李宇;谭毓铨;刘国辉
目的研究热化疗对多药耐药人肝癌细胞系BEL-7402/ADM耐药性的影响并探讨相关的机制.方法通过MTT法测定热化疗对多药耐药人肝癌细胞系BEL-7402/ADM耐药性影响;利用流式细胞仪检测多药耐药相关基因(MDR)的表达产物P糖蛋白(P-gp)、多药耐药相关蛋白(MRR)、谷胱甘肽转移酶(GSH/GST)的表达.结果热化疗使多药耐药人肝癌细胞系BEL-7402/ADM耐药性降低;P-gp、MRP和GSH/GST的表达均有所下降.结论热化疗具有逆转多药耐药人肝癌细胞系BEL-7402/ADM耐药性的作用,可能与多药耐药相关基因表达水平下调有关.
作者:王宁;杨海山;刘洁;李玉 刊期: 2005年第02期
目的建立检测大鼠TGF-β1 mRNA表达水平的SYBR Green Ⅰ荧光定量RT-PCR方法.方法摸索SYBRGreen Ⅰ工作液的配制方法,筛选PCR反应液,优化反应中引物和MgCl2的浓度,以actin为对照,建立大鼠TGF-β1 mR-NA表达水平的SYBR Green Ⅰ荧光定量RT-PCR方法并检测大鼠肾皮质TGF-β1 mRNA表达水平.结果SYBR GreenⅠ工作液,40倍水溶液稳定性好,佳反应稀释度为1:10000.大鼠TGF-β1表达水平的SYBR Green荧光定量PCR方法,TGF-β1和actin的佳MgCl2反应浓度分别为2.5 mM和3.5 mM,引物浓度分别为0.8 μM和0.5 μM,特异扩增产物的熔解温度分别为88.1和88.6℃,因此选择在85℃时收集荧光信号.正常大鼠TGF-β1的Ct值在29.03,actin的Ct值在24.86,扩增效率分别为0.995和1.08.结论通过优化反应条件和特异性分析,成功地建立了特异、敏感的大鼠TGF-β1 mRNA SYBRGreen Ⅰ荧光定量RT-PCR.SYBRGreen Ⅰ荧光定量PCR快速、敏感、特异、经济,可以满足临床和科研的需要.
作者:陈英剑;胡成进;赵苗青 刊期: 2005年第02期
肉毒碱(Camitine)又名肉碱、卡尼汀、维生素BT,是一种氨基酸衍生物,1905年由俄国科学家从牛肉中发现,化学名为3-羟基-4三甲基铵丁酸,分子式为(CH3)-N+-CH2-CH(OH)CH2-COO-.肉毒碱有左旋和右旋两种构象,体内具有生物活性的是左旋肉毒碱(L-camitine).
作者:杨瑞锋;李志艳;徐国宾;夏铁安 刊期: 2005年第02期
球形肺炎是急性肺炎在影像学上的特殊表现,近来临床上发病率明显增高,因影像学上与肺内其他球形病灶相似[1],如早期严重急性呼吸综合征,肺结核,周围型肺癌等,故极易误诊.我院从2002年11月至2003年5月收治球形肺炎患者24例,且其中20例为本院职工,集中在门诊、ICU、呼吸科及中心实验室等.患者陆续发病,在发病前多有过度疲劳、抵抗力下降等诱因,但相关医护人员在无特殊防护的情况下并未发病,表明病菌虽具有一定的传染性,但毒力相对较弱.现报告如下.
