目的使用免疫组化方法研究膀胱肿瘤组织中碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)的表达情况及微血管密度(MVD)水平.方法手术切除的膀胱肿瘤组织26例,应用bFGF抗体、CD34 Envision两步法进行免疫组化染色.bFGF免疫组化染色参考Matern方法进行评分,MVD的计数按Weidner法并稍改进.结果bFGF在膀胱肿瘤组织中的过表达及MVD值随着病理分级和临床分期的升高而增加,MVD的多少与bFGF表达强弱有关.结论血管生成因子bFGF促进膀胱肿瘤的微血管生成和浸润,为抑制肿瘤微血管生成的治疗提供了试验依据.
作者:汪伟;丁强;张元芳;姜昊文;龚健 刊期: 2005年第05期
目的采用随机对照的方法对神经刺激器法和异感法这两种定位方法在三点腋路臂丛阻滞中的效果进行比较.方法45名拟行前臂和手部手术的病人被随机分入异感定位组(paresthesia,PAR组n=23)和周围神经刺激器定位组(peripheral nerve stimulator,PNS组n=22),分别采用异感定位法和神经刺激器定位法定位支配上肢的4支混合神经中的3支(肌皮神经、正中神经、桡神经或尺神经),将等量的2%利多卡因和0.5%布比卡因混合液40 mL分别注射于3支神经周围,其中肌皮神经5 mL,正中神经15 mL,桡神经或尺神经15 mL,另5 mL侵润上臂内侧的皮神经.臂丛阻滞成功被定义为注射30 min后,肘部远端5支神经(肌皮神经、桡神经、正中神经、尺神经和前臂内侧皮神经)支配区域的感觉阻滞完全,比较2组在臂丛阻滞成功率、时效和并发症等方面的差异.结果PNS组的阻滞成功率要高于PAR组(95.5%对54.5%,P<0.01),两组间差异主要由于PAR组的肌皮神经和桡神经阻滞率较低(P<0.05).PNS组的麻醉起效时间短于PAR组(19 min对29 min,P<0.01).两组中共有3例病人(6.6%)发生术后短暂的神经功能障碍,3周内均获完全恢复.结论PNS法是一种良好的定位手段.将该方法应用于三点法腋路臂丛神经阻滞,可获得优于传统异感定位法的效果.臂丛阻滞后神经功能障碍并不少见,应引起足够重视.
作者:车薛华;梁伟民;陈佳瑶 刊期: 2005年第05期
目的研究雌激素对体外培养的卵巢透明细胞癌细胞系ES-2增殖、侵袭力的影响和对MTA3、Snail、基质金属蛋白酶2(MMP-2)表达的调节作用,以探讨雌激素作用对ES-2细胞系的影响.方法体外培养卵巢透明细胞癌ES-2细胞系,去激素培养7 d后加入17β雌二醇(E2)1×10-7、1×10-8、1×10-9mol/L,MTT法检测细胞增殖情况,流式细胞仪测定细胞周期,改良的Boyden小室检测细胞侵袭力、运动力的变化,RT-PCR检测MTA3、Snail、MMP-2 mRNA表达,免疫组化法检测Snail、MMP-2表达,明胶酶谱检测基质金属蛋白酶活性.结果RT-PCR、Western Bbt结果示ES-2细胞系为ERα阴性表达,ERβ阳性表达,E-cad为阴性表达.17βE21×10-7、1×10-8、1×10-9mol/L均可促进细胞增殖;E21×10-8mol/L可使G0~G1期细胞减少,S期细胞增加,但对细胞凋亡无影响;17βE21×10-8mol/L可显著增强ES2细胞的侵袭力和趋向运动能力,并可降低MTA3mRNA表达,增加Snail、MMP-2 mRNA及蛋白表达.结论17βE2可显著促进ES-2细胞的侵袭能力,此作用可能是通过17βE2对MTA3表达下调和对Snail、MMP-2表达的上调实现的.
作者:丁景新;殷莲华;金鸿雁;刘晓霞;尧良清;孙云燕;丰有吉 刊期: 2005年第05期
目的探讨婴幼儿呼吸道合胞病毒肺炎治疗前后肺功能的变化.方法采用潮气呼吸法测定23名1~19个月的呼吸道合胞病毒肺炎婴幼儿的肺功能.以26名同龄健康儿童做对照.主要参数为:达峰时间(TPTEF)、达峰时间比(TPTEF/TE)、达峰容积(VPEF)、达峰容积比(VPEF/VE)、呼吸频率(RR)、潮气量(VT/kg)、潮气呼吸容量环(TFVL).结果治疗前肺炎患儿呼吸频率(RR)为(36.300±7.154)次/分,较同龄对照组(30.950±6.00)次/分明显增快(P<0.01),反映气道阻塞的指标:TPTEF/TE和VPEF/VE分别为(19.650±3.030)%和(23.150±2.860)%,低于健康对照组的(24.580±5.190)%和(26.020±4.340)%,P<0.01.经治疗,患儿呼吸频率逐渐下降为(33.560±5.570)次/分,TPTEF和VPEF、TPTEF/TE、VPEF/VE均明显回升,其中TPTEF/TE、VPEF/VE显著增高,为(24.240±5.700)%和(24.760±3.040)%,P<0.05.TBFV环形态特点:治疗前TBFV环呼气曲线升支陡、高峰提前、降支斜率增大.结论婴幼儿呼吸道合胞病毒肺炎时存在明显的小气道阻塞,潮气呼吸测定能反映肺炎气道病变的程度及临床治疗的效果.
