常振战;沈昕;果德安;王沙生;金明善;谢梅英;郑俊华
目的:研究人红细胞摄入具有手性配体的铂(Ⅱ)配合物的手性选择性和摄入机制.方法:合成1, 2-环己二胺(1, 2-diaminocyclohexane, dach)作截体配体,柠檬酸根(cit)作为离去基团的配合物Na[Pt(dach)(cit)],并用元素分析、红外光谱对其组成和结构进行表征;测定人红细胞摄入这些配合物的动力学常数并研究阴离子通道抑制剂(4,4'-diisothiocyanatostilbene-2,2'-disulfonic acid,DIDS)对摄入的影响.结果:人红细胞对[Pt(dach)(cit)]-3种手性异构体的摄入服从一级动力学过程并且具有不同的速率常数,DIDS可抑制40%~50%的铂(Ⅱ)配合物进入细胞.结论:人红细胞对[Pt(dach)(cit)]-的摄入具有手性选择性,这些配合物可通过简单扩散及阴离子通道进入人红细胞.
作者:高愈希;李荣昌 刊期: 1999年第02期
目的:探讨猪肝细胞膜蛋白结构与异种移植细胞免疫反应原性的关系.方法:肝衰大鼠分为冻存细胞移植组(17只)、新鲜细胞移植组(9只)和对照组(9只,不移植肝细胞),腹腔内分别移植新鲜和冻存的猪肝细胞,记录鼠的存活率.圆二色光谱测定新鲜和冻存猪肝细胞的膜蛋白构象,抗体依赖性细胞毒性(antibody-dependent cellular cytotoxicity, ADCC)试验检测肝细胞破损情况.结果:对照鼠存活3只(3/9),新鲜细胞移植鼠存活6只(6/9);移植冻存肝细胞后,存活16只(16/17),显著高于对照鼠,P=0.002 2.新鲜肝细胞膜蛋白构象中α螺旋比率为47.5%,经液氮处理后,α螺旋增至56.5%;ADCC显示存活的新鲜细胞数为0.24×105,冻存细胞0.68×105.结论:异种移植细胞免疫反应原性的降低与肝细胞膜蛋白中α螺旋比率增高有关.
作者:林丛;侯宽永;张文秀;吕京宁;公衍道;丁晓岚;张秀芳;赵南明 刊期: 1999年第02期
石蜡切片法是科研与教学工作中的一种常用实验技术,在细胞生物学、组织胚胎学及病理学中应用甚广[1].对于一般肉眼可见的较大组织标本来说,此项技术操作简便 ,标本能够长期保存.胚卵标本是研究人与动物胚胎发生发育过程中必须观察的标本,尤其是植入前的早期胚卵,对研究胚体早期发育的影响因素至关重要.本文对原有的胚卵切片技术进行了改进,为进一步研究人与动物的早期胚卵发育及其影响等诸因素提供了新的技术方法.已有研究表明层粘连蛋白(laminin,LN)在胚胎粘附、着床过程中发挥重要作用[2,3].本实验利用植入前各阶段的早期胚卵,以单个胚卵石蜡包埋切片技术为手段 ,通过免疫组化染色研究LN在小鼠早期胚卵中的分布,摸索出一套特异性强的针对单个胚卵进行免疫组化染色的方法,为进一步研究LN在小鼠早期胚卵中的免疫定位及分布奠定了基础.
作者:吕丹瑜;李英 刊期: 1999年第02期
目的:分析下丘脑背内侧核(nucleus dorsomedialis hypothalami, NDM)升压反应的机制.方法:大鼠脑内或静脉注射不同药物,记录血压和心率的变化.结果:(1)谷氨酸(glutamate, Glu)注入NDM,P物质注入室旁核(nucleus paraventricularis, NPV)或延髓头端腹外侧区(rostral ventrolateral medulla, RVL)均引起升压反应;(2)NDM 升压反应可被双侧NPV或RVL内注入P物质拮抗剂衰减,但RVL内注入阿托品无此效应;(3)静脉注射酚妥拉明也能使NDM升压反应减小,而心得安或甲基阿托品静脉注射对该反应无影响.结论:Glu注入NDM可通过NPV(P物质受体)和RVL(P物质受体)-交感缩血管神经系统引起升压反应.
