刘珊玲;钱晓蕾;彭芝兰;王和
目的研究L1210及其克隆细胞mRNA表达的差异,从基因水平探讨质控瘤株的方法.方法用SDS-PAGE电泳观察瘤细胞株的蛋白质电泳图谱;6株生物素标记的探针与瘤细胞进行玻片原位杂交测定瘤细胞mRNA的表达.结果北京肿瘤所L1210蛋白质条带数为32条带,克隆细胞L3F9和L3E11均为31条带;细胞原位杂交证明,北京肿瘤所L1210与6株探针均杂交阳性,但杂交阳性染色强度不同;克隆细胞L3E11与p16、c-jun及p53探针杂交阳性;克隆细胞L3F9与p16,c-fos,c-myc及c-jun探针杂交阳性.结论从北京肿瘤所保存的L1210细胞中获得的2株克隆细胞L3E11和L3F9的蛋白质电泳图谱的条带数一致,但其mRNA 的表达不同; c-fos,c-myc以及p53基因的表达与否可以把这2株克隆细胞区别开来,cDNA探针检测可作为对细胞株进行质量控制的有效方法.
作者:刘秋燕;吕占军;王秀芳;刘福英 刊期: 2003年第02期
目的观察雄激素和雌激素对去势后大鼠前列腺腹侧叶中血红素氧化酶-1(HO-1)基因表达的影响.方法采用睾丸切除术创建大鼠去势模型,用RT-PCR方法观察HO-1的转录水平,应用免疫组织化学结合图像分析技术,观察去势、外源性雄激素和雌激素对大鼠前列腺腹侧叶中HO-1蛋白水平及分布的影响.结果去势组HO-1 mRNA转录水平和HO-1蛋白表达水平显著低于正常对照组(P<0.01);外源性给予雄激素组和雌激素组的HO-1 mRNA转录水平和HO-1蛋白表达水平明显增高(P<0.01),且雌激素引起前列腺间质HO-1表达增加.结论一氧化碳-血红素氧化酶系统可能参与了雌、雄激素引起前列腺异常增殖的病理过程.
作者:田坚;郑煜;张杰;杨春;王健;张峙 刊期: 2003年第02期
目的从人子宫颈粘液分离纯化新的抗菌多肽. 方法用5%乙酸提取人子宫颈粘液可溶物,经电泳凝胶琼脂糖弥散法抗菌试验发现,子宫颈粘液酸溶性提取物有一条主带对大肠杆菌耐氨苄株ML-35P有强抗菌活性,命名为HCP.应用制备性酸性尿素聚丙烯酰胺凝胶电泳技术及洗脱电泳技术得到构成该主带的混合物,后应用反相高效液相色谱技术分离纯化多肽.经Tricine-SDS-PAGE鉴定其相对分子质量,并运用琼脂糖弥散法鉴定其抗菌活性.结果从子宫颈粘液酸溶性提取物中纯化出一多肽,相对分子质量约为14×103,命名为HCP-1,具有抗耐药性大肠杆菌和绿脓杆菌的活性. 结论 HCP-1可能是宫颈粘液天然免疫机制中的新的效应分子.
作者:杨华蓉;潘小玲;黄宁;吴琦;冯云;王伯瑶 刊期: 2003年第02期
目的评价腺苷脱氨酶和结核抗体对鉴别恶性腹水和结核性腹水的临床价值.方法采用改良的Martineck法和金标免疫斑点法(DIGFA)对35例结核性腹水,31例恶性腹水的腹水腺苷脱氨酶(ADA)和结核性抗体(PPD)水平进行了检测.结果结核性腹水ADA和PPD水平明显高于恶性腹水,以ADA>45 U/L作为阳性标准,其对结核性腹水的敏感性为100%,特异性为97.1%,准确性为98.5%,腹水结核抗体对结核性腹水的敏感性为93.5%,特异性为94.3%,准确性为95.38%.结论腹水ADA和PPD检测对鉴别恶性腹水和结核性腹水有重要的临床价值,腹水ADA水平升高和PPD阳性支持结核性腹水,反之,则支持恶性腹水诊断.
