学术投稿

人NIT1基因原核表达载体的构建和鉴定

吴汉林;王允;周清华;朱文;王艳萍;车国卫;陈晓禾;孙芝琳

关键词:原核表达载体, 人NIT1基因, FHIT基因, 肺肿瘤
摘要:背景与目的目前已知FHIT基因为抑癌基因,其结构和功能的异常与肺癌的发生、发展有密切关系,而且可能与NIT1基因存在功能上的相关性.但是,FHIT基因与NIT1基因调控肺癌发生发展的分子机制尚未明了.本研究旨在构建人NIT1基因原核表达载体,为进一步研究人肺癌细胞株中NIT1基因和FHIT基因的关系打下基础.方法应用RT-PCR法获得NIT1基因cDNA,定向克隆到融合表达载体pET-32a中,作双酶切和测序鉴定.结果①克隆的cDNA片断包含了人NIT1基因翻译区的全部序列,翻译区序列与GenBank登录的人NIT1 cDNA序列完全一致.②对构建的原核表达载体做双酶切,获得了预期的目的条带.结论通过RT-PCR和定向克隆的方法,成功构建了人NIT1基因的原核表达载体,为研究人NIT1蛋白的表达和进一步研究人肺癌细胞中NIT1基因和抑癌基因FHIT的关系奠定了基础.
中国肺癌杂志相关文献
  • COX-2与VEGF在人肺癌组织中的表达

    背景与目的已有研究发现环氧化酶-2(COX-2)和血管内皮生长因子(VEGF)在肿瘤组织中有高表达且对患者的预后有重要影响.本研究拟探讨肺癌组织中COX-2及VEGF的表达及作用.方法应用组织芯片技术制成126例肺癌组织芯片,采用免疫组化方法对标本中COX-2及VEGF的表达进行检测,并对COX-2的表达情况与疾病生物学特点、患者生存时间等关系进行了回顾性队列研究.结果 COX-2阳性表达86例(68.25%).COX-2在肿瘤中的表达与肿瘤T分期、N分期及疾病临床分期等具有密切关系(P<0.05).VEGF同样在肺癌组织中有高表达(98/126,77.78%),且与COX-2的表达在统计学上具有显著正相关(χ2=6.72,P<0.05).COX-2和VEGF表达水平与患者生存时间有密切关系(P<0.05).结论 COX-2与VEGF在人肺癌组织中均有高表达,两者能分别作为患者生存时间预测的单因素影响因子,且同是外科手术切除后的肺癌病例预后较差的标志.

    作者:李小飞;李灿;张伟;高坤祥;朱以芳;卢强 刊期: 2005年第02期

  • canstatin基因转染对肺癌A549细胞和血管内皮细胞增殖与凋亡的影响

    背景与目的肿瘤的生长和转移需要大量新血管的生成,人血管能抑素(canstatin)是新近发现的高效内源性血管生成抑制剂,其抑制血管内皮细胞的作用已引起人们广泛关注.本研究的目的是探讨canstatin基因在人肺癌A549细胞和人脐静脉内皮细胞HUV-ECC中的表达及意义.方法将canstatin基因通过电穿孔的方法转染人肺癌细胞A549和人脐静脉内皮细胞HUV-ECC,行G418筛选获得转基因细胞克隆.用SDS-PAGE电泳检测canstatin蛋白在转基因细胞培养上清液中的表达,以流式细胞仪分析细胞周期,并比较转基因和未转基因细胞的生长特性.结果 canstatin在转染组A549细胞和ECC细胞表达并分泌至上清液中.canstatin基因转染组ECC的凋亡率(16.04%)显著高于空载体组(0.43%)和亲代细胞组(2.92%)(P<0.01),转染细胞生长明显受抑(P<0.01).而转染组A549细胞的凋亡率(0.19%)与空载体组(0.13%)及亲代细胞组(0.07%)比较无显著性差异(P>0.05),细胞生长也未受明显影响.结论 canstatin能特异地抑制内皮细胞增殖,并诱导内皮细胞凋亡.