作者:尹金植;张云霞;张捷 刊期: 2005年第02期
目的建立孕周为19~37周各胎龄段的正常胎儿脐血凝血因子的活性的正常范围,并与正常新生儿及成人血浆凝血因子的活性进行比较,了解各凝血因子活性的动态变化,为产前诊断血液病提供依据.方法采用美国IL公司的AGL Futura Plus型全自动血凝仪检测182例胎儿、32例足月新生儿、30例健康成人血浆中的凝血因子Ⅱ、Ⅴ、Ⅶ、Ⅷ、Ⅸ、Ⅹ、Ⅺ的活性.结果凝血因子Ⅱ、Ⅴ、Ⅶ、Ⅷ、Ⅸ、Ⅹ、Ⅺ的活性在19~30周随胎龄的增加变化不明显,在出生时Ⅱ、Ⅸ、Ⅹ、Ⅺ因子活性都显著增加,但明显低于成人,Ⅷ因子在出生时显著增加已达成人水平,胎儿Ⅴ因子活性在19周时已达成人水平.结论凝血因子Ⅱ、Ⅴ、Ⅶ、Ⅷ、Ⅸ、Ⅹ、Ⅺ的活性在胎儿、新生儿血浆中是一个动态变化过程,凝血因子活性发展不平衡,胎儿Ⅴ因子活性在19周时已达成人水平,Ⅷ因子在出生时已达成人水平,Ⅱ、Ⅷ、Ⅸ、Ⅹ、Ⅺ因子活性在出生时显著低于成人.
作者:霍梅;林琳华;龚文胜;叶素丹;何林 刊期: 2005年第02期
急诊检验是对急、重危患者做出病因诊断、紧急治疗、抢救和战时伤员救治必需的检验工作,是医学检验在特定环境下的展开形式;是急诊医学和军事医学必不可缺的技术手段.急诊检验结果的准确性和及时性对挽救生命、减少伤残起着很关键的作用,是衡量医学水平的标志之一.
作者:崔娴维;江浪进;梅旭;曹东华 刊期: 2005年第02期
乙型肝炎病毒DNA和血清学标志物模式的检测是目前临床分析和判断肝炎患者病情传染性和疗效分析的主要依据之一.在198例检测HBV-DNA含量标本中发现32例抗HBsAb、抗HBeAb、抗HB-cAb特殊血清学模式,现就此与HBV-DNA含量的关系作一分析.
作者:宋红美;鹿新红 刊期: 2005年第02期
目的研究血清层粘连蛋白(Laminin,LN)与宫颈上皮内瘤样病变(CIN)及宫颈癌的关系,并进一步探讨手术和放疗两种治疗方法对血清层粘连蛋白的影响.方法用酶联免疫吸附试验(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)方法测定11例健康妇女和62例宫颈病变患者血清LN含量.结果CINⅠ-Ⅱ级病人血清LN值与正常健康妇女血清LN值无显著差异(P>0.10);CINⅢ级病人及宫颈浸润癌患者治疗前血清LN值显著高于正常组(P<0.05).经过手术或放疗治疗后其血清LN值显著下降(P<0.05);宫颈浸润癌患者其血清LN值与其临床病理期别(F=3.02<F0.05(2,50),P>0.05)及有无淋巴结转移(P>0.10)无关而与癌变细胞组织学分化程度有关,即随分化程度降低其血清LN值有升高的趋势.结论血清LN值可以作为宫颈癌早期诊断指标,并作为肿瘤细胞分化程度的参考.
作者:程娇影;崔满华;王进达 刊期: 2005年第02期
目的探讨床旁B型利钠肽(BNP)测定对急性呼吸困难鉴别诊断的敏感性、特异性和准确性.方法采用美国博适-Triage干式快速定量心力衰竭/心肌梗死诊断仪对367例心源性和非心源性呼吸困难患者床旁BNP测定.结果不同心功能分级患者BNP水平不同;BNP水平小于61pg/ml患者基本可诊断为非心源性呼吸困难;BNP水平大于100pg/ml但小于500pg/ml患者需考虑心源性呼吸困难可能;大于500pg/ml患者基本可诊断为心源性呼吸困难.结论BNP水平高低是鉴别心源性和非心源性呼吸困难可靠的指标.
