李飒；许天民；林久祥
目的 克隆牙龈卟啉单胞菌菌毛fimA基因并使其在大肠杆菌中正确表达.方法 利用PCR方法克隆牙龈卟啉单胞菌fimA基因,构建其原核表达质粒pT-BAD/fimA,获得其在大肠杆菌中的表达,基质辅助激光解吸电离-飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)鉴定重组蛋白.以不同质量浓度咪唑缓冲液(250、200、150、100、50 μmol·L~(-1))洗脱结合在His-tag纯化柱的目的蛋白,选择佳洗脱质量浓度.结果 克隆基因测序结果与GeneBank数据库中的序列呈现99.9%同源性;诱导表达后可观察到相对分子量3.8x10~4的融合蛋白,经MALDI-TOF-MS检测进一步证实为FimA蛋白.100 μmol·L~(-1)咪唑缓冲液洗脱得到的蛋白质纯度高,其纯度为95%.结论 本实验成功克隆了fimA基因,并获得在大肠杆菌中的正确表达,同时得到纯度较高的FimA蛋白,为后续研制增强免疫应答的高效牙周炎真核表达质粒奠定了基础.
作者：刘薇；于飞；陈卫民；何伟 刊期： 2009年第06期
目的 构建磷灰石晶体矿化的体外模型,研究牛血清白蛋白(BSA)和不问浓度的氟离子对磷灰石晶体体外矿化的影响.方法 利用阳离子膜和透析膜建立磷灰石晶体矿化的体外模型.在模型中分别加入去离子水、BSA和不同浓度的氟离子(5、20、100mg·L~(-1)),反应3 d后,扫描电镜(SEM)、X线衍射法检测矿化产物.结果 成功构建了磷灰行晶体体外矿化模型,加入去离子水和BSA后,晶体成分主要为磷酸八钙(OCP),但晶体形态筹异显著.加入氟离子后,形成了柱状、杆状的氟磷灰石(FAP)晶体,且随着氟离子浓度的增加,晶体的尺寸和矿化程度均增加.结论 该体外模犁是检测磷灰石晶体矿化调控因素的有效方法.
作者：王疆；倪龙兴；王捍国 刊期： 2009年第06期
目的 探讨多数牙先天缺失患者的人类成对盒基因(PAX9)和肌节同源盒基因(MSX1)突变位点,为该疾病的病因学研究提供依据.方法 对于该例患者与部分正常家庭成员进行口内检查及家系调查,取研究模型测量其牙冠宽度,并与正常值比较.拍摄曲面断层片和头颅侧位片进行头影测量分析,对比颅面形态和错(牙合)畸形类型及特点.从静脉血中提取DNA,根据PAX9和MSX1的全序列设计引物,采用聚合酶链式反应(PCR)扩增PAX9基因的外显子1、2、3、4及MSX1基因外显子1、2,而后通过对分段PCR纯化产物的测序,并结合系谱进行突变分析.结果 患者伴有牙齿形态畸形,与中国人正常值相比较,牙冠宽度较小.头影测量分析结果提示先证者在骨面型及颌骨形态等方面无明显遗传倾向.基因筛查结果显示先证者及其母亲的PAX9外显子3第718位点上由G变为C,属错义突变,导致与之对应的第240位氨基酸由丙氨酸变为脯氨酸:MSX1未见突变.结论 多数牙先天缺失可能与PAX9基因外显子3的第718位点上的错义突变有关.
