学术投稿

小RNA干扰DDR2基因表达对肝星状细胞的影响

张广林;罗蒙;孙勇伟;徐庆;陈炜

关键词:RNA干扰, 盘状结构域受体2, 肝星状细胞, 肝硬化
摘要:目的 探讨siRNA干扰大鼠盘状结构域受体2(discoidin domain receptor2,DDB2)基因对肝星状细胞(hepatic stellate cell,HSC)的影响,评估DDR2在肝纤维化发生中的作用.方法 (1)化学合成3对针对DDR2基因的siRNAs,转染肝星状细胞株(HSC-T6),筛选抑制效率高的siRNA用于干扰实验;(2)将肝星状细胞株HSC-T6分为3组:正常组(normal,N组)、阴性对照组(negative control,NC组)和干扰组(siRNA-DDR2,SI组).将筛选的抑制效率高的siRNA以脂质体法转染HSC-T6细胞株,以RT-PCR检测其DDR2,α-平滑肌肌动蛋白(α-smooth muscle actin,α-SMA)和I型胶原(collagen-Ⅰ)的mRNA表达,Western blot检测DDR2蛋白表达变化;同时四唑盐(MTT)法检测细胞增殖情况.结果 (1)868位点的siRNA抑制效率高;(2)与正常组相比,siRNA-DDR2转染组DDR2和α-SMA的mRNA表达均显著下降(分别t=6.43,t=7.34,均P<0.01),DDR2蛋白的表达亦显著降低(t=4.49,P<0.01),同时HSC的增殖能力也显著降低(t=18.32,P<0.01);相反,阴性对照组与正常组相比,DDR2、α-SMA的mRNA表达以及DDR2蛋白和HSC的增殖能力则无明显改变.结论 siRNA-DDR2能显著抑制HSC的活化与增殖,进而抑制纤维化发生,具有潜在的抗纤维化作用.
中华普通外科杂志相关文献
  • 小RNA干扰DDR2基因表达对肝星状细胞的影响

    目的 探讨siRNA干扰大鼠盘状结构域受体2(discoidin domain receptor2,DDB2)基因对肝星状细胞(hepatic stellate cell,HSC)的影响,评估DDR2在肝纤维化发生中的作用.方法 (1)化学合成3对针对DDR2基因的siRNAs,转染肝星状细胞株(HSC-T6),筛选抑制效率高的siRNA用于干扰实验;(2)将肝星状细胞株HSC-T6分为3组:正常组(normal,N组)、阴性对照组(negative control,NC组)和干扰组(siRNA-DDR2,SI组).将筛选的抑制效率高的siRNA以脂质体法转染HSC-T6细胞株,以RT-PCR检测其DDR2,α-平滑肌肌动蛋白(α-smooth muscle actin,α-SMA)和I型胶原(collagen-Ⅰ)的mRNA表达,Western blot检测DDR2蛋白表达变化;同时四唑盐(MTT)法检测细胞增殖情况.结果 (1)868位点的siRNA抑制效率高;(2)与正常组相比,siRNA-DDR2转染组DDR2和α-SMA的mRNA表达均显著下降(分别t=6.43,t=7.34,均P<0.01),DDR2蛋白的表达亦显著降低(t=4.49,P<0.01),同时HSC的增殖能力也显著降低(t=18.32,P<0.01);相反,阴性对照组与正常组相比,DDR2、α-SMA的mRNA表达以及DDR2蛋白和HSC的增殖能力则无明显改变.结论 siRNA-DDR2能显著抑制HSC的活化与增殖,进而抑制纤维化发生,具有潜在的抗纤维化作用.

    作者:张广林;罗蒙;孙勇伟;徐庆;陈炜 刊期: 2009年第09期

  • 主动脉损伤覆膜支架治疗后急性血管阻塞的处理

    血管腔内技术治疗大血管病变近年来发展迅速,其并发症如支架移位、内漏、脊髓缺血等已为临床医生所熟知[1],但大血管内覆膜支架急性阻塞的并发症临床罕见,本文报告2例治疗情况及原因分析.