作者:黄剑峰;张皓;陈超 刊期: 2005年第05期
目的拟从细胞水平观察阻断糜酶途径后对人血管平滑肌细胞生成血管紧张素(AngⅡ)及细胞增殖的影响.方法通过植块培养法获得人脐动脉血管平滑肌细胞,并分组为:①DMEM组(空白培养液对照组);②AngⅠ组;③AngⅠ+卡托普利组;④AngⅠ+糜酶抑素组;⑤AngⅠ+缬沙坦组.分别阻断血素紧张素转换酶、糜酶和AngⅠ受体,进行细胞计数、细胞增殖指数及培养液中AngⅡ含量的测定.结果药物干预组较AngⅠ组细胞数量减少(P<0.01);糜酶抑素组与缬沙坦组能明显抑制细胞增殖(P<0.01);糜酶抑素组的AngⅡ含量明显降低(P<0.01),缬沙坦组则明显升高(P<0.01).结论糜酶途径在血管平滑肌细胞AngⅡ生成及细胞增殖中起重要作用.
作者:沈建颖;宿燕岗;王现;虞勇;郭祺;王克强;葛均波 刊期: 2005年第05期
目的研究转染生存蛋白survivin反义寡核苷酸的抗肿瘤作用,对大鼠胃癌模型形成的干预作用、机制及是否与紫杉醇间有协同作用.方法在脂质体介导下进行survivin反义寡核苷酸的体外转染,以Western Blot检测survivin蛋白表达,以MTT法检测转染survivin反义寡核苷酸及联合紫杉醇对胃癌BGC-823细胞生长增殖的影响;以高盐饲料和甲基硝基二硝基胍(MNNG)诱导大鼠发生胃癌,造模中期分别腹腔注射脂质体包裹的survivin反义寡核苷酸、紫杉醇或两者联用,检测造模结束时各组大鼠胃癌的发生率、肿瘤组织中Brdu标记率及凋亡指数.结果Survivin反义寡核苷酸能明显抑制survivin蛋白表达,并抑制BGC-823细胞的生长,其IC50约350 nmol/L;survivin反义寡核苷酸与紫杉醇联合能显著降低其IC50值,起到协同抗肿瘤作用.造模结束时对照组(C)、紫杉醇组(T)、反义寡核苷酸组(A)、反义寡核苷酸联合紫杉醇组(AT)胃腺癌发生率分别为90%、78.6%、73.3%和50%,AT组的胃癌发生率显著低于对照组(P<0.05),两个单独治疗组胃癌发生率均低于对照组,但无统计学差异(P>0.05);AT组胃癌的BrdU标记率(10.2±4.7)显著低于对照组(18.7±5.5,P<0.05)及T、A两个单独治疗组(分别为16.0±5.8和15.4±5.2,P<0.05);AT组胃癌的凋亡率(1.71±0.41)显著高于对照组(0.91±0.14,P<0.01)及T、A单独治疗组(1.19±0.42、1.29±0.43,P<0.05).结论Survivin反义寡核苷酸能抑制BGC-823细胞生长,与紫杉醇有协同抗肿瘤作用;腹腔注射survivin反义寡核苷酸与紫杉醇能协同抑制胃癌形成,与促进凋亡和抑制细胞增殖有关.Survivin是抗肿瘤基因治疗的良好靶点.
作者:朱晓东;林庚金;朱腾芳;李进;程侣圳;陈立鹰 刊期: 2005年第05期
目的探讨N-乙酰氨基葡萄糖转移酶Ⅴ(GnT-Ⅴ)对细胞基因表达和功能的影响.方法用Western Blot验证GnT-Ⅴ的反义cDNA稳转的细胞株AsGnT-Ⅴ7721(AsGnT-Ⅴ SMMC 7721)中GnT-Ⅴ表达,用基因芯片技术比较AsGnT-Ⅴ7721与7721(SMMC-7721)细胞的基因表达差异,同时用RT-PCR和Western Bolt检测AsGnT-Ⅴ 7721细胞中未折叠蛋白质反应信号通路关键分子Bip和XBP1的表达变化.结果基因芯片检测到的AsGnT-Ⅴ7721细胞中的基因表达变化表明,细胞中产生未折叠蛋白质反应.同时AsGnTⅤ7721细胞中未折叠蛋白质反应信号途径中的关键分子Bip的mRNA和蛋白表达升高,XBP1 mRNA被剪接.结论GnT-Ⅴ表达受阻能导致细胞产生未折叠蛋白质反应.
