学术投稿

磁分离酶联免疫法检测AFP

韩金利;周亚莉;张国军;王雅杰;方芳;吕虹;耿会娟;张果;刘振世;陈立杰;康熙雄

关键词:甲胎蛋白, 磁分离酶联免疫法, 碱性磷酸酶
摘要:目的 建立检测甲胎蛋白(脚)的磁分离酶联免疫法(Magnetic affinity inmlunoassay,MAIA).方法 采用双抗体夹心法,用异硫氰酸荧光素(fluorescein isothiocyanate,FITC)和碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,AP)分别标记识别不同表位的两种抗AFP单克隆抗体(mAb)4A3和5H7,以偶联羊抗Frrc mAb包被的免疫磁珠作为固相载体,单磷酸酚酞(phenolphthalein monophosphate,PMP)做显色底物,建立检测AFP的MAIA法.结果 成功实现了用MAIA法对AFP的定量检测,其检测灵敏度0.2IU/ml,线性范围0.2-510IU/ml,批内CV5.5%-9.3%,批间CV1.6%-9.7%.添加回收率101.4%-104.9%,稀释回收率78.3%-123%.与雅培AxSYM及i2000的检测结果对比,相关系数分别为0.984和0.985.结论 MAIA法的性能优于现有的ELISA和RIA试剂盒,接近进口同类试剂的水平,有助于为市场提供一种高质量而价廉的AFP测定试剂盒.
中国实验诊断学杂志相关文献
  • 产前胎儿超声的规范性检查

    随着现代人们物质生活水平的不断提高,超声仪器的不断更新,产前对孕妇优生优育观念的详细指导,人们对产前胎儿超声检查有了更深的认识,对孕期胎儿畸形的筛查有了更高的要求,但对于我们医务工作者来说,由于胎儿畸形的多样性、复杂性,我们所有机器的局限性,孕妇本身身体的因素,以及我们超声科医生的水平的局限性,都会对产前胎儿畸形的筛查带来一定困难.

    作者:范丽梅;张立会;祝贺;陈沫 刊期: 2008年第11期

  • 蛋白芯片联合检测多种肿瘤标志物在消化道肿瘤诊断中的应用

    目的 探讨蛋白芯片联合检测多种肿瘤标志物在消化道恶性肿瘤的诊断价值.方法 用多种肿瘤标志物蛋白芯片系统测定分析146例消化道恶性肿瘤患者,77例消化道良性疾病患者和356例健康体检者血清中的12种肿瘤标志物(CA199、CEA、AFP、CA242、CA125、CA153、NSE、β-HCC、f-PSA、PSA、HCH、FER)的含量.结果 消化道恶性肿瘤组的阳性率(72.6%)显著高于良性疾病组(29.87%)和健康体检组(11.24%)(P<0.001)除胰腺癌外,联合检测对食管癌、胃癌和结直肠癌的阳性率均显著高于单一肿瘤标志物检测(P<0.01).结论 蛋白芯片联合检测血清多种肿瘤标志物可以显著提高消化道恶性肿瘤诊断的敏感性.

    作者:马经野;刘新民 刊期: 2008年第11期

  • DIM联合顺铂诱导PC-3细胞凋亡机制的研究

    目的 探讨顺铂(DDP)和3,3.二吲哚基甲烷(3,3-diindolylmethane,DIM)联合诱导人前列腺癌PG3细胞凋亡的机制.方法 采用免疫组化技术观察细胞内bcl-2,caspase3和caspase9蛋白的表达,利用RT-PCR和westem blot检测bcl-2,caspase3和caspase9基因和蛋白表达变化.结果 细胞培养及免疫组化可见:各给药组与对照组比较均有不同程度抑制PC-3细胞增殖并诱导其凋亡作用;RT-PCR结果显示:各给药组均能使caspase3和caspase9基因表达上调,bd-2表达下调;westem blot结果表明:各给药组与对照组相比caspase3和caspase9蛋白表达上调,hcl-2表达下调,且0.4mg.L-1DDP+60μmol.L-1DIM联合应用与10倍剂量DDP(4mgL-1)单独应用效果相同.结论 DIM与DDP均可抑制PC-3细胞增殖并诱导其凋亡;其细胞凋亡机制可能与上调caspase3、caspase9基因表达,下调bel-2表达有关;DIM与DDP联合抗瘤具有明显的减毒增效作用.

