赵昕；杨玉花；克晓燕；王良绪
目的:建立丙型肝炎病毒包膜区基因的真核表达载体,并通过对其序列分析阐明其作为基因接种的可能性.方法:经常规RT-PCR法从HCV RNA阳性病人的血清中扩增出HCV E1区的基因片段,经EcoR Ⅰ和Xba Ⅰ双酶切后将其克隆到真核表达载体P cDNA3中,阳性克隆经Sma Ⅰ和Xba Ⅰ双酶切鉴定;用双脱氧终止法测序,同时利用计算机软件对其推定的氨基酸序列进行分析.结果:RT-PCR扩增产物经酶切过夜后与经过同样双酶切的真核表达载体PcDNA3连接,阳性克隆经Sma Ⅰ和Xba Ⅰ酶切后产生了预期大小的144bp的片段 .测序后其核苷酸序列与已经报道的HCV Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ型的同源性分别为72.8%、93.25% 、61.96%和56.44%;其推定的氨基酸序列的同源性分别为77.3%、95.7%、54.6%和51.35%;与已经报道的中国株的同源性为95.06%和93.25%;属HCV Ⅱ型; 经计算机辅助分析表明该片段内含有4个可能的糖基化位点,1个跨膜区,其氨基端为信号肽序列,在跨膜区的两端分别含有2个和1个抗原决定簇, 而每一个抗原决定簇内均含有1个糖基化位点,该片段内还含有2个T细胞识别位点.结论:本实验克隆的HCV E1基因属Ⅱ型,为我国流行的基因型,其基因的一级结构具备进行有关HCV核酸免疫的研究条件,其真核表达载体的构建,为进一步研究HCV E1基因的功能及HCV基因免疫的研究创造了条件.
作者：高建恩；蒋栋；陶其敏；纪和平；季颖；冯百芳 刊期： 1999年第02期
目的:探讨Y染色体在葡萄胎中的出现率及其遗传学意义.方法:采用3对引物对大体病理完全性和部分性葡萄胎共41例标本扩增Y染色体长臂、短臂和着丝粒区特异DNA序列.结果:28例完全性葡萄胎中Y阳性者6例(6/28),13例部分性葡萄胎中Y染色体阳性者4例(4/13),统计学检验两类葡萄胎间Y染色体出现率差异无显著性.结论:Y染色体在病理学完全性和部分性葡萄胎中的出现率差异无统计学意义,提示葡萄胎的遗传学类型与病理分类可能并不存在完全的对应关系.
作者：张小为；张丽珠；周羡梅 刊期： 1999年第02期
目的:探讨P物质(SP)与造血的关系.方法:采用甲基纤维素半固体造血祖细胞培养法检测正常血浓度的SP以及不同浓度的SP 对骨髓CFU-GM和CFU-C21的作用.结果:10-10 mol*L-1和10-11 mol.L-1 SP组CFU-GM的产率分别为193±19和206±40,与对照(136±17)相比具有显著差异(P<0.05); 10-10mol.L-1和10-11mol.L-1 SP对CFU-C21也有明显刺激作用,前者CFU-C21为143±16,后者为153±15,与对照(80.3±31)相比具有显著性差异 (P<0.05);高于或低于上述浓度时,SP对CFU-GM和CFU-C21的刺激作用均减弱,与对照相比无显著性差异(P＞0.05).结论:适当浓度的SP对体外CFU-GM和CFU-C21具有明显的刺激效应.SP对正常骨髓造血具有重要的意义.
作者：夏长青；王逸兰；陆道培 刊期： 1999年第02期
经皮腔内冠状动脉成形术(percutaneous transluminal coronary angioplasty, PTCA)治疗长病变的手术成功率较低, 并发症率较高, 对术后再狭窄的发生也有一定的影响[1].本文旨在分析病变长度和再狭窄的关系.
