学术投稿

蛋白磷酸酶LY1基因原核表达载体的构建及蛋白的初步表达

彭万仁;陈兵;倪芳;鲁云霞;郑红;李菲菲;汪思应

关键词:基因, 蛋白, 基因表达
摘要:目的 构建蛋白磷酸酶LY1基因的原核表达载体,并在E.coli BL21(DE3)中表达.方法 PCR扩增LY1的CDs基因片段,并将其克隆人原核表达载体pET28a(+)中构建重组质粒pET28a(+)-LY1.经限制性内切酶Nhe Ⅰ、XhoⅠ双酶切鉴定及序列测定后,转化E.coli BL21(DE3),经IPTG诱导表达组氨酸融合蛋白.SDS-PAGE、Western blot方法检测重组蛋白的表达.结果 获得全长为1 179 bp的LY1基因片段,以构建的重组质粒pET28a(+)-LY1转化E.coliBL21(DE3)后,经IPTG诱导,表达出分子量约为42 kD的重组蛋白.SDS-PAGE分析显示,表达的蛋白主要以不溶性包涵体的形式存在于E.coli BL21(DE3)的胞质中.Western blot方法检测出LY1融合蛋白的表达.结论 成功构建了原核表达载体pET28a(+)-LY1,并表达出重组LY1蛋白,为进一步单克隆抗体的制备和生物信号转导的相关研究奠定了实验基础.
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    作者:王声湧 刊期: 2007年第05期

  • 《伤害流行病学现场研究方法》出版发行

    作者: 刊期: 2007年第05期

  • 湖北省推广实施娱乐场所100%安全套使用项目效果评价与分析

    目的 了解湖北省推广实施娱乐场所100%安全套使用项目(100%CUP)及其效果,提出完善及改进的建议,为普遍深入开展100%CUP提供参考依据.方法 对商业性行为女性群体(CSW)实施综合的干预措施,促进安全套使用,并在1 a干预前后随机抽样问卷调查测试.结果 推广实施100%CUP 1 a后,CSW对艾滋病的传播与预防相关知识知晓率显著提高(x2>13,P<0.01),CSW今后愿意使用安全套的比例由88.0%上升到95.4%(x2=210.10,P<0.01),近1次与嫖客发生性关系时安全套使用率由68.5%上升到83.0%(x2=315.34,P<0.01),近1个月与嫖客发生性关系时安全套使用率由32.3%上升到48.4%(x2=298.10,P<0.01),去公立医院就诊的比例由38.8%上升到42.4%,安全套销量增长18.6%.结论 湖北省大范围推广实施100%CUP策略及方法是有效可行的,同时,要进一步完善和改进实施100%CUP策略和措施,以提高干预覆盖面和效果.

    作者:姚中兆;许骏;丁洁;孙必高;罗莉;王红方;周旺 刊期: 2007年第05期

  • 舟山海岛1953~2006年传染病演变动态研讨

    普陀区位于浙江省东北部、舟山群岛东南部,全区由454个大小岛屿组成,人口32万,外来人口约12万.为了解普陀区传染病的演变动态,探索在不同时期传染病发病规律,掌握传染病的流行特征和影响因素,评价防治措施对传染病流行的影响,以及为今后制定相应的防治对策提供科学依据,现将普陀区1953~2006年传染病演变动态情况报告如下.

    作者:张世宏;王国荣 刊期: 2007年第05期

  • 中华临床医师杂志(电子版)征稿启事

    作者: 刊期: 2007年第05期

  • 江苏省结核分枝杆菌14个VNTRs位点的基因分型研究

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    作者:陆伟;万康林;杨丹丹;章体慧;周扬;虞浩;许卫国;汪华 刊期: 2007年第05期

  • 无锡市堰桥社区老年人糖尿病流行病学调查

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    作者:包纪盛;顾海华;刘娟;朱琦 刊期: 2007年第05期

  • 李金斯坦(Lichtenstein)无张力疝成型术治疗老年腹股沟疝77例临床观察

    老年人腹股沟疝发病率较高,因其结构和病理生理特点,应用传统手术方式,术后复发率较高.安徽省桐城市中医医院自2004年12月~2006年12月对77例老年腹股沟疝患者采用李金斯坦无张力疝成型术,取得满意效果.报告如下:

    作者:赵冰清 刊期: 2007年第05期

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    作者:谭伟龙;钱万红;陆年宏;郑剑;贾德胜;陈超 刊期: 2007年第05期

