小鼠骨髓来源的树突状细胞体外诱导分化的实验研究

陈玉丙；张红梅；刘亚娟；刘林林；范洪学

关键词：树突状细胞, 抗原, T细胞增殖

摘要：目的研究小鼠骨髓树突状细胞体外诱导分化、成熟及对T细胞增殖的影响,为进一步研究树突状细胞的功能及临床肿瘤治疗的应用提供技术方法.方法应用IL-4、GM-CSF培养小鼠骨髓细胞5～7 d,镜下观察细胞形态学变化;培养至第5～6 d,加入黑色素瘤(B16)冻融抗原继续培养1～2 d,流式细胞仪检测细胞表面分子CD83、CD86,并与同种异体T细胞混合培养72 h,终止培养前16 h加入3H-TdR(0.5μCi/孔),γ-液体闪烁仪测定cpm值.结果IL-4、GM-CSF培养3 d可见细胞形态发生改变,细胞形状不规则,培养5～6 d时,有刺状突起、拉长,为典型树突状细胞形态学特征;抗原装载后流式细胞仪检测CD83、CD86表达,IL-4+GM-CSF+TNF-α组(61.68%,71.25%)及IL-4+GMCSF+冻融抗原组(63.11%,76.88%)明显高于对照组(2.41%,3.88%)及单纯IL-4+GM-CSF培养组(21.86%,28.69%)(P＜0.001),IL-4+GM-CSF+TNF-α组与IL-4+GM-CSF+冻融抗原组比较CD83、CD86表达没有显著性差异;液闪仪检测结果显示,IL-4+GM-CSF+冻融抗原组刺激T细胞增殖的能力明显强于其他组,且有显著性差异(P＜0.001,P＜0.05).结论小鼠骨髓细胞体外培养可以成功诱导扩增出足够量树突状细胞,经肿瘤抗原刺激后绝大部分成熟.

中国实验诊断学杂志相关文献

99mTc标记的人成骨肉瘤单克隆抗体在荷瘤裸鼠体内的分布及显像研究

目的研究骨肉瘤的放射免疫显像.方法应用杂交瘤技术获得OS-732骨肉瘤单克隆抗体,用99mTc直接标记单克隆抗体(McAb),将99mTc-McAb经尾静脉注入荷人成骨肉瘤裸鼠体内,然后进行SPECT显像.结果注射后6h,肿瘤影像模糊,24h后,肿瘤部位可见明显的放射性浓聚,而对照组99mTc-IgG除在肝脏稍有积聚外,放射性分布弥散,未见肿瘤显像.注射99mTc-McAb后24h,肿瘤中的放射性明显高于其他组织,此时肿瘤与血液的放射性之比为2.25,而对照组仅为0.97,故有明显差别.结论99mTc-McAb在骨肉瘤组织中有明显放射性浓聚,因此,99mTc-McAb放射性显像对骨肉瘤及其转移灶有很好的诊断价值.

作者：李宏伟；王金成；段德生；宋成；施建胜刊期： 2003年第06期
SARS病房工作的医护人员血清中特异抗体测定分析

目的检测密切接触SARS患者的医护人员血清中SARS病毒IgM及IgG抗体的水平,对SARS病毒有无隐性感染作初步调查.方法分别用酶联免疫吸附法和间接免疫荧光法(IIFA)检测200例正常人,200例在SARS病房工作1个月的医护人员血清中SARS病毒IgM及IgG抗体的水平.结果正常人及医护人员血清中未检测到SARS病毒IgM及IgG抗体.结论不同于普通的流行性传染性疾病,SARS病毒可能不具有隐性感染性.

作者：冯珍如；徐国宾；刘平；闫存玲；李海霞；王广发；王贵强；徐小元刊期： 2003年第06期
p53基因单核苷酸多态性与肺癌易感性

目的p53基因是与多种肿瘤发生、发展密切相关的抑癌基因,其单核苷酸多态性与肺癌的早期诊断和放射治疗疗效密切相关.检测p53基因多态性将对肺癌患者的放疗疗效及预后提供指导意义.本文简要综述p53基因单核苷酸多肽性与肺癌及与其组织学类型和种族的关系.