作者：温尚煜；毛节明；郭丽君；赵一鸣；张福春；牛杰；郭静萱；陈明哲 刊期： 1999年第02期
目的:观察缺氧及再给氧对体外培养星形胶质细胞存活能力及谷氨酸摄取功能的影响.方法:取生后1～2 d新生昆明小鼠大脑皮层进行星形胶质细胞原代培养,培养1周左右予以缺氧.缺氧时间分别为12、24、48 h,并取缺氧24 h后再给氧0、12、24、48 h的细胞观察其形态、死亡细胞数目、乳酸脱氢酶活性及谷氨酸摄取能力的变化.结果:缺氧组及再给氧组星形胶质细胞死亡数较对照组无明显变化,缺氧前、后乳酸脱氢酶活性亦无明显改变,缺氧组谷氨酸摄取功能较对照组下降30%～60%,并随缺氧时间延长而明显下降(与对照组相比,P＜0.01),再给氧24 h内谷氨酸摄取能力有所恢复,但未达正常水平.结论:星形胶质细胞与神经元相比,对缺氧培养液较为耐受,缺氧对星形胶质细胞存活能力无明显影响,但细胞摄取谷氨酸能力有所改变.
作者：熊晖；梁卫兰；母得志；吴希如 刊期： 1999年第02期
11号染色体q23的易位可造成几种类型的白血病.易位多聚集于MLL(mixed lineage leukemia)基因内部,造成MLL基因的重排.
作者：刘迎；朱平；薛海鹏；许玉风 刊期： 1999年第02期
目的:研究白细胞介素10(rhIL-10)对白细胞介素1β(rhIL-1β)诱导的人肾小球系膜细胞(human mesangial cells, hMsC)的细胞间粘附分子1(CD54)表达的影响及其细胞内作用机制.方法:用细胞ELISA法检测CD54蛋白水平表达,以Northern杂交方法测定CD54的基因表达,采用电泳迁移率变动法观察核因子κB(nuclear factor κB, NFκB)的活性.结果:20 ng*L-1的rhIL-10能抑制rhIL-1β诱导的CD54的表达,此抑制作用在rhIL-1β加入后的36 h内持续存在,rhIL-10还能抑制rhIL-1β诱导的hMsC CD54基因表达和核因子κB活化.结论:细胞因子rhIL-10对rhIL-1β诱导的hMsC 的CD54表达的抑制作用至少部分与其对NFκB活化及CD54基因表达的抑制有关.
作者：陈建粮；李晓玫；王海燕 刊期： 1999年第02期
目的:探讨在超声引导下经皮胸腔细针吸取活检对肺外周型肿块、肺的弥漫性病变和纵隔肿块细胞学、病理学诊断的临床应用价值.方法:选择68例影像学检查提示肺外周型肿块、肺弥漫性病变或纵隔肿块,而痰细胞学和支气管镜检查阴性的病例.应用ALOKA-SSD 650实时灰阶超声仪.采用日本18G与21G细针活检.68例全部做细胞涂片,40例除做涂片外同时吸取组织块做石蜡切片.计算敏感性,特异性,准确性.结果:经细胞学、组织学两种方法诊断恶性肿瘤43例,仅细胞学诊断为恶性肿瘤40例,良性病变28例,其中3例假阴性.细胞学检查敏感度为93%,特异性100%.细胞学总准确率为95.6%.被检查者无气胸或出血等合并症.结论:该方法简便、迅速、安全且准确.尤其对细支气管肺泡癌的诊断更有帮助.
作者：邢香芬；李竞贤；王彬；黄咏梅；何冰 刊期： 1999年第02期
目的:分析下丘脑背内侧核(nucleus dorsomedialis hypothalami, NDM)升压反应的机制.方法:大鼠脑内或静脉注射不同药物,记录血压和心率的变化.结果:(1)谷氨酸(glutamate, Glu)注入NDM,P物质注入室旁核(nucleus paraventricularis, NPV)或延髓头端腹外侧区(rostral ventrolateral medulla, RVL)均引起升压反应;(2)NDM 升压反应可被双侧NPV或RVL内注入P物质拮抗剂衰减,但RVL内注入阿托品无此效应;(3)静脉注射酚妥拉明也能使NDM升压反应减小,而心得安或甲基阿托品静脉注射对该反应无影响.结论:Glu注入NDM可通过NPV(P物质受体)和RVL(P物质受体)-交感缩血管神经系统引起升压反应.