    作者:刘艳波;赵丽娟;郭亚雄;潘玉琢;孙薇娜;赵雪俭 刊期: 2008年第11期

  • 53例结核性腹膜炎误诊原因分析

    本文收集2001-2007年经手术和(或)病理检查证实被误诊的结核性腹膜炎(结腹)53例.结腹的临床表现错综复杂,故误诊率较高.本组361例中,误诊者53例(14.7%).

    作者:朱国忠;高学峰;张加丰 刊期: 2008年第11期

  • 青年脑梗死75例临床分析

    脑梗死由于其高致残率、高复发率、高死亡率而成为危害人们健康的三大杀手之一,近年来发展中国家的脑血管病发病率呈上升趋势,随着生活水平的提高和生活方式的改变,我国脑卒中呈底龄化趋势,缺血性脑血管疾病中45岁以下的青年人占10%左右.

    作者:邢跃;孙捷;赵凯军 刊期: 2008年第11期

  • HLA抗体检测在肾移植术前患者中的应用价值

    以肾移植为代表的器官移植已成为终末期脏器功能衰竭的首选治疗方法.随着人们对移植免疫的不断认识,受者体内预存HLA抗体在排斥反应中的作用已经明确.

    作者:马悦;朱丽遵;王善菊;富晶;都桂珍 刊期: 2008年第11期

  • SonoVue心肌声学造影结合冠状动脉造影早期诊断冠心病的临床研究

    目的 采用外周静脉注射声学造影剂声诺维,观察心肌灌注及心内膜缘显像,并且与患者的冠状动脉造影结果进行对比研究,评价声诺维对冠心病的早期诊断价值.方法 分别在基础和非线性成像条件下,对28例患者经静脉注射声诺维2ml,并与冠状动脉造影检查结果作对比分析.结果 注射造影剂之前心内膜显示欠清的左室心内膜缘得到满意的显影;声诺维能很好显示心肌灌注情况.结论 声诺维可以增强心内膜缘的显影,能显示心肌灌注,有助于冠心病的早期诊断.

    作者:王智慧;陈丽萍;邢玥 刊期: 2008年第11期

  • 全身磁共振弥散加权成像对骨转移性病变的诊断价值

    目的 探讨磁共振全身弥散成像对骨转移性病变的诊断价值.方法 32例恶性肿瘤患者行全身磁共振弥散成像检查.使用反转恢复平面回波弥散序列分5段进行全身扫描.结果 反转恢复平面回波弥散序列成功进行了全身磁共振弥散成像.重建出的大密度投影像图像均一,清晰.32例恶性肿瘤患者中19例患者检出了多发骨转移灶;7例患者为单发转移灶;2例淋巴瘤表现为骨髓信号增高;1例为多发骨髓瘤;3例假阴性.结论 全身磁共振弥散成像对骨转移性病变是一种有效的检出方法.

    作者:吴晶涛;王立富;王守安;叶靖 刊期: 2008年第11期

  • 磁分离酶联免疫法检测AFP

    目的 建立检测甲胎蛋白(脚)的磁分离酶联免疫法(Magnetic affinity inmlunoassay,MAIA).方法 采用双抗体夹心法,用异硫氰酸荧光素(fluorescein isothiocyanate,FITC)和碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,AP)分别标记识别不同表位的两种抗AFP单克隆抗体(mAb)4A3和5H7,以偶联羊抗Frrc mAb包被的免疫磁珠作为固相载体,单磷酸酚酞(phenolphthalein monophosphate,PMP)做显色底物,建立检测AFP的MAIA法.结果 成功实现了用MAIA法对AFP的定量检测,其检测灵敏度0.2IU/ml,线性范围0.2-510IU/ml,批内CV5.5%-9.3%,批间CV1.6%-9.7%.添加回收率101.4%-104.9%,稀释回收率78.3%-123%.与雅培AxSYM及i2000的检测结果对比,相关系数分别为0.984和0.985.结论 MAIA法的性能优于现有的ELISA和RIA试剂盒,接近进口同类试剂的水平,有助于为市场提供一种高质量而价廉的AFP测定试剂盒.