作者:杨正兵;向丹沙;傅明建 刊期: 2003年第02期
目的探讨沙棘总黄酮改善高血压及慢性心力衰竭等疾病造成的心肌肥大的分子药理机制.方法用机械牵张负荷离体培养大鼠心肌细胞,使心肌压力超负荷,造成肥大;并通过免疫组织化学方法观察不同浓度沙棘总黄酮对牵张诱导的心肌细胞NF-κB激活的影响.结果牵张离体培养心肌细胞10 h后,NF-κB被激活;沙棘总黄酮抑制牵张诱导的心肌细胞NF-κB的激活,其抑制作用与沙棘总黄酮存在浓度依赖关系.结论沙棘总黄酮通过抑制NF-κB信号传递系统的激活,引起细胞内相关分子表达调控机制改变,从而发挥其药理作用.
作者:肖准;彭文珍;朱彬;王正荣 刊期: 2003年第02期
目的了解食管癌切除行食管胃分层吻合和吻合器吻合术后的生命质量.方法用改良EORTC QLQ C-30法对切除食管癌行食管胃分层吻合术后3~6月的生命质量进行测评,并与器械吻合者比较.结果分层吻合在躯体功能,情感功能,吞咽症状,反流症状四个维度得分[中位数(中间四分位间距)]分别为70(50~100),85(58~100),0(0~0),13(0~44),器械吻合在四个维度得分分别为62(40~100),79(50~100),0(0~33),25(0~50),两种吻合方法在这四个维度方面差别有统计学意义(P<0.05),其余维度差别无统计学意义.结论分层吻合术后生命质量高于器械吻合,主要表现在身体功能和情感功能好于器械吻合,吞咽症状和反流症状低于器械吻合.
作者:付茂勇;赵雍凡;阎齐;姚玉春;解晨浩 刊期: 2003年第02期
目的探讨血管紧张素Ⅱ受体拮抗剂(Losartan)减少糖尿病大鼠尿蛋白及保护肾功能的机制.方法实验分为对照、模型和Losartan治疗组3组,干预处理4周.分别在1、2和4周检测24 h尿蛋白,内生肌酐清除率( Ccr)、平均动脉压(MAP)、肾重/体重、血、尿ET-1及肾组织Ⅳ型胶原、纤连蛋白(FN)的表达.结果模型组24 h尿蛋白及MAP明显增高,第2周达高峰,与对照组比较有显著性差异(P<0.05),而Ccr下降、肾重/体重增加.免疫组化显示,肾组织FN、Ⅳ型胶原表达水平增强,尤其在基底膜.血、尿ET-1水平升高,与对照组比较亦有显著性差异(P<0.05).Losartan组MAP、24 h尿蛋白、肾重/体重、Ccr均有下降,与模型组比较,P<0.05;血、尿ET-1水平亦降低,尤其尿ET-1下降明显(P<0.01),肾组织FN、Ⅳ型胶原表达水平减弱,与对照组强度相似.结论 Losartan可减少糖尿病大鼠蛋白尿,并有肾脏保护作用.
作者:杨立川;樊均明;米绪华;刘先蓉;许国章 刊期: 2003年第02期
目的构建C3d的真核表达质粒,以期将其作为分子佐剂,提高核酸疫苗的免疫效能.方法采用PCR技术扩增小鼠补体C3d基因(897 bp),并将其克隆至pGEM-T载体上; 经鉴定其DNA序列正确;再将其亚克隆至真核表达载体pVAX1上.结果经DNA测序证实了该克隆片段为小鼠补体C3d基因,可进一步用于基因表达和基因治疗的研究.结论构建了C3d真核表达质粒,为高效核酸疫苗的研究打下了良好的基础.