    作者:姜剑军;丁祥就;王庆良;胡三元;张光永;苏庆波;李峰;王占民 刊期: 2009年第09期

  • Billroth-Ⅱ式胃切除术后治疗性内镜逆行胰胆管造影的应用经验

    我们回顾性分析2001年2月至2008年10月间我院18例毕Ⅱ式胃切除术后治疗性内镜逆行胰胆管造影(ERCP)的临床资料,分析其操作技巧、成败原因及临床疗效,现报告如下:

    作者:王爱东;冯仙菊;陈志红;何赛琴;龚彪;方哲平 刊期: 2009年第09期

  • 经腹经后纵隔贲门癌根治术

    目的 探讨经腹经后纵隔进行贲门癌根治的可行性和安全性.方法 对26例贲门癌侵及食管下段的患者进行经腹经后纵隔贲门癌根治术,其中根治性近端胃食管切除9例,根治性全胃食管切除17例.结果 本组26例均成功完成经腹经后纵隔贲门癌根治术.平均手术时间:全胃切除(189±39)min,近端胃切除(153±35)min;平均手术出血量:全胃切除(200±80)ml,近端胃切除(168±76)ml;平均清扫淋巴结数:腹腔淋巴结(23.3±7.3)枚/例,食管旁淋巴结(4.1±2.0)枚/例.术后无吻合口出血、吻合口瘘、吻合口狭窄发生,4例患者出现肺部感染,经治疗好转,所有患者恢复良好.术后随访5~51个月,4例出现肝转移,2例发生肺转移,其中1例死亡,其余患者情况良好,无吻合口癌复发.结论 经腹经后纵隔贲门癌根治术安全、可行,适用于膈肌没有受侵犯、食管受侵小于5 cm的胃上都癌.

    作者:陈焰;管小青;朱信强;吴骥 刊期: 2009年第09期

  • 左侧门静脉高压症的外科治疗体会

    左侧门静脉高压症是一种因脾静脉阻塞而形成的特殊类型的门静脉高压症.脾静脉阻塞时,脾脏血液回流受阻造成门静脉脾胃区属支压力升高,继而可引起胃底静脉曲张、上消化道出血、脾肿大等一系列临床表现.

    作者:朱一平;牟一平;王挺;徐孙兵;陈其龙;王松彪;徐晓武;彭淑牖 刊期: 2009年第09期

  • Ⅵ型Ehlers-Danlos综合征合并肾动脉自发破裂及肾动脉-下腔静脉瘘形成一例

    患者男,32岁.因无诱因发生剧烈右腰区疼痛伴肉眼血尿2d于2006年11月7日急诊入院.既往幼年始皮肤易破损,其母亲与他特征相似.行常规检查后,初步判断为泌尿系疾病收入泌尿外科.入院后第2天发生充血性心力衰竭,呼吸困难,不能平卧.

    作者:单绍银;张健;王雷;段志泉;辛世杰 刊期: 2009年第09期

  • 原发性十二指肠癌的诊治与预后分析

    目的 探讨原发性十二指肠癌的诊断、治疗及影响预后的因素.方法 回顾性分析2000年6月至2007年6月间经手术治疗的41例原发性十二指肠癌患者的临床资料. 结果本组原发性十二指肠癌的临床表现无特异性,可有腹痛、腹胀、黄疸、呕吐以及上消化道出血等表现.术前纤维十二指肠镜确诊率为86%,十二指肠低张造影诊断率为90%,B超检查阳性率为20%,CT扫描诊断正确率为33%.对23例行胰头十二指肠切除术,6例节段性肠管切除术,9例短路手术,剖腹探查取活检术3例.患者术后5年生存率为18%.单因素分析结果显示:手术方式、病理类型、原发肿瘤浸润深度、淋巴结转移与预后相关;多因素回归分析显示:手术方式、原发肿瘤浸润深度和淋巴结转移是影响原发性十二指肠癌患者术后生存的独立因素.结论 十二指肠低张X线造影和纤维胃十二指肠镜是诊断十二指肠癌的主要手段.胰十二指肠切除术是原发性十二指肠癌的首选治疗方法.

