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外周血干细胞治疗血管闭塞性脉管炎

韩忠朝;杨晨

关键词:外周血干, 细胞治疗, 血液血管干细胞, 造血细胞, 造血干细胞, 血管性疾病, 流式细胞仪, 移植治疗, 血管细胞, 实验研究, 免疫磁珠, 分离纯化, 分化增殖, 分化潜能, 发育分化, 大系统, 临床, 鉴别, 技术
摘要:早在一个世纪前就有人提出造血细胞和血管细胞可能有一个共同的干细胞--血液血管干细胞(hemangioblast).血液血管干细胞可以发育分化成造血干细胞(HSC)和血管干细胞(angioblast),后两者进一步分化增殖形成血细胞和血管两大系统.但直到近几年,才有实验研究证实了血液血管干细胞的存在,并可通过免疫磁珠或流式细胞仪等技术进行鉴别和分离纯化.这些干细胞虽然数量很少,但其双重分化潜能使之成为临床移植治疗血液和血管性疾病的候选干细胞.
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  • 外周血干细胞治疗血管闭塞性脉管炎

    早在一个世纪前就有人提出造血细胞和血管细胞可能有一个共同的干细胞--血液血管干细胞(hemangioblast).血液血管干细胞可以发育分化成造血干细胞(HSC)和血管干细胞(angioblast),后两者进一步分化增殖形成血细胞和血管两大系统.但直到近几年,才有实验研究证实了血液血管干细胞的存在,并可通过免疫磁珠或流式细胞仪等技术进行鉴别和分离纯化.这些干细胞虽然数量很少,但其双重分化潜能使之成为临床移植治疗血液和血管性疾病的候选干细胞.

    作者:韩忠朝;杨晨 刊期: 2004年第16期

  • KRT6A基因I462S新生突变导致Ⅰ型先天性厚甲症

    目的研究Ⅰ型先天性厚甲症患者KRT6A基因突变情况,为建立该病的基因诊断与遗传咨询提供依据.方法提取1例Ⅰ型先天性厚甲症患者及家系成员和50名正常对照外周血白细胞基因组DNA,设计针对KRT6A基因的特异引物,采用聚合酶链反应(PCR)扩增基因的全部编码序列,DNA直接测序明确具体的突变位置和方式,限制性内切酶反应验证基因突变.结果 PCR结合DNA测序发现患者KRT6A基因第7外显子存在异常;第1385位核苷酸由胸腺嘧啶(T)突变为鸟嘌呤(G),导致KRT6A角蛋白2B螺旋区末端第462位密码子由异亮氨酸(I)变成丝氨酸(S),即发生I462S错义突变.患者父母及与家系无血缘关系的50名正常对照均未发现此突变,提示I462S为一种新生突变(de novo mutation).结论 KRT6A基因I462S新生错义突变是导致该例患者Ⅰ型先天性厚甲症的特异突变.

    作者:康晓静;孙淼;杨威;于敏;鞠强;罗会元;夏隆庆;张学 刊期: 2004年第16期

  • 阻塞性睡眠呼吸暂停/低通气综合征血清促红细胞生成素水平昼夜变化规律的研究

    阻塞性睡眠呼吸暂停/低通气综合征(obstructive sleep apnea/hypoventilation syndrome,OSAHS)为常见疾病.有关OSAHS与心脏、肾脏的损害等研究目前报道较多.OSAHS也可引起血液学改变,包括红细胞增多、血小板活化、血栓性疾病增加等,其原因与反复发生夜间缺氧有关.夜间反复发生的低氧血症能刺激肾脏释放促红细胞生成素(erythropoietinEPO),这可能与红细胞增多症有关[1].EPO是红细胞生成、分化成熟的重要刺激因子,近研究认为EPO有许多生理作用.为此,本研究通过测定OSAHS患者不同时间的EPO水平,并与对照组进行比较,探讨OSAHS患者血清EPO释放的昼夜规律.

