姜勇；屠鹏飞
21世纪是有史以来世界高技术研究和产业化进程快速的时期.伴随全球经济一体化进程,特别是我国作为WTO成员国,传统的医药产业的发展面临前所未有的机遇、挑战和冲击,也更加突出了科技在调整医药产业结构、提高国家经济实力乃至综合国力中的主导作用.由于新药研究与开发 (R & D) 属于高科技领域,目前世界各国对其市场的竞争体现在高科技的投入上.回顾近10年新药上市情况,新技术在新药寻找中的应用增加了被筛选化合物、扩大了筛选的靶标、提高了筛选速度、使新药的筛选向微型化、自动化、智能化迈进.尽管新药研究与开发的投入逐年增加,但上市的一类新药却逐年在减少,如:世界范围1994年上市44个新药,1998年上市27个新药,2001年仅上市25个新药.在2001年上市的25个新药中,美国有13个,欧洲有6个,日本有4个,其他国家有2个.从国际规范的新药研究与开发的周期上看,从GLP开始到GCP结束约消耗9～14.5年的时间,对新药上市的要求也更高.这些都说明新药研究与开发与时俱进,更加规范,更加艰难.
作者：杨秀伟；杨晓达；蒲小平；钱忠明；王夔 刊期： 2004年第01期
目的:研究一氧化氮(nitric oxide,NO)/一氧化氮合酶(nitric oxygnase, NOS)体系和硫化氢(hydrogen sulfide,H2S)/胱硫醚γ-裂解酶(cystathionine-γ-lyase,CSE)体系在低氧性肺动脉高压发生机制中的作用及其相互关系.方法:将25只大鼠随机分为4组:低氧组(7只)、低氧+L-NAME组(给与NOS抑制剂Nω-硝基-L-精氨酸甲酯处理的低氧组,6只)、低氧+PPG组(给与CSE抑制剂炔丙基甘氨酸处理的低氧组,6只)和对照组(6只).低氧21 d后,测定肺动脉平均压、血浆NO及H2S含量,分别测定低氧组、低氧+L-NAME组及对照组CSE活性,应用免疫组织化学的方法检测低氧组、低氧+PPG组及对照组的肺动脉内皮细胞eNOS表达.结果:低氧21 d大鼠肺动脉平均压力明显增高,同时血浆中NO和H2S含量、肺动脉内皮细胞eNOS表达及肺组织CSE活性亦明显下降;而低氧+L-NAME组,伴随着NO含量的下降,肺动脉平均压显著上升,同时,血浆中的H2S含量及肺组织CSE活性较低氧组显著上升;在低氧+PPG组,伴随血浆H2S含量的降低,肺动脉压力显著升高,同时血浆中的NO含量及肺血管内皮细胞eNOS表达也较低氧组显著上升.结论:内源性NO/NOS体系与H2S/CSE体系在低氧性肺动脉高压中呈现相互的负性调节作用.它们既相互独立又以网络调节的方式共同参与低氧性肺动脉高压形成的调控机制.
作者：张清友；杜军保；石琳；张春雨；闫辉；唐朝枢 刊期： 2004年第01期
目的:利用多通道记录技术在清醒大鼠前扣带回(ACC)记录神经元群的痛反应模式,以证实ACC在痛觉情绪编码中的作用.方法:在5只成年雄性SD大鼠的双侧ACC脑区植入微电极阵列,在大鼠术后清醒状态下给予尾部及四肢足底伤害性辐射热刺激,神经元的放电信号经由电缆和连接器传送至多通道记录系统.结果:伤害性辐射热刺激在大鼠ACC引起以兴奋为主的反应,该反应持续时间较长,可能与痛情绪有关;刺激开始附近ACC神经元有与痛刺激相关的预期性反应,可能与准备逃避的动机有关;同侧和对侧肢体刺激引起的ACC神经元的反应差别不显著,表明神经元感受野大,不适合精确定位.结论:ACC主要参与编码痛觉的情绪动机成分.
作者：王锦琰；罗非；张含荑；张景渝；Donald J.WOODWARD；韩济生 刊期： 2004年第01期
目的:研究多裂委陵菜(Potentilla multifida L.)的化学成分. 方法:用色谱法和波谱法对多裂委陵菜的化学成分进行分离和结构鉴定. 结果:分离、鉴定了5个化合物:3β,24-二羟基-乌苏-12-烯(1);3β-羟基-乌苏-12-烯-28-酸(2);2α,3α,19α-三羟基-乌苏-12-烯-28-酸(3);2α,3β,19α-三羟基-乌苏-12-烯-28-酸(4);3β,24-二羟基-齐墩果-12-烯-28-酸(5). 结论:5个化合物均为首次从该种植物获得,1和5为首次从该属植物获得,1为新天然产物.