作者:丁欣;吴金胜;顾蕴辉;王益光;谭璐 刊期: 1999年第02期
目的:获取稳定表达重组人血小板生成素(thrombopoie tin, TPO)的NIH3T3成纤维细胞克隆,为开展成纤维细胞介导的TPO基因治疗研究提供细胞学基础.方法:以重组人T PO cDNA为目的基因, 构建真核细胞表达重组体pcDNA3/TPO,藉脂质体将其转染于NIH3T3细胞,经G418筛选,获得稳定表达重组人TPO的细胞克隆,应用PCR、RT-PCR及Western印迹等技术鉴定目的基因的导入及表达.结果:pcDNA3/TPO可藉脂质体转染NIH3T3细胞,转染细胞可稳定表达并分泌TPO.结论:已获得所需细胞克隆,为应用人TPO cDNA进行基因治疗奠定了基础.
作者:韩安平;陆爱丽;王申五;侯纬敏;王德炳 刊期: 1999年第02期
我们曾首先证实α1肾上腺素受体(α1-AR)包含α1A与α1B两种亚型.α1A-AR与一系列选择性拮抗剂的结合呈高亲和性,不被氯乙基可乐定(chlorethylclonidine, CEC)不可逆阻断,激动后促进肌醇磷脂水解,在介导平滑肌收缩效应时依赖细胞外Ca2+通过双氢吡啶敏感性钙通道的进入;α1B-AR与选择性拮抗剂的结合呈低亲和性,能被CEC不可逆阻断,激动后促进肌醇磷脂水解,并由此启动生物学效应,并不依赖细胞外Ca2+通过双氢吡啶敏感性钙通道进入细胞[1~3].
作者:韩启德 刊期: 1999年第02期
目的:探讨Y染色体在葡萄胎中的出现率及其遗传学意义.方法:采用3对引物对大体病理完全性和部分性葡萄胎共41例标本扩增Y染色体长臂、短臂和着丝粒区特异DNA序列.结果:28例完全性葡萄胎中Y阳性者6例(6/28),13例部分性葡萄胎中Y染色体阳性者4例(4/13),统计学检验两类葡萄胎间Y染色体出现率差异无显著性.结论:Y染色体在病理学完全性和部分性葡萄胎中的出现率差异无统计学意义,提示葡萄胎的遗传学类型与病理分类可能并不存在完全的对应关系.
作者:张小为;张丽珠;周羡梅 刊期: 1999年第02期
大规模前瞻性临床试验已证明辛伐它汀可明显降低冠心病病人的发病与死亡率,但其对止血功能的影响至今不清.
作者:陈红;罗宇 刊期: 1999年第02期
目的:观察睾丸炎期间生精细胞凋亡的情况.方法:Giemsa染色、TUNEL及流式细胞术测定.结果:经Giemsa染色可见一些生精细胞及巨大核细胞的细胞核染色致密,形状不规则.流式细胞仪测定发现正常小鼠睾丸内亚单倍体很少,模型小鼠睾丸内亚单倍体增多.TUNEL阳性细胞在模型小鼠睾丸内增多,主要为精原细胞、精母细胞及管腔中的巨大核细胞.结论:正常小鼠睾丸中可见少量凋亡的生精细胞.睾丸炎期间凋亡的生精细胞增多.此时出现的一些巨大核细胞也是凋亡中的细胞.
作者:聂振英;刘斌 刊期: 1999年第02期
目的:观察重组组织型纤溶酶原激活剂(recombinant tissue-type plasminogen activator, rt-PA)治疗急性心肌梗死的疗效.方法:53例急性心肌梗死患者,于60 min或90 min内给予rt-PA总量为50 mg,观察血管再通的临床指标、低血压、出血及寒战等并发症.结果:总血管再通42例(42/53),其中,60 min组及90 min组再通者分别有19例(19/28)、23例(23/25).不良反应发生中,一过性低血压6例(6/53),轻度出血7例(7/53),发生寒战1例(1/53),一般不需处理自行消失.结论:rt-PA是一种安全、有效的溶栓剂.