    作者:韩金利;周亚莉;张国军;王雅杰;方芳;吕虹;耿会娟;张果;刘振世;陈立杰;康熙雄 刊期: 2008年第11期

  • 超高倍显微诊断仪在泌尿生殖道支原体衣原体快速检查中的临床应用

    近年来,泌尿生殖道感染率在我国有明显的上升趋势,特别是性传播疾病,且多种病原体合并感染的病例越来越多,泌尿生殖道支原体和衣原体感染的发生率已经超过淋球菌感染而居性传播疾病首位[1],因此快速有效的检测方法显得非常重要.

    作者:刘长德;张艳;殷敏;郑永刚 刊期: 2008年第11期

  • 乳腺浸润性微乳头癌的临床病理分析

    乳腺浸润性微乳头癌(invasive micropapillarycarcinoma,IMPC)是一种淋巴管侵袭力强、淋巴结转移率高、预后不良的特殊类型的浸润型乳腺癌.因此,引起了临床及病理医生的高度重视.现通过对12例IMPC进行临床病理分析,以提高对此病的认识及诊断与鉴别诊断水平.

    作者:白信花;盖保东;郝彦勇;王帅;武艳 刊期: 2008年第11期

  • 小儿过敏性紫癜与HLA-DRB1关联性分析

    目的 探讨小儿过敏性紫癜与HLA-DRB1的相关性.方法 选取2802年-2005年因过敏性紫癜住院患儿79例.用SSP/PCR方法,分析HLA-DKB1基因多态性.过敏源及血清IgE检测用ELISA方法.结果 过敏性紫癜患儿HLA-DRB1*18的基因频率为10.1%与正常对照组有显著差异.具有HLA-DRB1*18等位基因者发生过敏性紫癜的相对危险性近似值(OR)为2.76.结论 HLA-DRB1*18与小儿过敏性紫癜相关联,HLA-DRB1*18可能是小儿过敏性紫癜的易感基因.

    作者:刘愉;孙利炜;李丽红;赵艳玲;焦立新 刊期: 2008年第11期

  • 亚胺培南耐药铜绿假单胞菌的耐药性分析

    铜绿假单胞菌广泛分布于自然界,尤其是医院内环境中分布十分广泛,因此是临床较常见的引起医院内获得性感染的条件致病菌.

    作者:李秀;吴敏飞;徐雪松 刊期: 2008年第11期

  • 雄激素水平与男性老年心力衰竭相关性

    近年研究男性老年雄激素水平降低与动脉粥样硬化高发密切相关.老年发生动脉粥样硬化后.心力衰竭的发生率日益增高.老年男性中雄激素水平和心血管疾病之间的关系得到越来越多关注,就此进行分析.

    作者:白玫;张广成;张雪莲 刊期: 2008年第11期

  • 中国人群FⅫ46C/T多态性与血栓形成关联性解析

    目的 探讨FⅫ基因exon146C/T基因多态性与血栓形成的关联性.方法 采用PCR-RFIP法鉴定了92例血栓性脑梗塞患者和87例静脉血栓患者及129例健康人的FⅫ基因exon146C/T基因型及C、T等位基因分布频率,采用多元Logistic非条件回归分析方法,进行多因素分析,解析FⅫ基因46C/T多态性与血栓性脑梗塞、静脉血栓形成的关联性.结果 血栓性脑梗塞组和静脉血栓组的C等位基因分布频率均高于对照组,血栓性脑梗塞组的C,/C基因型在血栓形成中的危险性是T/T基因型的14.533倍,具有统计学意义;静脉血栓组中C/C基因型P值为0.074(x2=3.203,OR=2.063,95%CI:0.933-4.559),没有统计学意义.结论 中国人群中存在FⅫ46C/T基因多态性位点.FⅫ46C/C基因型可能是脑血栓形成的危险因素,而静脉血栓的形成可能与FⅫ46C/T基因多态性没有关联性.