作者：薛培凤；乔梁；梁鸿；赵玉英 刊期： 2004年第01期
目的:探讨一种方便、快速、原代培养成功率高的人牙龈上皮细胞培养方法.方法:用含血清的DMEM培养基培养人牙龈组织上皮层7～10 d,然后换用无血清的EpiLife角化上皮细胞专用培养基加速已移出的上皮细胞分裂、增殖和游走.对培养出的上皮细胞进行组织学、形态学检测、单克隆角蛋白的鉴定和生长曲线测定.并比较联合培养方法和其他两种单独应用有血清DMEM培养基或无血清EpiLife培养基对上皮细胞生长的影响.结果:17～22 d内可获得供实验用上皮细胞,原代培养成功率为90.6%.倒置显微镜下见上皮细胞排列紧密,呈铺路石样生长.免疫组化染色角蛋白抗体阳性.同有血清培养基相比,无血清培养基能促进上皮细胞的迁移、游走,加速其分裂、增殖.结论:用有血清培养基和无血清培养基联合培养,可以方便、快速、成功地培养出人原代牙龈上皮细胞.
作者：赵宝红；白薇；冯海兰；李盛琳 刊期： 2004年第01期
作者： 刊期： 2004年第01期
目的:探讨纳洛酮对幼年大鼠反复热惊厥后远期惊厥易感性的影响.方法: 用热水浴惊厥模型诱导生后15 d的SD大鼠发生7次热性惊厥,期间两治疗组大鼠(各13只)每次惊厥一出现立即腹腔注射低剂量纳洛酮(分别为1 mg/kg和2 mg/kg),而惊厥对照组大鼠(n=13)仅腹腔注射相同体积的生理盐水.间隔2个月再热水浴1次,观察比较治疗组和惊厥对照组大鼠远期惊厥发生率、惊厥潜伏期、惊厥持续时间及惊厥程度的差异.采用Timm染色观察神经元海马齿状回苔藓纤维发芽状况.结果: 未接受纳洛酮治疗的有幼年反复热性惊厥史的对照组大鼠,2个月后再次接受热刺激时,惊厥发生率为84.6%, 惊厥潜伏期(3.65±0.77) min,惊厥持续时间(21.18±4.06) min,惊厥级别评分(4.54±0.78), 5级惊厥发生率达69.3%,且有2只大鼠出现惊厥持续状态, 其中1只抽搐后死亡;而接受纳洛酮治疗的实验组大鼠,2个月后再次接受热刺激时,惊厥发生率、惊厥潜伏期、惊厥持续时间、惊厥级别评分分别为57.7%、(3.78±0.69) min、(5.66±2.78) min、(2.97±1.18), 5级惊厥发生率仅为19.3%, 无1只出现惊厥持续状态.比较两组惊厥发生率、惊厥潜伏期差异均无显著性,但惊厥持续时间、惊厥级别评分、5级惊厥发生率两组相比差异均有显著性.惊厥对照组Timm染色显示大鼠海马区有明显苔藓纤维发芽现象,评分达(2.33±1.03);而治疗组大鼠Timm染色示海马区苔藓纤维发芽现象明显减轻,评分为(0.92±0.79);两者比较差异有显著性, 提示治疗组大鼠远期惊厥脑损伤较未治疗组明显减轻.结论:应用低剂量纳洛酮对反复热性惊厥的幼年大鼠进行早期干预治疗,可以降低远期惊厥易感性,减轻成年后再次惊厥所造成的神经元损伤.
作者：单英；秦炯；常杏芝；杨志仙 刊期： 2004年第01期
硫化氢(H2S)可以在体内由半胱氨酸在胱硫脒-β-合酶(CBS)和胱硫脒-γ-裂解酶(CSE)作用下生成,可以调节神经元兴奋性.我们系统研究并证实了内源性H2S类似一氧化氮(NO)和一氧化碳(CO),是参与心血管系统功能调节的新型气体信号分子.
作者：耿彬；闫辉；钟光珍；张春雨；陈晓波；蒋宏峰；唐朝枢；杜军保 刊期： 2004年第01期
目的:研究和厚朴酚在大鼠体内药代动力学变化规律.方法:采用HPLC法测定大鼠静脉注射给药后的体内血浆中和厚朴酚的浓度,并用3P87程序处理数据.结果:静脉注射和厚朴酚后,药-时曲线符合三室开放模型,具有体内分布快、血药浓度下降迅速等特点.结论:为和厚朴酚的剂型设计和药效学研究提供了重要依据.
作者：陈世忠；贾晖；乌耀华；王弘 刊期： 2004年第01期
(口山)酮(xanthone),又称苯骈色原酮,是一类黄色或类白色的酚性化合物,与黄酮类化合物有相似的颜色反应和谱学特征[1].通常存在于一些较高等的植物种属,如龙胆科、桑科、藤黄科、远志科、豆科等植物及真菌和地衣中,具有利尿、抗菌、抗癌、抗抑郁等活性[2].