作者:张毅;张力;方欢;申宗侯 刊期: 2005年第05期
目的体外观察Con A活化淋巴细胞来源的DNA(ALD-DNA)对BALB/c小鼠巨噬细胞株RAW264.7的刺激作用.方法将ALD-DNA及未活化淋巴细胞来源的DNA(UnALD-DNA)分别与BALB/c小鼠来源的巨噬细胞株RAW264.7孵育48 h,然后以四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测细胞的增殖情况,流式细胞仪测定细胞表面分子的表达,ELISA检测白细胞介素6(IL-6)、白细胞介素12(IL-12)和肿瘤坏死因子α(TNF-α)的分泌情况.结果ALD-DNA在体外能够明显刺激细胞发生增殖,上调细胞表面主要组织相容性复合体(MHC)Ⅱ类分子以及共刺激分子CD40、CD80和CD86的表达,并能够诱导细胞分泌IL-6、IL-12和TNF-α.结论ALD-DNA对RAW264.7细胞具有免疫刺激作用.
作者:乔滨;徐薇;陈刚;张凤;杨秀利;熊思东 刊期: 2005年第05期
目的探讨两切口微创技术在全髋置换术中的临床应用价值.方法2003年12月至2004年6月间的30例行人工全髋关节置换手术者,随机分为两组:两切口微创全髋组15个、常规全髋置换组15个.比较两组在手术切口、手术时间、出血量、手术并发症、术后恢复与影像学等方面的差异.结果两切口微创全髋手术切口分别为3.6(3.0~4.5)cm、5.7(5.4~6.5)cm,常规手术组12.0(9.0~14.0)cm,P<0.05.两切口微创组与常规手术组的手术时间、出血量分别为:100(80~220)min、80(60~150)min,760 mL、650 mL,P<0.05,但所需输血量没有差异.两切口手术组与常规手术组比,具有手术后功能恢复快,住院时间短,双下肢不等长少,差异有显著性(P<0.05).结论两切口人工全髋置换手术不切断髋关节周围肌肉,创伤小,具有术后恢复快,住院时间短的优点;但技术难度高,必须经过严格的培训才能开展,以防止并发症的发生.
作者:阎作勤;陈云苏;杨轶;李文俊;陈峥嵘;张光健 刊期: 2005年第05期
目的筛选转染人转化生长因子β1(TGF-β1)基因的大鼠系膜细胞相关反应性基因,并观察TGF-β1对其中之一的酸性核糖体蛋白P0的影响.方法筛选经SSH-PCR和反向杂交法构建的大鼠系膜细胞TGF-β1相关反应性基因cDNA消减杂交库,并进行测序及与GenBank资料作同源性比较;分别用Northern Blot、半定量RT-PCR观察TGF-β1、酸性核糖体蛋白P0基因在培养的大鼠系膜细胞和动物模型体内表达的变化.结果经筛选获得的28个反应性基因cDNA片段,长度为59~535 bp,其中7个片段均和已知酸性核糖体蛋白P0基因同源性一致.在转染TGF-β1的大鼠系膜细胞中P0基因mRNA表达增强;在大鼠抗Thy1系膜增生性肾小球肾炎模型的病变肾组织中,P0基因mRNA和TGF-β1基因mRNA的上调表达趋势一致.结论酸性核糖体蛋白P0是一个与TGF-β1基因表达密切相关的基因,可能参与TGF-β1介导的肾小球肾炎和肾小球硬化的发生机制.
作者:刘国元;沈素芹;曾文姣;蒋涛;陈琦;赵仲华;张农 刊期: 2005年第05期
目的观察卡介菌多糖核酸(BCG-PSN)对结核分枝杆菌感染小鼠的免疫保护作用及其免疫学机制.方法将BALB/c小鼠48只随机分成BCG-PSN免疫治疗组和结核菌感染对照组,每组24只.两组小鼠制成结核分枝杆菌感染模型.感染后1周,每天分别腹腔内注射BCG-PSN(10 mg/kg)或生理盐水(10 mL/kg),连续7 d.感染后3周和4周每组处死12只小鼠,检测小鼠体重以及肺、脾脏湿重,观察肺脏病理改变,取肺、脾组织进行结核菌培养和菌落计数,用real-time PCR法测定肺、脾组织IFN-γ mRNA、IL-10 mRNA和IL-4 mRNA的表达.结果感染后4周,治疗组小鼠体重和脾脏重量高于对照组,肺脏重量低于对照组,且肺部病变较轻.感染后3周和4周,治疗组小鼠肺、脾组织结核菌落均低于对照组,小鼠肺组织IFN-γ mRNA表达与对照组无差别,IL-10 mRNA和IL-4 mRNA的表达低于对照组.感染后3周,治疗组小鼠脾组织IFN-γ mRNA表达与对照组相似;感染后4周,脾组织治疗组脾组织IFN-γ mRNA的表达高于对照组.感染后3周和4周,IL-10 mRNA和IL-4 mRNA的表达低于对照组.结论BCG-PSN可减轻结核病小鼠体重下降,减少结核病小鼠肺和脾脏结核菌数量,并增强Th1型免疫反应.
