疗,免疫卡控点的阻断剂给肿瘤患者带来了福音.中国是肝癌高发国家,为了探究免疫卡控点的阻断剂是否可以用于肝癌患者的治疗,本文对CTLA-4、PD-1及Tim-3在HCC中的相关研究进行综述,探讨这些免疫卡控点阻断剂在HCC抗肿瘤治疗中的应用.
作者：廖竞宇；卿克勤 刊期： 2016年第09期
目的 探讨TNF-α在李斯特菌(Listeria monocytogenes,LM)感染模型中对CD8+T细胞应答的影响.方法 采用尾静脉注射重组OVA的李斯特菌株感染TNF-α基因敲除(TNF-α KO)小鼠和野生型(WT)对照小鼠建立系统性感染模型.运用流式细胞术检测不同时相点TNF-α KO小鼠和WT小鼠中内源性和外源性特异性CD8+T细胞应答反应情况.采用体内细胞杀伤实验和检测细菌滴度的方法评估TNF-α KO小鼠和WT小鼠感染后记忆期CD8+T细胞的效应功能.接着分析记忆期和增殖期CD8+T细胞的KLRG-1和CD127等分子的表达变化.结果 与WT对照小鼠相比,TNF-αKO小鼠中CD8+T细胞应答减少,记忆细胞增多;TNF-α KO小鼠中记忆CD8+T细胞的效应功能正常;TNF-αKO小鼠记忆CD8+T细胞中含有更多比例的KLRG-1+CD127-CD62L-效应记忆细胞,而第7天TNF-α KO小鼠特异性CD8+T细胞的KLRG-1和CD127的表达与对照组无明显差别.结论 TNF-α KO小鼠初次应答降低,形成更多记忆细胞,且效应记忆细胞增多.其机制与早期效应CD8+T细胞分化无关,可能是TNF-α KO小鼠更多的KLRG-1+CD127-细胞在应答收缩期存活所致.
作者：郭浪；张迎春；胡小波；李亚林；徐斌；杜鸿城；曹朝晖 刊期： 2016年第09期
目的 观察输注CD4+CD25+调节性T细胞对实验性自身免疫性脑脊髓膜炎(EAE)模型大鼠后脑和脊髓组织的保护作用及相关机制.方法 取SD大鼠30只,随机均分为空白对照组、模型组(实验性自身免疫性脑脊髓炎模型)和实验组(CD4+CD25+调节性T细胞输注),对EAE大鼠进行神经功能评分及体质量测量,通过病理学HE染色和免疫组化观察脑和脊髓炎症浸润,实时荧光定量PCR(qPCR)检测鼠脑和脊髓IFN-γ、IL-17、IL-23和Foxp3 mRNA水平表达.结果 实验组SD大鼠神经功能评分明显改善,体质量明显增加;与模型组比较,实验组神经症状和病理改变减轻,鼠脑和脊髓IFN-γ、IL-17、IL-23 mRNA表达下降,而Foxp3 mRNA表达增加(P＜0.05).结论 CD4+CD25+调节性T细胞通过调节免疫系统的脑和脊髓IFN-γ、IL-17、IL-23和Foxp3 mRNA水平的表达对EAE起保护作用.
作者：龚业莉；何峰容；李佳楠；黄丽霞 刊期： 2016年第09期
目的 研究塞来昔布对T细胞淋巴瘤Jurkat细胞株化疗敏感性的影响,并探讨其作用机制.方法 MTT法检测表柔比星联合塞来昔布对Jurkat细胞增殖活性的影响,并计算IC50值;流式细胞术检测表柔比星联合塞来昔布对Jurkat细胞凋亡水平的影响;Western blot检测塞来昔布对Jurkat细胞株表达P-gp、MRP1、LRP及TopoⅡ蛋白水平的影响;构建Jurkat细胞株裸鼠移植瘤模型,分为模型对照组、单独塞来昔布组、单独表柔比星组及塞来昔布表柔比星组,治疗后引颈处死裸鼠,剥离瘤组织,检测其质量、体积、瘤组织细胞凋亡率,同时检测瘤组织表达MDR1、MRP1、LRP及TopoⅡ的水平.结果 表柔比星联合塞来昔布对T细胞淋巴瘤细胞株Jurkat增殖活性具有明显抑制作用,同时表柔比星的IC50值明显减低(P,＜0.05),Jurkat细胞的凋亡水平也较对照组明显增加(P＜0.01);与塞来昔布共培养的Jurkat细胞表达TopoⅡ蛋白的水平明显增加,而表达MDR1、MRP1、LRP蛋白的水平均明显下降(P＜0.05);联合塞来昔布可明显增强表柔比星对Jurkat瘤组织的抑制作用,并可明显下调瘤组织MDR1、MRP1、LRP的表达水平,上调TopoⅡ的表达水平.结论 塞来昔布可通过调控耐药相关基因的表达而增强Jurkat细胞化疗敏感性,因此提示该药在T细胞淋巴瘤的临床治疗中具有广泛前景.
