学术投稿

决明Ri质粒转化根离体培养研究

常振战;沈昕;果德安;王沙生;金明善;谢梅英;郑俊华

关键词:决明/生长和发育, Ri质粒, 转化根, 蒽醌类/分析, 组织培养
摘要:目的:用Ri质粒转化决明,检测转化根培养物中蒽醌化合物的产生.方法:用叶盘法转化决明外植体诱导Ri质粒转化根并用Southern杂交加以鉴定,测定转化根的生长周期,用高效液相色谱法(high performance liquid chromatography, HPLC)测定光培养及暗培养转化根中游离蒽醌化合物的质量分数.结果:决明转化根在第5~20天为对数生长期,Southern杂交证明了Ri质粒T-DNA转移并整合到植物基因组中,HPLC结果说明暗培养转化根中芦荟大黄素等6种游离蒽醌化合物含量为光培养的2倍多.结论:决明转化根培养周期为35 d较为适宜;暗培养有利于决明转化根的生长及游离蒽醌化合物的积累.
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  • 杂合性急性白血病9例分析

    目的:分析杂合性急性白血病(hybrid acute leukemia, HAL)的临床、细胞形态、细胞化学、免疫学及细胞遗传学特征,以了解其临床意义.方法:选择1991年10月至1996年8月间我院治疗的成人急性白血病患者145例,采用瑞特染色、常规细胞化学染色、间接免疫荧光、G显带方法,按Catovsky标准,凡淋巴和髓系积分均≥2分者诊为HAL.结果:9例(9/145)患者诊为HAL,临床表现无特征性异常,细胞形态及细胞化学染色多显示淋巴或髓系特征,免疫学表型多同时显示两系标志,5例核型异常,完全缓解(complete remission, CR)者3例(3/9),与其余136例急性白血病患者CR率(69.85%)相比,有明显统计学差异(P<0.05).结论:免疫分型技术在HAL诊断中可发挥重要作用.

    作者:郑蕊;王德炳;付剑峰;单福香;卢锡京;陆道培 刊期: 1999年第02期

  • 帕米磷酸二钠治疗多发性骨髓瘤的初步观察

    帕米磷酸二钠为第二代二磷酸盐,它可抑制破骨细胞活性,用来治疗骨髓瘤患者的骨损害和骨疼痛,其作用较第一代二磷酸盐明显增强.本文对浙江奥托康制药集团股份有限公司生产的国产帕米磷酸二钠的疗效以及副作用作了初步临床观察.

    作者:赵昕;杨玉花;克晓燕;王良绪 刊期: 1999年第02期

  • 体外培养星形胶质细胞缺氧/再给氧后谷氨酸摄取功能的变化

    目的:观察缺氧及再给氧对体外培养星形胶质细胞存活能力及谷氨酸摄取功能的影响.方法:取生后1~2 d新生昆明小鼠大脑皮层进行星形胶质细胞原代培养,培养1周左右予以缺氧.缺氧时间分别为12、24、48 h,并取缺氧24 h后再给氧0、12、24、48 h的细胞观察其形态、死亡细胞数目、乳酸脱氢酶活性及谷氨酸摄取能力的变化.结果:缺氧组及再给氧组星形胶质细胞死亡数较对照组无明显变化,缺氧前、后乳酸脱氢酶活性亦无明显改变,缺氧组谷氨酸摄取功能较对照组下降30%~60%,并随缺氧时间延长而明显下降(与对照组相比,P<0.01),再给氧24 h内谷氨酸摄取能力有所恢复,但未达正常水平.结论:星形胶质细胞与神经元相比,对缺氧培养液较为耐受,缺氧对星形胶质细胞存活能力无明显影响,但细胞摄取谷氨酸能力有所改变.

    作者:熊晖;梁卫兰;母得志;吴希如 刊期: 1999年第02期

  • 重组组织型纤溶酶原激活剂溶栓治疗急性心肌梗死临床观察

    目的:观察重组组织型纤溶酶原激活剂(recombinant tissue-type plasminogen activator, rt-PA)治疗急性心肌梗死的疗效.方法:53例急性心肌梗死患者,于60 min或90 min内给予rt-PA总量为50 mg,观察血管再通的临床指标、低血压、出血及寒战等并发症.结果:总血管再通42例(42/53),其中,60 min组及90 min组再通者分别有19例(19/28)、23例(23/25).不良反应发生中,一过性低血压6例(6/53),轻度出血7例(7/53),发生寒战1例(1/53),一般不需处理自行消失.结论:rt-PA是一种安全、有效的溶栓剂.