作者：姜勇；屠鹏飞 刊期： 2004年第01期
目的:获得纯化的重组SARS病毒S1蛋白N端部分,研究其与机体产生针对SARS病毒免疫应答的规律和机制.方法:将编码SARS病毒S1蛋白N端334个氨基酸残基的基因进行克隆,并在原核表达系统中表达,获得了纯化的重组蛋白.利用SARS患者恢复期已知的SARS抗体阳性血清,鉴定纯化的重组S1蛋白片段.结果:克隆表达的重组蛋白基因序列与公布的SARS病毒S1蛋白N端的基因序列相同,所表达的重组蛋白相对分子质量约为64 000.3份SARS患者恢复期的血清均与重组蛋白反应,在相对分子质量64 000处形成特异性的反应条带,而来自SARS流行前的正常人对照血清则不能与重组蛋白反应.结论:获得的重组蛋白与SARS病毒抗体呈现特异性的反应,为进一步研究SARS病毒感染免疫应答机制和制备SARS病毒的重组疫苗奠定基础.
作者：杨小昂；董学员；李燕；李云燕；徐国宾；冯珍如；王月丹；陈慰峰 刊期： 2004年第01期
目的:研究中药合欢皮化学和活性成分.方法:用溶剂、色谱和谱学方法分离和鉴定化合物.结果:从合欢皮95%(体积分数)乙醇提取物中分得一个八糖苷(1),经化学与谱学分析方法鉴定其结构为3-O-[β-D-吡喃木糖基-(1→2)-α-L-吡喃阿拉伯糖基-(1→6)-β-D-吡喃葡萄糖基]-21-O{(6S)-2-反式-2-羟甲基-6-甲基-6-O-[3-O-(6S)-2-反式-2-羟甲基-6-甲基-6-羟基-2,7-辛二烯酸基)-β-D-吡喃木糖基]-2,7-辛二烯酸基}-金合欢酸-28-O-β-D-吡喃葡萄糖基-(1→3)-[α-L-呋喃阿拉伯糖基-(1→4)]-α-L-吡喃鼠李糖基-(1→2)-β-D-吡喃葡萄糖基酯.结论:1为新皂苷,命名为合欢皂苷J24 (Julibroside J24).
作者：邹坤；王邠；赵玉英；郑俊华；张如意 刊期： 2004年第01期
生物转化(biotransformation)是利用生物体系或其产生的酶对外源性化合物进行结构修饰的生物化学过程,其本质为酶催化反应[1,2].生物转化反应具有选择性强,催化效率高,反应条件温和,反应类型多,以及环境污染小等特点,且往往可用于催化有机合成方法难以完成的化学反应,易于得到结构新颖的化合物.因此,生物转化技术作为合成方法的有力补充,已成为有机化学家的重要研究工具之一.目前采用生物转化技术已获得了大量新颖的化学结构,包括很多天然产物衍生物,为新药的研制与开发提供了极有价值的先导化合物.有的生物转化反应还达到了工业化生产的规模,创造了巨大的经济效益[3].
作者：叶敏；宁黎丽；占纪勋；郭洪祝；果德安 刊期： 2004年第01期
目的:通过结直肠癌患者术前外周血T淋巴细胞的T细胞受体(TCRβ)基因谱型,了解肿瘤患者外周血中T细胞克隆特征以及机体抗肿瘤免疫状况.方法: 采用RT-PCR方法扩增结直肠癌患者术前外周血、肿瘤组织和术后外周血TCRβ基因的24个V基因片段,经过特殊的测序凝胶分离和银染色后,确定它们的TCRβV基因表达谱型.通过PCR产物直接测序的方法,分析克隆性增殖的特征和CDR3区氨基酸序列.结果: 结直肠癌患者术前外周血的TCRβ基因谱型中具有克隆性表达条带,其中有些克隆的CDR3区与肿瘤组织肿瘤浸润性淋巴细胞(tumor infiltrating lymphocyte,TIL)中克隆性表达的TCRβ基因的CDR3区具有相同的氨基酸基序;临床特征表现为肿瘤局部有淋巴结转移,但是术后10个月没有复发.结论: 结直肠癌患者外周血具有与肿瘤负荷相关的T淋巴细胞克隆性增生,可能是肿瘤相关抗原特异性的抗肿瘤T淋巴细胞克隆.