作者:任涛;蔡映云;金美玲;李传友;袁正宏;田苗;赵冰 刊期: 2005年第05期
目的探讨整合蛋白α5、β1亚基在肾透明细胞癌中的表达与癌细胞的病理分级和临床分期的关系.方法采用免疫组织化学ABC法检测30例正常肾脏组织和30例肾透明细胞癌石蜡标本整合蛋白α5、β1亚基的表达水平.结果肾透明细胞癌组织与正常肾脏组织相比,癌组织整合蛋白α5、β1亚基表达减弱或消失(P<0.05).整合蛋白α5、β1亚基表达水平随肾透明细胞癌的病理分级(分化程度)升高而升高,随临床TMN分期的升高而降低.结论在正常肾脏组织中整合蛋白α5、β1亚基的表达比肾透明细胞癌中高,其表达水平与肾透明细胞癌的病理分级呈正相关关系,与临床分期呈负相关关系.整合蛋白α5、β1亚基的表达可能与肾透明细胞癌的分化、转移密切相关.
作者:陈海蛟;王浩;张立;王国民 刊期: 2005年第05期
目的研究2型糖尿病(T2DM)微量白蛋白尿(MAU)的转归及其危险因素.方法296例T2DM患者分为正常白蛋白尿(NAU)组和MAU组,分别测定尿白蛋白排泄率(UAER),分析其临床和生化特征,随访4.1年后复查上述指标.结果在(NAU)组中,维持NAU者占73.57%,进展至MAU者占24.28%,进展至大量白蛋白尿(MaAU)者占2.15%;而MAU组的病人中,回归NAU者占53.20%,维持MAU者占43.59%,进展至MaAU者占3.21%.根据UAER转归情况将所有的NAU和MAU的病人分为进展组和无进展组,比较2组病人有关临床资料可以发现,2组病人在舒张压、sCr、UA、CCr等方面差别有显著性,提示这些因素可能为UAER进展的危险因素.Logistic回归分析结果显示,舒张压、FPG、TG、LDL、HDL为UAER进展的独立危险因素.结论MAU并不是一个很好的预测和诊断早期糖尿病肾病的指标.
作者:闻杰;陆志强;殳雪怡;滕香宇;谭燕;杨永年 刊期: 2005年第05期
目的研究后腹腔镜手术与腹腔镜手术中机体对CO2气体吸收的不同.方法腹腔镜手术患者30例,选择胆囊切除术28例、精索静脉高位结扎2例;后腹腔镜手术患者30例,选择肾囊肿去顶减压术.根据公式计算出不同手术时段机体对CO2的排除量.结果在手术的第1个15 min和第2个15 min内,两组患者的CO2排除量无明显差异,而在第3个15 min,后腹腔镜组患者CO2排除量及排除增加量明显高于腹腔镜组.结论经由后腹腔的腹腔镜手术比经由腹腔的腹腔镜手术引起更为明显的高CO2血症,在进行长时间后腹腔镜手术操作时,应采取措施减少CO2的吸收.
作者:王杭;王国民;孙立安;朱彪 刊期: 2005年第05期
目的观察3日龄未成熟大鼠慢性缺氧缺血脑损伤胶质细胞凋亡及髓鞘相关蛋白(MBP和PLP)变化,研究早产儿脑损伤的发病机制.方法将164只3日龄同窝生SD未成熟新生大鼠随机分为实验组92只和对照组72只,对照组仅切开颈部皮肤,而实验组结扎双侧颈总动脉,造成未成熟鼠缺氧缺血脑损伤,分别于不同时间点处死大鼠,采用组织切片苏木精-伊红染色、少突胶质细胞抗体O4和细胞凋亡免疫组化双标记、RT-PCR实时绝对荧光定量检测等方法,观察未成熟鼠脑损伤的病理变化、少突胶质细胞凋亡及MBP和PLP mRNA的表达.结果实验组未成熟鼠出现脑白质液化疏松、小胶质细胞增生和脑室扩大等病理变化,深部白质凋亡细胞计数在损伤后24、48、72 h和1周较对照组增多(P<0.05),以48 h两组差异为显著,损伤后2周两组无统计学差异(P>0.05).凋亡细胞经双标显示以少突胶质细胞为主.髓鞘相关蛋白mRNA的表达在损伤后较对照组减少.结论3日龄未成熟新生大鼠缺氧缺血脑损伤后,出现以脑白质少突胶质细胞损伤为主的病变,有助于理解早产儿脑损伤发病机制和神经病理变化,并可作为研究早产儿缺氧缺血脑损伤的动物模型.
作者:贺影忠;陈超;杨毅;陈莲;朱列伟 刊期: 2005年第05期
类风湿关节炎(Rhumatoid Arthitis,RA)是一种累及周围关节为主的多系统性炎症性自身免疫性疾病,在西方国家患病率约1%[1],在我国稍低,约0.32%~0.36%.一般发病年龄在35~50岁,男女比1:3[2].RA自然病程在不同患者表现不一,约10%患者短期发作后可自行缓解,不留后遗症.
作者:傅辰生;丁小强 刊期: 2005年第05期
1型糖尿病是一种由T细胞介导的胰腺β细胞自身免疫性损害为特征的,器官特异性的自身免疫性疾病.目前有些研究尝试用环孢素、完全弗氏佐剂、卡介苗、谷氨酸脱羧酶、烟酰胺、口服胰岛素等方法,通过免疫抑制或刺激来保护β细胞,预防疾病发生或延缓其进展,但是由于所使用药物的不良反应或不确切的作用使他们在临床应用中受到限制[1~3].
