大鼠缺氧性肺动脉高压时三种缺氧诱导因子α亚基在肺动脉中的差异表达

摘要：目的区分大鼠缺氧性肺动脉高压时肺血管壁3种缺氧诱导因子α(HIF-α) 亚基(HIF-1α、HIF-2α、HIF-3α)的基因表达特征.方法 40只雄性Wistar大鼠按随机数字表法分为常氧0 d组(H0组)、缺氧3 d组(H3组)、7 d组(H7组)、14 d组(H14组)和21 d组(H21组),每组8只.用(10.0±0.5)%的氧浓度每天间断缺氧8 h,测各组大鼠平均肺动脉压(mPAP)、肺动脉管壁面积(WA%)、肺动脉中膜厚度(PAMT)、右室肥厚指数(RVHI%);用原位杂交、免疫印迹和免疫组化法检测HIF-1α、HIF-2α和HIF-3α基因表达.结果 H7组mPAP为(18.40±0.40) mm Hg (1 mm Hg=0.133 kPa), H0组为(14.40±0.40) mm Hg, H14组为(21.20±0.20) mm Hg,H7组与H0组、H14组比较差异有统计学意义(P均<0.05);血管形态学显示,H7组WA%、PAMT、RVHI%分别为 (47.8±0.8)%、(12.3±0.5) μm、(24.0±1.0)%, H14组分别为(60.3±0.4)%、(15.0±0.3)μm、(25.0±1.8)%,H0组分别为(35.5±1.3)%、(11.9±0.6)μm、(23.6±0.5)%,H21组分别为(65.0±0.7)%、(23.0±0.8)μm、(27.7±1.0)%, WA% H7组与H0组、H14组与H0组、H21组与H14组间比较差异均有统计学意义(P均<0.05). 原位杂交显示,H14组HIF-1α、HIF-2α、HIF-3α mRNA水平的吸光度(A)值分别为0.200±0.020、0.080±0.010、0.170±0.010;H7组分别为0.050±0.020、0.160±0.020、0.160±0.020; H0组分别为0.050±0.010、0.140±0.020、0.060±0.010; H14组与H0组三者、H7 组与H0组仅HIF-3α比较差异有统计学意义(P均<0.05).免疫组化表明, H3组HIF-1α,HIF-2α和HIF-3α蛋白表达分别为0.200±0.020、0.020±0.010、0.050±0.010;H14组分别为0.160±0.010、0.100±0.020、0.160±0.010; H7组分别为0.220±0.020、0.030±0.010、0.180±0.020; H0组分别为0.050±0.010、0.020±0.010、0.040±0.010, H3组HIF-1α蛋白、H14组HIF-2α蛋白、H7组、H3组HIF-3α蛋白分别与H0组比较差异有统计学意义(P均<0.05).H7组免疫印迹显示在肺组织中HIF-3α表达较H0组显著减弱,H3组HIF-2α、HIF-3α蛋白表达较H0组增强,随着缺氧时间延长,H14组较H7组更明显.结论 3种HIF-α表达差异可能在缺氧性肺动脉高压发病中发挥作用.