作者：丁欣；吴金胜；顾蕴辉；王益光；谭璐 刊期： 1999年第02期
目的:用Ri质粒转化决明,检测转化根培养物中蒽醌化合物的产生.方法:用叶盘法转化决明外植体诱导Ri质粒转化根并用Southern杂交加以鉴定,测定转化根的生长周期,用高效液相色谱法(high performance liquid chromatography, HPLC)测定光培养及暗培养转化根中游离蒽醌化合物的质量分数.结果:决明转化根在第5～20天为对数生长期,Southern杂交证明了Ri质粒T-DNA转移并整合到植物基因组中,HPLC结果说明暗培养转化根中芦荟大黄素等6种游离蒽醌化合物含量为光培养的2倍多.结论:决明转化根培养周期为35 d较为适宜;暗培养有利于决明转化根的生长及游离蒽醌化合物的积累.
作者：常振战；沈昕；果德安；王沙生；金明善；谢梅英；郑俊华 刊期： 1999年第02期
目的:观察比较大鼠心室与左心房α1肾上腺素受体(α1-adrenoceptor, α1-AR)3种亚型的分布.方法:放射配体结合实验.结果:大鼠心室与左心房每毫克蛋白中α1-AR含量分别为(81±13) fmol和(86±15) fmol;在心室和左心房α1-AR的3种亚型α1A-、α1B-和α1D-AR分别约占受体总密度的25%,45%和30%.结论:α1-AR 3种亚型在心室肌与左心房分布基本一致.
作者：张幼怡；孙晓光；韩启德 刊期： 1999年第02期
目的:通过对激光心肌血管重建术(transmyocardial laser revascularization, TMR)后孔道修复中胶原变化的研究,明确依那普利对孔道转归的影响.方法:大鼠经TMR手术后给予依那普利(15 mg*kg-1*d-1)治疗8周后处死,观察胶原纤维病理形态学的变化及测定左室心肌羟脯氨酸(hydroxyproline, HYP)的含量.结果:动物经依那普利治疗,孔道残腔明显增大,孔道区胶原纤维厚度减少43.7%(P＜0.05),左室心肌间质胶原的面积较对照组减少32.7%(P＜0.05),左室HYP含量较对照组减少16.4%(P＜0.05).结论:依那普利能够减少TMR后胶原的沉积,促进孔道开放.
作者：郭静萱；李建权 刊期： 1999年第02期
白癜风是一种获得性色素脱失性皮肤病.至今病因及发病机制不清,治疗非常困难.尽管补骨脂素加长波紫外线照射(PUVA)及激素治愈了一些患者,但很多患者用这些方法治疗无效.近,外科手术治疗包括自体表皮移植、自体培养的黑素细胞、黑素细胞-角朊细胞混悬液或表皮片移植已成功地应用于白癜风患者.后3种方法均需要特殊的细胞培养技术,而且价格昂贵.所以我们选用自体表皮移植治疗白癜风.现总结36例临床资料完整的患者的治疗情况.
作者：杜娟；朱铁君 刊期： 1999年第02期
目的:评价北京医科大学5年来在新生入学时应用吸烟行为团体干预法进行控烟的效果.方法: 采用整群分层抽样方法,对1994～1998级学生中的1169 人进行问卷调查、分析,并以此分析结果与1988、1991、1995年相应的调查结果进行对比.结果:北京医科大学学生1988、1991、 1995、1998年的吸烟率分别为30.0%、26.7%、22.5%、5.0%,呈明显下降趋势;特别表现在男性学生的吸烟率分别为58.6%、50.4%、42.5%、8.8%,其下降趋势更为明显.结论: 吸烟行为团体干预法成功地鼓励学生预防或停止吸烟,创造了许多无烟班,使北京医科大学学生吸烟率明显下降,并为大、中、小学校可应用的控烟方法提供了科学依据.
作者：马迎华；李红；胡长风；王嘉；朱锡莹 刊期： 1999年第02期
目的:探讨灵芝多糖(Ganoderma lucidum polysaccharides B, GL-B)对小鼠腹腔巨噬细胞(peritoneal macrophage, PM)、肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor alpha, TNFα)、脾细胞γ干扰素(interferon-γ, IFNγ)的产生及其mRNA表达的影响.方法:采集小鼠PM和脾淋巴细胞,体外给药,分离细胞培养上清.生物法测定TNFα,ELISA测定IFNγ;RT-PCR方法检测mRNA的表达.结果:GL-B 25～400 mg.L-1使正常小鼠PM培养上清中TNFα的活性升高,并呈剂量依赖关系,24h达高峰,72h后开始减少.GL-B对小鼠PM的TNFαmRNA表达有显著促进作用.GL-B 12.5～200mg.L-1明显增加正常小鼠脾细胞培养上清中IFNγ的产生.24h内随培养时间的延长而增加,48 h后开始减少.GL-B对IFNγ mRNA的表达有促进作用.结论:灵芝多糖GL-B明显促进小鼠PM及脾细胞TNFα和IFNγ mRNA的表达,增加TNFα和IFNγ的产生.