    作者:张玲;于艳辉;吴山力;邓沫;曲成刚;张桂荣 刊期: 2008年第11期

  • 多层螺旋CT灌注成像在诊断与鉴别诊断肾脏良恶性肿瘤中的临床应用研究

    目的 利用多层螺旋CT灌注扫描技术,分析肾脏灌注图像及灌注参数变化规律,探讨CT灌注成像在肾脏良恶性肿瘤的诊断与鉴别诊断的应用价值.方法 利用美国GE公司LightSpeed CT 16 splice或64splice多层螺旋CT灌注扫描技术对正常志愿者6例及肾脏肿瘤(良恶性)患者25例的CT灌注参数值和参数图进行分析.结果 ①肾细胞癌(15例)肾皮质BF、BY明显高于正常肾组织(P<0.05).肾错构瘤(10例)肾髓质BF及肾细胞癌肾髓质BF低于正常肾组织.②肾细胞癌及肾错构瘤MTT明显缩短,其中肾细胞癌MTT短于肾错构瘤(P<0.05).③肾细胞癌BF、BV高于肾错构瘤(P<0.05).④BF,BV,MTT具有统计学意义(P<0.05).结论 多层螺旋CT灌注扫描技术能够较好地反映正常肾组织及肾脏良恶性肿瘤的血流动力学变化,为肾脏良恶性肿瘤的诊断与鉴别诊断提供可靠的依据.

    作者:吕卓;赵妍;赵永生;刘烨;孙东杰 刊期: 2008年第11期

  • 三氧化二砷诱导胃癌细胞凋亡及其机制的探讨

    目的 观察氧化砷对胃癌细胞是否具有凋亡诱导作用,并进一步研究bcl-2基因家族和bax在此过程的表达作用,以了解三氧化二砷(AS2O3)作用于胃癌细胞的机制.方法 AS2O3作用于胃癌细胞株,用Annexin-v荧光探针、流式仪及免疫组织化学等方法检查bcl-2和bax的表达.结果 经AS2O3作用的胃癌细胞bcl-2基因表达水平降低.box基因表达水平增加.结论 氧化砷可诱导胃癌细胞发生凋亡.

    作者:张丽芳;孙晓琪 刊期: 2008年第11期

  • ST段抬高型心肌梗死样心电图的误诊分析——附7例报告

    急性ST段抬高型心肌梗死是以相关冠脉急性闭塞性血栓形成为病理特征,多表现为突发胸骨后剧痛持续不缓解,伴有或不伴有严重心律失常、血流动力学障碍的临床急症,心电图作为确定诊断及评估预后的常用手段,经济、方便实用,但如不能结合其他检查结果综合分析,偶有误诊、误判发生.现将我院2006年9月至2007年8月所遇7例初诊误诊病例报告如下.

    作者:王超;王玉慧;郑晓群;刘俊新;鲁硕;王彦新 刊期: 2008年第11期

  • EPC细胞生物学特征及其临床意义

    EPC即内皮祖细胞,是endothelial progenitor cells的缩写.早期认为EPC仅存在于胚胎发育阶段,之后的研究发现EPC也存在于成体.

    作者:王琴;仉红刚 刊期: 2008年第11期

  • 前S1蛋白对乙型肝炎诊断及判断病毒复制中价值探讨

    目的 分析Pre-S1蛋白与HBeAg及HBV-DNA的相关性,探讨Pre-S1蛋白在诊断乙型肝炎病毒复制中的价值.方法 收集我院住院慢性乙型肝炎患者血清97例,检测其Pre-S1蛋白、HBV标志物与HBV-DNA定量.结果 HBsAg、HBeAg、抗折-HBc阳性者28例,HBV-DNA与Pre-S1蛋白的检出率均高达90.0%以上.HBsAg、抗-HBe和抗-HBc 阳性者61例,HBV-DNA与Pre-S1蛋白的检出率分别为82.0%和70.5%;HBsAg和抗-HBc阳性者8例,HBV-DNA与Pre-S1蛋白的检出率均为87.5%,说明部分HBeAg阴性患者仍有病毒复制,以乙肝病毒HBV-DNA定量≥5.0×102拷贝为判断乙肝病毒存在的标准,HBV-DNA与Pre-S1蛋白的阳性检出率无统计学差异(P>0.05),而HBV-DNA与HBeAs的阳性检出率有统计学差异(P<0.001).结论 Pre-S1是诊断及判断乙肝病毒复制的非常有价值的血清学参考指标.

    作者:夏凌志;蔡长争;苏进 刊期: 2008年第11期

中国实验诊断学杂志

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