  • 海岛社区居民伤害现况调查

    目的 调查海岛县(南澳县)居民伤害发生的现况,为社区伤害的防制工作提供科学依据.方法 根据世界卫生组织推荐的社区调查方案,随机选择512户1 638名社区居民,对其过去1 a内伤害发生情况进行入户问卷调查.结果 16个社区居民在1 a里共发生各类伤害754人次,总发生人次率为43.28%.伤害发生率前3位依次为钝/锐器伤、跌倒/坠落、烧烫伤.发生伤害的男性(421人次,占55.84%)是女性(333人次,占44.16%)的1.26倍,且男性伤害发生率明显高于女性(P=0.001).男/女性均是钝/锐器伤的发生率高.男性钝/锐器伤的发生率高于女性,64.52%发生在31~55岁,45.50%发生于农牧渔水利生产人员(其中渔民占63.60%).跌倒/坠落伤多发生在1~15岁、41~55岁及60岁以上,47.19%发生于学龄前儿童和学生.女性烧烫伤的发生率高于男性,46.1596发生于做家务的人群.结论 海岛县城农牧渔水利生产人员是伤害高发人群,政府部门应针对当地伤害发生特点尽快制定并实施相应的预防策略与措施.

    作者:赵丹;李丽萍;林文杰;吴宜群 刊期: 2007年第05期

  • 弓形虫的感染途径和预防

    弓形虫是一种世界范围内广泛分布的机会致病原虫,人类普遍易感且感染途径广泛,先天性和免疫缺陷者获得性弓形虫病危害较为严重.对于人类感染弓形虫途径的深入了解,有助于更好的预防弓形虫感染.

    作者:徐军;孙新 刊期: 2007年第05期

  • 秩和比法在传染病疫情网络直报报告质量评价中的应用

    自2004年我国对法定传染病实行网络直报以来,各级医疗机构和疾控中心报告的主动性和及时性大大提高了,网络直报也给疫情报告管理带来了新的内容[1].如何评价传染病网络直报的质量,是报告质量管理中有待解决的问题.本文将采用秩和比(rank-sum ratio,RSR)法[2]对报告质量进行综合评价(本文着重于评价方法的研究,具体数据仅供参考).

    作者:李云;杭惠;惠东明;陈立凌 刊期: 2007年第05期

  • 蒙古族人群高血压危险因素的探讨

    目的 了解蒙古族人群高血压的患病情况并探索其危险因素.方法 选取内蒙古科左后旗朝鲁吐苏木(乡)10个村15岁及15岁以上的人群为调查对象,采取普查方法.运用Excel、SAS软件对资料进行统计分析.结果 蒙古族人群高血压患病率为28.18%,随年龄的增长而高升.11个变量经单因素非条件logistic回归分析有8个变量可能与高血压有关,再对这8个变量进行多因素logistic逐步回归分析筛选出高血压家族史、年龄、腰臀围比值(WHR)、打鼾、饮酒5个变量具有统计学意义.结论 高血压家族史、年龄、肥胖、打鼾、饮酒可能是蒙古族高血压的危险因素.

    作者:王华;张永红;滕国兴 刊期: 2007年第05期

  • IL-10-592A/C基因多态性与慢性牙周炎的关系

    目的 探讨IL-10启动子区基因多态性与重度慢性牙周炎易感性的关系.方法 收集142名重度慢性牙周炎患者和81名健康对照者的颊粘膜拭子,提取DNA,采用多聚酶链反应-限制性内切酶片段长度多态性(PCR-RFLP)方法检测IL-10-592C/A基因多态性,比较重度慢性牙周炎患者和健康对照组中等位基因频率和基因型分布.结果 IL-10-592C/A等位基因频率和基因型分布在患者和对照组之间差异无统计学意义(OR=1.377,P>0.05).结论 IL-10-592C/A基因多态性与重度慢性牙周炎遗传易感性之间无相关关系.

    作者:唐燕;张蕴惠;章锦才 刊期: 2007年第05期

  • 血清蛋白质谱在单纯性室间隔缺损诊断中的应用

    目的 通过构建血清诊断模型,探讨血清蛋白质谱在诊断单纯性室间隔缺损中的意义.方法 采用病例对照研究设计,用CM10蛋白质芯片检测56例单纯性室间隔缺损患儿、85例儿科常见病患儿及23例其他先天性心脏病患儿血清,筛选血清差异蛋白,并构建诊断模型.结果 完整模型ROC曲线下面积、预测准确率、灵敏度、特异度、阳性预测值及阴性预测值分别为0.988、95.00%、100.00%、92.42%、87.18%和100.00%,简化模型ROC曲线下面积、预测准确率、灵敏度、特异度、阳性预测值及阴性预测值分别为0.948、94.00%、88.24%、96.97%、93.75%和94.12%.简化模型与完整模型之间预测准确率、灵敏度及特异度比较,差异均无统计学意义(P>0.05).结论 利用血清蛋白质谱建立的诊断模型能够较好地区分病例与对照,对诊断室间隔缺损具有一定的发展和应用前景.