作者：刘林林；吕文天；邹国光；龚守良刊期： 2003年第06期
垂体微腺瘤的影像学诊断

垂体腺瘤是鞍区常见的肿瘤,小于10mm称垂体微腺瘤.随着现代医学影像学的迅速发展,CT与MRI的广泛应用,使其诊断率不断提高.收集2000年1月至2003年3月28例垂体微腺瘤的CT与MRI资料,经临床追踪,病理证实及MRI随访进行分析,报告如下.

作者：刘剑平；周晓琦；李彤；陈峰刊期： 2003年第06期
小鼠骨髓来源的树突状细胞体外诱导分化的实验研究

目的研究小鼠骨髓树突状细胞体外诱导分化、成熟及对T细胞增殖的影响,为进一步研究树突状细胞的功能及临床肿瘤治疗的应用提供技术方法.方法应用IL-4、GM-CSF培养小鼠骨髓细胞5～7 d,镜下观察细胞形态学变化;培养至第5～6 d,加入黑色素瘤(B16)冻融抗原继续培养1～2 d,流式细胞仪检测细胞表面分子CD83、CD86,并与同种异体T细胞混合培养72 h,终止培养前16 h加入3H-TdR(0.5μCi/孔),γ-液体闪烁仪测定cpm值.结果IL-4、GM-CSF培养3 d可见细胞形态发生改变,细胞形状不规则,培养5～6 d时,有刺状突起、拉长,为典型树突状细胞形态学特征;抗原装载后流式细胞仪检测CD83、CD86表达,IL-4+GM-CSF+TNF-α组(61.68%,71.25%)及IL-4+GMCSF+冻融抗原组(63.11%,76.88%)明显高于对照组(2.41%,3.88%)及单纯IL-4+GM-CSF培养组(21.86%,28.69%)(P＜0.001),IL-4+GM-CSF+TNF-α组与IL-4+GM-CSF+冻融抗原组比较CD83、CD86表达没有显著性差异;液闪仪检测结果显示,IL-4+GM-CSF+冻融抗原组刺激T细胞增殖的能力明显强于其他组,且有显著性差异(P＜0.001,P＜0.05).结论小鼠骨髓细胞体外培养可以成功诱导扩增出足够量树突状细胞,经肿瘤抗原刺激后绝大部分成熟.

作者：陈玉丙；张红梅；刘亚娟；刘林林；范洪学刊期： 2003年第06期
尿检中发现多量一过性前列腺巨嗜颗粒细胞1例

病例:徐××、男性、31岁、高烧住院.症状:腰痛、流鼻涕、咳嗽.实验室检查:血像WBC4.1×109/L,Hgb:160g/L.plt:43×109/L.便常规:不成形、软、潜血(+).

作者：苏小妹；张燕军；刘锋刊期： 2003年第06期
心律失常与老年人肺癌手术的关系及防治

肺癌的治疗方法目前仍以外科手术为主.手术不仅会影响肺部功能,对心脏的功能还会造成较大的影响,尤以对老年人的影响为显著.

作者：陈树；邵国光；缪文瑞刊期： 2003年第06期
重症肌无力患者白细胞介素6水平的测定

目的探讨白细胞介素-6(IL-6)在重症肌无力(MG)发病机制中的作用.方法采用双抗体夹心ELISA法对18例MG患者用糖皮质激素(GC)治疗前、治疗3个月后和20例正常对照血清IL-6、乙酰胆碱受体抗体(AchRab)水平进行检测.结果MG患者组血清IL-6水平显著高于对照组(P＜0.01),MG患者组血清IL-6水平在用GC治疗3个月后显著降低(P＜0.01),其血清IL-6与血清AchRab水平呈正相关(r=0.689,P＜0.01).结论IL-6与MG发病密切相关,IL-6参与了MG的免疫病理过程;检测血清IL-6水平对MG临床有重要价值;GC可抑制IL-6合成及AchRab的产生.

作者：程耀武；张东威刊期： 2003年第06期
新生儿脐部分泌物致病菌分析

1材料和方法1.1标本来源68份脐部分泌物均来自我院NICU病房患儿,年龄小1天,大28天,脐部分泌物用无菌棉试采取,取样后立即送细菌培养室.