    作者:王毓洲;张沪生 刊期: 2004年第16期

  • 胚胎干细胞向肝细胞诱导分化的研究及思路

    我们从2001年开始进行胚胎干细胞向肝细胞方向的诱导分化研究,大体分3个阶段:肝细胞在胚胎细胞分化系统中的获得及功能表达;肝细胞分化率的检测及提高;胚胎细胞来源的肝细胞移植在动物急性肝衰竭中的应用.

    作者:郑启昌;胡安斌 刊期: 2004年第16期

  • 创伤后脂肪栓塞19例临床分析

    外伤性脂肪栓塞综合征(fat embolism syndrome,FES)是指全身多发性损伤或长骨骨折时,脂肪颗粒游离,在组织内压力增大情况下进入血液循环,成为脂肪栓子,造成体内多脏器的脂肪栓塞.多为严重创伤或骨折后的紧急危重合并症,如果未能及时发现并予以正确治疗,往往导致不良后果.我科自1998年8月至2003年8月共诊治创伤后脂肪栓塞19例,现分析报道如下.

    作者:王以国;陈保东;柴中民 刊期: 2004年第16期

  • 慢性呼吸衰竭的康复期治疗(危重病医学系列第45讲)

    急性呼吸衰竭的治疗多在医院ICU内进行,而慢性呼吸衰竭患者因发生速度相对缓慢、机体内环境有足够的时间进行代偿,多不需要紧急救治.对慢性呼吸衰竭治疗的重点是对患者进行康复期训练和指导,增强呼吸功能储备,避免导致呼吸功能恶化的诱因,减少慢性呼吸衰竭急性恶化的次数.从长期和预防的角度来看,慢性呼吸衰竭康复期的治疗在呼吸衰竭的整体治疗中占有重要位置,是急需加强的重点工作之一.近年来,该领域的进展主要表现在下述几方面:(1)长期氧疗(long term oxygen therapy,LTOT)在慢性呼吸衰竭中的应用和评价;(2)家庭内机械通气技术的应用及与LTOT的结合;(3)运动康复技术的应用等.本文将就上述问题重点讨论.

    作者:张波 刊期: 2004年第16期

  • 干细胞与组织工程学在眼科中的应用前景

    一、干细胞与组织工程学的基本概念干细胞是指具有自我更新、高度增殖和多向分化潜能的一类未分化细胞,主要分为两大类:一类是胚胎组织来源,可以分化为3个胚层的各种细胞,如胚胎干细胞(embryonic stem cell,ESC);另一类是源于成体组织,能够产生所在特定组织的各种细胞,称为成体干细胞,如骨髓间质干细胞(bone marrow stromal stem cell,BMSC)、神经干细胞(neural stem cell,NSC)、视网膜干细胞以及角膜缘干细胞等.

    作者:葛坚 刊期: 2004年第16期

  • 卵巢上皮性癌中环氧合酶2的表达及意义

    流行病学研究发现,非甾体抗炎药(NSAIDs)可以减少大肠癌、肺癌、乳腺癌及前列腺癌等多种恶性肿瘤的发生.目前认为该作用与环氧合酶2(COX-2)相关.检测发现,多种恶性肿瘤组织中存在COX-2高表达,选择性抑制COX-2可以达到预防或治疗肿瘤的目的.本研究旨在明确卵巢上皮性癌中COX-2的表达情况,以期为卵巢上皮性癌的防治提供新思路.

