学术投稿

扫描电镜喷镀技术在透射电镜样本反差中的应用

刘湘花;董修兵;孙宁;李建国

关键词:透射电子显微镜, 真空喷镀, 反差
摘要:透射电子显微镜是生物医学、化学、农林和材料学等领域进行科学研究的重要工具.透射电子显微镜技术中,要获得理想的实验结果,不仅要有高分辨率、高放大倍数的电子显微镜,还需要超微结构保存良好、厚度合适、反差适中的样品.没有适当的反差,就无法辨认生物组织的微细结构.如何在制样与观察时增加反差是一个值得重视的问题.本实验将扫描电镜“喷镀”技术应用于增加透射电镜样本反差,方法简便,反差效果好.目前国内尚未有使用扫描电镜“真空喷镀法”对透射电镜生物组织样本进行处理以增加反差的报道.
临床与实验病理学杂志相关文献
  • DNA倍体分析在胃黏膜上皮反应性增生与异型增生鉴别中的价值

    目的 探讨图像细胞测量术(image cytometry,ICM)在鉴别胃黏膜腺体上皮异型增生(gastric epithelial dysplasia,GED)和胃黏膜腺体反应性增生(gastric epithelial reactive hyperplasia,GERH)中的价值.方法 GED和GERH蜡块各50例,应用ICM技术分别检测DNA指数.结果 GED的DNA指数、超二倍体率均明显高于GERH.结论 ICM有助于鉴别GED和GERH,达到胃癌早期诊断的目的.

    作者:田智丹;齐琼;王劲松;林庆秀;赵有财 刊期: 2014年第10期

  • 恶性间皮瘤的病理诊断

    恶性间皮瘤是一种好发于胸膜和腹膜的恶性肿瘤,具有高侵袭性,正确的病理诊断对临床治疗和预后判断十分重要.该文就恶性间皮瘤的细胞学、组织学、免疫表型以及分子病理学方面的一些新进展进行介绍.

    作者:刘绮颖;平波;王坚 刊期: 2014年第10期

  • ALK阳性晚期非小细胞肺癌临床病理分析

    目的 探讨间变性淋巴瘤激酶(anaplastic lymphoma kinase,ALK)在晚期非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)中的表达,及其与临床特征、鉴别诊断、预后的关系.方法 采用免疫组化法检测253例晚期NSCLC中ALK的表达,并对其中132例进行荧光PCR法验证.结果 采用免疫组化法检测晚期NSCLC中ALK阳性率为20.95%(53/253).ALK阳性组中未吸烟者、腺癌的比例高于ALK阴性组(P<0.05).132例进行荧光PCR验证,免疫组化与荧光PCR符合率随免疫组化阳性程度的增加而递增.结论 免疫组化可作为ALK的筛查手段,提高ALK的检出率.荧光PCR检测对ALK阳性NSCLC的确诊具有重要意义.

    作者:谢强;陈群;林清华;钟爱虹;卢筠;廖胜祥;臧焕平 刊期: 2014年第10期

  • 《Enzinger & Weiss软组织肿瘤》(第6版)中软组织肿瘤的新进展与新类型介绍

    时隔6年,新版《Enzinger&Weiss软组织肿瘤》一书于2014年面世.根据近年来对软组织肿瘤的新认识,《Enzinger & Weiss软组织肿瘤》的内容做了一系列调整,在新版中删除间皮肿瘤、副神经节瘤及神经母细胞瘤3个章节.该类肿瘤虽然可发生于软组织(包括腹膜后),但是它们的组织起源却非间叶源性,从而保证了书本内容的一致性.为了方便读者阅读与理解,作者把伴有黑色素细胞分化的软组织肿瘤归为一类,新增1个章节,包括:(恶性)黑色素性神经鞘瘤、婴儿黑色素性神经外胚层肿瘤、软组织透明细胞肉瘤、胃肠道透明细胞肉瘤样肿瘤(clear cell sarcoma-like tumors of the gastrointestinal tract,CCSLGT)及血管周上皮样细胞肿瘤(perivascular epithelioid cell tumor,PEComa).