作者：马鸣；王雪晓；杨兴肖；刘丽华；焦文静；张金艳；魏媛媛；邓艳丽；郭秀娟 刊期： 2016年第09期
T细胞耗竭是慢性感染和肿瘤状态下T细胞发生的一种功能障碍状态.耗竭T细胞效应功能低下,持续高表达抑制性受体,表达转录因子谱与效应和记忆T细胞明显不同.耗竭状态削弱T细胞对感染和肿瘤的有效控制,导致慢性持续感染和肿瘤发生.耗竭T细胞的分化特征、表型标志和功能逆转对临床抗感染和抗肿瘤具有重要的指导意义.靶向耗竭T细胞的免疫治疗已经在实验动物模型和临床治疗研究中获得了较为理想的效果.为此,本文对CD8+T细胞耗竭特点、影响因素、表型功能与临床治疗等作一综述.
作者：孙建军；冯辉 刊期： 2016年第09期
目的 探讨具有同源受体CCR4的趋化因子CCL17和CCL22对CD4和CD8 T细胞亚群的趋化能力.方法 首先利用流式细胞术检测健康人外周血中CCR4+T细胞的比例分布,接着用MoFlo分选流式细胞仪分选出健康人外周血中的CD4细胞和CD8细胞.利用CCL17和CCL22趋化因子蛋白分别对CD4及CD8细胞进行细胞趋化实验,计算趋化指数.利用流式细胞术检测CCL17和CCL22分别作用CD4及CD8细胞后CCR4受体内化情况,计算受体内化效率.结果 外周血PBMC中,CD4细胞CCR4分子的表达水平要高于CD8细胞(P＜0.05).在相同趋化时间内,CCL22对CD4和CD8 T细胞亚群的趋化能力强于CCL17(P＜0.05),CCL17和CCL22趋化CD4细胞通过Transwell板的细胞数均多于CD8细胞(P＜0.05),但CCL17对2种T细胞亚群趋化能力的差异性要小于CCL22.CCR4受体内化实验证实,相同时间下CCL22比CCL17更容易促使CCR4受体发生内化(P＜0.05),对于CD4和CD8T细胞亚群,CCL22作用后受体CCR4内化程度无显著性差别(P＞0.05),而CCL17对CD8细胞的内化作用要强于CD4细胞(P＜0.05).结论 CCL22对CD4和CD8细胞的趋化能力均强于CCL17,而促进受体内化方面,CCL17对CD8细胞的作用更强,CCL22对这2种细胞则无显著差别.
作者：寇敬；谌天娇；邵红伟；张文峰；薄华本；瞿创；高淑慧；黄树林；张帆 刊期： 2016年第09期
目的 研究IL-16基因单核苷酸多态性(SNP)位点rs 150605585I/D在广西人群中的分布,并对比不同种族间IL-16插入/缺失频率分布的差别.方法 采用单碱基延伸的聚合酶链反应(PCR)技术和DNA测序法检测303例广西人IL-16基因多态性,分析广西人群这个位点的基因型和等位基因的分布频率,并与人类基因组计划(HapMap)公布的欧洲人、中国北京汉族人、日本人和非洲人的基因多态性分型数据比较,分析这5类人群rs150605585插入/缺失的分布频率.结果 在我国广西人群中存在IL-16基因rs150605585 I/D多态性,分别有I/I、I/D、D/D 3种基因型.与人类基因组计划(HapMap)公布的4类人群的SNP分型数据进行比较,IL-16基因rs150605585I/D与北京、日本人群的分布差异不具有统计学意义(P均＞0.05);rs150605585I/D与非洲人、欧洲人相比差异具有统计学意义(P＜0.05).结论 在广西地区人群中存在着IL-16基因多态性.广西人群IL-16基因多态性的分布与其他种族人群比较存在有差异,这种差异也许是与IL-16相关的疾病在不同地区人群间发病率不同的原因之一,这为我们研究基因与疾病的关系提供遗传数据支持.
作者：向阳；郭静；彭友帆；雷茗；蓝艳；韦叶生 刊期： 2016年第09期
免疫学杂志
主管:第三军医大学
主办：第三军医大学,中国免疫学会