作者:施念玮;吴艺捷 刊期: 2005年第05期
目的研究通过改进对食管残端的处理降低吻合口瘘的发生.方法在我院接受食管贲门癌切除术并使用管状吻合器重建食管的480例患者根据术中食管残端处理方法的不同分为两组.第一组300例,食管残端用荷包钳法作荷包处理;第二组180例,食管残端在荷包钳处理的基础上,再间断全层缝合食管壁并结扎缝线,或沿食管残端连续全层缝合一周,放入抵钉座后结扎缝线.结果第一组患者吻合结束后检查切下的食管圈有10例黏膜不完整,吻合口瘘8例;第二组患者食管圈均完整,无吻合口瘘发生.结论对食管残端处理的改进有助于减少术后吻合口瘘.
作者:庞烈文;陈志明;马勤运;陈刚;陈佶 刊期: 2005年第05期
目的介绍一种简易有效并体现个体化的椎弓根螺钉进针点定位方法.方法取5具附带躯干的腰椎脊柱标本(L1~5),摄取X线正位片,以椎弓根投影水平中线和投影外缘交点作为佳进钉点,测量佳进钉点距离同椎体横突上缘和椎板外缘的垂直距离.L5椎弓根外缘和椎板边缘投影欠清,定位参照L4椎板外缘,并在L5椎弓根投影内缘旁开10 mm.按照常规后路入路暴露相关解剖结构,测量并确定进钉点,模拟打入椎弓根螺钉,随后解剖出每个椎体的椎弓根,观察预设的进钉点位置和椎弓根螺钉位置.结果各椎体椎弓根解剖显示预设的椎弓根螺钉进钉点选址良好.50枚椎弓根螺钉中,1枚轻微挤裂L1椎弓根内壁,椎弓根内壁骨折,螺钉没有露出;1枚轻微挤裂L1椎弓根外壁,螺钉没有露出;还有1枚轻微穿破L2椎弓根外壁,螺钉露出少许螺纹.整体穿破率为6%,L1椎弓根穿破率为20%.结论参照腰椎正位X线片上椎弓根投影与椎板外缘和横突上缘的关系来确定椎弓根螺钉进钉点是一种简易有效的个体化定位方法.
作者:马昕;姜建元;吕飞舟;黄煌渊 刊期: 2005年第05期
目的比较腕管综合征术前和正中神经松解术后(术中)两者感觉神经动作电位(sensory nerve action potential,SNAP)与复合肌肉动作电位(compound muscle action potential,CMAP)检测结果的差异.方法对20例腕管综合征患者,术中在切开屈肌支持带及正中神经松解术后,分别测定(1)拇短展肌的CMAP;(2)刺激示、中指,于腕部记录正中神经的SNAP;(3)刺激环指,于腕部分别记录正中神经和尺神经的SNAP.将三者结果与术前的相应数据行统计学分析.结果(1)术前拇短展肌CMAP的潜伏期<4.3 ms,术后其潜伏期、波幅与术前相比差异无统计学意义(P>0.05).(2)术后2~4指SNAP的潜伏期比术前平均缩短5%、波幅增加13%左右,两者相比差异均有统计学意义(P<0.01).结论腕管综合征手术中,在正中神经松解术后行SNAP检测较CMAP检测的结果更为敏感和准确.
作者:朱艺 刊期: 2005年第05期
目的研究三七总皂苷鼻腔用粉雾剂以混悬液形成给药后在大鼠体内的药代动力学过程及对心脑血管疾病的保护作用.方法HPLC测定三七总皂苷混悬液大鼠鼻腔给药后血样中人参皂苷Rg1的浓度,考察药物在体内的动力学过程,并计算其绝对生物利用度;结扎SD大鼠的左冠状动脉建立急性缺血性心肌梗死模型,夹闭沙鼠的双侧颈劝脉建立脑缺血再灌注模型,考察三七总皂苷混悬液对心脑血管疾病的保护作用.结果三七总皂苷混悬液鼻腔给药后,Rg1在大鼠体内的过程符合二室模型,其绝对生物利用度为103.56%;对大鼠急性缺血性心肌梗死及沙鼠脑缺血再灌注所引起的脑水肿和脑卒中症状均具有明显的缓解作用,且呈剂量依赖性,剂量越高,保护作用越强.结论药代动力学和药效学结果证明,三七总皂苷鼻腔给药制剂具有很好的开发前景.
作者:吴云娟;朱晓蕊;沙先谊;方晓玲 刊期: 2005年第05期
目的通过对大鼠肾小球系膜细胞(MsC)转染Smad 2基因,观察转染的阳性细胞克隆纤连蛋白(FN)及Ⅳ型胶原(ColⅣ)表达的改变,以探讨转化生长因子β(TGF-β)/Smad信号转导通路引起细胞外基质积聚导致肾小球硬化发生的分子机制.方法经磷酸钙介导将含有Smad 2重组表达质粒转染大鼠MsC,用G418筛选及Western印迹分析法鉴定,又分别采用Western印迹分析法和逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测转染阳性细胞克隆FN及ColⅣ表达的改变.结果成功建立高表达Smad 2蛋白的阳性MsC克隆(T-12、T-31、T-35、T-40),并证实其FN及ColⅣ的mRNA和蛋白的表达水平均明显上调.阳性MsC克隆FN蛋白为对照组2.4倍(P<0.05),mRNA为对照组的2.7倍(P<0.05);阳性MsC克隆ColⅣ蛋白为对照组的2.9倍(P<0.01),mRNA为对照组的3.3倍(P<0.01).结论TGF-β/Smad信号转异途径中Smad 2可能是促进FN及ColⅣ在肾小球中积聚,是导致肾小球硬化发生的重要信号转导分子.