    作者:李海;范钦和 刊期: 2014年第10期

  • 结直肠癌中COX Ⅰ和COX Ⅲ的表达及临床意义

    目的 观察线粒体细胞色素C氧化酶Ⅰ(cytochrome coxidase Ⅰ,COX Ⅰ)和线粒体细胞色素C氧化酶Ⅲ(cytochrome coxidase Ⅲ,COX Ⅲ)在正常结直肠黏膜、结直肠高级别上皮内瘤变(原位癌)和结直肠癌组织中的表达,探讨COX Ⅰ和COX Ⅲ在结直肠癌早期诊断中的作用以及二者与结直肠癌患者预后的关系.方法 采用免疫组化SP法检测20例结直肠正常黏膜、20例结直肠高级别上皮内瘤变(原位癌)和80例结直肠癌组织中COX Ⅰ和COX Ⅲ的表达,并分析二者表达与结直肠癌临床病理特征及患者预后的关系.结果 COX Ⅰ和COX Ⅲ在正常结直肠黏膜中的阳性率分别为75.0%(15/20)和70.0%(14/20),在结直肠高级别上皮内瘤变(原位癌)组织中的阳性率为35.0%(7/20)和25.0%(5/20),在结直肠癌组织中的阳性率为36.2%(29/80)和26.2% (21/80);COX Ⅰ和COX Ⅲ在正常结直肠黏膜和结直肠高级别上皮内瘤变(原位癌)中的阳性率差异有统计学意义(x2=6.465,P=0.011;x2=8.120,P=0.004),COX Ⅰ和COX Ⅲ在正常结直肠黏膜和结直肠癌组织中的阳性率差异有统计学意义(x2 =9.75,P=0.002;x2=13.46,P<0.001).COX Ⅰ的阳性率与结直肠癌组织学分级、临床分期相关;组织学分级越低,COX Ⅰ阳性率越高,Ⅲ+Ⅳ结直肠癌组中COX Ⅰ阳性率低于Ⅰ+Ⅱ组.COX Ⅲ的阳性率与结直肠癌临床分期相关,Ⅲ+Ⅳ期结直肠癌组中COX Ⅲ阳性率低于Ⅰ+Ⅱ期组.Kaplan-Meier生存分析表明COX Ⅰ和COX Ⅲ表达与结直肠癌患者预后相关(P =0.008,P=0.017).结论 COX Ⅰ和COX Ⅲ高表达与结直肠癌组织学分级、临床分期、预后密切相关,联合检测二者表达可作为结直肠癌早期诊断及判断其生物学行为的重要指标.

    作者:孟媛;宋敏;许斌 刊期: 2014年第10期

  • 结直肠癌中miR-200家族启动子甲基化状态分析

    目的 检测HCT116、HT29、LS174t、SW480、SW620和LoVo细胞中miR-200家族启动子甲基化状态,分析其与结直肠癌临床分期、分化程度及预后的相关性;同时进行miR-200家族甲基化程度与患者生存相关性分析.方法 重亚硫酸盐测序法(bisulfite genomic sequence PCR,BSP)检测6株不同恶性程度的结直肠癌细胞株中miR-200家族启动子甲基化程度;分析其甲基化程度与细胞恶性程度、miR-200a表达量的相关性.甲基化特异性(methylationspecific PCR,MSP)技术检测138例结直肠癌组织中miR-200家族启动子甲基化程度.结果 6株不同恶性程度的结直肠癌细胞株中miR-200家族启动子甲基化程度不同,且其甲基化程度与细胞恶性程度成反比,与细胞株中miR-200a表达量的检测结果一致.结直肠癌组织中miR-200家族启动子甲基化程度与患者年龄无关,与患者性别、肿瘤大径、淋巴结转移及远处转移、患者术后生存时间相关.结论 miR-200家族的表达受甲基化修饰的调控,且该调控成为影响表达量的主要原因.miR-200家族甲基化程度与结直肠癌患者生存期密切相关,可作为预后指标.

