常磊；马康涛；张蘅
目的:克隆胸腺细胞发育相关新基因.方法:应用抑制性差减杂交技术(suppression subtractive hybridization, SSH),构建了胸腺基质细胞系cDNA差减杂交文库,结合RACE及RT-PCR进一步克隆并验证新基因的cDNA全长序列.结果:筛选两个不同胸腺基质细胞系的差异表达基因,获得了差异表达的cDNA片段,克隆后挑选阳性克隆进行测序,成功克隆8个新基因片段.对其中两个新基因克隆C55和C91进行Northern杂交分析,mRNA转录体长度分别为1.4 kb及1.5 kb,C55的表达在两种胸腺基质细胞系中存在显著差异.进一步克隆了C55和C91两个新基因的cDNA全长序列,已被GenBank所接受.结论:抑制性差减杂交技术是克隆新基因片段的有效方法;成功克隆8个新基因片段及两个新基因的cDNA全长序列.
作者：金成刚；李燕；陈慰峰 刊期： 2000年第04期
目的:研究低密度脂蛋白受体相关蛋白6(low density lipoprotein receptor related protein6, LRP6)的胞内代谢及其与淀粉样前体蛋白(amyloid precursor protein, APP)的相关性.方法:构建含有APP羧基端106个氨基酸的融合表达质粒,用酵母双杂交系统筛选人胎脑cDNA文库.结果:发现LRP6的羧基端可以和含有β淀粉样蛋白和胞内区的APP片段相互作用.结论:使与AD相关的两个重要蛋白载脂蛋白E和APP联系起来,并提示LRP6可能在APP的代谢和β淀粉样蛋白的产生中起重要作用.
作者：常磊；马康涛；张蘅 刊期： 2000年第04期
北京大学公共卫生学院与青岛疾病控制中心联合成立教学科研基地,揭牌仪式5月27日在青岛举行,青岛市委副书记张旭生,北京大学医学部副主任、公共卫生学院院长李立明等出席了基地揭牌仪式.
作者：周小平 刊期： 2000年第04期
目的:探讨非造血系统来源的恶性肿瘤细胞内Ig样蛋白与Ig分子在抗原性及分子结构上的关系.方法:应用亲和层析的方法将HeLa MR(人宫颈癌传代细胞)细胞内Ig样蛋白进行了纯化;并以SDS-PAGE及Western Blot方法将Ig样蛋白与IgG进行比较分析.结果:SDS-PAGE结果显示Ig样蛋白既有与IgG相近的轻、重链泳带,同时又分别在相对分子质量6 600、7 000左右出现两条泳带,此两条泳带与人IgG具有高度一致的抗原性.Western Blot结果显示,Ig样蛋白与IgG相同,不但可与抗人IgG多克隆抗体、单克隆抗体反应而且可与Protein A蛋白发生反应.结论:Ig样蛋白与IgG比较在抗原性上具有明显的一致性,而在分子结构上也表现明显相似性,但二者不完全相同.
作者：王东升；邱晓彦；朱晓辉；吕蓬；姜南；吕平；张玲；张岩；高晓明 刊期： 2000年第04期
目的:获得高纯度的人心肌肌钙重组蛋白,为临床上检测心肌损伤及预后提供新的诊断方法.方法:利用RT-PCR方法从人心肌细胞的cDNA文库中扩增编码人心肌肌钙蛋白Ⅰ的cDNA,并克隆到大肠杆菌表达载体中,表达含凝血酶识别序列的MS2-cTnI 融合蛋白,纯化后用Western-blot进行鉴定.结果:从人心肌cDNA文库中扩增出编码人cTnI的cDNA,克隆并在大肠杆菌中表达,表达量达30%以上.经离子交换柱纯化,终产物纯度在95%以上.可与其特异性单克隆抗体反应.结论:cTnI能够在大肠杆菌中高效表达和纯化,为今后检测心血管疾病提供了一种高效快捷的方法.
作者：狄春辉；钟英成；施群 刊期： 2000年第04期
王志均先生是我的老师.1955年我们班的生理课是王先生讲授的.他讲课时必定穿一件整洁的白大衣,打一条领带,显得十分认真和严肃.他讲课生动活泼,将近半个世纪后的今天,这些印象还历历在目.毕业后我又留在本校生理教研组当助教,仍然是王先生的学生,直到今天.回忆这一段走过的路程,可以看到王先生不仅在学术上有很高的成就,王先生在做人、做学问上也是我们的楷模.下面几件小事可以从一个侧面反映他的思想境界和道德风貌.