    作者:陆卫忠;黄桂君;钱桂生;李玉英;余时沧;李瑾 刊期: 2005年第02期

  • EphB4、HIF-1α在肺癌组织中的表达及其意义

    背景与目的业已发现EphB4和HIF-1α与肿瘤的发生、发展有密切关系.本研究的目的是探讨EphB4、HIF-1α蛋白在肺癌中表达的生物学意义及相互间的关系.方法采用免疫组织化学SP法检测54例肺癌组织和10例正常肺组织中EphB4、HIF-1α蛋白表达的情况.结果 EphB4和HIF-1α蛋白在54例肺癌组织中的阳性表达率分别为50.0%(27/54)和42.6%(23/54),较对照组显著升高(P<0.05);肺癌中EphB4和HIF-1α的表达与肉眼类型、分级、分期有密切关系(P<0.05),而与组织学类型、年龄、性别、淋巴结转移无明显关系(P>0.05);EphB4和HIF-1α的表达呈显著正相关关系(P<0.01).结论 EphB4和HIF-1α在肺癌中的异常表达与肺癌的发生、进展和恶性度有关,两者存在着一定的协同作用;检测EphB4和HIF-1α表达有助于预测肺癌预后.

    作者:朱丛中;王新允;郑海燕;刘婷;李艳;孙翠云;王爱香;赵凤云 刊期: 2005年第02期

  • GSTT1基因多态性与中国四川汉族人群肺癌遗传易感性关系的研究

    背景与目的 GSTs可能参与机体致癌物的解毒反应,如保护个体免受吸烟的损害,因此GSTs基因多态性被认为是个体是否患癌的易感因素.本研究的目的是探讨GSTT1基因多态性与中国四川汉族人群肺癌遗传易感性的关系.方法采用病例对照和PCR-RFLP方法检测中国四川汉族人群肺癌患者150例和健康对照者152例的GSTT1基因缺失型的频率,并评价其与吸烟和肺癌遗传易感性的关系.结果①GSTT1(-)基因型在肺癌组和对照组分别为54.7%(82/150)和38.2%(58/152),二者间比较有显著性差异(OR=1.681,95%CI=1.009~2.803,P=0.046);②GSTT1(-)基因型患肺鳞癌 (OR=2.969, 95%CI=1.511~5.834,P=0.002)及肺腺癌(OR=2.095,95%CI=1.060~4.140,P=0.033)的风险性明显增加;③吸烟者中GSTT1(-)基因型者患肺癌的风险是GSTT1(+)者的4.051倍;④GSTT1(-)基因型者中,吸烟者患肺癌的风险是不吸烟者的53.885倍;⑤吸烟≥20包年者中,GSTT1(-)基因型者患肺癌的风险是GSTT1(+)者的4.296倍.结论①GSTT1(-)基因型增加四川汉族人群患肺癌的风险性,特别是增加患肺鳞癌的风险;②GSTT1(-)基因型和吸烟之间存在交互作用,吸烟量越大且为GSTT1(-)基因型者则患肺癌的风险性越大.

    作者:袁天柱;周清华;朱文;郭占林;李代蓉;王艳萍;陈晓禾;刘伦旭;杨俊杰 刊期: 2005年第02期

  • 纤维支气管镜下介入冷冻治疗支气管腔内恶性肿瘤

    气管、支气管肿瘤是临床上常见的疾病,目前常用的治疗方法有手术、化疗和放疗等.为探讨新的治疗方法以提高疗效、减轻患者痛苦、提高生活质量、延长生存期,我院自2003年开始,应用纤维支气管镜(以下简称纤支镜)下冷冻治疗支气管腔内中央型肺癌28例,取得了良好的近期疗效,现报道如下.

    作者:杨红忠;胡成平;杨华平;陈琼;瞿素洁 刊期: 2005年第02期

  • 重组腺病毒p53基因治疗肺癌的研究进展

    肺癌是人类常见的恶性肿瘤之一,为恶性肿瘤死亡的首要病因,对肺癌采用传统治疗包括化疗、放疗和手术方法总的生存率不到15%[1];另外,化疗、放疗在杀伤肿瘤细胞的同时,对正常细胞也有明显的毒性,这就需要我们发展新的治疗策略来达到治疗目的.自2004年1月世界首个基因治疗药物--重组人p53腺病毒注射液(今又生)正式在我国上市以来,肿瘤基因治疗引起全世界高度瞩目.本文就近年来重组腺病毒p53基因(Ad-p53)治疗肺癌的研究进展作一综述.

    作者:王朝霞;束永前 刊期: 2005年第02期

  • 肺癌癌前病变的研究进展

    近年来,肺癌的发病率逐年上升,它已成为严重危害人类健康的常见的恶性肿瘤之一.随着时代的发展,虽然诊断和治疗手段有所进步,但其5年生存率仍维持在15%左右,如此低的生存率多由于早期诊断方面的相对滞后.因此如果我们对肺癌的癌前病变能有充分了解,并将诊断与防治提前到癌前病变阶段,就有可能提高肺癌患者的生存率.本文就肺癌癌前病变进行综述.