    作者:何楠;吴共发;赵海燕;赖伟男;韩慧霞 刊期: 2014年第10期

  • 大脑额叶伴显著肉芽肿反应的生殖细胞瘤1例并文献复习

    目的 探讨发生于大脑半球且伴有显著肉芽肿反应的生殖细胞瘤的临床病理特点.方法 分析1例发生于大脑额叶伴有显著肉芽肿反应的生殖细胞瘤的临床表现、影像学特征及病理学特点,并结合相关文献进行复习.结果 该病临床表现随发病部位的不同而不同;头颅MRI平扫+增强示多发斑片状异常信号影,边界不清,占位效应不明显,周边见大片状水肿信号,增强后病灶呈斑片及结节状明显强化;镜下见上皮样肉芽肿病变中散在一些异型大细胞,背景淋巴细胞弥漫分布,肿瘤性异型大细胞胞质丰富,部分透明,核圆形、泡状、位于中央,核仁明显,核分裂象少见.免疫表型:异型大细胞中CD117、CD10及PLAP呈阳性,Ki-67增殖指数约70%.特殊染色:PAS染色显示异型大细胞胞质富于糖原.结论 发生于大脑半球白质区的中枢神经系统的原发性生殖细胞瘤少见,当肉芽肿反应显著时常会掩盖肿瘤细胞的存在,此时易误、漏诊,临床表现及影像学特征缺乏一定的特异性,主要依赖病理学诊断,应进一步加深对其病理学诊断的认识.

    作者:王慧;刘伟;曲利娟;郑智勇 刊期: 2014年第10期

  • 胚胎发育相关信号通路在横纹肌肉瘤中的研究进展

    横纹肌肉瘤(rhabdomyosarcoma,RMS)是儿童常见的软组织恶性肿瘤,Notch、Wnt和Hedgehog等胚胎发育相关信号通路能够调节骨骼肌干细胞的自我更新和分化,在RMS的发病机制中也可能发挥重要作用.因此,了解和掌握这些信号通路在RMS中扮演的角色对于肿瘤的诊治和预后具有重要意义.

    作者:刘春霞;李锋 刊期: 2014年第10期

  • 整合素α5β1蛋白及mRNA在子宫颈鳞状细胞癌中的表达及意义

    目的 探讨子宫颈鳞状细胞癌(cervix squamous cell carcinoma,CSCC)中整合素α5β1蛋白和mRNA的表达,并分析其与临床病理特征的关系.方法 采用免疫组化SP法、RT-PCR技术检测60例CSCC及40例子宫颈正常组织中整合素α5β1蛋白及mRNA的表达.结果 CSCC中整合素α5β1蛋白及mRNA表达均高于子宫颈正常组织,差异有统计学意义(P<0.05);整合素α5β1蛋白及mRNA的表达均与CSCC分化程度、pTNM分期、淋巴结转移、浸润深度有相关性(P<0.05),与患者年龄无相关性(P>0.05).结论 CSCC中整合素α5β1蛋白及mRNA的表达与其生长、侵袭与转移密切相关.采用免疫组化SP法与RT-PCR技术联合检测CSCC中整合素α5β1蛋白及mRNA,有望成为评估CSCC恶性程度、侵袭、转移和临床预后的指标.

    作者:王闯;李键淇;齐洁敏 刊期: 2014年第10期

  • 钛合金、人工骨材料厚切片再研磨后显示新生骨-荧光双标法

    因钛合金、人工骨材料组织坚硬,无法切出较薄的完整切片.传统方法切片只能看到骨结构,V-G染色法镜下观察切片颜色不鲜亮,细胞核模糊,软骨和纤维结缔组织很难辨别,荧光双标两条线不够清晰,只能采集低倍图片.本文现介绍一种新方法,用502胶粘贴于有机玻片上,再经自制电动磨片机研磨至30~ 50 μm厚,用Van Gieson(亚甲基兰-酸性品红,简称V-G)染色,颜色对比鲜艳,高倍镜下骨细胞核、软骨、纤维结缔组织等均可清晰辨别.四环素-钙黄绿素荧光双标更为清晰[1-3].