作者:孙梅芹;赵连三;陈守春;王松;周陶友;唐红;陈毅荣;闫娟 刊期: 2003年第02期
目的对两种中国地方猪种(五指山猪和版纳微型猪近交系)的86头个体进行猪内源性逆转录病毒(PERV)亚型分析. 方法取引物EnvA、EnvB和EnvC分别用于鉴定PERV的A、B和C亚型,并对86头个体进行PCR法分析. 结果在所有被检测个体中,77.9%的个体的基因组中同时有PERV的A、B两种亚型,另外22.1%的个体的基因组中则只有PERV的A或B亚型;所有个体的外周血白细胞中均未检测到PERV的C亚型. 结论 PERV在中国五指山猪和版纳微型猪近交系的外周血白细胞中只有A、B两种亚型,并且以AB的混合亚型为主.
作者:张立;步宏;李胜富;于萍;李幼平;程惊秋 刊期: 2003年第02期
目的建立粮食样品中玉米赤霉烯酮及其代谢物的毛细管电泳测定方法.方法样品经液-液超声波提取,C18小柱净化后,胶束电动毛细管电泳(MEKC)测定.结果玉米赤霉烯酮(Zeralenone,ZON)、α-Zearalenol(α-ZOL)、β-Zearalenol(β-ZOL)、黄曲霉B1(Aflatoxin B1,AFT B1)、赭曲霉A(Ochratoxin A,Och A)的检出限分别为:0.0084、0.081、0.14、0.0016、0.031 μg/ml.样品加标回收率77.9%~103.1%,相对标准偏差0.63%~1.98%.结论该法灵敏、准确,可用于粮食样品中玉米赤霉烯酮等真菌毒素的测定.
作者:曾红燕;黎源倩;晋军;孙惠琴 刊期: 2003年第02期
目的探讨胃起搏在手术后胃动力障碍治疗中的可行性及疗效.方法对迷走神经干切断术后急性胃轻瘫的动物模型分别应用胃起搏及静注红霉素(1 mg/kg),比较胃动力学指标变化.结果胃起搏组及红霉素组的胃、十二指肠压力及胃窦-十二指肠压力差均高于起搏前基础压(P<0.001);胃起搏组胃内压及胃窦-十二指肠压力差均高于红霉素组(P<0.001);两组的十二指肠压无显著性差异(P>0.05);起搏组停起搏20 min后胃内压虽有下降趋势,但此时的胃底压、胃体压、胃窦压仍高于红霉素组(P分别<0.01,<0.05,<0.05);胃起搏2 h的胃排空率(64.41±6.66%)高于静注红霉素2 h的胃排空率(53.73%±7.07%)(P<0.01).结论高频胃起搏能明显增加胃内压、胃窦-十二指肠压力差及胃排空率,对术后胃轻瘫的疗效优于红霉素.
作者:李富宇;于运海;何生;毛辉 刊期: 2003年第02期
目的评价血行播散型肺结核的螺旋CT表现特征.方法对18例经临床证实的血行播散型肺结核采用螺旋CT机扫描,观察肺粟粒结节的分布、大小、肺密度、肺门纵隔淋巴结增大及肺内继发结核病灶.结果 14例急性粟粒性肺结核均表现为粟粒结节肺野内均匀分布,粟粒结节大小一致11例(78%),粟粒结节周围毛玻璃样征13例(93%);4例亚急性或慢性血行播散型肺结核均表现为肺结节上下、内外分布不均,大小不一致.结论血行播散型肺结核不同病期存在着不同的优势螺旋CT表现特征,与感染途径以及相应的病理解剖改变有关.