作者：张群豪；林志彬 刊期： 1999年第02期
目的:获取稳定表达重组人血小板生成素(thrombopoie tin, TPO)的NIH3T3成纤维细胞克隆,为开展成纤维细胞介导的TPO基因治疗研究提供细胞学基础.方法:以重组人T PO cDNA为目的基因, 构建真核细胞表达重组体pcDNA3/TPO,藉脂质体将其转染于NIH3T3细胞,经G418筛选,获得稳定表达重组人TPO的细胞克隆,应用PCR、RT-PCR及Western印迹等技术鉴定目的基因的导入及表达.结果:pcDNA3/TPO可藉脂质体转染NIH3T3细胞,转染细胞可稳定表达并分泌TPO.结论:已获得所需细胞克隆,为应用人TPO cDNA进行基因治疗奠定了基础.
作者：韩安平；陆爱丽；王申五；侯纬敏；王德炳 刊期： 1999年第02期
石蜡切片法是科研与教学工作中的一种常用实验技术,在细胞生物学、组织胚胎学及病理学中应用甚广[1].对于一般肉眼可见的较大组织标本来说,此项技术操作简便 ,标本能够长期保存.胚卵标本是研究人与动物胚胎发生发育过程中必须观察的标本,尤其是植入前的早期胚卵,对研究胚体早期发育的影响因素至关重要.本文对原有的胚卵切片技术进行了改进,为进一步研究人与动物的早期胚卵发育及其影响等诸因素提供了新的技术方法.已有研究表明层粘连蛋白(laminin,LN)在胚胎粘附、着床过程中发挥重要作用[2,3].本实验利用植入前各阶段的早期胚卵,以单个胚卵石蜡包埋切片技术为手段 ,通过免疫组化染色研究LN在小鼠早期胚卵中的分布,摸索出一套特异性强的针对单个胚卵进行免疫组化染色的方法,为进一步研究LN在小鼠早期胚卵中的免疫定位及分布奠定了基础.
作者：吕丹瑜；李英 刊期： 1999年第02期
目的:研究诱导型一氧化氮合酶(inducible nitric oxide synthase, iNOS)在电离辐射导致的神经细胞凋亡中的作用.方法:以单剂量2.0 Gy γ射线照射出生后0 d的Wistar大鼠,用ABC法检测照射后第0.5、1、2、4、6、8、12、24、48小时大脑皮质内iNOS的表达.结果:照射组各时间点均有不同程度的iNOS表达,第6小时达峰值.各对照组未见iNOS表达.结论:iNOS所具有的神经毒作用可能是电离辐射导致的发育中脑神经细胞凋亡的重要因素.
作者：徐胜利；沈丽 刊期： 1999年第02期
急性上消化道出血是重型颅脑外伤(GCS 7～3)和脑中线结构及其附近病变手术后常见的并发症,在严重颅脑损伤病人中发生率占40%～80%,死亡率高达30%～50%,严重影响患者的预后.阐明其相关因素和高危因素并采取相应措施对预防和治疗急性上消化道出血,提高这类患者抢救成功率有重要意义.
作者：朱曦；陈浩辉；王宇欣；付军；杨澄；伊敏 刊期： 1999年第02期
目的:讨论先天性巨结肠的诊断依据和手术治疗.探讨全结肠型巨结肠的手术时机及方法.方法:回顾30例先天性巨结肠手术效果.结果:采用改良Duhamel术式治疗先天性巨结肠并发症少,远期排便功能良好.结论:改良Duhamel术式适于任何年龄和所有类型的巨结肠,疗效满意.
作者：余奇志；王平；钱雪丽 刊期： 1999年第02期
北京大学学报（医学版）杂志
主管:中华人民共和国教育部
主办：北京大学