作者:王小刚;于鸿;陈琦;赵仲华;张志刚;郭慕依 刊期: 2005年第05期
目的研究HBV不同感染状态对CCL20表达水平的影响,探讨CCL20在乙肝病毒感染中的作用.方法通过基因体外转染技术,建立HBV不同感染状态的肝细胞模型;以内对照定量RT-PCR检测HBV不同感染状态下CCL20的表达水平.结果HBV不同感染状态下CCL20的表达水平不同,HBV未感染肝细胞CCL20表达水平每106细胞为(2.65±0.02)pg/10μL,HBV短暂感染肝细胞CCL20的表达水平每106细胞为(3.43±0.02)pg/10μL,而HBV持续感染肝细胞CCL20的表达水平每106细胞为(1.22±0.04)pg/10 μL,上述三种不同感染状态下肝细胞表达CCL20的水平差异有统计学意义,表现为HBV短暂感染肝细胞>未感染肝细胞>HBV持续性感染肝细胞(P<0.05).在HBV同一感染状态下,CCL20的表达水平与HBV感染时间、细胞的培养时间、病毒载量等因素未见显著性相关;上述细胞经乙酸肉豆蔻佛波醇(PMA)活化后,相应细胞CCL20表达均明显增加(P<0.05),但并不改变CCL20在各细胞中的表达格局.结论HBV的不同感染状态影响了CCL20的表达.
作者:邵先安;叶巍;郑秀娟;陈习武;储以微;熊思东 刊期: 2005年第05期
柯萨奇病毒感染病情轻重不一,隐性感染者无症状,轻者类似感冒,重者可引起心肌炎、脑炎、脑膜炎、肺炎、溶血性贫血、肝炎等多种病变,甚至多脏器损害,病死率甚高.柯萨奇病毒感染引起的横纹肌溶解症则比较少见,我们于2004年12月诊治了1例慢性肾衰竭合并柯萨奇病毒感染致横纹肌溶解症和肾功能急剧减退患者.
作者:王一梅;叶志斌;袁敏;吴兆龙 刊期: 2005年第05期
新疆阿克苏是我国维族人居住为主的边陲地区,经济发展远落后于上海,妇女卫生状况也并非乐观.为了具体了解两地妇科情况的差异,本文对20002年新疆阿克苏地区第一人民医院妇科和上海奉贤区中心医院妇科住院手术治疗的共746例患者的情况作了比较,报道如下.
作者:孙敏;陶应珍;周卫强 刊期: 2005年第05期
近年来,性病/艾滋病(STD/AIDS)的发病率在世界范围内日益升高,疫情不断升级,性传播疾病已经成为威胁人类健康的主要疾患之一.从1994年起,上海的性病发病率每年以32%的速度递增,1997年底达到202.43/10万,居全国榜首.
作者:黄伟栋;武俊青;李文英;李玉艳;袁蕾;高尔生 刊期: 2005年第05期
目的探讨腺病毒介导的低氧诱导因子-1α(HIF-1α)基因对大鼠缺血再灌注后脑梗死体积的影响.方法构建HIF-1α基因的重组腺病毒(Adv-HIF-1α),建立大鼠大脑中动脉阻塞性脑缺血(MCAO)模型:①将携带绿色荧光蛋白(GFP)基因的重组腺病毒(Adv)于MCAO后立即注射入缺血侧脑室,观察其在脑内的表达部位和持续时间;②动物被随机分为4组:假手术(sham)组、缺血再灌注(IR)组、Adv-HIF-1α组、Adv组,除sham组外,其余3组均于MCAO后立即在缺血侧脑室分别注射磷酸盐缓冲液、Adv-HIF-1α基因和Adv,治疗72 h,取大脑,平均切成6片,用2,3,5-三苯基氯化四氮唑染色,以观察Adv-HIF-1α对大鼠脑梗死体积的影响.结果注射Adv后,GFP仅在大鼠双侧侧脑室壁和脑室内的脉络丛及室管膜上皮细胞表达,持续2周左右;Adv-HIF-1α能明显缩小脑梗死体积,分别与IR组和Adv组相比有显著性差异(P<0.05).结论Adv-HIF-1α能显著缩小大鼠缺血再灌注的脑梗死体积,提示其具有治疗缺血性卒中的作用.
作者:陶陶;陈莉芬;胡长林;唐宏 刊期: 2005年第05期
目的应用cDNA微阵列杂交技术筛选垂体瘤组织差异表达基因,并初步讨论了差异表达基因在垂体瘤发病过程中的作用.方法用cDNA微阵列技术筛选垂体瘤组织差异表达基因,对于在3种垂体瘤中高差异表达基因用RT-PCR和实时定量PCR进行初步验证.结果用cDNA微阵列技术筛选垂体瘤组织差异表达基因按照基因功能分类,发现差异表达的基因主要与信号转导相关和发育、分化相关.PP4R2,GHRHR和clusterin分别在泌乳素瘤,生长激素瘤,无激素瘤中明显高表达,并经RT-PCR,实时定量PCR等证实.结论PP4R2,GHRHR,clusterin可能分别在泌乳素瘤,生长激素瘤,无激素瘤的发生发展中发挥了重要作用.