作者:余建群;杨志刚 刊期: 2003年第02期
目的探讨平滑肌肌动蛋白(SMA)-α mRNA的表达,以了解其在哮喘发病机制中的作用.方法以卵蛋白雾化复制哮喘模型,在激发后3 d、1周及2周用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测肺部α-SMA mRNA表达,同时用图象分析法测量大鼠气道形态学参数.结果大鼠哮喘激发后2周开始出现气道平滑肌肌层增厚,而α-SMA mRNA在哮喘激发1周表达升高,2周后更加明显,α-SMA mRNA表达与气道平滑肌肌层增厚具有一定相关性.结论哮喘气道重构中既有气道平滑肌的增生肥大,又可能有平滑肌表型改变.
作者:吴昭萍;罗凤鸣;王曾礼;刘小菁;刘春涛;王文志;章小红 刊期: 2003年第02期
目的研究不同生长发育期大鼠口腔运动肌肉的收缩特性,以期对口腔功能改变对肌肉收缩特性的影响进行评价. 方法对4、6、8周龄Wistar 雄性大鼠各15只深度麻醉后,在自制的电刺激-力测试装置上测试并记录了大鼠单侧嚼肌(MM)、二腹肌前腹(DM)、翼外肌(LPM)在电刺激下的时间-收缩力关系曲线,得出了它们在电刺激下主动收缩的收缩速度、完全松弛时间、大收缩力.并分析了这些数据之间的关系.结果在单一刺激下,4、6、8周龄大鼠MM的收缩时间分别为0.18±0.01 s,0.16±0.01 s,0.16±0.02 s,收缩力分别为4.83±0.48 g、5.96±1.21 g、9.85±1.93 g;DM的收缩时间为0.34±0.03 s、0.36±0.04 s、0.17±0.01 s,收缩力分别为:3.80±0.40 g、4.71±0.73 g、8.59±1.48 g,LPM的收缩时间为0.37±0.04 s、0.24±0.03 s、0.24±0.02 s,收缩力分别为5.38±1.05 g、10.70±2.76 g、34.95±12.2 g;各肌群收缩力随刺激频率增加明显加大,挛缩时达到大值. 结论在单一刺激下三种肌群的收缩速度在快速生长期都在加快,MM、LPM显著加快期为4到6周,DM则为6到8周.所有肌群收缩力快速增长期为6到8周.
作者:陈孟诗;李良;宋一平;李蜀晋;吴文超 刊期: 2003年第02期
目的了解白细胞介素18(IL-18)在结肠腺癌及腺瘤中的表达及其作用. 方法采用免疫组化方法检测IL-18在21例结肠腺瘤及33例结肠癌中的表达.结果结肠腺癌、腺瘤及非癌非瘤粘膜上皮IL-18表达的阳性率分别为78.8%,100%,100%,无显著性差异(P>0.05).无表达主要集中在中、低分化腺癌,腺癌分化程度越高,IL-18表达越强(P<0.05).结肠腺瘤阳性率与伴随的不典型增生程度无明显相关(P>0.05).结论 IL-18在结肠腺瘤中表达仍较丰富,但结肠癌中表达减少或不表达,分化越低,表达越弱.
作者:温忠慧;欧阳钦;陈代云;苏学英 刊期: 2003年第02期
女性生殖系统多部位原发恶性肿瘤(multiple primary carcinoma, MPC)是指原发于女性生殖系统的两个或两个以上部位的恶性肿瘤,临床上少见,其中多为卵巢癌合并子宫内膜癌,目前尚无国际公认的标准治疗模式.作者通过分析15例女性生殖系统MPC,探讨其临床、病理特点及预后相关因素,并对治疗模式进行初步评价.