作者：王璟；简繁；王晟；王虎；杨秩；廖正宇；赖文莉 刊期： 2009年第06期
目的 比较下颌切牙Empress 2瓷贴面和全瓷冠牙预备体及修复体粘接后复合体的抗折强度.方法 选择人离体下颌切牙50颗,随机分为5组.A组为瓷贴面牙体预备组,B组为全瓷冠牙体预备组,C组为瓷贴面修复组,D组为全瓷冠修复组,E组为完整下颌切牙(对照组).采用标准化牙体预备过程,Empress 2铸瓷系统及树脂粘接技术完成瓷贴面-牙体和全瓷冠-牙体复合体.使用Instron万能试验机测试5组牙齿的抗折裂载荷值,采用方差分析进行统计学分析.结果 A、B、C、D、E组的抗折裂载荷值分别为:(576.11±91.53)、(204.13±85.88)、(451.50±116.81)、(386.16±117.75)、(566.05±121.37)N.经统计学分析,B组抗折裂载荷值低于其他组(P<0.01);A、E组间的差异无统计学意义,其值高,高于其他组(P<0.05);C、D组间的差异也无统计学意义,其值低于A、E组,但高于B组(P<0.05).结论 下颌切牙瓷贴面预备后,牙体抗折能力无明显降低.下颌切牙Empress 2瓷贴面与全瓷冠粘接后,2种复合体的抗折裂能力无明显区别.
作者：魏煦；李彦 刊期： 2009年第06期
目的 克隆少汗型外胚层发育不良症(HED)eda-A1基因并进行突变分析,同时构建eda-A1基因编码序列突变型(M)和野生型(W)的真核表达载体pcDNA3.1(-)-eda-A1-M/W,为进一步明析eda基因的功能奠定基础.方法 设计含有BamH Ⅰ和Hind Ⅲ的酶切位点的引物,从HED患者和正常人外周血淋巴细胞中提取总mRNA,利用RT-PCR法克隆eda-A1(M/W)基因cDNA序列;并运用BamH Ⅰ和Hind Ⅲ双酶切pcDNA3.1(-)载体和eda-A1基因片段,将eda-A1(M/W)插入到pcDNA3.1(-)载体中,从而构建新的真核表达载体,命名为pcDNA3.1(-)-eda-A1-M和pcDNA3.1(-)-eda-A1-W.结果 成功克隆少汗型外胚层发育不良症eda-A1基因,并发现未见报道过的907位A→C错义突变,导致306位编码氨基酸由谷氨酰胺变异为脯氨酸;经PCR法、重组载体双酶切法、DNA测序验证,成功构建了pcDNA3.1(-)-eda-A1-W/M的真核表达载体.结论 成功构建少汗型外胚层发育不良症eda-A1基因(突变型和野生型)真核表达载体pcDNA3.1(-)-eda-A1-M/W,为进一步研究该基因在牙齿发育中的生物学作用奠定了实验基础.
作者：雷科；车团结；王锦明；邓旎；张琳；何祥一 刊期： 2009年第06期
目的 定量分析环孢素(CsP)对大鼠牙龈组织形态影响的部位特异性和时间依赖性.方法 将80只7周龄雄性Wistar大鼠随机分为实验组和对照组,每组又分为10、20、30、40 d亚组.实验组胃饲含CsP的鲜牛奶,对照组胃饲等量鲜牛奶.内固定取材后制作下颌第一磨牙颊舌向石蜡切片,HE染色,利用图像分析系统分别测量颊侧和舌侧牙龈上皮面积、结缔组织面积、长钉突长度,行完全随机分组两因素析因设计资料的方差分析.结果 实验组大鼠牙龈增厚,颊侧附着龈近膜龈联合处上皮钉突明显增生伸长.实验组大鼠颊侧和舌侧牙龈上皮面积和结缔组织面积以及颊侧长钉突长度均显著大于对照组(颊侧P＜0.01,舌侧0.01＜P＜0.05),2组间舌侧长钉突长度差异无统计学意义.各时间点相比,颊侧和舌侧上皮面积、结缔组织面积以及长钉突长度间差异无统计学意义.结论 CsP对大鼠颊侧膜龈联合端附着龈上皮的影响存在部位特异性,对大鼠牙龈的影响无时间依赖性.
