张倩；陈学荣；白小薇；殷金珠
目的:建立药物诱导狼疮(drug-induced lupus, DIL)的动物模型,研究狼疮诱导药物对小鼠免疫功能的影响.方法:用普鲁卡因酰胺(procainamide, Pca)、盐酸肼苯哒嗪(hydralazine, Hyd)和2,2′-偶氮-双(3-乙苯基-噻唑啉-6-硫酸)诱导DIL的动物模型.用3H-TdR参人法分析细胞增殖,流式细胞分析法分析细胞表型.结果:Pca和Hyd能诱导BALB/C小鼠而不是C57BL/6小鼠产生抗核抗体.对用药BALB/C小鼠的免疫功能(包括对外来抗原的免疫应答、外周血中淋巴细胞的分型等)的分析发现其部分免疫功能的异常.结论:狼疮诱导药物能够导致BALB/C小鼠部分免疫功能的紊乱.
作者：康自珍；吕平；张岩；朱小辉；郭长占；张玲；高晓明 刊期： 2000年第04期
免疫学是生命科学及医学领域中的前沿学科,涉及抗感染免疫、血液病、自身免疫病、移植免疫和肿瘤免疫等诸多范畴.该学科近二十年来与细胞生物学、分子生物学、分子遗传学以及生物化学相互渗透,发展迅猛.分子生物学、分子遗传学以及细胞生物学的发展促进了分子免疫学、免疫遗传学以及免疫生物学等新的分支学科的形成,使人们在分子水平上对免疫系统的结构与功能有了更加深刻的认识.
作者：高晓明 刊期： 2000年第04期
目的:研究HIV-1感染者缺损HIV-1 DNA的特性.方法:用长片段PCR法(LD-PCR)研究分析HIV-1感染者外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear, PBMCs)和体外培养感染淋巴细胞中HIV-1基因特征,使用位于HIV-1 DNA链两端的LTR(U5)、LTR(R)为引物,插入有全长HIV-1基因片段的大肠杆菌质粒PNL4-3等为标准对照,并对部分标本克隆测序.结果:经扩增9.1 kb是LD-PCR的主要产物,但在10例HIV-1感染者中有9例PBMCs检测出大小不一、范围较广的缺失HIV-1基因片段,经用基因探针杂交,发现近HIV-1基因中心部位缺失频率增加,缺失结合点常存在3～4个核苷酸短片段直接重复,体外培养中HIV-1基因缺损量减少,完整和缺失基因的存在与培养中病毒分离的时间密切相关.结论:HIV-1感染者PBMCs中存在大量HIV-1基因重组和缺损片段.
作者：徐小元；陈力；斯崇文；王勤环；Jean-Claude Chermann 刊期： 2000年第04期
目的:比较rhTRX与rhTRXδ3对细胞因子依赖株TF-1细胞、NFS60细胞撤除细胞因子所诱导凋亡的抑制及促细胞增殖作用.方法:在大肠杆菌中克隆并表达重组hTRX和hTRXδ3,纯化rhTRX与rhTRXδ3蛋白,FACS检测凋亡细胞,MTT法检测细胞增殖.结果:在依赖IL-3、GM-CSF生长的TF-1细胞(人红白血病细胞)和依赖G-CSF生长的NFS60细胞(小鼠白血病细胞)撤除细胞因子后,加入rhTRXδ3比加入rhTRX能更有效地抑制这两种细胞的凋亡并有促增殖的作用.结论:重组hTRX和hTRXδ3有着不同的生物活性,rhTRXδ3有着更强的抑制这两种细胞的凋亡和促增殖的作用.
作者：王应；狄春辉；张颖妹；宋泉声；马大龙 刊期： 2000年第04期
目的:克隆胸腺细胞发育相关新基因.方法:应用抑制性差减杂交技术(suppression subtractive hybridization, SSH),构建了胸腺基质细胞系cDNA差减杂交文库,结合RACE及RT-PCR进一步克隆并验证新基因的cDNA全长序列.结果:筛选两个不同胸腺基质细胞系的差异表达基因,获得了差异表达的cDNA片段,克隆后挑选阳性克隆进行测序,成功克隆8个新基因片段.对其中两个新基因克隆C55和C91进行Northern杂交分析,mRNA转录体长度分别为1.4 kb及1.5 kb,C55的表达在两种胸腺基质细胞系中存在显著差异.进一步克隆了C55和C91两个新基因的cDNA全长序列,已被GenBank所接受.结论:抑制性差减杂交技术是克隆新基因片段的有效方法;成功克隆8个新基因片段及两个新基因的cDNA全长序列.