作者：范少光 刊期： 2000年第04期
点滴型银屑病常继发于咽部链球菌感染之后,扁桃腺炎往往是斑块型银屑病加重的诱因.同时,与银屑病并发的皮肤疾病(如荨麻疹、异位性皮炎等)的罹患率显著降低[1].
作者：张理涛；陈学荣；李瑞玲；殷金珠 刊期： 2000年第04期
目的:研究Yaa基因与骨髓B细胞系细胞的分化发育是否有相互关系.方法:用Whitlock-Witte法从骨髓细胞中培养纯化出B细胞系细胞,继而检测B细胞系细胞对脂多糖(lipopolysaccharide, LPS)刺激后的表型、增殖反应和抗DNA抗体的产生以及对地塞米松诱导后的凋亡情况.结果:用Whitlock-Witte法成功地从骨髓细胞中培养分离出B细胞系细胞.经LPS刺激后,雌雄BXSB小鼠B细胞系细胞膜表面CD19抗原和膜表面Ig的分布相似,都出现较强的增殖反应和产生IgM类型的抗ssDNA和dsDNA 抗体,但是对地塞米松诱导的凋亡作用不敏感.结论:Yaa基因对BXSB小鼠骨髓中B细胞系细胞的分化发育无影响,提示Yaa基因仅在外周免疫器官的成熟B细胞中表达活性;并且BXSB小鼠骨髓中的自身反应性B细胞系细胞未被删除,可能是产生自身抗体的内在原因之一.
作者：徐志伟；邓鸿业；邓玉兰；丁桂凤 刊期： 2000年第04期
名词、术语应统一,不要一义多词或一词多义.妇产科学、耳鼻咽喉科学、血液病学、呼吸病学、内分泌学和眼科学的名词已由医学名词审定委员会审定公布,应严格执行,其它尚未审定者,目前以下列两个主题词索引为准:①<医学主题词注释字顺表(1992年版)中文索引>(北京:中国医学科学院医学信息研究所,1992)②<中医药主题词表>(中国中医研究院图书情报研究所,1987).
作者：<北京大学学报>编辑部 刊期： 2000年第04期
目的:观察去甲肾上腺素在体外诱导正常大鼠淋巴细胞产生应激免疫抑制蛋白.方法:采用体外培养的方法,以ConA活化正常大鼠的淋巴结细胞,同时加入去甲肾上腺素共同孵育12～16 h,测定细胞提取物对正常小鼠淋巴细胞转化的影响.并利用应激免疫抑制蛋白单克隆抗体以抗体中和及ELISA法,鉴定应激免疫抑制蛋白.结果:去甲肾上腺素(10-5～10-3 mol.L-1)可在体外诱导以ConA活化的淋巴细胞产生一种能抑制正常淋巴细胞转化的物质.用应激免疫抑制蛋白单克隆抗体所作的抗体中和及ELISA测定发现,提取物中的抑制物可被应激免疫抑制蛋白单克隆抗体识别.结论:去甲肾上腺素可以在体外诱导ConA活化的淋巴细胞产生应激免疫抑制蛋白.
作者：邵黎；陈国力；李菊香；孙阿萍；范少光 刊期： 2000年第04期
目的:比较rhTRX与rhTRXδ3对细胞因子依赖株TF-1细胞、NFS60细胞撤除细胞因子所诱导凋亡的抑制及促细胞增殖作用.方法:在大肠杆菌中克隆并表达重组hTRX和hTRXδ3,纯化rhTRX与rhTRXδ3蛋白,FACS检测凋亡细胞,MTT法检测细胞增殖.结果:在依赖IL-3、GM-CSF生长的TF-1细胞(人红白血病细胞)和依赖G-CSF生长的NFS60细胞(小鼠白血病细胞)撤除细胞因子后,加入rhTRXδ3比加入rhTRX能更有效地抑制这两种细胞的凋亡并有促增殖的作用.结论:重组hTRX和hTRXδ3有着不同的生物活性,rhTRXδ3有着更强的抑制这两种细胞的凋亡和促增殖的作用.