    作者:吴拮;吕荣;孟国林;李静;刘民 刊期: 2014年第10期

  • 肿瘤中miRNA异常表达的分子调控机制及研究进展

    microRNA(miRNA)是一类长约22 nt的非编码RNA分子,在转录后水平调控基因表达.研究表明miRNA在多种生物学过程中发挥作用,包括调控细胞的发育、分化、增殖和凋亡,以及在肿瘤的发生、侵袭、转移中起着重要作用.虽然miRNA具有重大的生物学功能,但目前大部分研究主要关注于筛选差异表达的miRNA及鉴定其调控的靶基因,而对自身转录调控的研究不多.该文将概述miRNA的分子调控机制,并简单介绍在肿瘤中miRNA异常表达的分子调控机制.

    作者:龚勇;谢海龙 刊期: 2014年第10期

  • 肺混合性鳞状细胞和腺性乳头状瘤1例

    患者女性,68岁,无明显诱因出现胸闷、气喘半个月,活动后加剧;无吸烟史.PET-CT示:右肺下叶可见一结节状高密度影,边界清,大小2.8 cm×2.4 cm,边缘毛刺状;伴有异常放射性浓聚,呈高代谢;考虑周围型肺癌(图1).遂行右肺下叶切除术,术中见胸膜部分粘连,肿物位于右下叶外基底段,大小3 cm×3 cm,胸膜凹陷征不明显,未见周围组织及脏器明显侵犯,未见周围淋巴结明显肿大.切除右肺下叶送病理检查.

    作者:陈淑梅;曲利娟;郑智勇 刊期: 2014年第10期

  • 结直肠腺癌患者外周血CNRIP1基因启动子甲基化的临床病理学分析

    目的 分析结直肠腺癌患者外周血大麻素受体互作蛋白1(cannabinoid receptor interacting protein 1,CNRIP1)基因启动子甲基化程度与临床病理学参数的相关性,探讨外周血CNRIP1基因启动子甲基化检测在结直肠腺癌早期筛查及病程评估中的价值.方法 采用定量甲基化特异性PCR技术(quantitative methylation-specific PCR,qMSP)检测结直肠腺癌患者(50例)、结直肠腺瘤患者(20例)、健康志愿者(20例)外周血CNRIP1基因启动子CpG岛甲基化程度,并通过焦磷酸测序技术确定该基因启动子甲基化位点.登记结直肠腺癌患者临床病理参数.采用Fisher检验分析CNRIP1基因启动子CpG岛甲基化与结直肠腺癌临床病理参数的相关性.结果 结直肠腺癌、结直肠腺瘤患者及健康志愿者外周血CNRIP1基因启动子CpG岛的2246位点甲基化程度分别为(85.50±8.24)%、(81.33±5.81)%、(63.66%±3.61)%(P<0.01);结直肠腺癌CNRIP基因启动子CpG岛2246位点甲基化程度分别与肿瘤直径、原发灶浸润深度、TNM分期具有显著相关性(P<0.01),与腺癌分化程度、淋巴结转移具有一定相关性(P<0.05).结论 CNRIP1基因启动子CpG岛2246位点甲基化程度与结直肠腺癌病程进展相对一致,可作为结直肠腺癌早期筛查及病程评估的标志物.

    作者:张婷;崔戈;冯文明;姚韵靓;朱国良;石麒麟 刊期: 2014年第10期

  • 假肌源性血管内皮瘤6例临床病理分析

    目的 探讨假肌源性血管内皮瘤(pseudomyogenic hemangioendothelioma,PHE)的临床病理学特征、免疫表型、诊断及鉴别诊断.方法 对6例PHE的临床病理资料和免疫表型进行回顾性复习.结果 男性4例,女性2例.平均年龄32岁(10~70岁).3例原发于骨内,均为多骨性累及,其中1例伴发皮肤结节;另3例分别表现为软组织局部肿块、皮肤和软组织多灶性病变及皮肤黑色斑块.影像学检查:3例骨病变均表现为多骨性骨质破坏,1例皮肤和软组织多灶性病变累及多个组织平面.眼观:送检肿瘤组织呈灰白、灰红或灰褐色,直径0.5 ~4 cm,平均2 cm.镜检:病变边界不清,可累及真皮、皮下、肌肉或骨组织.肿瘤主要由疏松条束状、结节状或片状分布的胖梭形细胞组成,部分区域内瘤细胞呈上皮样,间质内可见散在的中性粒细胞.高倍镜下见瘤细胞胞质丰富,嗜伊红色,核染色质呈空泡状,可见小核仁,形态上类似横纹肌母细胞.除1例局部区域外,瘤细胞异型性不明显或仅有轻度异型性,核分裂象为1~2个/10 HPF.部分区域内可见炎性或液化性坏死.免疫表型:瘤细胞弥漫强阳性表达CK(AE1/AE3),不同程度表达CD31和FLI1,INI-1标记显示无缺失,Ki-67平均增殖指数约5%.本组6例中2例复发,其中1例在短期内发生双肺转移.结论 PHE是一种局部易复发偶有转移的中间性血管内皮瘤.