    作者:秦长江;史朝晖;孙嵩洛;李诗杰;郑立;马万里 刊期: 2009年第09期

  • 胰十二指肠切除术后出血的原因及防治

    目的 探讨胰十二指肠切除术后出血的原因、诊断及防治方法.方法 回顾性分析1995年1月至2008年12月142例胰十二指肠切除术的临床资料.结果 142例胰十二指肠切除共发生术后出血20例,发生率14.1%.20例出血病例中,腹腔出血7例,消化道出血14例,1例兼有腹腔出血和消化道出血.在7例腹腔出血中,早期和晚期出血分别有3例和4例;14例消化道出血中,早期出血3例,晚期出血11例.20例患者中7例死亡,死亡率为35%.单因素分析显示术中出血量、术中输血量、术后感染和胰瘘为术后出血的相关因素,多因素分析显示术后感染(OR=6.918)和术后胰瘘(OR=3.948)为独立危险因素.结论 胰十二指肠切除术后出血的发生率和死亡率仍较高.术中严密止血,术后预防胰瘘、感染及应激性溃疡是减少术后出血的关键,应根据出血的部位、时间和严重程度采取相应的止血措施.

    作者:张大方;李澍;朱卫华;封益飞;郑晟旻;彭吉润;冷希圣 刊期: 2009年第09期

  • 腺病毒介导的靶向蛋白激酶B1和环氧合酶2短发夹RNA抑制人胃腺癌细胞的侵袭和转移

    目的 构建靶向性蛋白激酶B1(Aktl)和环氧合酶2(COX-2)短发夹RNA(shRNA)腺病毒载体,研究其对SGC-7901人胃腺癌细胞侵袭和转移的抑制效果.方法 构建腺病毒载体pGSadeno-Aktl+COX-2(rAd5-A+C)并体外转染SGC-7901人胃癌细胞株后,用实时定量PCR和蛋白印迹分别检测对照组SGC-7901、空载组rAd5-HK和治疗组rAd5-A+C中Aktl、COX-2 mRNA和蛋白质的表达,其中以对照组SGC-7901、空载组rAd5-HK作为阴性对照.用ELISA法分别检测它们的MMP-2和MMP-9含量;用Transwell法分析它们的侵袭和转移能力.结果 构建的rAd5-A+C重组腺病毒载体在转染SGC-7901细胞48 h后可显著抑制Aktl和COX-2 mRNA的表达,而治疗组rAd5-A+C的Aktl和COX-2蛋白表达量与对照组和空载组相比分别下调68.4%和60.2%(均P<0.01);rAd5-A+C组中MMP-2和MMP-9含量分别为(39.7±1.7)ng/ml(31.3±3.6)ng/ml,明显低于对照组SGC-7901(278.4±15.5)ng/ml(225.4±15.1)ng/ml和卒载组rAd5-HK(275.5±2.1)ng/ml、(226.0±23.3)ng/ml(P=0.01、P=0.021).结论 腺病毒介导的靶向性Aktl和COX-2shRNA可抑制人胃腺癌细胞的侵袭和转移.

    作者:张靖;付彦超;康春生;张庆瑜;王涛;张洁 刊期: 2009年第09期

  • 高风险患者腹主动脉瘤手术与腔内治疗效果的比较

    目的 比较高风险患者腹主动脉瘤(abdominal aortic aneurysm,AAA)手术治疗(opensurgical repair,OSR)与腔内治疗(endovascular aneurysm repair,EVAR)的效果,探讨高风险患者AAA治疗方式的选择.方法 利用(customized probability index,CPI)危险评分方法[1]筛选出我院1998年至2008年高风险患者55例,比较OSR组(20例)与EVAR组(35例)围手术期及术后近期结果.结果 OSR组随访率100%,平均随访6年3个月.EVAR组随访率94%,平均随访5年10个月.(1)手术时间高风险患者EVAR组(3.1±0.6)h短于OSR组[(4.9±0.9)h(P<0.05)];(2)EVAR组术中出血、ICU时间和住院时间均短于OSR组(P<0.01);(3)围手术期死亡率EVAR组(2.86%)明显低于OSR组(15.00%);(4)术后并发症发生率EVAR组(17%)明显低于OSR组(40%);(5)EVAR组术后并发症主要为内漏(8.57%);(6)OSR组并发症主要为心脏相关性疾病(25%).结论 EVAR对于高风险患者AAA的治疗可以更少的导致围手术期心血管事件的发生,降低围手术期的死亡率和并发症发生率.CPI可以相对准确评估血管手术围手术期死亡率和并发症的发生率,可用于指导围手术期的治疗策略.

