赵卓；韩剑峰；范宝昌；陈水平；姜涛；于曼；何维明；祝庆余；秦鄂德
为了增强抗体的效应功能,人们尝试多种方法改造抗体分子,双特异性抗体是改善抗体治疗效果的发展方向之一,现已成为抗体工程研究领域的热点.随着分子生物学技术的迅速发展,出现了基因工程双特异性抗体的多种构建模式,并且有多种基因工程双特异性抗体制剂已经用于肿瘤的临床诊断和治疗试验.本文对基因工程双特异性抗体的构建模式按照双特异性微抗体、双链抗体、单链双特异性抗体和多价双特异性抗体4类进行了综述.
作者：解志刚；郭宁；沈倍奋 刊期： 2004年第04期
目的:鉴定端粒单链结合蛋白hPOT1核定位结构域.方法:通过hPOT1的不同长度缺失突变体与EGFP绿色荧光蛋白融合,转染细胞后用荧光显微镜观察融合蛋白在细胞内的定位.结果:确定了hPOT1进核序列是定位于第355～375位氨基酸之间的富含碱性氨基酸序列,其中R372,R373影响hPOT1的细胞核内定位.结论:鉴定出hPOT1的核定位结构域,该结构域影响了hPOT1不同形式剪接体蛋白的细胞内分布.为进一步研究hPOT1在端粒末端调控中的作用提供了线索.
作者：林坚；陈皓；白云秀；金蕊；张彬；黄翠芬；黄君健 刊期： 2004年第04期
目的:克隆人CD20胞外区基因(cdw)和丝状噬菌体(M13K07 )G3蛋白N端结构域(pⅢN1)基因,并在大肠杆菌中进行高效融合表达.方法:利用逆转录PCR和PCR方法分别克隆CD20胞外区基因和pⅢN1基因,然后将二者融合克隆入pTIG-Trx表达载体,在大肠杆菌中进行可溶性表达.结果:可溶性表达产物占细菌可溶性蛋白的约25%,表达产物可被抗CD20分子的单克隆抗体识别.结论:成功地表达并鉴定了人CD20胞外区蛋白,为利用噬菌体抗体库进行抗CD20抗体的筛选奠定了基础.
作者：张效云；孙志伟；王双；俞炜源 刊期： 2004年第04期
O6-甲基鸟嘌呤-DNA甲基转移酶(MGMT)是细胞中一种重要的DNA损伤修复酶,它在抵御烷化剂所致的细胞突变和死亡中起重要作用.本文综述了近年来关于MGMT的新研究,内容包括MGMT的基因结构与功能,MGMT的分布及其影响因素,MGMT与肿瘤发生、发展及治疗的关系.
作者：崔灵芝；章扬培；宋三泰 刊期： 2004年第04期
泡囊短波单胞菌(Brevundimonas vesicularis)是一种较罕见的非发酵性病原性假单胞菌,其致病力较强,可以引起中枢神经系统感染或菌血症[1,2].近期我们发现了一例泡囊短波单胞菌所致M2型急性髓性白血病患者肺部感染的病例,经检索中国生物医学期刊数据库,尚无泡囊短波单胞菌导致肺部感染的报道.现报告如下.
作者：陈建魁；尹秀云；杜燕；张鹏；姚平；金欣；高亚兵 刊期： 2004年第04期
随着工农业的不断发展,重金属污染日益严重,尤其是土壤和水源中重金属可在农作物和水生动植物中产生累积效应,对人类健康构成潜在威胁.与其他污染物有所不同的是重金属不能被化学或生物降解,因此对它的治理更加困难和复杂.传统上对重金属污染的治理主要采用物理、化学或机械的方法,这些方法不仅造成人力、物力和财力上的极大消耗,而且效果也不明显.随着生物工程技术的发展,生物治理重金属污染具有极大的潜力和广阔的应用前景,越来越引起人们的广泛关注.