作者:蒋宝琦;朱继红;刘健;吴淳 刊期: 1999年第02期
目的:获得纯化的由大肠杆菌表达的小鼠Fas配体(Fas ligand, FasL ).方法:以质粒pET-15b为载体,在大肠杆菌BL21( DE3)中表达小鼠的FasL,用金属螯合亲和层析法纯化.结果:转化菌中,重组质粒是稳定的,异丙基-β-D硫代半乳糖苷可诱导小鼠FasL的表达,金属螯合亲和层析法可以初步纯化此蛋白.结论:在大肠杆菌中表达出小鼠的FasL,并得到初步纯化.
作者:顾维丰;王玉刚;殷金珠 刊期: 1999年第02期
目的:分析杂合性急性白血病(hybrid acute leukemia, HAL)的临床、细胞形态、细胞化学、免疫学及细胞遗传学特征,以了解其临床意义.方法:选择1991年10月至1996年8月间我院治疗的成人急性白血病患者145例,采用瑞特染色、常规细胞化学染色、间接免疫荧光、G显带方法,按Catovsky标准,凡淋巴和髓系积分均≥2分者诊为HAL.结果:9例(9/145)患者诊为HAL,临床表现无特征性异常,细胞形态及细胞化学染色多显示淋巴或髓系特征,免疫学表型多同时显示两系标志,5例核型异常,完全缓解(complete remission, CR)者3例(3/9),与其余136例急性白血病患者CR率(69.85%)相比,有明显统计学差异(P<0.05).结论:免疫分型技术在HAL诊断中可发挥重要作用.
作者:郑蕊;王德炳;付剑峰;单福香;卢锡京;陆道培 刊期: 1999年第02期
目的:观察大鼠海马发育过程中穿孔突触的超微结构,探讨中枢神经系统发育和可塑性过程中穿孔突触的作用.方法:透射电镜技术.结果:30日龄幼年大鼠海马内穿孔突触的突触小泡大而清亮,突触后致密物上的孔洞多为1个,存在典型的突触小泡偏心现象和双头突触.结论:穿孔突触与中枢神经系统的发育和可塑性过程有关.
作者:沈丽;买鸿宴;张琳;南燕 刊期: 1999年第02期
目的:观察比较大鼠心室与左心房α1肾上腺素受体(α1-adrenoceptor, α1-AR)3种亚型的分布.方法:放射配体结合实验.结果:大鼠心室与左心房每毫克蛋白中α1-AR含量分别为(81±13) fmol和(86±15) fmol;在心室和左心房α1-AR的3种亚型α1A-、α1B-和α1D-AR分别约占受体总密度的25%,45%和30%.结论:α1-AR 3种亚型在心室肌与左心房分布基本一致.
作者:张幼怡;孙晓光;韩启德 刊期: 1999年第02期
bcl-2是Tsujimoto在Ⅱ型B细胞淋巴瘤中发现的一种基因,其过度表达能抑制撤退生长因子、射线、热休克、化疗药物、病毒及促凋亡基因等多种因素诱导的细胞凋亡 .bcl-2蛋白高表达赋予肿瘤细胞对多种化疗药物的抗性,导致化疗失败或复发.逆转bcl -2的表达可能提高化疗效果.我们将bcl-2的编码序列反向插入逆转录病毒表达载体中并转导实体瘤胃癌细胞株MGC-803,观察bcl-2反义序列对实体瘤肿瘤细胞的作用.