    作者:王伟;郭伟;刘小平;尹太;贾鑫;张宏鹏;杜昕 刊期: 2009年第09期

  • 肝内胆管自发性破裂的外科处理

    肝内胆管自发性破裂可引起胆汁性腹膜炎或膈下脓肿,或并发中毒性休克.该病起病急,临床上属于少见的急腹症疾病之一.因对本病的文献报道甚少,故将1998年1月至2008年4月诊治的13例肝内胆管自发性破裂的临床资料进行回顾性分析,报告如下:

    作者:任培土 刊期: 2009年第09期

  • 胰管离断综合征一例

    患者女,58岁,因暴饮暴食后出现急性中上腹部疼痛4 h就诊.患者既往有胆囊结石,慢性胆囊炎病史10余年.入院查体:T 38.9℃,BP 110/80 mm Hg,P 110次min,R 32次/min;急性病容,右侧卧位,全身皮肤及巩膜可疑黄染,全腹膨隆,伴明显肌紧张及广泛压痛,反跳痛.

    作者:张日欣;王立明;梁锐;高振明;王澍;罗福文;苗健;勾玉丽;王海波 刊期: 2009年第09期

  • 多原发大肠癌的临床诊断和外科治疗

    目的 探讨多原发大肠癌的临床特点、诊断和治疗方法.方法 对1998-2007年收治的47例同时性多原发大肠癌和20例异时性多原发大肠癌患者的临床病理资料进行回顾性分析.结果 67例多原发大肠癌中同时性多原发大肠癌47例(占70%),其中直肠癌占39%.Dukes分期(以病理分期晚的一个为准):A期6例,B期22例,C期15例,D期4例.67例中伴有淋巴结转移者20例,肠腔内伴有息肉者21例,无息肉者26例.行全结肠切除术3例,结肠次全切除术10例,根治性手术加肠段联合切除术34例.异时性多原发癌20例(占30%),共有癌灶44个,以结肠癌多见,共31例(占70%),二原发癌17例,三原发癌2例,四原发癌1例.与原发癌间隔时间7个月至19年,其中<2年者7例,2~5年者5例,>5年者8例.20例异时性多原发癌的初发癌均行根治性手术,14例二次癌和2例三次癌均行根治性切除术.同时性多原发大肠癌和异时性多原发癌初发癌根治术后5年生存率分别为74%和78%.结论 治疗大肠癌切忌满足于单一肠段或单个肿瘤的诊断和治疗,应利用结肠镜对全肠道进行仔细地检查,以便于及时发现大肠的多原发肿瘤;在根治性切除肠道肿瘤的同时应尽可能多地保留残存的正常肠道,从而更好地改善患者术后的生活质量.

    作者:刘勇;李德川;钱俊;鞠海星;冯海洋;朱玉萍 刊期: 2009年第09期

  • 经鼻肠减压管选择性小肠造影诊断肠梗阻

    目的 探讨经鼻肠减压管选择性小肠造影对小肠梗阻诊断的临床意义.方法 对35例临床诊断为小肠梗阻并排除急诊手术指征患者,在X线监视下经鼻置入300 cm长的减压管至空肠上段抽吸减压治疗,随着小肠减压的不断深入,减压管前端可以大限度地接近病变部位进行选择性小肠造影.在透视下经减压管吸引口注入76%泛影葡胺20~100ml,再注入空气50~200ml,使造影剂和空气直接涌入梗阻病灶周围形成双对比造影.对局部进行动态多体位观察,摄取点片.必要时同抽减压管至空肠上段行全小肠双对比造影.结果 本组35例置管全部成功,小肠减压治疗后肠梗阻缓解20例,减轻15例,手术治疗10例.35例选择性小肠造影局部小肠显影清晰,不重叠,重点突出.未见明显异常X线征象6例,粘连性肠梗阻15例,小肠肿瘤4例(转移瘤3例,小肠癌1例),小肠克罗恩病3例,小肠放射性肠炎3例(其中1例造影误诊为小肠转移瘤),小肠套叠2例,小肠息肉1例,升结肠癌1例. 结论鼻肠减压管具有小肠减压治疗与选择性小肠造影检查的双重作用.选择性小肠造影可以明确梗阻部位、梗阻程度和梗阻病因,做出影像学定位与定性诊断,为确定手术时机和手术方案提供可靠依据.