    作者:林兴;黄云超 刊期: 2005年第02期

  • 第二届中国肺癌高峰论坛

    作者: 刊期: 2005年第02期

  • 北京协和医院外科治疗肺癌生存率变化分析

    背景与目的肺癌是目前癌症死亡的首要原因.有报道肺癌治疗效果有显著提高,但外科在其中的作用仍有争议.本研究拟探讨北京协和医院胸外科近15年外科治疗肺癌生存率变化的原因.方法回顾性分析1989年1月到2003年12月外科治疗肺癌1574例生存结果,按时间顺序分为两组,比较A组(1999~2003年)和B组(1989~1998年)生存率变化.结果 A组和B组并发症分别为11.2%和19.2%,死亡率分别为1.06%和1.93%,差异有显著性(P<0.01).A组和B组3年生存率分别为56.07%和42.35%,5年生存率分别为38.99%和28.46%,差异有显著性(P<0.05).A组Ⅰ期、Ⅱ期、ⅢA期生存率较B组提高并有显著性差异,而ⅢB期、Ⅳ期生存率无显著性差异.肺叶切除生存率提高明显,而开胸探查、局部肺切除、全肺切除及支气管袖状切除生存率差别不大.结论肺叶切除加系统性淋巴结清扫是支气管肺癌手术治疗的标准方式;肿瘤切除后辅以铂类/第三代化疗药物综合治疗模式,初步证实能提高远期生存率.

    作者:张志庸;郭峰;崔玉尚;李单青;李力;徐晓辉;戈烽;郭惠琴;李泽坚 刊期: 2005年第02期

  • 纵隔型肺癌一例

    患者男性,75岁,因间断性胸闷气短1月,加重伴胸痛10天入院.门诊胸部X线片示左肺门增大,并左侧少量胸腔积液.入院后胸部CT示:在前纵隔左侧见形态不规则肿块,大径线5.2 cm×4.5 cm,CT值为42 HU,与相邻大血管界面不清,隆凸下见肿大淋巴结,左侧胸腔内见弧形水样密度影(图1).考虑前纵隔占位性病变,可能为纵隔型肺癌并淋巴结胸膜转移,左侧少量胸腔积液;也可能为恶性淋巴瘤并转移.查体时发现左颈部颈静脉怒张,并可触及两粒豌豆大小肿大淋巴结,质中,无压痛,活动度尚可,边缘清楚.经做颈部淋巴结活检,病理证实为低分化肺腺癌.

    作者:秦军;高媛 刊期: 2005年第02期

  • 第九届全国肺癌学术大会征文通知

    作者: 刊期: 2005年第02期

  • 全国第七届肿瘤转移学术会议征文通知

    作者: 刊期: 2005年第02期

  • 肺癌误诊原因分析--附31例报告

    背景与目的目前基层医院肺癌的误诊率较高.本研究旨在探讨肺外征为首发表现的肺癌的误诊原因,以期进一步提高诊断率.方法回顾性分析本院1987~2004年收治的31例以肺外征为首发表现的肺癌病例,结合文献进行讨论.结果 31例患者均出现不同程度的误诊情况.误诊的原因系医源性和患者的疏忽约各占一半(15例/16例,48%/52%);医源性因素包括医务工作者对肿瘤知识掌握不足以及基层医院条件有限,患者因素主要是未及时就诊.结论提高医务人员对肺癌的认识及专业水平,加强肺癌相关知识的普及教育,误诊误治的发生率有望明显下降.

    作者:孙昌明;尉继伟;刘治帮 刊期: 2005年第02期

  • 肺腺鳞癌CT表现与临床分析

    肺腺鳞癌(adenosquamous carcinoma of the lung,ASC)是肺癌中较为少见的一种组织学亚型,在原发肺癌中的发生率约为0.4%~4%[1],是一种侵袭性强,恶性程度高,进展快,转移早,预后差的肺部恶性肿瘤.本文总结了39例经手术切除的肺腺鳞癌患者临床资料,结合文献复习,对肺腺鳞癌的临床特点和CT表现进行分析,探讨诊治对策.

