韩莉;黄慧敏;钱瑞华;陈刚;龙云
目的:为探索乙酰胆碱酯酶(AChE)活性中心狭隙与其水解底物高效性相适应的可能机制,研究胆碱类底物对AChE四聚体(AChE G4)亚分子结构的影响.方法:冰浴超声法制备磷脂膜,囊泡融合技术将AChE重组到以云母为支撑的磷脂膜上,原子力显微技术(AFM)观察AChE分别与乙酰胆碱(ACh)和丁酰胆碱(BCh)作用前后的亚分子结构.结果:单个AChE G4颗粒是表面光滑、中间突出的椭圆形结构,亚基排列紧密,平均大小为[(89±7)nm×(68±9)nm×(6±3)nm,长×宽×高,n=100].与底物反应后,可清楚地看到亚基排列松散,酶蛋白是由4个亚基组成,亚基之间形成一个无阻碍空间,这与X线晶体学和分子动力学研究结果相一致.与S-ACh反应后,单个AChE G4颗粒平均大小为[(104±7)nm×(91±5)nm×(8±2)nm,长×宽×高,n=100],无阻碍空间大小为[(60±5)nm×(51±9)nm,长×宽,n=30];与S-BCh反应后,酶的大小为[(100±5)nm×(87±6)nm×(7±3)nm,长×宽×高,n=100],无阻碍空间大小为[(38±4)nm×(35±2)nm,长×宽,n=30].结论:胆碱类底物对AChE G4亚分子结构具有明显影响,酶亚分子结构变化与其水解底物的高效性是一致的.
作者:姜爽;张英鸽;张飒 刊期: 2009年第03期
目的:纯化细胞色素氧化酶P450(CYP4F3A)以及测定酶促反应动力学参数.方法:应用免疫共沉淀技术纯化CYP4F3A酶,通过LTB4降解实验测定其米氏常数.结果:纯化的CYP4F3A浓度为0.12 mg/ml,Km=2.643±0.106 μmol/L,Vmax=24.97±1.163 nmol/(min·nmol).结论:获得从哺乳动物细胞中纯化的CYP4F3A具有较强LTB4降解活性,并通过测定其酶动力学常数,为研究CYP4F3A活性调节机制打下基础.
作者:蔡瑜;刘萱;杨尧;李平;曹诚;张部昌 刊期: 2009年第03期
目的:以微生物抗菌肽为研究对象,利用电喷雾串联质谱对其分子结构进行解析.方法:首先通过全扫描模式,得到主要成分的相对分子质量为1 436.76.然后选择主要成分m/z718.38(双电荷离子)进行串联质谱测定.结果:相对分子质量为1 436.76的化合物结构为β-OH-FA-TEAPQYIYNE(该肽的脂肪链为羟基14碳脂肪酸),属于Fengycin家族(families).结论:本研究结果表明,电喷雾串联质谱适用于分析微生物抗菌肽类具有相似结构的同系物,是测定此类化合物相对分子质量及鉴定其结构的有效工具.
作者:姚树森;冷冰;王鸿丽;刘锋;李萍 刊期: 2009年第03期
布鲁菌是引起人畜共患传染性布鲁菌病的病原体.基因分型作为布鲁菌病溯源的主要方法,目前以多位点VNTR分析技术备受关注,其他分型技术如随机扩增多态性和扩增片段长度多态性、多位点序列分型等也在布鲁菌基因分型中得到应用,本文综述了近年来布鲁菌基因分型的研究进展.
作者:何斌;朱虹;端青 刊期: 2009年第03期
目的:获得重组人半乳糖凝集素-1(galectin-1)蛋白,并分析其生物学活性.方法:PCR方法扩增目的基因,将其克隆到原核表达载体pET21a(+),获得重组质粒pET-galectin;将其转化至表达宿主菌BL21(DE3)中,用IPTG进行诱导,获得目的蛋白的表达;采用Ni-NTA亲和层析柱对目的蛋白进行纯化,用红细胞凝集试验分析其生物学活性.结果与结论:成功构建重组原核表达质粒pET-galectin,目的蛋白在大肠杆菌中获得高效表达,经Ni-NTA亲和层析柱一步纯化后,得到的蛋白纯度可达80%以上.红细胞凝集试验结果表明获得的重组蛋白具有较好的生物学活性,可进一步用于半乳糖凝集素-1功能研究.
作者:易绍琼;任声权;于婷;张晓艳;刘树玲;陈薇 刊期: 2009年第03期
新甲型H1N1流感疫情正在从北美洲向全球逐步蔓延,引起了全世界的关注.本文介绍了此次新甲型H1N1流感的流行概况及特点,分析了病毒的遗传学特征,并尝试性地对新甲型H1N1流感的国际流行态势及对我国的影响进行了初步评估.初步分析认为,新甲型H1N1流感病毒极有可能引发一次全球范围的流感大流行,但其对人类健康造成的危害程度会比1918、1957和1968年3次流感要低;在中国不可避免地会出现一些散发病例甚至小规模的局部暴发流行,但近期造成大规模暴发流行的可能性较小.