作者：金成刚；李燕；陈慰峰 刊期： 2000年第04期
目的:研究Yaa基因与骨髓B细胞系细胞的分化发育是否有相互关系.方法:用Whitlock-Witte法从骨髓细胞中培养纯化出B细胞系细胞,继而检测B细胞系细胞对脂多糖(lipopolysaccharide, LPS)刺激后的表型、增殖反应和抗DNA抗体的产生以及对地塞米松诱导后的凋亡情况.结果:用Whitlock-Witte法成功地从骨髓细胞中培养分离出B细胞系细胞.经LPS刺激后,雌雄BXSB小鼠B细胞系细胞膜表面CD19抗原和膜表面Ig的分布相似,都出现较强的增殖反应和产生IgM类型的抗ssDNA和dsDNA 抗体,但是对地塞米松诱导的凋亡作用不敏感.结论:Yaa基因对BXSB小鼠骨髓中B细胞系细胞的分化发育无影响,提示Yaa基因仅在外周免疫器官的成熟B细胞中表达活性;并且BXSB小鼠骨髓中的自身反应性B细胞系细胞未被删除,可能是产生自身抗体的内在原因之一.
作者：徐志伟；邓鸿业；邓玉兰；丁桂凤 刊期： 2000年第04期
目的:获得高纯度的人心肌肌钙重组蛋白,为临床上检测心肌损伤及预后提供新的诊断方法.方法:利用RT-PCR方法从人心肌细胞的cDNA文库中扩增编码人心肌肌钙蛋白Ⅰ的cDNA,并克隆到大肠杆菌表达载体中,表达含凝血酶识别序列的MS2-cTnI 融合蛋白,纯化后用Western-blot进行鉴定.结果:从人心肌cDNA文库中扩增出编码人cTnI的cDNA,克隆并在大肠杆菌中表达,表达量达30%以上.经离子交换柱纯化,终产物纯度在95%以上.可与其特异性单克隆抗体反应.结论:cTnI能够在大肠杆菌中高效表达和纯化,为今后检测心血管疾病提供了一种高效快捷的方法.
作者：狄春辉；钟英成；施群 刊期： 2000年第04期
目的:观察IL-4对诱导骨髓干细胞分化形成破骨细胞的作用.方法:用终浓度为10-8 mol.L-1的1,25(OH)2D3诱导成年小鼠骨髓干细胞分化形成破骨细胞,在此过程中加入不同质量浓度梯度的 IL-4(0、0.1、1、10 μg.L-1) 以及用IL-4的抗体中和IL-4.取IL-4(1 μg.L-1)处理过的第6天的培养上清液,先用抗IL-4抗体中和残余IL-4,再以体积分数1%,10%,20%,0加入另一新培养4 d含有骨片的骨髓细胞培养体系中,计数骨片上骨吸收陷窝数及面积,玻片上抗酒石酸酸性磷酸酶(tartrate-resistant acid phosphatase, TRAP)阳性多核细胞和单核细胞数.结果:随IL-4(质量)浓度的增加,骨片上形成的骨吸收陷窝及面积数,玻片上的TRAP阳性细胞数呈量的依赖性的减少,加抗体组抵消了IL-4的抑制作用,加条件培养液组和未加组上述参数没有显著差别.结论:IL-4具有抑制骨髓干细胞分化形成破骨细胞的作用,这种作用不是通过使其它细胞形成可溶性因子,可能是直接作用于靶细胞(能分化为破骨细胞和巨噬细胞的前体细胞),使定向分化为TRAP阳性单核细胞的前体细胞转向分化为巨噬细胞, 破骨细胞数目减少,从而抑制了骨吸收.
作者：王晓敏；于世凤；杨宗萍 刊期： 2000年第04期
点滴型银屑病常继发于咽部链球菌感染之后,扁桃腺炎往往是斑块型银屑病加重的诱因.同时,与银屑病并发的皮肤疾病(如荨麻疹、异位性皮炎等)的罹患率显著降低[1].
作者：张理涛；陈学荣；李瑞玲；殷金珠 刊期： 2000年第04期
目的:观察去甲肾上腺素在体外诱导正常大鼠淋巴细胞产生应激免疫抑制蛋白.方法:采用体外培养的方法,以ConA活化正常大鼠的淋巴结细胞,同时加入去甲肾上腺素共同孵育12～16 h,测定细胞提取物对正常小鼠淋巴细胞转化的影响.并利用应激免疫抑制蛋白单克隆抗体以抗体中和及ELISA法,鉴定应激免疫抑制蛋白.结果:去甲肾上腺素(10-5～10-3 mol.L-1)可在体外诱导以ConA活化的淋巴细胞产生一种能抑制正常淋巴细胞转化的物质.用应激免疫抑制蛋白单克隆抗体所作的抗体中和及ELISA测定发现,提取物中的抑制物可被应激免疫抑制蛋白单克隆抗体识别.结论:去甲肾上腺素可以在体外诱导ConA活化的淋巴细胞产生应激免疫抑制蛋白.