作者：刘培红；马肃；刘薇婷 刊期： 2009年第06期
对3例艾滋病患者的口腔表征进行分析,并对艾滋病的诊断进行探讨,以提高口腔医务工作者对艾滋病的警惕性,做到早发现、早诊断、早治疗,以控制疾病的进一步传播及加强医务工作人员的自身防护.
作者：李张维；李晓英；刘文钊；王甲一；曾昕 刊期： 2009年第06期
目的 探索一种可以较好地分离口腔双歧杆菌的选择性培养基,以此为基础,检测儿童口腔不同部位双歧杆菌的分布状态,初步探讨口腔双歧杆菌与儿童龋病的发生关系.方法 选择70例3-6岁儿童为研究对象,其中无龋组30例,重症婴幼儿龋(S-ECC)组40例.无龋组收集唾液及唇面、邻面、(牙合)面沟裂的混合菌斑;S-ECC组收集唾液、光滑面菌斑、牙面白垩斑菌斑和深龋龋坏组织.在经过改良的TPY选择性培养基中进行培养,提取细菌总DNA,用双歧杆菌特异性引物进行聚合酶链反应,对其电泳条带进行记录分析.结果 S-ECC组双歧杆菌的检出率为47.5%,无龋组为0,2组间检出率的差异有统计学意义(P<0.05).在S-ECC组儿童口腔的不同部位,双歧杆菌检出率分别为唾液27.5%、光滑面菌斑27.5%、白垩斑菌斑20.0%、龋坏组织22.5%,不同检测部位间检出率的差异无统计学意义(P>0.05).齿双歧杆菌在S-ECC组儿童口腔不同部位的检出率分别为唾液10.0%、光滑面菌斑7.5%、白垩斑菌斑7.5%、龋坏组织10.0%,不同检测部位间检出率的差异也无统计学意义(P>0.05).结论 改良TPY双歧杆菌选择性培养基是一种适合分离口腔双歧杆菌的选择性培养基;双歧杆菌可能与S-ECC的发生相关,但其检出情况与儿童牙面的部位关系不大.
作者：翟晶晶；邹静；鲁莉英 刊期： 2009年第06期
目的 研究舌鳞癌(TSCC)及癌前病变中Noteh1的表达,探讨其与表皮生长因子受体(EGFR)之间的潜在关系.方法 免疫组化检测41例人TSCC、39例舌黏膜白斑(LP)和7例正常舌黏膜标本中Notch1和EGFR的表达.结果 在正常舌黏膜和LP中,Notch1阳性表达主要位于角化层,部分颗粒层和棘层细胞也有表达,基底层无表达;而EGFB阳性表达主要位于基底层,棘层少见表达,颗粒层和角化层无表达.在TSCC中,Notch1阳性表达多见于癌巢中鳞状化生的角化细胞及类棘层细胞,周边细胞无表达;而EGFR阳性表达主要位于癌巢周边细胞,鳞状化生的角化细胞及类棘层细胞无表达.结论 Notch1在舌黏膜上皮中促进细胞分化,在TSCC中起抑癌作用;而EGFR的表达可能抑制Notch1的表达,以维持细胞增殖,并促进TSCC发生发展.
作者：黄红杰；平飞云；胡济安；赵士芳 刊期： 2009年第06期
目的 分析安氏Ⅲ类错(牙合)患者的头颅侧位形态特征及其与治疗的关系.方法 收集北京大学口腔医院1997-2000年就诊的安氏Ⅲ类错(牙合)患者472名,通过影像测量及小平方和重叠法(PS)处理获得患者的标准化点坐标值并以此为统计指标对472例患者进行聚类分析和亚型分类,并总结各亚型的治疗方式.结果 472例患者共分成14类亚型,通过计算机绘图形成了各亚型的图形模板,同一类亚型的治疗方式较一致.结论 安氏Ⅲ类错(牙合)具有不同的颅面骨骼分型,这些分型对于治疗方式的选择具有重要的意义.