作者：周绪斌；刘琼明；邢瑞云；吕星 刊期： 2004年第04期
目的:研制具备负压净化功能的救护车,用于运送非典型肺炎一类的急性传染病员.方法:救护车病室自成一区,采用负压净化系统对周围环境进行防护,负压范围为-30～-80 Pa,负压净化系统由负压净化装置和监测报警装置组成.通过以CO2气体为模拟污染源,对救护车病室内气溶胶颗粒的流向与分布进行测量.结果:CO2为替代污染气体的扩散范围以病室中部区域为主,在病室前部和后部得到了有效的抑制.结论:传染病员救护车负压净化系统能够有效抑制急性传染病员在运送途中对沿途周围环境的污染与病毒的传播.
作者：孙景工；刘亚军；徐新喜；祁建城；刘志国；谭树林 刊期： 2004年第04期
目的:建立共同稳定表达大鼠μ阿片受体及人咪唑啉-1受体的哺乳动物细胞表达系统.方法:采用脂质体介导的方法,将编码大鼠μ阿片受体和人咪唑啉-1受体的基因导入CHO细胞中,以放射配体-受体结合试验分析受体的表达水平,用cAMP积累试验分析表达受体的功能.结果:在共同稳定表达大鼠μ阿片受体及人咪唑啉-1受体的CHO细胞中,表达的μ阿片受体对3H-二丙诺啡(diprenorphine)的Kd和Bmax值分别为(0.24 ± 0.02)nmol/L和(1.83±0.13)pmol/mg蛋白;表达的咪唑啉-1受体对3H-可乐定的Kd和Bmax值分别为(3.72±0.25)nmol/L和(43.59±6.83)fmol/106细胞.表达的μ阿片受体抑制福司科林(forskolin)刺激下cAMP的积累,表达的咪唑啉-1受体抑制吗啡慢性处理、纳洛酮催促引起的cAMP超射.结论:首次建立了共同稳定表达μ阿片受体和咪唑啉-1受体的细胞模型.
作者：吴宁；苏瑞斌；徐波；李锦；秦伯益 刊期： 2004年第04期
目的:构建糖多孢红霉菌KR6酶域基因失活突变体,探讨SRR氨基酸相应9核苷酸去除突变体与合成酮内酯类化合物3-脱氧-3-羰基-红霉内酯B的关系.方法:以糖多孢红霉菌基因组DNA为模板,用重叠PCR技术扩增出缺少SRR氨基酸相应9核苷酸的KR6酶域DNA片段,并克隆到载体pWHM3上,构建了同源重组质粒pWHM3-SRR.将pWHM3-SRR质粒转化糖多孢红霉菌λC3菌株,筛选出质粒整合到染色体上红霉素合成基因位点的整合体λC3-A、B和C.λC3-A在无硫链丝菌肽(Thio)的R3M斜面上生长两代后,制备的原生质体涂R3M平皿,挑选出不能在含Thio的R3M斜面上生长、发酵液也无抑制枯草芽孢杆菌活性的突变菌株λC3-SRR.结果:部分基因组DNA序列分析表明,糖多孢红霉菌λC3-SRR染色体上SRR氨基酸相应9核苷酸已经敲除,Zabspec Fab质谱分析证实λC3-SRR菌株合成了3-脱氧-3-羰基-红霉内酯B.结论:糖多孢红霉菌KR6酶域SRR氨基酸相应9核苷酸敲除的λC3-SRR突变菌株可以合成3-脱氧-3-羰基-红霉内酯B,SRR为KR6酶域上NADPH 2′-磷酸结合位点.
作者：李凌凌；张部昌；张华；任洌；刘传暄；马清钧 刊期： 2004年第04期
以战斗力系统中重要、易损的军人为保障对象的军事医学,实质上保障的是战斗力.军事医学以战斗力的保持、再生与提高为根本目的,军事医学本质上是战斗力医学.军事医学发展与转型的根本动因是战斗力的发展与转型,新军事变革及全维卫勤呼唤全维战斗力医学;医学模式对军事医学也有重要影响,生物心理社会医学模式要求军事医学的内涵实现由生物单维向生物心理社会全维的扩展.全维战斗力医学是针对全维战场环境对军人全维健康的威胁,注重维护军人军事作业能力,以全时域军人健康的保持、恢复与促进为目标,以军队战斗力的全维保护为目的医学科学理论与技术,是新军事变革时代的军事医学.全维战斗力医学的领域较传统军事医学有较大扩展.对于中国特色的军事医学变革,全维战斗力医学概念的提出是有益的理论探索.