作者:林磊;童贻刚;祝庆余 刊期: 2009年第03期
糖尿病患者20%~40%合并高血压[1],病程长者易并发肾脏损害出现继发性高血压.这类患者有明显的代谢紊乱和较严重的靶器官损害,降压药的疗效降低,控制血压的能力受影响,构成一种特殊类型的高血压[2].积极控制血压能明显减少糖尿病患者高血压的靶器官损害及病死率.
作者:曹子敬 刊期: 2009年第03期
烟雾病是一种少见的慢性进行性脑血管闭塞性疾病,可以影响大脑中、前、后动脉的供血区域并引起相应的临床症状.常用于烟雾病灌注成像的影像学技术包括正电子发射体层成像、CT灌注成像、磁共振灌注成像以及单光子发射体层灌注成像等.本文对烟雾病脑灌注成像的方法和临床应用价值作一综述.
作者:谢安明;李功杰 刊期: 2009年第03期
目的:研究扛板归(Polygonum perfoliatum L.)的化学成分.方法:利用硅胶、Sephadex LH-20柱色谱等方法对扛板归进行分离纯化,根据理化性质、波谱数据(质谱、核磁共振谱)鉴定化合物的化学结构.结果:分离鉴定出12个单体化合物,分别为槲皮素(quercetin, 1)、异鼠李素(isorhamnetin,2)、金丝桃苷(hyperrosid,3)、槲皮苷(quercitrin,4)、原儿茶酸(protocatechuic acid,5)、没食子酸(gallic acid,6)、鞣花酸(ellagic acid,7)、3,3'-二甲氧基-鞣花酸(3,3'-di-O-methyl ellagic acid,8)、1-O-没食子酰基-β-D-葡萄糖(1-O-galloyl-B-D-glucose,9)、黏酸二甲酯-2-O-没食子酰基(mucic acid dimethyl ester-2-O-gallate,10)、咖啡酸乙酯(ethyl caffeate,11)、黏酸二甲酯(mucic acid dime-thyl ester,12).结论:化合物10和12首次从该属植物中分离得到,化合物2、3、7、8和9首次从扛板归中分离得到.
作者:汪琼;陈立;田瑛;李彬;孙启鸿;董俊兴 刊期: 2009年第03期
目的:改进β-苯甲酰氨基类肿瘤坏死因子转化酶(TACE)抑制剂重要中间体4-[(2-甲基-4-喹啉基)-甲氧基]苯甲酸的合成工艺.方法:以2-甲基喹啉为起始原料,经过羟甲基化、氯代、威廉姆森成醚反应、水解得到目标化合物.结果与讨论:目标化合物和中间体的结构经1HNMR和FAB-MS确证.该路线优化了合成工艺,收率高,原料易得,成本低廉,操作简单,总收率约为47.5%.
作者:孙宇;李行舟;钟武;李松 刊期: 2009年第03期
目的:预测炎症相关miRNA及其靶基因.方法:将基因组分析结果和miRNA靶标预测结果融合.结果:通过两种方法所产生数据的叠加,可以挑选出候选的关键miRNA和关键靶基因作为进一步实验研究的线索.结论:将基因组分析与靶标预测相结合可以有效减少假阳性预测结果,缩小实验验证的范围.
作者:余光创;王超;许尹;伯晓晨;王升启;秦宜德 刊期: 2009年第03期
目的:分析C基因及其编码蛋白突变对登革病毒RNA复制的影响.方法:利用融合PCR方法在登革病毒复制子中引入C基因相应部位的缺失突变,将复制子RNA转染细胞后,利用报告基因活性分析、间接免疫荧光及实时定量PCR等方法分析其复制水平.结果:获得了含有不同α螺旋缺失突变的C基因的复制子质粒,并发现△α1复制子复制水平明显下降.结论:登革病毒C蛋白α1螺旋或其编码序列对病毒RNA复制具有重要作用.
作者:刘忠钰;于学东;赵慧;刘然;尉雁;李晓峰;邓永强;姜涛;于曼;秦成峰;秦鄂德 刊期: 2009年第03期
随着万古霉素耐药金黄色葡萄球菌的出现,临床上抗感染治疗面临极大困难.本文对万古霉素耐药金黄色葡萄球菌的作用机制及相关治疗药物研究进展作一综述.