作者:孙晓鸥;姜朝晖;赵荣 刊期: 2005年第02期
患者女,16岁,脊柱侧弯,拟在气管插管全麻下行侧弯矫正植骨术.入室后测血压110/70 mmHg,脉搏80次/分,血氧98%,心肺功能正常.麻醉诱导用咪唑安定5 mg,芬太尼0.1 mg,琥珀胆碱90mg,静注快速诱导,气管插管后接麻醉机行控制呼吸,听诊双肺呼吸音清晰对称,生命体征正常,翻身俯卧置手术体位,约10 min,发现患者口唇青紫,颈动脉搏动消失,确诊心搏骤停.
作者:樊爱枝;张玫;麦力艳;木沙 刊期: 2005年第02期
目的评估原发性肝细胞癌(HCC)患者血清AFP数值变化在介入临床治疗过程中的意义.方法136例Child-Pugh A级HCC患者,均经导管化疗栓塞(TAC/TACE)干预.按照栓塞剂用量进行分组;分别于术前3天、术后3天、以及术后4~6周进行血样采集;采用放免方法对样本血样进行血清AFP数值测定.结果Child-PughA groupHCC患者按照碘油用量分组,术后4~6周AFP数值与术前3天相比无显著性差异(P>0.05).术后3天AFP数值与术前3天相比,AFP数值变化存在显著差异,其中TACE(I.O≥8 ml)组差异性显著(P<0.05).非规律TACE组与规律TACE组2次治疗术前AFP数值相比较,具有统计学显著相关性(P<0.005).结论在允许的情况下,适当增加的碘油的用量、规律进行TACE治疗可以更好的降低血清AFP数值,达到介入治疗控制HCC的目的.
作者:张海峰;杨海山;赵永生;王大伟;金仲慧 刊期: 2005年第02期
目的研究重组腺病毒介导RECK基因转染大肠癌细胞后基因的表达情况,并观察转染细胞浸润能力变化.方法构建了RECK基因的复制缺陷型重组腺病毒载体adRECK,以adRECK转染大肠癌癌细胞株后,用RT-PCR法检测RECK基因在大肠癌中的表达.并用Boyden小室测试转染细胞的侵袭性.结果RECK基因在转染细胞中有效的表达.被转染细胞浸润能力明显下降.结论重组腺病毒介导RECK基因能够在大肠癌细胞中有效的表达,转染病毒的大肠癌浸润能力明显下降.
作者:杨德君;孟子辉;张纯海;王巍;鞠险峰 刊期: 2005年第02期
1临床资料患者女性,66岁,因间断胸闷,头晕伴大汗7天,持续性胸闷25小时入院.既往高血压史10年,血压高达180/100 mmHg;吸烟50年,20支/日.心电图示Ⅱ、Ⅲ、avF、V4-V9导联ST段抬高.TNT0.42ng/nl.心脏超声示EF 0.42,左室后壁运动减弱并稍延长,下壁运动略弱.心包少~中量积液.入院查体血压140/80 mmHg,心音低钝,心率80次/分,各瓣膜听诊区未闻及杂音.
作者:王萍;王宇朋 刊期: 2005年第02期
现代医学的进步随之带来的试验技术的先进,使对人类疾病的认识、诊断和治疗越来越依赖实验室检验,许多的诊疗决定完全是根据实验室检验结果来定论,因此实验室结果的准确性在医疗实践中至关重要.但在实际工作中,临床医务人员只重视检验结果的分析,而往往忽略了分析前的影响因素,给疾病的诊断造成错误的判断.为了使检验结果有效地用于临床,医务人员包括实验室工作人员必须充分了解实验项目在体内的生物学影响因素和标本采集的质量保证.笔者根据有关资料[1~3]与临床体会综述影响生化试验分析前的重要因素.