作者：王应；狄春辉；张颖妹；宋泉声；马大龙 刊期： 2000年第04期
目的:探讨前列腺增生间质结节的演化过程,进一步认识前列腺增生病理组织学分类依据.方法:应用免疫组织化学方法对55个前列腺增生的间质结节做了波形蛋白、肌细胞肌动蛋白、平滑肌肌动蛋白和第Ⅷ因子相关抗原的免疫组化染色.结果:结合HE切片和免疫组化结果发现前列腺间质结节的早期为幼稚的纤维性结节,随着结节内肌纤维母细胞向平滑肌细胞和纤维细胞的双向分化,间质结节可继续演化为纤维肌性结节和肌性结节.55个结节按免疫组化分类,纤维性结节占42%,纤维肌性结节占51%,肌性结节占7%.结论:前列腺早期的纤维性结节随着肌纤维母细胞向平滑肌和纤维细胞的分化而演化为纤维肌性结节和肌性结节,明确这种演化过程可进而认识前列腺增生的病理学分类.
作者：孔祥田；曾荔；夏同礼；密培；顾方六；郭应禄 刊期： 2000年第04期
目的:构建抗卵巢癌单链抗体183B2ScFv 与假单孢外毒素(peudononas exotoxin, PE38)的融合蛋白表达载体并制备抗人卵巢癌单链免疫毒素蛋白183B2ScFvPE38,为卵巢癌导向治疗打下基础.方法:采用基因工程技术,经过3次亚克隆,将编码单链抗体的基因及编码毒素的基因亚克隆至原核表达载体pET30a(+)上,并在IPTG的诱导下进行表达.采用直接ELISA及细胞杀伤对抗体及毒素部分的活性进行检查.结果:表达蛋白183B2ScFvPE38具有较好的抗体活性及毒素活性.结论:抗卵巢癌单链免疫毒素183B2ScFvPE38 具有良好的免疫学活性及生物学活性,可能有良好的应用前景.
作者：尤芳蕾；冯捷；成夜霞；钱和年；周萍；叶雪 刊期： 2000年第04期
目的:探讨神经递质降钙素基因相关肽(calcitonin gene-related peptide, CGRP) 与银屑病皮损Langerhans细胞的相关性,研究银屑病的发病机制.方法:抗生物素蛋白-生物素-过氧化物酶复合物法确定CGRP的靶细胞,用双相间接免疫荧光染色法,把CD1a单克隆抗体和CGRP抗体作用于寻常型银屑病斑块型皮损同一切片,用PE-αM IgG和FITC-αR IgG 抗体显示,通过激光扫描共焦显微镜观察,并利用RNA探针原位杂交技术,研究表皮树枝状细胞CGRP的来源.结果:免疫组化染色银屑病皮损显示CGRP阳性表皮树枝状细胞,经双相免疫荧光染色及激光扫描断层光切,可见CGRP存在于银屑病皮损表皮CD1a+ Langerhans细胞膜表面,Langerhans细胞内有CGRPmRNA的表达.结论:寻常型银屑病斑块型皮损表皮Langerhans细胞与神经肽CGRP密切接触,同时Langerhans细胞内有CGRPmRNA的表达.
作者：何焱玲；丁桂凤；张波；邓玉兰；王宪；朱铁君；范少光 刊期： 2000年第04期
王志均教授是我国著名的生理学家,中国科学院资深院士.在50年代初,新中国成立伊始,他毅然放弃了国外优裕的工作和生活条件,回到祖国参加社会主义建设.近半个世纪来,他以满腔热情,勤奋地工作,在消化生理领域里创造出一个又一个具有国际水平的科研成果,并为国家培养了大批优秀人才.在此仅就王志均教授在消化生理领域里的突出贡献作一简要回顾.
作者：朱文玉 刊期： 2000年第04期
目的:分析EB病毒膜抗原(membrane antigen, MA)BLLF1基因在转基因小鼠外周血淋巴细胞中的表达.方法:EB病毒膜抗原BLLF1基因转基因首建鼠4只,尾组织经PCR检测携带有BLLF1基因,用流式细胞仪分析MA在外周血淋巴细胞中的表达并用激光共焦显微镜确定MA在细胞中的表达部位.结果:4只首建鼠中有2只KM-Tg-EBV1和KM-Tg-EBV5外周血淋巴细胞中有MA的表达,表达部位在细胞浆中和细胞膜上.结论:表达EB病毒膜抗原的转基因小鼠可作为研究EB病毒致病机制的一个新的动物模型.