作者：刘艳萍刊期： 2003年第06期
人胚关节软骨细胞移植修复关节软骨缺损的免疫学研究

目的通过非协调性异种移植,从免疫学角度探讨将人胚关节软骨细胞作为同种异体移植材料用于关节软骨损伤修复的可能性.方法分离培养人胚关节软骨细胞,移植修复家兔膝关节软骨缺损,于术后2、4、8、12、20周通过淋巴细胞转化试验、细胞因子水平监测及循环中抗供者抗体的检测进行免疫学监测,同时设胶原对照组和空白对照组.结果综合分析免疫学检测结果显示,采用人胚关节软骨细胞异种移植修复关节软骨缺损未见明显的宿主排斥移植物反应发生无明显.结论本研究为人胚关节软骨细胞应用于同种异体移植修复关节软骨缺损提供了免疫学佐证.

作者：陈昕；赵雷；闫晓明；胡春光；周余来；颜炜群刊期： 2003年第06期
TRAIL分子胞外区基因工程蛋白的制备与鉴定

目的制备人TRAIL配体胞外区基因工程蛋白.方法应用RT-PCR技术从激活的人外周血淋巴细胞总RNA中扩增TRAIL配体胞外区cDNA,克隆入PCR2,1载体,测序验证后用基因重组法构建了TRAIL配体胞外区和组氨酸盒的原核表达质粒pQE-hTRAIL.将重组质粒转入大肠杆菌M15中表达,经1mmol/LIPTG在37℃条件下诱导4 h,亲和层析柱纯化.用SDS-PAGE电泳和Western blot鉴定表达产物.结果所表达融合蛋白为人TRAIL配体胞外区分子,分子量30kD.表达量约为2mg/ml.结论人TRAIL配体胞外区在大肠杆菌中得到良好表达,为深入研究TRAIL配体分子在肿瘤与自身免疫病中的可能应用提供了材料.

作者：路丽明；李宁丽；沈佰华；王利；余奇文；聂红；张继英；柏峻；张冬青刊期： 2003年第06期
小儿肺炎支原体感染的血清学检测及临床应用

小儿肺炎支原体(Mycoplasma pneumonia,MP)感染的临床表现多种多样,可引起全身各脏器损害,但以呼吸道感染为多见.仅依据临床表现常难与病毒、细菌及结核感染鉴别.自1999年3月～2000年12月,本院对收治住院的呼吸道感染患儿进行MP-IgM抗体(抗-MP-IgM)及冷凝集实验(CAT)的检查,诊断为肺炎支原体感染26例,现总结如下.

作者：丽娜；乌云刊期： 2003年第06期
系统性红斑狼疮患者外周血中性粒细胞CD89表达在发病中的意义及免疫调节治疗对其影响

目的本研究旨在探讨系统性红斑狼疮伴有血尿的患者应用免疫调节治疗前后外周血中性粒细胞CD89表达水平及血尿的变化在发病机理中的作用及免疫调节治疗对其影响.方法应用直接免疫荧光法流式细胞术,检测20例健康志愿者及20例系统性红斑狼疮伴有血尿的患者外周血中性粒细胞CD89的表达情况,并分析其与血尿的关系及免疫调节治疗对CD89表达的影响.结果系统性红斑狼疮伴有血尿的患者其外周血中性粒细胞CD89的表达水平明显低于健康对照组(P＜0.01).治疗一个月后,CD89表达水平上升,血尿亦减轻.相关分析显示,系统性红斑狼疮伴有血尿的患者血尿定性检测结果与患者外周血中性粒细胞CD89表达水平呈明显负相关,治疗前后相关系数分别为r=-0.5821(P＜0.01)和r=-0.748(P＜0.01).结论系统性红斑狼疮伴有血尿的患者外周血中性粒细胞CD89表达水平明显降低,免疫调节治疗可使其上升.患者血尿的发生与中性粒细胞CD89表达的减少有关.外周血中性粒细胞CD89表达缺陷可能是引起系统性红斑狼疮血尿的原因之一.

作者：毕黎琦；刘波；周宇刊期： 2003年第06期
低浓度混苯作业对工人的总抗氧化能力的影响

在体内苯能诱导机体产生半醌自由基,并导致氧自由基增加,而体内存在早期灭活氧自由基的抗氧化系统分为酶促体系(如SOD,GSH-px,caT,GDT等)和非酶促体系(如Vc早期,Ve,cp.Glu,GDT等)可以灭活自由基保护机体受其害[1].