    作者:缐胤生;党诚学;陈武科;王作仁 刊期: 2005年第02期

  • 人NIT1基因原核表达载体的构建和鉴定

    背景与目的目前已知FHIT基因为抑癌基因,其结构和功能的异常与肺癌的发生、发展有密切关系,而且可能与NIT1基因存在功能上的相关性.但是,FHIT基因与NIT1基因调控肺癌发生发展的分子机制尚未明了.本研究旨在构建人NIT1基因原核表达载体,为进一步研究人肺癌细胞株中NIT1基因和FHIT基因的关系打下基础.方法应用RT-PCR法获得NIT1基因cDNA,定向克隆到融合表达载体pET-32a中,作双酶切和测序鉴定.结果①克隆的cDNA片断包含了人NIT1基因翻译区的全部序列,翻译区序列与GenBank登录的人NIT1 cDNA序列完全一致.②对构建的原核表达载体做双酶切,获得了预期的目的条带.结论通过RT-PCR和定向克隆的方法,成功构建了人NIT1基因的原核表达载体,为研究人NIT1蛋白的表达和进一步研究人肺癌细胞中NIT1基因和抑癌基因FHIT的关系奠定了基础.

    作者:吴汉林;王允;周清华;朱文;王艳萍;车国卫;陈晓禾;孙芝琳 刊期: 2005年第02期

  • 肺纤维肉瘤一例报告并文献复习

    患者男,49岁,因咳嗽、痰血2周于2004年9月11日入院.查体未见异常.胸部X线片示:右上肺野纵隔旁、右上肺前段见密度均匀升高、边界清晰块影.

    作者:王瑞松;李加佳;田彬 刊期: 2005年第02期

  • 以视力下降为首发症状的脉络膜转移性肺腺癌一例报告

    患者女,31岁,因右眼视力进行性下降4月入院.患者于2004年7月无明显诱因出现右眼视物模糊,无恶心、呕吐及头痛,无畏寒、发热、眼睛红肿疼痛及其它不适.

    作者:李玉新;刑力刚;黎功;张健东 刊期: 2005年第02期

  • 第11届世界肺癌大会

    作者: 刊期: 2005年第02期

  • 成人型肺母细胞瘤五例报告及文献复习

    背景与目的肺母细胞瘤是一种少见的肺部原发恶性肿瘤,分为成人型肺母细胞瘤和儿童胸膜肺母细胞瘤.本文主要讨论成人型肺母细胞瘤的临床特点、诊断和治疗.方法回顾我院从1964年4月至2004年3月收治的5例成人型肺母细胞瘤的临床资料,并复习有关国内外文献.结果 5例中男3例,女2例;发病年龄22~70岁;以咳嗽、咳血丝痰为主要症状,次为胸闷、胸痛;影像学主要表现为肺部单发实性肿块,纤维支气管镜检查及痰细胞学检查均没有发现肿瘤细胞.3例行肺叶切除加肺门纵隔淋巴结清扫术,1例行左全肺切除加肺门纵隔淋巴结清扫术,1例行肺楔形切除术并行术后化疗.到随访结束,3例死亡,2例生存,生存期短6个月,长11年.结论肺母细胞瘤术前难明确诊断.治疗以肺叶切除加纵隔淋巴结清扫术为主,对放疗及化疗不敏感,预后差别较大.

    作者:姚广裕;杨名添;王思愚;何萍;王军业;陈捷鑫 刊期: 2005年第02期

  • 18F-FDG-SPECT/CT显像在肺癌诊断中的临床价值

    背景与目的正确的诊断对肺癌疑似患者是至关重要的.根据肿瘤组织摄取18F-FDG的能力远大于正常组织的原理,本研究探讨了双探头符合线路SPECT/CT在肺癌诊断中的临床应用价值.方法对61例肺部肿块患者进行18F-FDG-SPECT/CT检查,对良恶性肿块的摄取比值R进行比较,并与CT检查和病理检查结果进行比较.结果以摄取比值R≥2为标准,18F-FDG-SPECT/CT对肺癌诊断的敏感性为82%,特异度为87%,准确率为84%.18F-FDG-SPECT/CT对纵隔淋巴结转移的诊断与病理结果的符合率为81%,而CT诊断与病理结果的符合率为52%,二者有显著性差异(P<0.05).结论 18F-FDG-SPECT/CT对肺癌的诊断与鉴别诊断以及临床分期有重要的应用价值.

    作者:阮征;郑健;黄海龙;张闻瑞;赵晋华 刊期: 2005年第02期

中国肺癌杂志

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主管:中国科学技术协会

主办:中国抗癌协会 中国防痨协会 天津医科大学总医院