作者：邵黎；陈国力；李菊香；孙阿萍；范少光 刊期： 2000年第04期
目的:了解凋亡相关新基因TFAR19编码蛋白分子中潜在的Ser100磷酸化位点与其促凋亡效应的关系.方法:利用重叠延伸PCR定点突变技术构建TFAR19 Ser100→Ala100突变体,用DNA测序技术验证,大肠杆菌表达,离子交换技术纯化重组突变蛋白,将其加入培养的白血病细胞株HL-60,通过PI染色,流式细胞仪分析,观察突变重组蛋白的促凋亡效应.结果:构建成TFAR19 Ala100突变体,并经DNA测序所证实,在大肠杆菌中获得了高水平表达,Western blot表明突变型重组蛋白与野生型具有相同的免疫学活性,流式细胞仪分析发现突变蛋白对撤除血清的HL-60细胞具有与野生蛋白相似的剂量依赖性促凋亡效应. 结论:TFAR19 分子中潜在的Ser100磷酸化位点对其促凋亡效应无影响,提示TFAR19发挥其生物学活性时无需cAMP和cGMP依赖的蛋白激酶活化.
作者：曹志敏；张颖妹；陈英玉；马大龙 刊期： 2000年第04期
目的:研究低密度脂蛋白受体相关蛋白6(low density lipoprotein receptor related protein6, LRP6)的胞内代谢及其与淀粉样前体蛋白(amyloid precursor protein, APP)的相关性.方法:构建含有APP羧基端106个氨基酸的融合表达质粒,用酵母双杂交系统筛选人胎脑cDNA文库.结果:发现LRP6的羧基端可以和含有β淀粉样蛋白和胞内区的APP片段相互作用.结论:使与AD相关的两个重要蛋白载脂蛋白E和APP联系起来,并提示LRP6可能在APP的代谢和β淀粉样蛋白的产生中起重要作用.
作者：常磊；马康涛；张蘅 刊期： 2000年第04期
目的:构建抗卵巢癌单链抗体183B2ScFv 与假单孢外毒素(peudononas exotoxin, PE38)的融合蛋白表达载体并制备抗人卵巢癌单链免疫毒素蛋白183B2ScFvPE38,为卵巢癌导向治疗打下基础.方法:采用基因工程技术,经过3次亚克隆,将编码单链抗体的基因及编码毒素的基因亚克隆至原核表达载体pET30a(+)上,并在IPTG的诱导下进行表达.采用直接ELISA及细胞杀伤对抗体及毒素部分的活性进行检查.结果:表达蛋白183B2ScFvPE38具有较好的抗体活性及毒素活性.结论:抗卵巢癌单链免疫毒素183B2ScFvPE38 具有良好的免疫学活性及生物学活性,可能有良好的应用前景.
作者：尤芳蕾；冯捷；成夜霞；钱和年；周萍；叶雪 刊期： 2000年第04期
目的:探讨前列腺增生间质结节的演化过程,进一步认识前列腺增生病理组织学分类依据.方法:应用免疫组织化学方法对55个前列腺增生的间质结节做了波形蛋白、肌细胞肌动蛋白、平滑肌肌动蛋白和第Ⅷ因子相关抗原的免疫组化染色.结果:结合HE切片和免疫组化结果发现前列腺间质结节的早期为幼稚的纤维性结节,随着结节内肌纤维母细胞向平滑肌细胞和纤维细胞的双向分化,间质结节可继续演化为纤维肌性结节和肌性结节.55个结节按免疫组化分类,纤维性结节占42%,纤维肌性结节占51%,肌性结节占7%.结论:前列腺早期的纤维性结节随着肌纤维母细胞向平滑肌和纤维细胞的分化而演化为纤维肌性结节和肌性结节,明确这种演化过程可进而认识前列腺增生的病理学分类.
作者：孔祥田；曾荔；夏同礼；密培；顾方六；郭应禄 刊期： 2000年第04期
目的:分析EB病毒膜抗原(membrane antigen, MA)BLLF1基因在转基因小鼠外周血淋巴细胞中的表达.方法:EB病毒膜抗原BLLF1基因转基因首建鼠4只,尾组织经PCR检测携带有BLLF1基因,用流式细胞仪分析MA在外周血淋巴细胞中的表达并用激光共焦显微镜确定MA在细胞中的表达部位.结果:4只首建鼠中有2只KM-Tg-EBV1和KM-Tg-EBV5外周血淋巴细胞中有MA的表达,表达部位在细胞浆中和细胞膜上.结论:表达EB病毒膜抗原的转基因小鼠可作为研究EB病毒致病机制的一个新的动物模型.