作者：李惠芳；万远廉；刘玉村；吴涛；张英；朱平 刊期： 2004年第01期
目的:探讨咖啡酸(CA) 是否对1-甲基-4-苯基吡啶离子(1-methyl-4-phenylpyridinium ion, MPP+) 诱导的大鼠小脑颗粒细胞凋亡具有保护作用.方法: 用咖啡酸孵育大鼠小脑颗粒细胞, 经MPP+处理后, 用MTT法测定细胞存活率, 荧光法检测caspase-3的活性.结果:咖啡酸对MPP+致小脑颗粒细胞存活率降低和caspase-3活性增强具有很好的抑制作用,并呈现稳定的量效和时效关系.结论:咖啡酸对MPP+诱导小脑颗粒细胞凋亡具有明显的保护作用.
作者：田雪菲；蒲小平 刊期： 2004年第01期
CD15抗原(粒细胞相关抗原,Lewisx)是存在于中性粒细胞和单核细胞细胞膜表面糖蛋白的一种碳水化合物抗原, 由半乳糖、岩藻糖和N-乙酰葡萄糖胺组成,属于黏附分子家族成员,为选择素所识别的一个配基[1,2].Hodgkin淋巴瘤 Reed-Sternberg细胞表达CD15抗原,多年来CD15阳性表达被用来诊断Hodgkin淋巴瘤[3]. 近年的研究发现多种上皮组织和/或其发生的肿瘤也表达CD15蛋白,其表达与这些肿瘤的发生、发展、侵袭转移及预后有关[4-8].迄今为止,CD15在子宫内膜组织中的表达情况未见文献报道.我们应用免疫组织化学法检测CD15在良恶性子宫内膜组织和子宫腺肌症中内膜腺体的表达情况,并探讨其可能的临床意义.
作者：廖晓耘；李荣；吕晓红；回允中 刊期： 2004年第01期
作者： 刊期： 2004年第01期
目的:研究中国南海海绵Cinachyrella australiensis的化学成分.方法: 用多种色谱技术进行分离纯化,根据理化性质和波谱数据进行结构鉴定. 结果:从中国南海海绵C. australiensis中分离得到19个化合物,分别为2 -甲氧基-6,12,15-三烯-8-炔-十八酸(1),邻苯二甲酸二正丁基酯(2),邻苯二甲酸二-(2-乙基)-己基酯(3),(-)(3S)-1,2,3,4-四氢-β-咔啉-3-羧酸(4),L-色氨酸(5),对羟基苯甲醛(6),对羟基苯乙醇(7),对羟基苯丙醇(8), 胆甾-4-烯-3-醇(9),2-甲基-6-氨基嘌呤脱氧核苷(10),6-氨基嘌呤脱氧核苷(11),6-氨基嘌呤核苷(12),尿嘧啶(13),胸腺嘧啶(14),胸腺嘧啶脱氧核苷(15),尿嘧啶脱氧核苷(16),乙基-α-脱氧核糖苷(17),异光黄素(18),zarzissine(19). 结论:1和18为新化合物,化合物2～17,19系首次从该种中分离得到.
作者：李莉娅；邓志威；李军；付宏征；林文翰 刊期： 2004年第01期
作者： 刊期： 2004年第01期
目的:观察不同类型维生素E(α、γ、mixed-tocopherols)对氧化型低密度脂蛋白 (oxLDL)及重组人C反应蛋白 (rhCRP)诱导的人脐静脉内皮细胞 (HUVECs)细胞间黏附分子-1 (ICAM-1)表达的影响,以探讨不同类型维生素E的抗炎、抗动脉粥样硬化机制及不同效果. 方法: 体外培养HUVECs,分别加oxLDL、oxLDL+α-tocopherol、oxLDL+γ-tocopherol、oxLDL+mixed-tocopherols、rhCRP、rhCRP+α-tocopherol、rhCRP+γ-tocopherol、rhCRP+mixed-tocopherols孵育 24 h,采用细胞酶联免疫吸附(ELISA)、流式细胞、RT-PCR技术分别测定ICAM-1蛋白和mRNA表达水平. 结果: oxLDL和rhCRP均可诱导HUVECs的ICAM-1蛋白和mRNA表达增加,不同类型维生素E均可抑制oxLDL诱导的HUVECs的ICAM-1蛋白和mRNA表达,并呈浓度依赖性(50～200 μmol/L).与相同浓度的α、γ-tocopherol相比, mixed-tocopherols抑制作用强.不同类型维生素E均不能抑制 rhCRP诱导的HUVECs的ICAM-1蛋白和mRNA表达.结论: 不同类型维生素E均可抑制oxLDL诱导的HUVECs的ICAM-1蛋白和mRNA表达,与α、γ-tocopherol相比,mixed-tocopherols对oxLDL诱导HUVECs表达ICAM-1的抑制作用强.
作者：范琰；刘梅林；祁芸芸；任自文 刊期： 2004年第01期
北京大学学报（医学版）杂志
主管:中华人民共和国教育部
主办：北京大学