作者：李飒；许天民；林久祥 刊期： 2009年第06期
目的 研究一氧化氮合酶(NOS)在犬下颌骨牵张成骨及骨创伤修复过程的表达和意义.方法 28只犬随机分成牵张组和直接延长组各12只及正常对照组4只,用免疫组化法检测牵张第6天、牵张后固定2周和8周NOS表达水平的变化.结果 牵张第6天牵张组可见牵开区组织内炎性细胞浸润,血管周围和间质内较多红细胞漏出.牵张及固定早期,牵张组和直接延长组诱导型NOS(iNOS)与内皮型NOS(eNOS)阳性表达均明显高于正常对照组,直接延长组的iNOS和eNOS阳性表达低于牵张组,差异均有统计学意义(P＜0.05);牵张后固定8周iNOS和eNOS阳性表达3组间比较差异无统计学意义(P>0.05).结论 NOS在牵张早期表达升高,结合在牵张早期组织内红细胞漏出,提示牵张成骨过程中存在某种程度的微创伤,这种微创伤可能是牵张成骨的重要启动因素之一.
作者：周诺；廖妮；韦山良；梁飞新 刊期： 2009年第06期
目的 对比相同浓度下赤藓糖醇和木糖醇对变异链球菌生长和产酸的影响.方法 分别用含0.5%、1%、2%、4%、8%、12%、16%赤藓糖醇和木糖醇的TPY培养基在厌氧条件下培养变异链球菌,分别于0、2、4、6、8、10、12、18、24h测量液体培养基的光密度值(A值)和pH值,运用SPSS描绘其变化曲线图.结果 在0.5%、1%、2%浓度下,赤藓糖醇培养基的A值较木糖醇培养基高,pH值较木糖醇培养基低,说明变异链球菌在含0.5%、1%、2%赤藓糖醇的培养基内的生长和产酸能力明显较相同浓度木糖醇培养基高.在8%、12%、16%浓度下,赤藓糖醇培养基的A值较木糖醇培养基低,pH值较木糖醇培养基高,说明变异链球菌在含8%、12%、16%赤藓糖醇的培养基内的生长和产酸能力明显较相同浓度木糖醇培养基低.结论 对比木糖醇,低浓度下赤藓糖醇对变异链球菌生长和产酸的抑制作用较弱,高浓度下赤藓糖醇的抑菌效果更强.
作者：姚军；张佳丽；吴玉琼；卢兆杰 刊期： 2009年第06期
目的 分析人龋坏组织中变异链球菌与乳酸杆菌在不同分组中的培养计数及不同细菌主导的病例数,研究变异链球菌和乳酸杆菌在致龋过程中的协同作用.方法 选取甘肃省靖煤公刮总医院口腔科110例龋病患者,按照不同龋坏程度、不同年龄、不同龋坏性质分组采集龋坏组织,在选择培养基上培养,计数菌落数量.统计2种细菌在不同分组中的检出率、细菌计数半均数及不同敛龋菌病例数,研究二者的致龋作用.结果 变异链球菌和乳酸杆菌的细菌计数平均数随着龋坏程度增加而增高(P<0.05),在老年组患者中变异链球菌和乳酸杆菌数鼍增高(P<0.05),在龋病活动期增高(P<0.05).随着龋坏程度的增加,变异链球菌和乳酸杆菌共同致龋病例数增高(P<0.05),在老年人龋坏中共同致龋病例数增高(P<0.05),变异链球菌和乳酸杆菌共同致龋作用与龋病的静止与活动无相关性.结论 变异链球菌和乳酸杆菌随着龋坏程度的增加,共同致龋作用增强;老年人龋齿中,二者的协同作用占主导作用;在龋病活动期与静止期中,变异链球菌和乳酸杆菌仪存在数量上的区别,二者的单独致龋能力均在活动期增强,但共同致龋作用与龋病的活动与静止无关联.