    作者:李德春;李瑞红;吴萍;王守军;张昕辉 刊期: 2009年第09期

  • 自发性胃破裂一例

    患者,女,19岁.因饱餐后腹胀伴呕吐20 h,剧烈腹痛1.5 h于2008年11月1日入院.患者14 d前曾因上腹不适行胃镜检查,可见浅表性胃炎,无其他阳性发现.查体:一般状态差,发育正常,表情痛苦,烦躁不安,被动体位.

    作者:付强 刊期: 2009年第09期

  • 急性肠系膜上动脉闭塞的诊断与治疗

    目的 探讨急性肠系膜上动脉闭塞的诊断与治疗.方法 对2000-2007年收治的15例急性肠系膜上动脉闭塞患者的临床资料进行回顾性分析.结果 本组15例患者中肠系膜上动脉栓塞11例,肠系膜上动脉血栓形成4例.入院后均行急诊剖腹探查术,其中2例行肠系膜上动脉取栓术,11例行肠系膜上动脉取栓加坏死肠管切除术,2例放弃手术.术后均行肝素等抗凝治疗.4例死亡,总病死率为27%.结论 对于有器质性心脏病的患者,如突然出现腹部疼痛,应警惕肠系膜上动脉闭塞的可能.早期诊断、早期行肠系膜上动脉取栓术是提高治愈率的关键.

    作者:王浩;席时富 刊期: 2009年第09期

  • 暴发性肝功能衰竭的急诊肝脏移植治疗

    暴发性肝功能衰竭(包括超急性、急性、亚急性肝功能衰竭)是一种严重威胁生命的肝脏疾病,需要在短时间内行肝脏移植.解放军一零七医院肝胆外科于2005年3月至2006年5月期间对6例暴发性肝功能衰竭患者行急诊肝脏移植治疗,现将相关经验总结如下:

    作者:曲明;王营;史艳芬;杜英东;尹惠生;夏强;张建军;陈小松 刊期: 2009年第09期

  • 脾脏窦岸细胞血管瘤的临床与病理分析

    脾脏窦岸细胞血管瘤(littoral cell angioma,LCA)是近来才被认识的一种仅发生于脾脏的良性血管性肿瘤,极为罕见.由Falk等[1]于1991年首次报道,至今国外仅报道数十例,国内报道不多.我院收治2例脾脏LCA,结合文献报告如下:

    作者:陈琴;邵黎明 刊期: 2009年第09期

  • 腔镜腋窝淋巴结清扫在早期乳腺癌保乳术中的应用

    现在已经有较多单位对早期乳腺癌采用保乳手术,我院自2002年3月至2006年1月,对118例早期乳腺癌患者进行肿瘤局部切除加腔镜腋窝淋巴结清扫,并与改良根治术进行对比,现将结果报告如下:

    作者:陈开运;向国安;王汉宁;肖方联 刊期: 2009年第09期

  • 胃间质瘤的临床病理特征和预后相关因素分析

    目的 探讨胃间质瘤的临床病理特征及预后相关因素.方法 回顾性分析1996年3月至2008年3月间天津医科大学附属肿瘤医院121例行手术切除治疗的胃间质瘤患者的临床资料,分别对性别、年龄、肿瘤大小及组织学类型等因素进行预后分析.结果 本组121例患者中位生存期为73.2个月,术后1年、3年及5年总生存率分别为82%、59%和50%,术后1年、3年、5年无瘤生存率分别为65%、46%和33%.单因素分析显示,性别(P=0.000)、肿瘤大小(P=0.000)及累及脏器(P=0.000)是影响预后的因素;多因素分析则显示,性别(P=0.000)、肿瘤大小(P=0.000)及累及脏器是影响预后的独立因素.结论 胃间质瘤中的男性、肿瘤直径>10 cm及累及周围脏器的患者预后较差.

    作者:赵天锁;李慧锴;王秀超;任贺;郝继辉 刊期: 2009年第09期

中华普通外科杂志

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