    作者:蒋宝琦;朱继红;刘健;吴淳 刊期: 1999年第02期

  • 辛伐它汀对高胆固醇血症患者部分止血参数的影响

    大规模前瞻性临床试验已证明辛伐它汀可明显降低冠心病病人的发病与死亡率,但其对止血功能的影响至今不清.

    作者:陈红;罗宇 刊期: 1999年第02期

  • 基质金属蛋白酶及其抑制剂在软骨细胞内的表达及其意义

    骨性关节炎(osteoarthritis, OA)及类风湿性关节炎(rheumatoid arthritis , RA)时软骨的病理性降解机制迄今不清.目前的研究发现基质金属蛋白酶(matrix metalloproteinases, MMPs)及其特异性组织抑制剂(tissueinhibitors of metalloproteinases, TIMPs)在皮肤等结缔组织的重建过程中起着非常重要的作用;然而,MMPs的过度表达会导致组织损伤及肿瘤转移.那么,MMPs与TIMP s是否在软骨细胞内也有表达并与OA、RA时的软骨损伤有关呢?本实验通过研究MMPs及TIMPs是否在软骨细胞内也有表达,为探讨软骨的重建过程及在OA、RA时软骨的降解机制打下基础.

    作者:田华;党耕町;娄思权;张克;王志国 刊期: 1999年第02期

  • 含重组人血小板生成素基因的小鼠成纤维细胞的克隆筛选与鉴定

    目的:获取稳定表达重组人血小板生成素(thrombopoie tin, TPO)的NIH3T3成纤维细胞克隆,为开展成纤维细胞介导的TPO基因治疗研究提供细胞学基础.方法:以重组人T PO cDNA为目的基因, 构建真核细胞表达重组体pcDNA3/TPO,藉脂质体将其转染于NIH3T3细胞,经G418筛选,获得稳定表达重组人TPO的细胞克隆,应用PCR、RT-PCR及Western印迹等技术鉴定目的基因的导入及表达.结果:pcDNA3/TPO可藉脂质体转染NIH3T3细胞,转染细胞可稳定表达并分泌TPO.结论:已获得所需细胞克隆,为应用人TPO cDNA进行基因治疗奠定了基础.

    作者:韩安平;陆爱丽;王申五;侯纬敏;王德炳 刊期: 1999年第02期

  • 苯那普利降低慢性肾炎尿蛋白的临床观察

    目的:了解苯那普利(benazepril)的降低慢性肾小球肾炎尿蛋白的作用.方法:对慢性肾炎病人64例进行多中心自身对照观察.结果:经苯那普利治疗12周后,大量蛋白尿组(30例)尿蛋白下降47.0%,小量蛋白尿组(34例)尿蛋白下降47.5%,平均起效时间分别为(5.1±3.2)周(大量蛋白尿组)和(2.7±2.1)周(小量蛋白尿组),同时,其中14例肾病综合征患者的低白蛋白血症也有明显改善.结论:苯那普利可部分地降低慢性肾小球肾炎患者的尿蛋白.

    作者:金其庄;王化民;赵秀娟;潘缉圣;范敏华;周柱亮;刘章锁;李荣山;姬长鸣;李英;王静毅;刘瑞华;周春华;王海燕 刊期: 1999年第02期

  • 白细胞介素10对人肾系膜细胞的细胞间粘附分子1表达的抑制作用通过核因子κB介导

    目的:研究白细胞介素10(rhIL-10)对白细胞介素1β(rhIL-1β)诱导的人肾小球系膜细胞(human mesangial cells, hMsC)的细胞间粘附分子1(CD54)表达的影响及其细胞内作用机制.方法:用细胞ELISA法检测CD54蛋白水平表达,以Northern杂交方法测定CD54的基因表达,采用电泳迁移率变动法观察核因子κB(nuclear factor κB, NFκB)的活性.结果:20 ng*L-1的rhIL-10能抑制rhIL-1β诱导的CD54的表达,此抑制作用在rhIL-1β加入后的36 h内持续存在,rhIL-10还能抑制rhIL-1β诱导的hMsC CD54基因表达和核因子κB活化.结论:细胞因子rhIL-10对rhIL-1β诱导的hMsC 的CD54表达的抑制作用至少部分与其对NFκB活化及CD54基因表达的抑制有关.