作者:赵晓东;刘爱玲 刊期: 2009年第03期
目的:探讨人参皂苷Rg1的免疫佐剂效应.方法:分别将人参皂苷Rg1以及氢氧化铝胶(Alum)作为佐剂和卵清白蛋白(OVA)抗原混合免疫BALB/c小鼠,二次免疫后2周采血和取脾脏,分离血清,观察免疫前后血清OVA诱导特异性抗体及亚类含量变化,以及淋巴细胞在抗原刺激下的体外细胞增殖反应.结果:Rg1和抗原混合物免疫小鼠后,未见任何不良反应;Rg1组小鼠血清抗体IgG,IgG1和IgG2a水平显著高于抗原对照组(P<0.05);人参皂苷Rg1免疫小鼠受刀豆蛋白A(ConA)、脂多糖(LPS)和OVA刺激产生的淋巴细胞体外增殖能力显著高于OVA组(P<0.05),Rg1组小鼠脾淋巴细胞受OVA刺激后培养上清检测细胞因子IL-5和IFN-γ浓度显著高于OVA组.结论:Rg1是一种能同时激活Th1和Th2型免疫反应的免疫佐剂.
作者:陈宇;郑纯威;陈国江;张文娟;李端杨;胡松华 刊期: 2009年第03期
造血干细胞(hematopoietic stem cells,HSCs)是研究早和为深入的干细胞.众所周知,HSCs可以分化为各种成熟的血细胞,并能重建经致死剂量照射损伤的造血系统,在临床治疗多种造血系统疾病中具有重要的意义.
作者:陆颖;王全立;王立生;吴祖泽 刊期: 2009年第03期
目的:研究CPNE5对TNF-α诱导的NF-κB转录激活活性的影响,并探讨其作用机制.方法:用10 ng/mlTNF-α处理转染了pcDNA3.1或pcDNA3.1-CPNE5的HEK293细胞,用双荧光素酶报告基因实验检测不同转染组NF-κB的转录激活活性;Western印迹和细胞免疫荧光技术检测CPNE5表达上调对NF-κB入核的影响;凝胶阻滞实验研究CPNE5表达上调对NF-κB DNA结合能力的影响.结果:CPNE5可以显著抑制TNF-α对NF-κB的转录激活活性(P<0.0001);CPNE5不影响TNF-α诱导的NF-κB(P65)入核;CPEN5过表达降低了TNF-α诱导的NF-κB与DNA结合的能力.结论:CPNE5通过抑制NF-κB的DNA结合活性抑制TNF-α诱导的NF-κB转录激活活性.
作者:吴彦瑞;王晓文;靳雁斌;丁学峰;刘淑红;吴燕;范文红;范明 刊期: 2009年第03期
胸部肿瘤患者在接受放射治疗过程中,常发生放射性肺损伤(放射性间质性肺炎和肺纤维化),严重影响其生活质量.因此,放射性肺损伤的发病机制及防治研究对于肿瘤的放射治疗具有重要意义.本文就其研究进展进行综述,以期为进一步研究提供理论基础.
作者:王芳;侯春梅;袁顺宗;张伟京 刊期: 2009年第03期
椎动脉型颈椎病是颈椎病中较常见的类型,多见于45~60岁的中老年患者,并随着年龄的增长,发病率有平行上升的趋势.笔者近2年来对108例患者进行手法推拿和物理综合治疗,取得了满意的疗效,现总结如下.
作者:王慧珍;齐微微 刊期: 2009年第03期
目的:调查、评价我军炮兵部队膳食情况.方法:选择南京、北京、沈阳、广州四军区炮兵部队伙食单位作为调查对象,采用称重法进行为期5 d的膳食调查,同时采用军人食物定量、军人营养素供给量标准和膳食平衡指数法评价膳食结构存在的问题.结果:调查单位膳食结构不尽合理,谷类、豆类及其制品、蔬菜、水产品等摄入不足较普遍;猪肉、食用油的消费较高;奶类、蛋类、牛羊肉等摄入量则参差不齐.人均能量和大部分营养素摄入量基本达到军人营养素供给量规定水平;脂肪产能过高,达到34%~46%;钙摄入不足较突出;维生素A、维生素B1、维生素B2缺乏比较普遍.结论:我军膳食结构存在一定问题,应用膳食平衡指数评价军人膳食结构简便易行,但需要针对部队实际情况进行完善.
作者:吴健全;郭长江;韦京豫;杨继军;高蔚娜;蒲玲玲 刊期: 2009年第03期
淋巴瘤样丘疹病(lymphomatoid papulosis,LyP)的自然病程较长,可迁延多年不愈,但有20%~80%的患者会发展为霍奇金淋巴瘤(Hodgkin lymphoma,HL)、皮肤T细胞淋巴瘤或间变大细胞淋巴瘤(anaplastic lsurge cell lymphoma,ALCL).
作者:仲凯励;苏航;达永;刘静;赵世华;张伟京 刊期: 2009年第03期