作者:程易凡;彭芝兰;王平;罗军;钱晓蕾 刊期: 2003年第02期
目的研究雷公藤多甙对肌肉本身收缩力的作用.方法用电子刺激器刺激30只大鼠膈神经-膈肌标本的膈神经和直接刺激45只蟾蜍腓肠肌标本的方法,研究雷公藤多甙对肌肉本身收缩力的影响.结果在三分之一适刺激强度时,雷公藤多甙在20 mg/L组,前60 min使大鼠膈肌收缩幅度增大,此后至90 min为止,收缩幅度无增大;在40 mg/L、60 mg/L组中前60 min未引起大鼠膈肌收缩幅度减小.在三分之一适刺激强度直接刺激蟾蜍腓肠肌标本时,雷公藤多甙在60 mg/L组前30 min未引起蟾蜍腓肠肌收缩张力减小.而溶剂二甲亚砜在三分之一适刺激强度时使大鼠膈肌收缩幅度和蟾蜍腓肠肌收缩张力均明显减小.结论雷公藤多甙对肌肉本身收缩力有一定增强作用;溶剂二甲亚砜对肌肉本身收缩有抑制作用.
作者:张云;喻璟瑞;吕广能;李克勇;徐建国 刊期: 2003年第02期
目的研究壬基酚对SD雄性大鼠生殖功能的影响.方法将成年雄性SD大鼠经口染毒壬基酚(50、100、200 mg/kg)28 d后,处死,测定生殖功能相关指标,并作睾丸组织病理学检查.取成年雄性大鼠睾丸细胞进行体外培养,壬基酚染毒,测定睾丸酮分泌量的变化,并对其间质细胞、支持细胞和生精细胞的超微结构进行电镜观察.结果经口染毒壬基酚剂量≥100 mg/kg可引起大鼠精子计数和活力的显著降低,睾丸组织病理学切片显示曲细精管萎缩,生精能力下降.睾丸细胞体外培养研究显示,壬基酚能抑制睾酮的分泌,且电镜观察可见间质细胞内质网肿胀,表明合成功能减弱.结论壬基酚在高浓度时能明显损伤雄性大鼠的生殖功能.
作者:张浩;曾祥贵;程薇波;吴德生 刊期: 2003年第02期
目的探讨部分背根切断术及针刺对背根节(DRG)c-jun表达的影响.方法将成年雄猫15只,分假手术组,手术组和术后针刺组,每组5只.手术组动物行单侧备用根术,术后针刺组动物经单侧备用根术后,针刺后肢手术侧L6脊神经分布区中的两组穴位:足三里和悬中;伏兔和三阴交, 每天一次,每次30 min,连续针刺7 d.通过免疫组化ABC法,用c-jun特异抗体(1∶1000,Santa Cruz) 对切片进行染色,DAB呈色.观察并测量DRG中c-jun阳性神经元的分布、数量及反应强度.结果在假手术组DRG中,只有部分神经元染色.手术组c-jun阳性神经元的数量较假手术组显著增多(P<0.05),其免疫反应水平较假手术组,显著上升(P<0.05).术后针刺组较手术组的c-jun免疫反应强度增强,而阳性神经元的数量没有显著差异.结论部分背根切断后备用DRG神经元中c-jun的表达增加,针刺促使c-jun的表达进一步上调.
作者:柯青;王廷华;李朗;于建云;郭泽云 刊期: 2003年第02期
目的探讨影响小鼠胚胎成纤维细胞(MEF)分离和培养的一些因素,以建立稳定的MEF培养体系.方法取BALB/c小鼠胚胎分离成纤维细胞,利用体外培养体系,对MEF的生长形态、生长曲线及细胞周期进行观察,并对不同胚胎日龄以及不同胰酶作用时间对MEF分离及培养的影响进行研究.结果 13.5 d胎龄鼠胚的MEF分离效果优于10.5 d、18.5 d 胎龄鼠胚;MEF在体外为贴壁生长型细胞,第三代细胞增殖旺盛;在室温条件下,0.25%胰酶消化MEF时间以3~5 min为宜.结论 MEF在第3代增殖旺盛,适宜作胚胎干细胞的饲养层.
作者:张怡;赵连三;汪成孝;雷秉钧 刊期: 2003年第02期