作者:胡吉;王宣春;沈烨;李士其;王镛斐;吴劲松;赵曜;徐斌;寿雪飞;张玉林;俞茂华;胡仁明 刊期: 2005年第05期
目的用反义血管内皮细胞生长因子(VEGF)转染前列腺癌LNCaP C42细胞,从体外和体内研究抑制细胞内VEGF的表达后对肿瘤生长、侵袭等生物学行为的影响.方法用3-(4,5-二甲基噻唑-2)-2,5-二苯基四氮唑盐(MTT)方法测定体外反义VEGF转染的肿瘤细胞增殖.在体内分析,反义VEGF转染的肿瘤细胞皮下注射入裸鼠.根据公式体积=0.52×(宽)2×(长),计算肿瘤体积[13],以此绘制肿瘤生长曲线.用小鼠抗人CD31单克隆抗体经免疫组化检测肿瘤微血管密度.苏木精-伊红(HE)染色检测肺转移结节.结果体外研究显示,反义VEGF显著抑制前列腺癌LNCaP C42细胞的增殖;与对照细胞比较发现,反义VEGF转染的细胞在裸鼠皮下致瘤能力减弱,肿瘤生长明显减慢;肿瘤微血管密度明显降低[(31±3.25):(14.25±3.40),P<0.05],且肿瘤肺转移也显著被抑制.结论体内外研究表明,反义VEGF通过抗肿瘤新生血管形成作用可显著抑制前列腺癌的生长和转移.结果提示抑制VEGF表达对前列腺癌治疗具有潜在价值.
作者:苏伟;王起印;关明 刊期: 2005年第05期
目的建立胸腺细胞体外研究模型,为T细胞早期发育及相关实验提供有效技术平台.方法无菌摘取14.5天龄胚鼠胸腺,胸腺器官体外培养,FACS检测不同培养时间点细胞存活状况和表型变化,计数每个胸腺小叶的细胞数变化.结果胸腺体外培养显示:经过6 d的培养,胸腺细胞存活率均在88.0%以上,由双阴性发育至双阳性细胞,CD4+CD8+双阳性细胞由培养第0天的0上升到第6天的89.07%;细胞数量随胸腺发育(培养时间的增加)而增多,每个胸腺小叶胸腺细胞数量也由培养0 d的0.75×104个上升到第6天的1.38×106个.而体内数据显示:胸腺细胞由胚龄14.5 d的双阴性阶段发育到新生鼠的双阳性阶段,每个胸腺小叶细胞数量由14.5 d的0.75×104个上升到新生鼠的2.56×106个,同时间段CD4+CD8+双阳性细胞比例由0上升到91.22%.体内、外胸腺细胞表型、数量变化趋势一致.结论体外培养状态下胸腺细胞数量和表型变化与体内自然变化趋势一致,在体外培养可以模拟体内胸腺细胞由双阴性到双阳性的发育过程,这将为T细胞发育的研究提供简易、有效的技术平台.
作者:邵先安;张瑞华;蒋正刚;孙志平;储以微;熊思东 刊期: 2005年第05期
目的探讨丙戊酸在正常及癫癎大鼠海马神经元间隙液中的神经药物动力学过程.方法建立大鼠慢性癫癎模型及自由活动的清醒动物脑内在体微透析模型,结合荧光偏正免疫分析法测定急性腹腔注射丙戊酸(200mg/kg)后该药在大鼠海马胞外的动力学过程.用3P87药物动力学程序对药浓-时间数据进行拟合.结果丙戊酸在正常及癫癎大鼠海马胞外的峰浓度(Cmax)与药时曲线下面积(AUC0→∞)分别为(93.09±54.82)、(235.3±93.2)μg/mL及(6 252±3 607)、(19 286±5 219)μg·min·mL-1(n=5).结论推测由戊四氮诱发的大鼠脑病理性改变可能导致了丙戊酸在癫癎大鼠海马的蓄积,该研究为丙戊酸的临床抗癫癎治疗提供了新的实验资料.
作者:李智平;钟明康;施孝金;李中东 刊期: 2005年第05期
目的本实验建立动物左向右分流,当左向右分流导致血浆内皮素含量明显增高时,测定体、肺血管及组织中内皮素的表达,从而在分子生物学水平探讨内皮素与肺高压的发生发展机制.方法取新西兰兔18只,分为对照组6只,实验组12只.在主动脉与肺动脉间用人造血管建立左向右分流.分别于术前、术后1、2、5 h抽血测内皮素含量.对照组采用相同方法建立分流不予开放.术后取肺、肾动脉各1.5 cm,肺、肾组织各(1.5×1.5)cm2,采用逆转录、酶联免疫扩增法及ELISA法测定内皮素受体mRNA表达.结果实验组术后1、2 h内皮素水平均无显著差异.术后5 h内皮素水平较术前及术后2 h明显升高(P<0.05).实验组肺动脉、肺组织内皮素A受体mRNA表达分别高于肾动脉、肾组织与对照组(P<0.05,<0.01).结论当肺血流量增加,血浆内皮素水平明显增高而尚未出现肺高压时,肺动脉及肺组织中内皮素A受体mRNA的表达即显著高于肾动脉及肾组织.说明在肺充血时内皮素A受体的缩血管作用占主导地位.