作者:周雪艳 刊期: 2005年第02期
目的在烟草中高效表达抑肽酶(bpti).方法克隆抑肽酶基因,以烟草叶片为外植体,通过根癌农杆菌将其导入烟草,经卡那霉素抗性筛选和PCR扩增检测基因的整合;抽提转染植株叶片中的抑肽酶,进行活性测定.结果抗性植株整合并高效表达了抑肽酶.结论构建的含抑肽酶基因的植物表达载体pBI121+bpti具有正确的阅读框,并能在异源植物中表达.
作者:耿学军;常伟勤;范伟全;杨莉莉;贺巾超;马杰;颜炜群 刊期: 2005年第02期
目的比较不同消化酶对体外培养的原代乳鼠雪旺细胞的影响.方法取1周龄SD乳鼠坐骨神经,分别用胰蛋白酶、胶原酶Ⅱ型、混合酶消化,相同方法及实验条件下进行雪旺细胞培养,观察细胞形态、计算24h贴壁活细胞百分比及MTT微量比色法比较细胞的生长增殖状况.结果胰蛋白酶消化组细胞收获量相对小,细胞损伤程度较大;胶原酶组细胞有一定程度损伤;混合酶组细胞收获量大,细胞生长状态较好.结论单纯使用胰蛋白酶或胶原酶消化对原代雪旺细胞的活性及增殖有一定影响,采用胰蛋白酶与胶原酶联合消化效果较好.
作者:李春雨;张振兴;崔树森;孙鸿斌;韩冬;刘飙;王悦书 刊期: 2005年第02期
1临床资料男性,39岁,因发作性头晕、行为失常2年、突发昏迷、肢瘫1次于1992年3月2日就诊.患者2年前在劳累或空腹时出现头晕、心悸,伴有行为失常(如倒骑摩托车),约每2~3个月发作一次,每次经休息或输液治疗后好转.因此将工作岗位由以体力劳动为主调整到以脑力劳动为主,但发作次数并未减少.
作者:乔建文 刊期: 2005年第02期
目的评估雌二醇和他莫昔芬调节HER2/neu,EGFR,和ERα在乳腺癌细胞系中的表达.方法应用实时监测聚合酶链反应检测这三种受体基因在雌激素受体阳性和雌激素受体阴性乳腺癌细胞系中的表达.结果在ZR-75-1细胞系中,HER2/neu和ERα表达在TAM(1μM)和E2(10 nM)处理后升高(P<0.05).在MDA-MB-231细胞系中,HER2/neu和EGFR的表达在相同条件的TAM和E2处理后亦有所升高(P<0.05).结论监测聚合酶链反应技术是一项快速的,灵敏的,可重复使用的方法,适于检测基因的表达.
作者:袁霞;崔有斌;张宏;王凯忠;M.R.V.Murthy 刊期: 2005年第02期
目的通过检测Th2型趋化因子受体CCR4在移植肝脏急性排斥反应中的表达,探讨Th2型细胞在肝移植急性排斥反应中的作用机制.方法根据Banff病理分级将原位肝移植术后肝穿刺活检标本分成4组,应用RT-PCR方法半定量分析各组标本中CCR4的mRNA水平.结果轻度排斥组中11例CCR4高水平表达;中度排斥组中6例、未排斥组中5例CCR4中度水平表达;正常对照组、重度排斥组CCR4均轻度表达.结论肝移植免疫微环境中CCR4的表达可能与免疫耐受的诱导有关;Th1/Th2细胞的极化是影响免疫耐受诱导的关键因素.
作者:孟醒初;张家颖;朱志军;宋燕 刊期: 2005年第02期
当伤口有感染征兆时,应及时进行细菌学检验,感染的伤口也应及早进行病原学检测并根据药敏感试验结果指导抗感染药物的合理使用.然而,就伤口的标本而言,何时采集?如何采集?采集何部位?标本如何运输等均能影响检验结果的准确性,也直接关系到临床医师对伤口感染的分析与处理.本文参考有关资料[1],对有关问题作一浅述.
作者:沈定树 刊期: 2005年第02期