    作者:仇小强;李永红;曾小云;钟秋安 刊期: 2007年第05期

  • 上海市重残无业人员救助养护需求影响因素分析

    目的 分析影响残疾人救助养护服务需求的各种因素,为上海市重残无业人员救助养护服务的进一步合理规划和实施提供科学依据.方法 本研究采用普查的方法,对上海市范围内登记在册的3万余名重残无业人员进行入户问卷调查.运用logistic回归方法分析影响疾人救助养护服务需求的主要因素.结果 残疾人的经济水平、残疾类别、监护人与其的关系等是影响残疾人需求的主要因素,而对救助养护服务的了解程度、态度等对救助养护需求的影响不明显.结论 政府在今后制定相关政策应当针对不同需求类别的残疾人实施有针对性的政策.

    作者:周云;马进;虞慧炯;罗志坤;李娜 刊期: 2007年第05期

  • 神经肽Y受体2基因多态性对苯那普利降压疗效的影响

    目的 探讨神经肽Y受体2(neuropeptide Y receptor 2,NPY2R)基因多态性对苯那普利降压疗效的影响.方法 选取中国安徽某两地区共422名原发性高血压患者,服用苯那普利,每日10 mg,追踪观察16 d.分析苯那普利的降压疗效和NPY2R基因多态性的关系.结果 ①苯那普利13 d治疗后NPY2R Ile312Ile(T/C)突变组人群的舒张压下降要高于野生型组人群(校正前β±SE:2.28±1.07 mmHg,P=0.0338,校正后β±SE:2.72±0.98 mmHg,P=0.0056);②经过16 d的治疗后突变组人群的舒张压下降要高于野生型组人群(校正前β±SE:2.07±1.29 mmHg,P=0.1092,校正后β±SE:2.48±1.20 mmHg,P=0.0386);③NPY2R两种基因型人群的舒张压的下降值在治疗过程的前13 d基本一致,但此后两种基因型的舒张压降压疗效出现差异,突变组血压下降值高于野生型.结论 原发性高血压人群经过苯那普利13 d治疗后,NPY2R基因多态性和舒张压的降压疗效相关,其突变型(TC+CC)的降压疗效比野生型(TT)好,且基因型间存在药物时效性差异.

    作者:文育锋;臧桐华;徐希平 刊期: 2007年第05期

  • 蛋白磷酸酶LY1基因原核表达载体的构建及蛋白的初步表达

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    作者:彭万仁;陈兵;倪芳;鲁云霞;郑红;李菲菲;汪思应 刊期: 2007年第05期

  • 北京市朝阳区居民2004~2006年伤害死亡及其YPLL分析

    随着我国经济和交通的迅速发展,居民生活节奏的加快,伤害已经成为严重威胁人类健康的重要公共卫生问题,也是世界各国的主要死因之一[1,2],世界卫生组织1995年年度报告中指出:全球每年有500万余人死于伤害和暴力行为[3],近年来我国伤害发生率呈上升趋势,伤害的高发生率、高死亡率不仅给个人和家庭带来严重损失,也给社会造成沉重的经济负担.

    作者:石鹏;孟海英;韩晓燕 刊期: 2007年第05期

  • 广州市15岁以上居民伤害流行特征及其社区卫生服务利用的状况

    目的 了解广州市社区居民伤害发生情况及其流行特征、卫生服务现状,为进一步开展社区伤害预防与控制工作提供科学依据.方法 采用多级抽样方法,于2004年4~8月对广州市13个区(县级市)15岁以上的常住居民进行询问调查,了解其伤害发生及社区卫生服务利用状况.结果 共调查25 177人,伤害发生率为3.83%,标化率为3.85%,伤害类型前3位为跌伤(2.24%)、车辆伤(0.58%)和锐/钝器伤(0.48%);男性伤害发生率高于女性,不同年龄段伤害发生率的差异有统计学意义;不同职业、婚姻状况、家庭人均年收入及住房面积伤害发生率的差异有统计学意义;伤害患者家庭距离近医疗点的平均步行距离为500米,患病后选择就诊社区卫生服务机构的只占4.5%;69.8%的患者未到过社区卫生服务机构接受服务;86.9%的患者未接受过社区卫生服务机构人员上门服务;有87.2%患者表示患病后希望社区卫生服务机构人员给予服务.结论 应加强社区伤害综合防治,创建安全社区,采取有针对性的防治措施,减少伤害的发生.

    作者:罗不凡;杜琳;刘伟佳;潘冰莹;陈健;王声湧 刊期: 2007年第05期

中华疾病控制杂志

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主管:国家卫生和计划生育委员会

主办:中华预防医学会 安徽医科大学