作者:叶明;贾兵;陈张根;李炘;杨毅;陈莲 刊期: 2005年第05期
目的调查浙江省某农村地区猪群中戊型肝炎病毒的感染状况,探讨猪戊型肝炎病毒与人戊型肝炎病毒的关系.方法应用逆转录-巢式聚合酶链法(RT-nPCR)对当地某养猪场的猪粪便标本和生猪屠宰中心的猪胆汁标本进行HEV RNA的检测,并对部分阳性标本进行克隆测序和序列分析.结果132份猪粪便标本中13份为HEV RNA阳性,阳性率为9.85%;160份猪胆汁标本中有11份为阳性,阳性率为6.88%.序列分析发现猪HEV相互之间在ORF2部分区域(nt6317~6466)的核苷酸序列的同源性为90.0%~100.0%,与当地人株核苷酸序列的同源性为88.7%~100.0%,与Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ和Ⅳ型的同源性分别为78.7%~84.0%,80.0%~85.3%,76.0%~83.3%和84.7%~95.3%.结论该地区猪HEV与当地人HEV同属HEV Ⅳ型.
作者:张潇;郑英杰;王法弟;高眉扬;朱建福;姜庆五 刊期: 2005年第05期
目的探讨内皮素-1对前列腺癌PC3细胞系的侵袭、迁移能力的影响,并初步研究其机制.方法体外培养PC3细胞并以内皮素-1干预,通过划痕实验、Boyden-chmber细胞侵袭和迁移实验测定PC3细胞侵袭、迁移能力;RT-PCR和明胶酶谱法分别测定PC3细胞基质金属蛋白酶(MMP)-2、MMP-9的mRNA表达和蛋白合成、激活的水平.结果与对照组比较,内皮素-1组PC3细胞的侵袭、迁移能力显著提高,合成和激活MMP-2、MMP-9水平显著提高(P<0.05).结论内皮素-1能提高前列腺癌细胞的侵袭、迁移能力,促进MMP-2、MMP-9合成和激活是其机制之一.
作者:武睿毅;王杭;王国民 刊期: 2005年第05期
目的检测心肌梗死后大鼠缺血心肌中血管抑素的表达,探讨缺血心肌血管新生的调节机制.方法采用免疫组化和Western Bbt法检测心肌梗死大鼠7、14、21和28 d缺血心肌中血管抑素的水平;同时用免疫组织化学染色法检测缺血心肌VEGF的表达趋势.结果免疫组织化学染色显示心肌梗死大鼠缺血心肌中血管抑素表达明显增加(P<0.05),主要分布于血管周围,在第7天表达高,以后逐渐降低,至28 d仍略高于假手术组(P<0.05).VEGF的变化趋势与血管抑素相似.血管抑素的Western Blot检测结果与免疫组化染色结果基本一致.结论血管抑素在心肌梗死大鼠的缺血心肌中表达增加,与VEGF的动态变化趋势相似,血管抑素可能参与调节缺血心肌的血管新生.
作者:张玉英;范维琥;蒋霞;李勇 刊期: 2005年第05期
目的为了研究不同淋球菌菌株的基因多态性,了解不同菌株之间的亲缘关系,选择适当的随机引物.方法以淋球菌基因组DNA为模板,对淋球菌进行RAPD扩增,选择多态性好、重复性好、稳定性强的随机引物,并用S38号引物对不同淋球菌基因组DNA进行指纹图谱区分.结果从Sagon公司50条RAPD随机引物中筛选出8条扩增效果良好的引物,经RAPD扩增出的淋球菌指纹图谱间有明显不同的DNA多态性,可对不同菌株进行聚类分析.结论利用RAPD技术对淋球菌进行随机引物的筛选,可为今后淋球菌的分子流行病学研究奠定基础.
作者:张铁军;周晓明;姜庆五 刊期: 2005年第05期
目的探讨过氧化物酶体增殖物活化型受体(PPARs)激动剂罗格列酮对兔动脉粥样硬化的发生有无抑制作用.方法24只新西兰大白兔随机分为3组.正常饮食组、高脂饮食组、高脂饮食+罗格列酮治疗组.在0、8周时测定血清中血脂、肿瘤坏死因子-α(TNF-a)、白介素-6(IL-6)浓度.免疫组化染色测定斑块处巨噬细胞数量.图像分析观察主动脉斑块/内膜面积比.结果与高脂饮食组相比,罗格列酮对血脂无明显影响,但可使TNF-a、IL-6浓度下降、斑块处巨噬细胞数量减少和主动脉斑块/内膜面积比率显著降低(P<0.001).结论罗格列酮对兔动脉粥样硬化有预防作用.
作者:颜彦;王翔飞;张庆勇;崔杰峰;王颉;朱文青;王齐兵;钱菊英;葛均波 刊期: 2005年第05期