    作者:楼伟珍;沈铿;张羽;郎景和 刊期: 2004年第16期

  • 前列腺腺癌中P504S的检测及意义

    目的评价P504S免疫组织化学染色在前列腺腺癌活检标本病理诊断中的应用价值.方法观察P504S在150例前列腺腺癌和相关疾病[良性前列腺增生(BPH)、前列腺上皮内肿瘤(PIN)、不典型小腺体增生(ASAP)]前列腺标本中的免疫组织化学染色情况,并结合HE切片、前列腺特异抗原(PSA)和CK34βE12免疫组织化学染色及临床资料进行分析.结果在105例前列腺腺癌病例中,P504S染色阳性率为98.1%,其中弥漫阳性率(≥+++)为97.1%,染色情况与Gleason评分、患病年龄、血清总PSA值的关系无显著意义.在腺癌病例中:24例癌周有PIN,全部P504S弥漫阳性;82例周边有良性前列腺腺体,其中有8例P504S呈(+)(9.6%);8例周边有基底细胞增生(BCH),P504S均为阴性.在42例BPH中10例P504S呈(+)(23.8%),1例(++)(2.4%);在3例ASAP中未见阳性.结论 P504S是诊断前列腺腺癌的阳性标记物,具有较佳的敏感性(97.1%)和特异性(86.0%).在进行前列腺腺癌及其相关疾病的组织病理学诊断及鉴别时,还应结合HE切片、PSA、CK34βE12和p63等免疫组织化学染色情况以及临床资料.

    作者:肖雨;陈杰;罗玉凤;曹金玲;凌庆;金锋 刊期: 2004年第16期

  • 第61例低热-咳嗽-双肺浸润影-反复脓性便

    病历摘要患者女,51岁.因发热伴全身酸痛不适2 d于2003年10月15日入院.患者发病前无诱因,体温波动在37.5℃左右,发热无规律,多在下午出现.入院2 d后出现轻微咳嗽,无痰.无胸痛、胸闷、喘息及咯血等症状.既往无重要病史.入院体格检查:体温 36.2℃,脉搏 70次/min,呼吸14次/min,血压120/80 mm Hg(1 mm Hg=0.133 kPa).全身皮肤无黄染、皮疹、出血点,颜面无水肿,浅表淋巴结无肿大.双下肺可闻及湿啰音,呈中水泡音,右侧腋中线区域可闻及爆裂音.心率70次/min,心律齐.腹软,全腹无压痛,肝脾肋下未及.

    作者:张波;王蓉美;王东;于红;纪树国 刊期: 2004年第16期

  • 终末期冠心病的干细胞移植治疗

    终末期缺血性心脏病,常因大量功能组织细胞丧失而导致严重心力衰竭.对于这类疾病的治疗,近研究显示干细胞移植有可能取代受损组织细胞并建立新的血管恢复功能.对这一治疗措施的探索已经成为当前世界心血管病学研究的焦点之一.

    作者:葛均波 刊期: 2004年第16期

  • 严重急性呼吸综合征患者康复期股骨头缺血性坏死和骨质疏松的影响因素

    目的探讨严重呼吸综合征(SARS)患者康复期股骨头缺血性坏死和骨质疏松的影响因素.方法利用病历资料调查患者治疗期间的糖皮质激素用法和一般情况,在患者出院3个月后应用酶联免疫吸附实验(ELISA)和间接免疫荧光法(IFA)测定血清抗体IgG,应用磁共振(MRI)和定量超声(QUS)分别测定股骨头缺血性坏死和骨质疏松,统计分析采用Logistic多元回归法和协方差分析.结果全疗程使用的糖皮质激素总量平均为4949 mg±2959 mg,糖皮质激素应用天数平均为24 d±5 d,其应用天数主要集中在16~30 d,使用冲击疗法的病例有23例,其持续天数平均为8 d±4 d,减药速度平均为33 mg/d±26 mg/d.40例患者中,血清抗体IgG测定阴性4例,阳性36例,其吸光度值平均为0.91±0.24.股骨头坏死Ⅰ期有12例(双侧坏死9例,单纯左侧3例),无坏死患者例数28例;骨质疏松2例,骨密度减低30例,正常8例.QUS检查ZBUA平均为(-1.26±0.53),TBUA平均为(-1.49±0.59),ZVOS平均为(-0.53±0.30),TVOS平均为(-0.65±0.05).股骨头缺血性坏死的影响因素有后期活动量、糖皮质激素总量和糖皮质激素冲击疗法的持续天数;骨密度的影响因素有年龄、冲击疗法和糖皮质激素总量;骨结构和骨弹性的影响因素有冲击疗法、冲击疗法持续的天数;血清抗体IgG与患者康复期股骨头缺血性坏死、骨质疏松在统计学上无联系.结论 SARS患者康复期短时间内股骨头缺血性坏死和骨质破坏的发病率均很高,股骨头缺血性坏死主要与治疗期间糖皮质激素总量、糖皮质激素冲击疗法的使用持续天数和康复期的活动量有关;骨密度的减低主要与年龄、冲击疗法、糖皮质激素总量、大剂量和冲击天数的交互作用等变量有关;骨质结构的破坏主要与糖皮质激素冲击疗法、冲击疗法持续的天数、大剂量和冲击天数的交互作用等变量有关.SARS病毒对股骨头缺血性坏死和骨质疏松可能没有作用.