作者：雷二庆；吴乐山 刊期： 2004年第04期
目的:探讨电磁脉冲(EMP)辐射对离体培养兔角膜上皮细胞的损伤作用.方法:6×104 V/m场强的EMP重复照射离体培养的角膜上皮细胞5次,应用原子力显微镜和生化检测仪,对辐射前后的细胞膜状态及上清液多种离子浓度进行检测.结果:EMP照射后角膜上皮细胞膜表面出现多处大小不等的凹陷和穿孔.培养细胞上清多种离子浓度在照射后不同时间均有明显变化,其中K+,Ca2+,Fe2+浓度在照射后24 h明显升高.结论:细胞膜是EMP作用于细胞的敏感靶部位,细胞膜穿孔是EMP非热效应的损伤作用机制之一.
作者：姜涛；王德文；高亚兵；胡文华；陈建魁；刘杰；王水明；彭瑞云；谷庆阳 刊期： 2004年第04期
本文综述了近年来电喷雾等软电离质谱技术用于手性识别的研究进展.其研究方法主要分为对映体标记法、离子-分子反应法以及动力学方法等3类.通过综述对质谱技术用于手性识别的不足之处以及未来主要发展趋势进行了讨论.
作者：吴弼东；谢剑炜 刊期： 2004年第04期
目的:构建人β-防御素3(hBD3)的真核表达载体,建立稳定表达hBD3的细胞株.方法:用EcoRⅠ酶切含有hBD3全长基因的pGEM-hBD3重组质粒,获得其编码区全长序列,将其连接入EcoRⅠ预处理过的pcDNA3中,转化大肠杆菌,酶切鉴定筛选出插入方向正确的转化子.采用脂质体转染法将重组pcDNA3-hBD3真核表达载体导入COS-7细胞, 用G418进行抗性筛选,用RT-PCR和Western印迹检测目的基因hBD3的mRNA和蛋白表达水平.结果与结论:构建的pcDNA3-hBD3真核表达载体转染COS-7细胞后可稳定表达hBD3的mRNA和蛋白,且蛋白主要以分泌形式存在于培养上清中.
作者：庹晓晔；柴家科；徐明达；陈璧；盛志勇 刊期： 2004年第04期
恶性肿瘤是威胁人类生命的严重疾病之一,对肿瘤的治疗以手术、放疗和化疗三大手段为主.在放疗过程中由于患者白细胞数量下降等机体自身功能的低下常常不得不暂停治疗,待白细胞数目回升到一定水平才能再行治疗.这种状况影响了放疗效果,因此,国内外学者研究出一种放射增敏剂,在放疗前使用,使肿瘤细胞对射线的敏感性提高,照射低剂量可以达到高剂量的效果,而机体本身的各项功能不会下降过多,可使放疗持续下去,提高放疗效果.
作者：骆传环；黄荣清；肖炳坤；梁乾德；舒融；梁晓东；张宁 刊期： 2004年第04期
目的: 制备抗A型产气荚膜梭菌毒素α(CPTα)单克隆抗体(mAb)并鉴定其生物学特性.方法:利用工程菌株E.coli M15/pQE30-CPTα表达的重组A型CPTα带有6个组氨酸(6×his)标签的特性, 经Ni-NTA螯合亲和层析方法纯化后,用纯化的重组CPTα免疫BALB/c鼠,以常规杂交瘤细胞融合技术、HAT选择性培养和间接ELISA进行筛选,并分析其亚类及中和保护作用.结果: 获得一株能稳定分泌抗CPTα的mAb杂交瘤细胞株4E2,其分泌抗体亚类为IgG1.该mAb与重组CPTα和天然CPTα均可发生特异性反应,并可保护小鼠抵抗2倍小致死剂量CPTα的攻击,属中和性抗体.结论: 应用纯化的重组CPTα成功地获得了特异性的中和抗体mAb 4E2,为A型CPTα诊断抗体和治疗性抗体的研制奠定了基础.