作者：郭长占；韩文龙；潘秀芳；周为民；谷淑燕；田枫；刘斌；高晓明 刊期： 2000年第04期
目的:建立高效简便的人重组粒细胞集落刺激因子突变体rhG-CSF-Ala-17纯化工艺,并对其进行鉴定.方法:大肠杆菌表达的rhG-CSF-Ala-17经包涵体洗涤、变性复性后,采用DEAE Sepharose Fast Flow阴离子交换层析和Superdex75凝胶过滤层析分离纯化.经SDS-PAGE和FPLC检测纯度,并进行N端氨基酸序列分析、比活性分析、紫外大吸收光谱分析、内毒素检测等指标对其进行鉴定.结果:纯化后的rhG-CSF-Ala-17纯度可达99.64%,比活为1×108 U*mg-1.其N端19个氨基酸分析与预期序列一致,紫外大吸收光谱位于280 nm,氨基酸的组成与预期结果一致,内毒素含量低于部颁标准.结论:两步层析即可获得高纯度的rhG-CSF-Ala-17重组蛋白质,为进一步的rhG-CSF-Ala-17临床前和临床研究打下了基础.
作者：范慧；莫晓宁；张颖妹；杨璐；宋泉声；范中玉；马大龙 刊期： 2000年第04期
目的:研究年龄对小鼠腹腔注射IL-1β的影响.方法:用放射免疫法测定不同年龄的小鼠腹腔注射IL-1β后血浆中的皮质酮水平.结果:年老小鼠安静时血浆皮质酮的水平高于年轻小鼠;老年组动物在平时高皮质酮的水平上,注射IL-1β还能使皮质酮水平更高.全身麻醉可以完全阻断注射IL-1β引起血浆中皮质酮水平的升高.结论:老龄小鼠安静时血浆皮质酮水平升高,注射IL-1β后血浆皮质酮水平还可进一步升高.IL-1β引起血浆中皮质酮水平升高可能是在中枢神经系统调控下完成的.
作者：杨春星；张杰；王健；李欧；冀鹏；李怡凡；范少光 刊期： 2000年第04期
王志均教授是我国著名的生理学家,中国科学院资深院士.在50年代初,新中国成立伊始,他毅然放弃了国外优裕的工作和生活条件,回到祖国参加社会主义建设.近半个世纪来,他以满腔热情,勤奋地工作,在消化生理领域里创造出一个又一个具有国际水平的科研成果,并为国家培养了大批优秀人才.在此仅就王志均教授在消化生理领域里的突出贡献作一简要回顾.
作者：朱文玉 刊期： 2000年第04期
目的:总结急性完全性颈脊髓损伤继发低钠血症的发生率及变化规律,并推测其发生机制.方法: 回顾总结分析了本院1992～1998年住院的35例急性Frankel-A型颈脊髓损伤患者的血尿生化变化及其时间变化规律.结果:35例急性颈脊髓损伤患者伤后平均(2.8±1.8) d入院,平均住院时间(52±13) d.低钠血症发生率100%,低钠血症于伤后(4.5±1.2) d开始,(14±3) d达高峰,15例(42.88%)出院时低钠血症仍未恢复.此外,还可出现高碳酸血症、氮质血症、多尿以及尿钠排出量明显增多等变化,而血钾的变化始终在正常范围内波动. 结论: 严重、顽固的低钠血症是颈脊髓损伤后极为常见的并发症,其发生机制可能与脑耗盐综合征有关.
作者：张立；蔡钦林；党耕町；刘忠军 刊期： 2000年第04期
目的:探讨非造血系统来源的恶性肿瘤细胞内Ig样蛋白与Ig分子在抗原性及分子结构上的关系.方法:应用亲和层析的方法将HeLa MR(人宫颈癌传代细胞)细胞内Ig样蛋白进行了纯化;并以SDS-PAGE及Western Blot方法将Ig样蛋白与IgG进行比较分析.结果:SDS-PAGE结果显示Ig样蛋白既有与IgG相近的轻、重链泳带,同时又分别在相对分子质量6 600、7 000左右出现两条泳带,此两条泳带与人IgG具有高度一致的抗原性.Western Blot结果显示,Ig样蛋白与IgG相同,不但可与抗人IgG多克隆抗体、单克隆抗体反应而且可与Protein A蛋白发生反应.结论:Ig样蛋白与IgG比较在抗原性上具有明显的一致性,而在分子结构上也表现明显相似性,但二者不完全相同.
作者：王东升；邱晓彦；朱晓辉；吕蓬；姜南；吕平；张玲；张岩；高晓明 刊期： 2000年第04期
北京大学学报（医学版）杂志
主管:中华人民共和国教育部
主办：北京大学