作者：张立桓；孙涛生；邬宏亮；孙芳明 刊期： 2009年第06期
目的 探讨治疗运动型食物嵌塞的调验方法及效果.方法 选择邻面接触关系正常的食物嵌塞患者36例为研究对象,分析其咬合面形态及咬合关系,采用序列调(牙合)方法进行治疗,并培养合理的饮食习惯.序列调验法包括:调磨并消除对骀杵臼式牙尖、加深(牙合)面发育沟、调磨嵌塞间隙远中牙齿的近中斜面.治疗后1周、2周和6个月复杳食物嵌塞情况.结果 术后1周,36例患者中有32例的食物嵌塞症状消失,4例症状改善;术后2周,所有患者食物嵌塞症状完全消失;术后半年后复查,并无1例发生食物嵌塞.结论 序列调牙(牙合)法是治疗某些运动型食物嵌塞的有效方法.
作者：徐娟；方碧松；马宏；孙晓强 刊期： 2009年第06期
目的 通过对限定性角质形成细胞无血清培养基(DK-SFM)和3T3滋养层培养毛囊bulge干细胞的比较,寻求既能方便获得大量毛囊bulge干细胞,又能减少其分化的理想培养条件.方法 采用DK-SFM和313滋养层分别培养毛囊bulge干细胞,通过倒置显微镜观察毛囊bulge干细胞的形态,免疫荧光染色检测毛囊bulge干细胞的特异性标记细胞角蛋白19(CK19)和分化相关抗体群34(CD34)的表达鉴定毛囊bulge干细胞.通过比较2种方法培养的毛囊bulge干细胞的克隆形成率和CD34阳性率的差异,分别比较毛囊bulge干细胞的增殖能力和干细胞的数量,综合评估2种培养方法的优劣.结果 倒置显微镜观察2种培养方法所得毛囊bulge 干细胞均为铺路石状.免疫荧光染色检测2种培养方法培养的毛囊bulge干细胞CK19和CD34均呈阳性.DK-SFM和3T3滋养层培养的毛囊bulge干细胞克隆形成率分别为69.4%和62.2%.流式细胞仪检测DK-SFM培养的毛囊bulge干细胞中CD34阳性率为72.3%;3T3滋养层培养的毛囊bulge干细胞中CD34阳性率为34.7%.结论 DK-SFM和3T3滋养层培养作为毛囊bulge干细胞的2种培养方法,均可以获得未分化的毛囊bulge干细胞.用313滋养层培养毛囊bulge干细胞的方法比较复杂,且所获的细胞混杂有313细胞,但用此种方法可获得大量的毛囊bulge干细胞.用DK-SFM培养毛囊bulge干细胞方法简单,但细胞不易贴壁,且数量较少,但能有效分离出较纯的毛囊bulge 干细胞,保持较好的细胞活性.
作者：董刚；汪成林；彭栗；叶玲 刊期： 2009年第06期
咬唇颊症是长期习惯性咬嚼口腔黏膜所致的口腔黏膜慢性病损,主要表现为黏膜表面上皮呈脱屑样改变,患者可有轻度粗糙感.目前国内尚未见关于咬唇颊症统一的命名、译名及系统介绍,本文报道2例口腔咬唇颊症病例,并复习相关文献,讨论咬唇颊症可能的发病机制、临床表现、病理表现、诊断、鉴别诊断、治疗及预后等.
作者：王甲一；刘文钊；李晓英；李张维；曾昕 刊期： 2009年第06期
目的 研究氟对镍钛弓丝色泽的影响.方法 将4种镍钛弓丝(IMD、SL、TP、YY)各40个样本,分为4个小组.其中1个为对照组,放入人工唾液中不作处理;3个为实验组,分别放入含有不同浓度氟离子(0.05%、0.10%、0.15%)的氟化人工唾液中进行处理,每天处理3次(早、中、晚),每次3 min,然后去离子水冲洗样本,去除残留的氟化物溶液后放回人工唾液试管中.28 d后取出样本,观察表面色泽变化和微观形态.结果 随着氟离子浓度的增加,弓丝色泽的改变呈持续加重的趋势(P<0.05).氟离子浓度相同的条件下,IMD与YY色泽改变的差异无统计学意义,SL与TP的差异也无统计学意义(P＞0.05),但IMD和YY的色泽改变均明显高于SL和TP(P<0.01).结论 镍钛弓丝的表面色泽变化随着氟离子浓度的上升而加重.不同品牌的镍钛弓丝在同一氟环境下色泽改变的情况不完全相同.