作者：王景林；杨利敏；吴东林；康琳 刊期： 2004年第04期
NF-κB是一个广泛存在于哺乳动物细胞中的转录因子.它可以参与机体的炎症反应、免疫反应、细胞分化与凋亡及其他应激反应.NF-κB启动基因的表达涉及到IKK的激活、IκB磷酸化和泛素化、IκB裂解、NF-κB向核内的迁移、NF-κB与DNA的结合等过程.NF-κB的过度激活会引起一系列的疾病,如哮喘、类风湿性关节炎、肠炎等,利用药物或通过转基因方法来抑制以NF-κB为核心的信号转导途径可能会成为防治某些疾病的途径.
作者：鲍国强；李莉；章扬培 刊期： 2004年第04期
医院感染(nosocomial infection)是在医院或其他医疗保健机构内发生的各种感染,包括细菌性和真菌性医院感染.近年来,随着科学技术的飞快发展,各种先进诊疗技术层出不穷,新型抗生素亦应运而生.但是,随之出现的负面效应也呈现出越来越多的趋势,尤其是介入性诊断和治疗手段逐年增多,临床上广谱抗生素和免疫抑制剂的滥用,导致耐药菌株逐年增多,体内正常菌群发生了很大变化[1,2].很多体内的条件致病菌转变成致病菌,这在血液病和恶性肿瘤等免疫力低下的患者中表现尤为突出.因此,临床微生物工作者应积极做好医院感染病原学诊断和医院感染监测工作,定期将医院感染的优势菌群和耐药性监测情况反馈到临床一线,指导临床医师合理使用抗生素,减少耐药菌株的产生和传播,控制医院感染的发生.我们对我院恶性肿瘤和血液病患者发生医院感染的优势菌群和耐药性情况进行了监测,现报告如下.
作者：尹秀云；陈建魁；白云；姚平；金欣；佟雅丽；杜宇；郑纳新；张鹏 刊期： 2004年第04期
组装抗病毒疗法(PATs)是近年来新兴的基于细胞内免疫的抗病毒感染策略.目前PATs已在抗病毒(如小鼠白血病病毒、人乙型肝炎病毒和人类免疫缺陷病毒)感染等领域进行了深入研究.本文综述了PATs的发展历程和研究现状,并对现存的问题和应用前景进行了分析和展望.
作者：秦成峰；秦鄂德 刊期： 2004年第04期
目的:构建我国SARS病毒BJ01株基因组全序列的亚cDNA克隆,为进一步构建该毒株的全长感染性cDNA克隆奠定基础.方法:根据BJ01株病毒基因组序列中含有的特异酶切位点,利用DNAstar软件设计7对引物,然后通过RT-PCR扩增出覆盖病毒基因组全长的7个cDNA片段,并分别将其克隆至pGEM-T Easy或Topo载体.结果与结论:已构建出SARS-CoV BJ01株基因组的7个亚cDNA克隆,经酶切鉴定和序列测定表明,所获得的cDNA克隆为BJ01株病毒的特异序列.
作者：赵卓；韩剑峰；范宝昌；陈水平；姜涛；于曼；何维明；祝庆余；秦鄂德 刊期： 2004年第04期
目的: 克隆表达大肠杆菌脱氢奎尼酸合成酶基因aroB,并测定其生物学活性.方法: 根据大肠杆菌中aroB基因的序列设计了一对引物,利用PCR技术扩增得到aroB基因,将其克隆入pGEM-Teasy载体中,以双脱氧法进行测序,然后再克隆入高效原核表达载体pBV220,对该重组子的SD序列进行调节后利用温度诱导表达,并测酶的生物活性.结果: 构建了aroB基因的克隆和表达重组子,经SD序列调节后,aroB基因获得高效表达,SDS-PAGE图谱显示新增38.8×103蛋白带,酶活性测定结果表明脱氢奎尼酸合成酶的相对酶活性为5.4.结论: 实现了脱氢奎尼酸合成酶基因在大肠杆菌中的高效表达,为构建产脱氢奎尼酸工程菌种奠定了基础.
作者：常会波；刘云；吴建新；徐琪寿 刊期： 2004年第04期
军事医学杂志
主管:军事医学科学院
主办：军事医学科学院