作者:曹国栋;王申五;武莎莎;马丽萍;潘秀英 刊期: 1999年第02期
骨性关节炎(osteoarthritis, OA)及类风湿性关节炎(rheumatoid arthritis , RA)时软骨的病理性降解机制迄今不清.目前的研究发现基质金属蛋白酶(matrix metalloproteinases, MMPs)及其特异性组织抑制剂(tissueinhibitors of metalloproteinases, TIMPs)在皮肤等结缔组织的重建过程中起着非常重要的作用;然而,MMPs的过度表达会导致组织损伤及肿瘤转移.那么,MMPs与TIMP s是否在软骨细胞内也有表达并与OA、RA时的软骨损伤有关呢?本实验通过研究MMPs及TIMPs是否在软骨细胞内也有表达,为探讨软骨的重建过程及在OA、RA时软骨的降解机制打下基础.
作者:田华;党耕町;娄思权;张克;王志国 刊期: 1999年第02期
自王清任创制补阳还五汤以来,其临床应用广泛,疗效显著,是目前中风等血栓性疾病应用频率高的方剂[1].血小板活化因子(platelet activating factor,PAF )是迄今发现的体内强的血小板聚集剂,与血栓形成密切相关[2].本研究应用大鼠实验性动脉血栓模型,探讨补阳还五汤对动脉血栓形成前后动脉血中PAF质量浓度的影响,为其防治血栓性疾病提供新的实验依据.
作者:张继平;李长龄;郭欣欣;王银叶;王桂玲 刊期: 1999年第02期
11号染色体q23的易位可造成几种类型的白血病.易位多聚集于MLL(mixed lineage leukemia)基因内部,造成MLL基因的重排.
作者:刘迎;朱平;薛海鹏;许玉风 刊期: 1999年第02期
目的:观察小剂量血脂康、普伐他汀对高血脂病人的长期调脂作用.方法:多中心,195例高血脂病人,分血脂康组每晚睡前口服血脂康2粒(含他汀类物质6mg)]与普伐他汀组(每晚睡前口服5mg)治疗6个月,比较治疗前、后血脂水平变化及两组间差异,用方差分析法检验及χ2检验.结果:血脂康与普伐他汀治疗6个月时,TC下降16%及17%,TG下降13%及15%,LDL下降23% 及21%;HDL在血脂康组上升2%,在普伐他汀组上升10%.两组均能有效降低LDL/HDL.两组间比较普伐他汀升HDL作用较血脂康稍好(P=0.05).两组TC、LDL、LDL/HDL下降均有统计学意义.两组TG下降及HDL升高无统计学意义,血脂康及普伐他汀组降TC疗效分别为54.6%、68.4%;升HDL疗效分别为49.1%、53.9%;降TG为46.2%、40.8%.两组疗效差异均无显著性.两组均未见严重副作用.结论:小剂量他汀类药物(如血脂康和普伐他汀)长期口服治疗成人血脂紊乱安全、有效.
作者:康丽萍;徐成斌 刊期: 1999年第02期
目的:探讨灵芝多糖(Ganoderma lucidum polysaccharides B, GL-B)对小鼠腹腔巨噬细胞(peritoneal macrophage, PM)、肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor alpha, TNFα)、脾细胞γ干扰素(interferon-γ, IFNγ)的产生及其mRNA表达的影响.方法:采集小鼠PM和脾淋巴细胞,体外给药,分离细胞培养上清.生物法测定TNFα,ELISA测定IFNγ;RT-PCR方法检测mRNA的表达.结果:GL-B 25~400 mg.L-1使正常小鼠PM培养上清中TNFα的活性升高,并呈剂量依赖关系,24h达高峰,72h后开始减少.GL-B对小鼠PM的TNFαmRNA表达有显著促进作用.GL-B 12.5~200mg.L-1明显增加正常小鼠脾细胞培养上清中IFNγ的产生.24h内随培养时间的延长而增加,48 h后开始减少.GL-B对IFNγ mRNA的表达有促进作用.结论:灵芝多糖GL-B明显促进小鼠PM及脾细胞TNFα和IFNγ mRNA的表达,增加TNFα和IFNγ的产生.
作者:张群豪;林志彬 刊期: 1999年第02期