作者：高航；李铁骥；王欣刊期： 2003年第06期
HCV抗原诱导Th1/Th2细胞增殖活性分析及其在丙型肝炎诊断中的应用

目的通过检测Th1/Th2特征性细胞因子,分析Th1/Th2细胞增殖活性,探讨其在丙型肝炎慢性化进程中的免疫学作用,研究HCV感染者肝病慢性化的免疫学因素.方法首先用淋巴细胞分离液分离丙肝病毒感染者的PBMC,纯化其CD+4T细胞,然后用HCV混合Ag刺激培养CD+4T细胞,后用ELISA法检测IL-2、IL-4的含量,分析Th1和Th2细胞增殖活性.结果本课题研究病例共包括23例急性肝炎病例(其中7例呈自限性病程,16例转变为慢性肝炎)和20例慢性肝炎病例,以上病例CD+4T细胞经HCV混合抗原刺激培养后,其中7例急性自限性病例表现为Th1样反应(IL-2分泌增加),与16例急性转慢性病例比较有显著性差异(t=21.76、P＜0.01);7例自限性病例在HCV Ag刺激前后Th1样反应有显著性差异(t=18.15、P＜0.01).16例急性转慢性病例表现为Th2样反应(IL-4分泌增加),与7例自限性病例比较有显著性差异(t=7.75、P＜0.01);16例急性转为慢性病例在HCV Ag刺激前后Th2样反应有显著性差异(t=4.08、P＜0.01).20例慢性化病例主要为Th2样反应,其与急转慢性病例无显著性差异(t=1.01、P＞0.05).结论HCV Ag能够特异性地刺激Th前体细胞向Th1或Th2细胞分化;Th1样应答与疾病的好转有关,Th2样应答与慢性化有关.

作者：宋玉国；张吉林；黄建文；武玉久；毕胜利刊期： 2003年第06期
HBsAg对慢性HBV感染者外周血树突状细胞功能的影响

树突状细胞(DC)是一种具潜能的抗原呈递细胞;在增强或调节细胞介导的免疫反应中起着决定性的作用[1].有研究表明,慢性乙型肝炎患者存在DC表型和功能缺失,原因可能是由于其共刺激分子表达的降低或细胞因子产生的减少所致,提示DC在乙型肝炎的发病中起了一定的作用[2].

作者：刘惠萍；郑曲波；陈玉炳；罗峰；张宜俊刊期： 2003年第06期
尿液分泌型IgA鉴别上下尿路感染的研究

分泌型IgA(secretory IgA,sIgA)在局部黏膜免疫机制中具有重要作用[1-5].近的研究显示,肾脏有产生sIgA的能力,下尿路未显示有分泌这种物质的能力[2],上尿路感染应比下尿路感染产生更多的sIgA,因此测定尿液中sIgA可能有助于鉴别是上尿路感染和下尿路感染.

作者：刘木清；曾常茜；金海甲；刘捷刊期： 2003年第06期
结缔组织病与肺动脉高压

肺动脉高压是多种结缔组织病在呼吸系统的表现之一,它的发病机理尚不完全明确,由于其症状出现晚且不典型,多数患者在确诊时已发展至肺源性心脏病,治疗难度增加,预后甚差,死亡率高.因此对结缔组织病相关的肺动脉高压早期诊断,及时合理的治疗十分重要.本文就结缔组织病相关的肺动脉高压的流行病学、发病机理、治疗等方面作以综述.

作者：陈志营；毕黎琦；赵林阳刊期： 2003年第06期
标本放置时间对凝血初筛实验结果影响

凝血过筛试验指的是凝血酶原时间(PT)、活化部分凝血活酶时间(APTT)和凝血酶时间(TT),它是临床工作中诊断机体止血过程凝血系统病理变化的重要指标,尤其在患者手术前更为重要.但测定过程中受到多种因素影响,从而令结果的准确性受到怀疑.这里仅标本放置时间对凝血过筛试验影响报告如下.

作者：郑菊芬刊期： 2003年第06期
胃交界性间质瘤1例

患者男性,40岁,本地某医院行政工作人员.于2002年11月末体检时超声偶然发现腹腔肿物,直径7cm,包膜清晰,与周围组织无粘连.CT检查指示肿物位于胃窦后方、胰腺前方,团块形,肠系膜平滑肌肉瘤可能性大.

作者：靖建民；王连友；陈立新刊期： 2003年第06期