    作者:陈建粮;李晓玫;王海燕 刊期: 1999年第02期

  • 大鼠心脏不同部位α1肾上腺素受体3种亚型分布比较

    目的:观察比较大鼠心室与左心房α1肾上腺素受体(α1-adrenoceptor, α1-AR)3种亚型的分布.方法:放射配体结合实验.结果:大鼠心室与左心房每毫克蛋白中α1-AR含量分别为(81±13) fmol和(86±15) fmol;在心室和左心房α1-AR的3种亚型α1A-、α1B-和α1D-AR分别约占受体总密度的25%,45%和30%.结论:α1-AR 3种亚型在心室肌与左心房分布基本一致.

    作者:张幼怡;孙晓光;韩启德 刊期: 1999年第02期

  • 幼年大鼠海马穿孔突触的超微结构

    目的:观察大鼠海马发育过程中穿孔突触的超微结构,探讨中枢神经系统发育和可塑性过程中穿孔突触的作用.方法:透射电镜技术.结果:30日龄幼年大鼠海马内穿孔突触的突触小泡大而清亮,突触后致密物上的孔洞多为1个,存在典型的突触小泡偏心现象和双头突触.结论:穿孔突触与中枢神经系统的发育和可塑性过程有关.

    作者:沈丽;买鸿宴;张琳;南燕 刊期: 1999年第02期

  • 电离辐射诱导新生大鼠大脑皮质诱导型一氧化氮合酶的表达

    目的:研究诱导型一氧化氮合酶(inducible nitric oxide synthase, iNOS)在电离辐射导致的神经细胞凋亡中的作用.方法:以单剂量2.0 Gy γ射线照射出生后0 d的Wistar大鼠,用ABC法检测照射后第0.5、1、2、4、6、8、12、24、48小时大脑皮质内iNOS的表达.结果:照射组各时间点均有不同程度的iNOS表达,第6小时达峰值.各对照组未见iNOS表达.结论:iNOS所具有的神经毒作用可能是电离辐射导致的发育中脑神经细胞凋亡的重要因素.

    作者:徐胜利;沈丽 刊期: 1999年第02期

  • 人红细胞摄取1,2-环己二胺·柠檬酸合铂(Ⅱ)配合物的手性选择性和摄入机制

    目的:研究人红细胞摄入具有手性配体的铂(Ⅱ)配合物的手性选择性和摄入机制.方法:合成1, 2-环己二胺(1, 2-diaminocyclohexane, dach)作截体配体,柠檬酸根(cit)作为离去基团的配合物Na[Pt(dach)(cit)],并用元素分析、红外光谱对其组成和结构进行表征;测定人红细胞摄入这些配合物的动力学常数并研究阴离子通道抑制剂(4,4'-diisothiocyanatostilbene-2,2'-disulfonic acid,DIDS)对摄入的影响.结果:人红细胞对[Pt(dach)(cit)]-3种手性异构体的摄入服从一级动力学过程并且具有不同的速率常数,DIDS可抑制40%~50%的铂(Ⅱ)配合物进入细胞.结论:人红细胞对[Pt(dach)(cit)]-的摄入具有手性选择性,这些配合物可通过简单扩散及阴离子通道进入人红细胞.

    作者:高愈希;李荣昌 刊期: 1999年第02期

  • 超声引导下经皮胸腔细针吸取活检(附68例报告)

    目的:探讨在超声引导下经皮胸腔细针吸取活检对肺外周型肿块、肺的弥漫性病变和纵隔肿块细胞学、病理学诊断的临床应用价值.方法:选择68例影像学检查提示肺外周型肿块、肺弥漫性病变或纵隔肿块,而痰细胞学和支气管镜检查阴性的病例.应用ALOKA-SSD 650实时灰阶超声仪.采用日本18G与21G细针活检.68例全部做细胞涂片,40例除做涂片外同时吸取组织块做石蜡切片.计算敏感性,特异性,准确性.结果:经细胞学、组织学两种方法诊断恶性肿瘤43例,仅细胞学诊断为恶性肿瘤40例,良性病变28例,其中3例假阴性.细胞学检查敏感度为93%,特异性100%.细胞学总准确率为95.6%.被检查者无气胸或出血等合并症.结论:该方法简便、迅速、安全且准确.尤其对细支气管肺泡癌的诊断更有帮助.

    作者:邢香芬;李竞贤;王彬;黄咏梅;何冰 刊期: 1999年第02期

  • 急性白血病患者68例中MLL基因易位的发生

    11号染色体q23的易位可造成几种类型的白血病.易位多聚集于MLL(mixed lineage leukemia)基因内部,造成MLL基因的重排.