    作者:李玉明;王世鑫;高宏生;王景贵;尉传社;陈礼明;惠武利;苑淑玲;焦振山;杨震;苏彬 刊期: 2004年第16期

  • 去细胞组织工程同种心脏瓣膜的构建

    目的全面评价去细胞组织工程同种心脏瓣膜的生物学、生物力学及免疫学特性.方法采用低渗液-去污剂[0.5 %去氧胆酸(DOA),1% DOA,1%Triton]-核酸酶去细胞法,测定了47例去细胞同种心脏瓣膜去细胞前后组织学、免疫学、组织厚度、组织含水量、热皱缩温度、组织基因组DNA 含量、胶原蛋白含量、应力应变曲线、破坏强度及组织伸长比变化.结果组织学检查1%DOA 24 h组完整地去除了同种心脏瓣膜、管壁及肌肉组织中所有的细胞成分,保留了完整的细胞外基质;免疫组织化学证实白细胞DR(HLA-DR)抗原表达明显下降;组织基因组DNA含量显著下降(瓣叶下降91.14%,管壁下降91.53%);与去细胞前相比,只有管壁组织的含水量(去细胞前75.4±1.8,去细胞后82.0±0.7,P<0.05)明显增加,组织厚度、瓣叶组织含水量、热皱缩温度、应力应变曲线、破坏强度及组织伸长比差异无显著意义.结论低渗液-去污剂(1%DOA)-核酸酶去细胞法方便有效,去细胞组织工程同种心脏瓣膜的生物学及生物力学特性稳定,免疫性显著下降,符合机体的要求,为受体细胞化组织工程心脏瓣膜的研制提供了可靠的天然的纤维支架材料.

    作者:崔彬;刘迎龙;谢宁;于存涛;宋来凤;李建荣;吴松 刊期: 2004年第16期

  • 应用纳米免疫磁珠检测早期肺癌循环血中肿瘤细胞

    免疫纳米磁珠的诞生为肿瘤细胞生物诊断提供了先进的分离手段[1].本研究旨在探讨建立一种应用纳米免疫磁性分离技术(IMS),通过外周血液能快速、灵敏、简便地检测早期肺癌患者循环肿瘤细胞(CTC)的方法,以利于发现早期肺癌患者隐性微转移、监测术后患者肿瘤复发与转移、评估患者预后以及制定治疗方案.

    作者:王晓光;胡红;刘又宁 刊期: 2004年第16期

  • 心血管疾病防治服务模式的探索和创新

    心血管防治技术发展迅速,在过去的半个世纪中不断取得重大的进展和突破.值得关注的是,每当心血管疾病防治技术提高到一个新水平时,欧美一些发达国家都对重大技术成就进行科学整合,及时形成疾病防治的新模式,构建相应的先进服务系统.这对于充分发挥现代医学科技成就的作用有重要的意义.