    作者:汪庆余;郝华;刘绮颖;喻林;王坚 刊期: 2014年第10期

  • 胃癌组织中AEG-1、Cyclin D1的表达及其意义

    目的 观察胃癌组织中星形细胞上调基因-1(astrocyte elevated gene-1,AEG-1)、Cyclin D1的表达,分析二者表达与胃癌侵袭、转移的关系.方法 应用免疫组化EnVision法检测110例胃癌组织中AEG-1和Cyclin D1的表达,并复习相关文献.结果 AEG-1在胃癌组织中的阳性率为69.1%,AEG-1表达与癌组织Lauren分型、淋巴结转移、浸润深度和pTNM分期密切相关(P<0.05),与患者性别、年龄、发生部位和肿瘤大小无关(P >0.05);Cyclin D1在胃癌组织中的阳性率为57.3%,Cyclin D1表达与癌组织浸润深度、淋巴结转移和pTNM分期有关(P<0.05),与患者性别、年龄、发生部位、肿瘤大小和Lauren分型无关(P>0.05).相关性分析显示,胃癌组织中AEG-1与Cyclin D1的表达呈正相关(P<0.05).结论 AEG-1可能通过上调Cy-clin D1的表达而促进胃癌细胞的侵袭、转移.AEG-1可能作为胃癌治疗的一种潜在分子靶点.

    作者:邓伟;黄文斌;杨春梅;黄江生;戴建英;王劲松 刊期: 2014年第10期

  • 甲状腺髓样癌中CD133和CD44的表达及意义

    目的 探讨肿瘤干细胞(cancer stem cells,CSC)标志物CD133及CD44在甲状腺髓样癌(medullary thyroid cancer,MTC)组织中的表达及临床病理意义.方法 采用免疫组化SP法检测51例MTC组织中CD133和CD44的表达.结果 (1)CD133蛋白在MTC伴有包膜浸润组的阳性率(76.2%,16/21)明显高于无包膜浸润组(43.3%,13/30);CD133蛋白在MTC病灶直径≥1 cm组的阳性率(64.4%,29/45)显著高于病灶直径<1 cm组(0,0/6),差异均有统计学意义(P均<0.05).(2)CD44蛋白在MTC伴有包膜浸润组的阳性率(66.7%,14/21)明显高于无包膜浸润组(20%,6/30),差异有统计学意义(P<0.01).(3) MTC中CD133和CD44蛋白的表达与患者年龄、性别、是否散发、甲状腺受累范围、淋巴结转移、远处脏器转移、TNM分期均无关(P>0.05).(4)CD133与CD44共表达与MTC包膜浸润密切相关(P<0.01).结论 MTC中存在CSC,其与肿瘤的浸润生长及恶性增殖相关,可考虑将CD133及CD44作为MTC临床评价肿瘤生物学行为的指标.二者可能存在互相调节的机制,共表达在MTC的恶性进展中发挥作用.