    作者:刘迎;朱平;薛海鹏;许玉风 刊期: 1999年第02期

  • α1肾上腺素受体3种亚型在心血管共存的生理与病理生理意义

    我们曾首先证实α1肾上腺素受体(α1-AR)包含α1A与α1B两种亚型.α1A-AR与一系列选择性拮抗剂的结合呈高亲和性,不被氯乙基可乐定(chlorethylclonidine, CEC)不可逆阻断,激动后促进肌醇磷脂水解,在介导平滑肌收缩效应时依赖细胞外Ca2+通过双氢吡啶敏感性钙通道的进入;α1B-AR与选择性拮抗剂的结合呈低亲和性,能被CEC不可逆阻断,激动后促进肌醇磷脂水解,并由此启动生物学效应,并不依赖细胞外Ca2+通过双氢吡啶敏感性钙通道进入细胞[1~3].

    作者:韩启德 刊期: 1999年第02期

  • 先天性巨结肠的治疗与回顾

    目的:讨论先天性巨结肠的诊断依据和手术治疗.探讨全结肠型巨结肠的手术时机及方法.方法:回顾30例先天性巨结肠手术效果.结果:采用改良Duhamel术式治疗先天性巨结肠并发症少,远期排便功能良好.结论:改良Duhamel术式适于任何年龄和所有类型的巨结肠,疗效满意.

    作者:余奇志;王平;钱雪丽 刊期: 1999年第02期

  • 谷氨酸注入下丘脑的背内侧核引起升压反应的机制

    目的:分析下丘脑背内侧核(nucleus dorsomedialis hypothalami, NDM)升压反应的机制.方法:大鼠脑内或静脉注射不同药物,记录血压和心率的变化.结果:(1)谷氨酸(glutamate, Glu)注入NDM,P物质注入室旁核(nucleus paraventricularis, NPV)或延髓头端腹外侧区(rostral ventrolateral medulla, RVL)均引起升压反应;(2)NDM 升压反应可被双侧NPV或RVL内注入P物质拮抗剂衰减,但RVL内注入阿托品无此效应;(3)静脉注射酚妥拉明也能使NDM升压反应减小,而心得安或甲基阿托品静脉注射对该反应无影响.结论:Glu注入NDM可通过NPV(P物质受体)和RVL(P物质受体)-交感缩血管神经系统引起升压反应.

    作者:丁欣;吴金胜;顾蕴辉;王益光;谭璐 刊期: 1999年第02期

  • 逆转录病毒载体介导的bcl-2反义RNA促进胃癌MGC-803细胞凋亡

    bcl-2是Tsujimoto在Ⅱ型B细胞淋巴瘤中发现的一种基因,其过度表达能抑制撤退生长因子、射线、热休克、化疗药物、病毒及促凋亡基因等多种因素诱导的细胞凋亡 .bcl-2蛋白高表达赋予肿瘤细胞对多种化疗药物的抗性,导致化疗失败或复发.逆转bcl -2的表达可能提高化疗效果.我们将bcl-2的编码序列反向插入逆转录病毒表达载体中并转导实体瘤胃癌细胞株MGC-803,观察bcl-2反义序列对实体瘤肿瘤细胞的作用.

    作者:曹国栋;王申五;武莎莎;马丽萍;潘秀英 刊期: 1999年第02期

  • P物质体外对骨髓CFU-GM和CFU-C21的影响

    目的:探讨P物质(SP)与造血的关系.方法:采用甲基纤维素半固体造血祖细胞培养法检测正常血浓度的SP以及不同浓度的SP 对骨髓CFU-GM和CFU-C21的作用.结果:10-10 mol*L-1和10-11 mol.L-1 SP组CFU-GM的产率分别为193±19和206±40,与对照(136±17)相比具有显著差异(P<0.05); 10-10mol.L-1和10-11mol.L-1 SP对CFU-C21也有明显刺激作用,前者CFU-C21为143±16,后者为153±15,与对照(80.3±31)相比具有显著性差异 (P<0.05);高于或低于上述浓度时,SP对CFU-GM和CFU-C21的刺激作用均减弱,与对照相比无显著性差异(P>0.05).结论:适当浓度的SP对体外CFU-GM和CFU-C21具有明显的刺激效应.SP对正常骨髓造血具有重要的意义.

    作者:夏长青;王逸兰;陆道培 刊期: 1999年第02期

北京大学学报(医学版)杂志

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