作者：马长柏；刘新强；李金华 刊期： 2009年第06期
目的 通过对比不同纳米颗粒钛膜表面成骨细胞的合成能力,评价其生物相容性.方法 采用直流磁控溅射法通过控制温度(常温、100℃、250℃、380℃)构建4级纳米颗粒钛膜,将SD乳鼠第3代成骨细胞接种于其表面及未镀膜的钛片表面,对表面成骨细胞上清液中骨钙素(OC)含量进行检测.结果 在7、14d时,随着时间的延长,各实验组和对照组样本表面的细胞上清液中OC含量均增大.在7 d时,对照组与其他各组相比,OC含量间差异均有统计学意义(P<0.05).在14d时,100℃实验组表面OC含量增幅大,100℃实验组与380℃实验组、对照组、空白组相比,其筹异具有统计学意义(P<0.05),250 ℃实验组与380 ℃实验组、对照组、空白组相比,其差异也具有统计学意义(P<0.05).结论 钛表面纳米改性有利于其生物相容性,不同纳米粒径可以影响成骨细胞的合成功能.
作者：巴凯；张静；王虎；刘媛媛；杨振宇；李明霞；李伟；缪竞威 刊期： 2009年第06期
目的 通过检测不同质量浓度C-反应蛋白(CRP)对体外培养的人单核细胞趋化能力的影响,探讨CRP作为炎症介质联系牙周炎与冠心病的分子机制.方法 采用不同质量浓度CRP作用于体外培养的THP-1单核细胞,采用Transwell趋化实验检测单核细胞被趋化因子单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)趋化的数量.结果 Transwell趋化实验发现,CRP作用于THP-1单核细胞后可增强其趋化能力.CRP质量浓度为2μg·mL~(-1)时,单核细胞的趋化数量上调(P<0.05);随着CRP质量浓度升高,趋化的单核细胞增多(P<0.05).结论 CRP能增强THP-1单核细胞的趋化能力,且呈剂量依赖性.
作者：孟姝；张琳；杨禾；吴亚菲；葛颂；赵蕾 刊期： 2009年第06期
目的 探讨孕妇牙周病中牙龈卟啉单胞菌(P.gingivalis)检出情况、血清炎性因子与早产低体重(PLBW)的关系.方法 通过严格筛查分别选取分娩出早产低体重儿的产妇(PLBW组)和正常分娩的产妇各30例(对照组),对其牙周状况进行检查,记录菌斑指数(PI)、出血指数(BI)、探诊深度(PD)及临床附着丧失水平(CAL),并采集产妇龈下菌斑、静脉血和脐带血,采用16S rRNA PCR法检测菌斑中P.gingivalis,酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血清中自细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-6(IL-6)和前列腺素E_2(PGE_2)水平.结果 PLBW组牙周状况较差,P.gingivalis在PLBW组和对照组中检出率分别为56.7%和30.0%,两者差异有统计学意义(P<0.05).牙周病变程度、P.ginsivdis检出率与胎儿孕周和出生体重均呈弱负相关(P<0.05).PLBW组静脉血和脐带血中IL-1β、IL-6、PGE_2水平均较对照组高;PLBW组内患有牙周病者静脉血中IL-1β、PGE_2含量高于牙周健康者(P<0.01).结论 孕妇牙周感染可能是导致早产低体重儿的原因之一.
作者：林垚；田宗蕊；陈宏柏；台保军；江汉；杜民权 刊期： 2009年第06期
华西口腔医学杂志
主管:中华人民共和国教育部
主办：四川大学