    作者:毕娅兰;吴焕文;孟云霄;崔全才;罗玉凤;薛晓伟 刊期: 2014年第10期

  • 胃肠道间质瘤合并良恶性消化系统肿瘤的临床病理及分子遗传学特征

    目的 探讨14例胃肠道间质瘤(gastrointestinal stromal tumor,GIST)合并消化系统肿瘤的临床病理及遗传学特征.方法 病例采用免疫组化SP法对14例GIST合并消化系统肿瘤中CD117、DOG1、CD34等的表达进行检测,基因测序法检测KIT、血小板源性生长因子受体α(plateletderived growth factor receptor alpha,PDGFRA)的基因突变情况.结果 消化系统肿瘤中12例为恶性,以癌为主(11/12);合并的GIST中13例发生于胃,直径均<2 cm,梭形细胞为主,核分裂象少见或无,免疫组化标记CD117、DOG1、CD34强表达;基因突变10例位于KIT第11号外显子,且14例均无PDGFRA基因突变.结论 GIST合并消化系统肿瘤中以腺癌多见,但也可合并其他组织来源良恶性病变;合并其他肿瘤的GIST以微小GIST为主,多存在KIT基因11号外显子变异.

    作者:刘秋雨;缑向南;阚云珍;田鹏;史玉洁;贺慧;孔令非 刊期: 2014年第10期

  • 结直肠混合性腺神经内分泌癌2例临床病理分析

    目的 探讨结直肠混合性腺神经内分泌癌(mixed adenoneuroendocrine carcinoma,MANEC)的临床病理学特征、诊断及预后.方法 回顾性分析2例结直肠MANEC的临床病理学和免疫表型特征.结果 例1男性,72岁,直肠见一7cm×6.5 cm×5cm大小隆起型肿物,镜下见肿瘤组织由管状腺癌和大细胞癌混合构成;例2女性,58岁,左半结肠腔内见一4 cm×4 cm×1 cm大小溃疡型肿物,与肠系膜根部一10cm×7 cm×5 cm大小质嫩肿物相沿续,镜下见肿瘤组织由管状腺癌、少量黏液腺癌和小细胞癌构成.免疫表型:2例腺癌区域中CEA、CK20、Villin均阳性,三者在神经内分泌癌区域均阴性,CD56、Syn在神经内分泌癌区域均阳性,在腺癌区域均阴性.结论 结直肠MANEC属于高度恶性肿瘤,容易出现淋巴结或肝转移,肿瘤的发生机制和分级仍不明确,有待于进一步研究.

    作者:徐晓;欧阳斌燊;汪亮亮;欧阳卫泽;李婷;周燕 刊期: 2014年第10期

  • 临床病理学教学初探

    病理学是联系基础医学和临床医学的桥梁,在临床工作中发挥重要作用.临床病理学,也称为诊断病理学,包括活体组织检查、细胞学检查、尸体解剖检查、病理技术等方面,其作为病理学的重要组成部分,是临床医学必不可少的辅助诊断手段,同时也为临床医学发展提供重要的反馈信息,为临床医学研究提供重要科研资料.现今我国病理行业的发展存在一些体制性的问题,对临床病理工作的重要性不够重视,同时,对临床病理的教学工作也缺乏一定的经验[1].因此,对将要进入实习阶段的医学生而言,开展临床病理学的课程是十分必要的,一方面使他们能够更好地完成临床工作,另一方面也为病理医师的培养奠定基础.目前国内一些医学院校的病理学教研室和临床病理科室脱节现象,对教学工作非常不利,建议病理老师和病理医师要合二为一,担任双重角色,这样才能更有利于病理教学,同时也更有利于病理学的发展.大连医科大学的病理学教研室不仅担任教学、科研工作,同时还担任临床、尸检等多方面工作,为医学生的培养打下坚实的基础.但对于如何开展临床病理学这门课程?该课程该讲述哪些内容?学生们终会得到哪些帮助和启示?这些都是我们在实际教学工作中需要不断的探索和解决的问题.

    作者:李静;孙雷;李连宏;白璐璐;赵志英;张众 刊期: 2014年第10期

  • Leica Peloris全自动脱水机在小组织快速处理中的应用体会

    随着病理学的发展,临床病理技术在医疗过程中起着举足轻重的作用,而病理技术中的组织脱水对病理诊断也有着决定性的影响.为缩短标本的处理时间,四川大学华西医院于2010年引进Leica Peloris全自动脱水机,根据每日的病理标本量、标本大小、标本类型的研究,总结一套小组织快速处理技术方法.现将此方法的使用体会报告如下.

    作者:罗添友;秦巍笈;唐源 刊期: 2014年第10期

临床与实验病理学杂志

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主办:安徽医科大学;中华医学会安徽分会