    作者:胡大一 刊期: 2004年第16期

  • 自体干细胞移植在烧创伤研究领域的应用

    成体干细胞的可塑性(plasticity)是目前临床治疗性应用的基础,但一直备受争议.特别是2002年Nature杂志发表了Terada和Ying等将标记有绿色荧光蛋白(GFP)的骨髓间充质干细胞(MSC)与胚胎干细胞(ES)进行共培养,观察到形成GFP+ES样细胞后,这种争论与质疑便进一步受到人们的关注,并引发了相关论战.但在争论的背后,临床的某些领域,如心血管、中枢神经系统,下肢缺血性疾病治疗等,已在利用这一特性进行相关的治疗研究,据报道已取得了喜人的治疗效果.因此,这种临床治疗性应用超越理论突破的现象既是对基础科学研究本身,也是对伦理以及管理制度提出的挑战.

    作者:付小兵 刊期: 2004年第16期

  • 对诊疗知情同意书的再认识

    随着社会的进步和医学模式的改变,重视患者知情同意权已变为一种需要和行动.通过对<医疗事故处理条例>的学习,对诊疗知情同意书在临床中的运用有了新的认识.

    作者:黄丹文 刊期: 2004年第16期

  • 特发性脊柱侧凸椎旁肌组织钙调蛋白和神经元型一氧化氮合酶表达的研究

    目的通过比较特发性脊柱侧凸患者胸弯顶点处凸侧、凹侧椎旁肌的钙调蛋白(CaM)和神经元型一氧化氮合酶(nNOS)表达的差异,探讨椎旁肌在脊柱侧凸中可能的作用机制.方法本研究选择了2001年8~12月期间北京协和医院收治的胸椎侧凸畸形患者10例,手术中取脊柱侧凸患者顶椎凸侧、凹侧椎旁肌肉组织各1块,采用免疫组织化学和Western杂交检测脊柱侧凸椎旁肌组织中CaM和nNOS基因的表达,采用HE染色和SA染色检测椎旁肌组织肌纤维形态.结果 HE染色和SA染色显示脊柱侧凸患者凸侧肌纤维比其凹侧及正常对照的肌纤维明显变细.免疫组织化学和Western杂交显示凸侧肌肉组织CaM和nNOS的表达量明显降低.结论脊柱侧凸患者双侧椎旁肌CaM 和nNOS表达不均衡,可能在特发性脊柱侧凸发生发展中发挥作用.

    作者:赵宇;邱贵兴 刊期: 2004年第16期

  • 沙鼠前脑缺血后脑红蛋白的表达变化

    脑红蛋白(neuroglobin,NGB)是继血红蛋白和肌红蛋白之后发现的第三类携氧球蛋白,它主要在脑内高表达,可特异性地为脑供氧[1].NGB的发现开辟了脑缺氧研究的新方向,也为治疗缺血缺氧性脑疾病带来了新的希望.本实验室在国际上率先克隆了大鼠和人NGB的全长cDNA序列,并进行了组织分布、抗体制备等一系列研究[2-4].已有研究表明,缺氧和NGB的表达密切相关[5].在临床上,脑缺血尤其是各种原因导致的急性脑缺血是脑缺氧损伤性疾病的重要原因,而目前关于脑内缺血缺氧性损伤后NGB表达的变化情况尚缺乏详细资料.为此,我们采用沙鼠脑缺血模型系统地研究了急性脑缺血后脑内NGB在不同时间点表达的变化情况,旨在为脑缺血缺氧相关疾病的发病机理和临床治疗提供依据.

    作者:尚爱加;周定标;高艳;邓亚仙;张成岗 刊期: 2004年第16期

  • 遵循循证医学原则合理选用抗血小板药物(血栓栓塞性疾病防治系列第13讲)

    近几十年来人们逐渐认识到血小板在动脉血栓事件中的重要作用,尤其近5到10年,随着动脉血栓形成机制研究的不断深入和大型临床试验的广泛开展,越来越多的证据支持将抗血小板药物应用于临床.药物的选择也不仅仅是阿司匹林,噻氯匹啶和氯吡格雷等新药对心血管系统疾病的辅助治疗作用已得到广泛证实.有效的静脉药物如糖蛋白(GP)Ⅱb/Ⅲa受体拮抗剂也已应用于临床.

    作者:胡大一;史旭波 刊期: 2004年第16期

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