作者：郭长占；韩文龙；潘秀芳；周为民；谷淑燕；田枫；刘斌；高晓明 刊期： 2000年第04期
免疫学是生命科学及医学领域中的前沿学科,涉及抗感染免疫、血液病、自身免疫病、移植免疫和肿瘤免疫等诸多范畴.该学科近二十年来与细胞生物学、分子生物学、分子遗传学以及生物化学相互渗透,发展迅猛.分子生物学、分子遗传学以及细胞生物学的发展促进了分子免疫学、免疫遗传学以及免疫生物学等新的分支学科的形成,使人们在分子水平上对免疫系统的结构与功能有了更加深刻的认识.
作者：高晓明 刊期： 2000年第04期
银屑病发病机制的神经免疫调节是在一定的遗传背景基础上,神经系统通过分布于皮肤的神经末梢释放神经肽作用于皮肤的免疫细胞(包括Langerhans细胞、T淋巴细胞、单核巨噬细胞和内皮细胞等),影响这些细胞的生物学功能.其中T淋巴细胞是银屑病发病过程中的主要效应细胞,由于T淋巴细胞调节的紊乱,导致T细胞表型和功能的变化,释放相关的细胞因子,可能诱导了银屑病表皮角朊干细胞增殖状态的病理性改变,使角朊细胞过度增殖、表皮可凋亡的角朊细胞异常分化,从而诱发银屑病发病机制的神经免疫调节紊乱的病变过程.目前研究表明,在与皮肤有关的神经递质中,降钙素基因相关肽(calcitonin gene-related peptide, CGRP)是与皮肤免疫细胞联系较密切的神经肽,能刺激人皮肤微血管内皮细胞分泌趋化因子,影响免疫细胞的迁移.同时,在银屑病斑块型皮损内,CGRP的分泌释放增加,并与皮损表皮的Langerhans细胞密切接触,对银屑病斑块型皮损持续存在和发展的病变过程可能具有一定的意义.
作者：何焱玲；丁桂凤；李欧；范少光 刊期： 2000年第04期
目的:研究HIV-1感染者缺损HIV-1 DNA的特性.方法:用长片段PCR法(LD-PCR)研究分析HIV-1感染者外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear, PBMCs)和体外培养感染淋巴细胞中HIV-1基因特征,使用位于HIV-1 DNA链两端的LTR(U5)、LTR(R)为引物,插入有全长HIV-1基因片段的大肠杆菌质粒PNL4-3等为标准对照,并对部分标本克隆测序.结果:经扩增9.1 kb是LD-PCR的主要产物,但在10例HIV-1感染者中有9例PBMCs检测出大小不一、范围较广的缺失HIV-1基因片段,经用基因探针杂交,发现近HIV-1基因中心部位缺失频率增加,缺失结合点常存在3～4个核苷酸短片段直接重复,体外培养中HIV-1基因缺损量减少,完整和缺失基因的存在与培养中病毒分离的时间密切相关.结论:HIV-1感染者PBMCs中存在大量HIV-1基因重组和缺损片段.
作者：徐小元；陈力；斯崇文；王勤环；Jean-Claude Chermann 刊期： 2000年第04期
目的:研究雷公藤多甙(tripterygium wilfordii hook f multi-glycosides,TWG)对角朊细胞株(COLO-16)的增殖抑制及对凋亡的影响,并探讨其治疗免疫性皮肤病的机制.方法:MTT法检测细胞增殖抑制,二苯胺及PI染色法检测细胞凋亡,RT-PCR测细胞bcl-2及bcl-Xs mRNA表达.结果:TWG 0.25 mg.L-1与角朊细胞共育72 h后,角朊细胞增殖活性受抑,此抑制作用具药物(质量)浓度依赖性;TWG 1 mg.L-1作用于角朊细胞72 h,即可使片段化DNA含量及亚二倍体细胞百分数较对照明显增加,此现象随药物质量浓度增加而增高;TWG 5 mg.L-1,可上调角朊细胞bcl-Xs mRNA表达,此作用随药物作用时间延长而增强;TWG对bcl-2 mRNA表达则无明显影响.结论:TWG可抑制角朊细胞株增殖并诱导其凋亡,此诱导凋亡机制可能与bcl-Xs上调有关.
作者：张倩；陈学荣；白小薇；殷金珠 刊期： 2000年第04期
北京大学学报（医学版）杂志
主管:中华人民共和国教育部
主办：北京大学
